Anda di halaman 1dari 78

PATOLOGI KLINIK

A. SESI 1

A.1. HEMOGLOBIN (metode Cyanmethemoglobin)


Prinsip
Seluruh darah akan ditambahkan ke Cyanmethemoglobin (HiCN) reagen. Kalium ferricyanide
di reagen mengubah besi hemoglobin dari besi ferro (Fe++) ke besi ferri (Fe+++) untuk membentuk
methemoglobin (Hi) yang kemudian menggabungkan dengan potasium sianida untuk membentuk
pigmen yang stabil, Cyanmethemoglobin (HiCN). (Hi = hemoglobin = hemoglobin yang setrika sudah
teroksidasi ke keadaan besi. HiCN = hemoglobin sianida = hi yang telah banded terhadap ion
sianida). Kehadiran deterjen nonionik di reagen meningkatkan lisis dari sel-sel darah merah dan
menurunkan jumlah kekeruhan yang dihasilkan dari protein abnormal, seperti lipoprotein. Intensitas
warna campuran ini diukur dalam spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm. Kepadatan
optik dari solusi sebanding dengan konsentrasi hemoglobin. Semua bentuk hemoglobin diukur
dengan metode ini kecuali sulfhemoglobin.

Spesimen
Seluruh darah, menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler juga dapat
digunakan.

Reagen dan Peralatan


1. Cyanmethemoglobin (hemiglobincyanide) (HiCN) / reagen Drabkin berisi potasium sianida (50
mg), potasium ferricyanide (200 mg), potasium dihidrogen fosfat (KH2PO4) (140 mg), dan
detergen nonionik (1 mL) dalam 1 L air suling.
2. Tabung uji, 10 x 75 mm
3. Pipet, 0,02 mL.
4. Spektrofotometer (540 nm)

Prosedur
1. Tempatkan tepat 5.0 mL reagen HiCN ke dalam sebuah tabung tes dengan tepat
berlabel. Tempat 5.0 mL reagen ke dalam tabung reaksi untuk digunakan sebagai blanko.

1
2. Tambahkan 0,02 mL tercampur darah darah atau kontrol secara keseluruhan untuk tabung
tepat berlabel. Bilas pipet 3 sampai 5 kali dengan reagen HiCN sampai semua darah akan
dihapus dari pipet tersebut
3. Campur larutan sebelumnya baik dan memungkinkan untuk didiamkan pada suhu kamar
selama akhirnya 3 menit untuk memberikan waktu yang memadai untuk pembentukan HiCN
4. Transfer campuran untuk kuvet dan dibaca dalam spektrofotometer pada panjang gelombang
540 nm dengan menggunakan reagen HiCN dalam tabung blanko untuk mengatur densitas
optik (OD) pada 0,0. Catat pembacaan untuk sampel pasien dan kontrol dari OD skala dan
melihat tabel siap untuk nilai sebenarnya dari hemoglobin dalam g/dL.

A.2. PENGHITUNGAN SEL DARAH MERAH


Jumlah sel darah merah (RBC) dinyatakan sebagai jumlah sel darah merah / liter (L) dari
darah. RBC normal adalah 3,6-5,6 x 1012/L untuk wanita dan 4,2-6,0 x 1012/L untuk laki-laki. Bayi yang
baru lahir menunjukkan RBC 5,0-6,5 x 1012/L saat lahir, yang secara bertahap menurun hingga 3,5-
5,1 x 1012/L pada usia 1 tahun.

Prinsip
Untuk memudahkan penghitungan dan mencegah lisis dari sel-sel darah merah, darah
keseluruhan diencerkan dengan cairan isotonik menipiskan.

Reagen dan Peralatan


1. Thoma merah hitungan pipet
2. Solusi Hayem (count Merah menipiskan cairan)
Sodium sulfat 2,5 g
Sodium klorida 0,5 g
Merkuri klorida 0,25 g
Aquades 100 ml
3. Mikroskop
4. Kasa bersih atau kim tisu
5. Hemositometer dan kaca penutup. Alun-alun tengah besar berisi 25 kotak kecil dengan ukuran
yang sama digunakan untuk RBC.
a. Lima kotak kecil berlabel 'R' adalah wilayah yang akan menghitung RBC (Gambar 1)
b. Alun-alun pusat besar memiliki volume 0,1 uL. Oleh karena itu, volume masing-masing
dari 25 kotak yang lebih kecil adalah 0,004 uL selama lima kotak kecil.

2
Spesimen
Seluruh darah, menggunakan EDTA atau heparin sebagai antikoagulan tersebut. Darah
kapiler juga dapat digunakan.

Prosedur
1. Mengambil darah sampai persis tanda 0,5 dalam pipet hitungan merah dan encerkan sampai
tanda 101 dengan jumlah cairan merah menipiskan, sehingga membuat 1:200 pengenceran
darah.
2. Campur jumlah sel darah merah yang diencerkan selama 3 menit
3. Bersihkan ruang penghitungan
4. Mengisi ruang menghitung (satu pengenceran hitungan merah mengisi setiap sisi
hemositometer itu). Setelah menghitung ruang penuh, memungkinkan sekitar 3 menit untuk
sel darah merah untuk menyelesaikan sebelum menghitung.
5. Hitung sel darah merah.
a. Hati-hati tempat ruang penghitungan diisi di panggung mikroskop.

3
b. Menggunakan daya yang rendah (perbesaran 10 x). menempatkan alun-alun pusat besar
di kemudian tengah lapangan penglihatan. Periksa persegi besar untuk seluruh
pemerataan sel darah merah
c. Hati-hati mengubah ke perbesaran tinggi (40x)
d. Pindahkan ruang menghitung sehingga persegi sudut kecil bagian atas kiri adalah
sepenuhnya dalam bidang visi. Persegi ini dibagi lagi menjadi 16 kotak yang lebih kecil
untuk kemudahan menghitung.
e. Menghitung semua sel darah merah di alun-alun ini, mengingat untuk menghitung sel
pada dua dari margin luar tetapi tidak termasuk yang tergeletak di dua sisi lain di luar.
f. Beberapa sel darah merah dapat berbaring di sisi mereka dan, karenanya, tidak muncul
sebagai bulat. Sel-sel ini dimasukkan dalam hitungan.
g. Jika ada sel-sel darah putih di daerah yang sedang dihitung, tidak termasuk sel-sel dalam
hitungan Anda. (Sel darah putih biasanya jauh lebih besar dari sel darah merah dan tidak
memiliki sebagai menghaluskan penampilan)
h. Hitung sel darah merah yang masing-masing lima kotak kecil
i. Hitung sel darah merah di sisi berlawanan dari ruang penghitungan suara di lima kotak
yang sesuai kecil.
6. Hitung jumlah sel darah merah untuk masing-masing jumlah merah dilakukan dan rata-rata
dua hasil untuk laporan akhir
# Sel dalam lima kotak x Koreksi untuk Pengenceran x 106
RBC / L = ---------------------------------------------------------------- ------------------------
Koreksi untuk Volume

# Sel dalam lima kotak x 200 x 106


RBC / L = ----------- ---------------------------------------------
5 x 0,2 x 0,2 x 0,1

Sebagai contoh:
# Sel dalam lima kotak kecil = 400
Pengenceran = 1: 200
Jumlah volume = lima kotak kecil
Konversi ke liter = x 106

4
400 x 1,0 x 200 x 106
RBC / L = ------------------------------------
0,2
= 4.0 x 1012

A.3. PENGUKURAN HEMATOKRIT (METODE MIKROHEMATOKRIT)


Prinsip
Seluruh darah disentrifugasi untuk kemasan sel darah merah maksimum. Ruang yang
ditempati oleh sel-sel darah merah diukur dan dinyatakan sebagai persentase dari volume darah.

Spesimen
Seluruh darah, menggunakan dipotassium ethyIene diaminetetraacetic (EDTA) sebagai
antikoagulan tersebut. (EDTA cair diduga menyebabkan penurunan 2 sampai 3% pada hematokrit
karena penyusutan sedikit dari sel-sel darah merah)

Reagen dan Peralatan


1. Mikrohematokrit tabung, sekitar 75 mm dengan lubang bagian dalam sekitar 1,2 mm.Dua
jenis tabung mikrohematokrit bisa dibeli: (1) mereka yang berisi heparin (kode warna dengan
pita merah) sebagai antikoagulan, untuk digunakan dengan non-antikoagulasi darah secara
keseluruhan, dan (2) warna tabung biasa (dikodekan dengan pita biru ) untuk digunakan
dengan seluruh darah antikoagulasi. Tabung mikrohematokrit memiliki sekitar 0,05 mL darah.
2. Clay-like sealing darah.
3. Sentrifuge Mikrohematokrit mampu menghasilkan RCF dari 10000 menjadi 15.000 g.
Centrifuge harus mampu mencapai kecepatan maksimum dalam waktu 30 detik.
4. Membaca tabung Microhematokrit.

Prosedur
1. Biarkan darah kapiler atau tercampur seluruh antikoagulasi untuk memasukkan dua tabung
mikrohematokrit sampai mereka sekitar tvvo pertiga penuh dengan darah. (Gelembung udara
menunjukkan teknik yang buruk tetapi tidak mempengaruhi hasil tes).
2. Tanda salah satu ujung tabung mikrohematokrit dengan bahan tanah liat dengan
menempatkan ujung kering tabung ke dalam tanah liat dalam posisi vertikal (tabung
mikrohematokrit membentuk sudut 900 dengan baki tanah liat). Steker harus 4 sampai 6

5
mm. Membuat darah tertentu tidak dipaksa keluar bagian atas tabung mikrohematokrit
selama proses ini
3. Tempatkan dua tabung mikrohematokrit dalam alur radial kepala centrifuge persis
berhadapan, dengan ujung tertutup dari pusat dari sentrifus.
4. Sentrifuge selama 5 menit
5. Lepaskan tabung hematokrit sesegera centrifuge telah berhenti berputar. Tentukan hasil bagi
kedua microhematocrits, dengan menggunakan perangkat tabung membaca
mikrohematokrit. Hasil duplikat harus setuju dalam 1 unit (%). Jika tidak, ulangi
prosedur.Hematokrit dapat dinyatakan dalam salah satu dari dua cara: (1) sebagai persentase,
misalnya, 42%, atau, (2) sebagai pecahan desimal, misalnya, 0,42.

A.4. PERHITUNGAN RETIKULOSIT


Pendahuluan
Sel darah merah berjalan melalui enam tahap perkembangan: sel pronormoblast,
normoblast basofilik, normoblast orthochromic, retikulosit, dan matang darah merah.Empat tahap
pertama biasanya terbatas pada sumsum tulang. Retikulosit, bagaimanapun, ditemukan di kedua
sumsum tulang dan darah perifer. Jumlah retikulosit merupakan alat diagnostik yang penting. Hal ini
merupakan cerminan dari jumlah produksi sel darah merah yang efektif terjadi di sumsum tulang.

Prinsip Metode
Setelah normoblast orthochromic kehilangan intinya, sejumlah kecil RNA tetap dalam sel
darah merah, dan sel ini dikenal sebagai sebuah retticulocyte. Untuk mendeteksi keberadaan RNA,
sel-sel darah merah harus ternoda saat mereka masih hidup. Proses ini disebut pewarnaan
supravital.

Reagen dan Peralatan


1. Pewarna retikulosit dapat dipilih salah satu dari berikut:
a. Larutan pewarna Metilen biru yang baru:
Metilen biru yang baru (Cl 52030) 1,0 g
Sodium klorida 0,89 g
Air suling 100 mL
b. BriIliant cresyl biru:
Brilliant cresyl biru 1,0 g
Natrium klorida 0,85% 99 ml

6
Campur selama minimal 15 menit, filter, dan tempatkan pada suhu kamar. Saring kembali
pada hari penggunaan.
2. Kaca slide
3. Tabung mikrohematokrit
4. Tabung uji yang kecil
5. Mikroskop

Spesimen
Seluruh darah (1 mL), menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler juga
dapat digunakan.

Prosedur
1. Tempat tiga tetes retikulosit disaring noda dalam tabung reaksi kecil
2. Tambahkan tiga tetes tercampur seluruh darah ke tabung yang berisi noda
3. Campur tabung dan biarkan berdiri pada suhu kamar, atau inkubasi pada 37°C, selama 15
menit. Hal ini memungkinkan retikulosit waktu yang cukup untuk mengambil noda
4. Pada akhir 15 menit, campuran isi tabung dengan baik
5. Siapkan irisan beberapa atau pap berputar dan biarkan mengering.
6. Tempatkan slide pertama di panggung mikroskop dan, dengan menggunakan tujuan daya
rendah (10x), menemukan suatu wilayah di bagian tipis dari BTA dimana sel darah merah yang
merata dan tidak menyentuh satu sama lain. Hati-hati mengubah ke tujuan perendaman
minyak (100x) dan selanjutnya mencari area di mana ada sekitar 100 sampai 200 sel darah
merah per lapangan minyak imersi.
7. Segera setelah daerah yang tepat dipilih, retikulosit dapat dihitung. Sel-sel darah merah akan
menjadi lampu hijau untuk media dalam warna. RNA hadir dalam retikulosit noda biru
tua. Retikulum mungkin berlebihan atau jarang, tergantung pada tahap sel pembangunan;
yang retikulosit termuda menunjukkan sejumlah besar RNA sedangkan retikulosit lebih
dewasa menunjukkan hanya sejumlah kecil RNA. Menghitung semua sel darah merah dalam
kemudian field pertama pada satu counter sel. Pada saat yang sama, penghitungan retikulosit
di bidang yang sama dengan counter sel kedua. Untuk dipertimbangkan sebagai retikulosit sel
merah harus berisi dua atau lebih biru pewarnaan partikel. Pindahkan kemudian geser seperti
yang dijelaskan dalam prosedur your diferensial Count, menggunakan metode cross-sectional,
sampai semua retikulosit dalam 1000 sel darah merah telah dihitung.
8. Rata-rata dua hasil dan menghitung jumlah retikulosit seperti yang ditunjukkan di bawah ini.

7
Jumlah retikulosit
%Retikulosit = dalam 1000 sel darah merah
---------------------------------------
10

A.5. INDEKS ERITROSIT


Para sel darah merah (RBC) indeks yang digunakan untuk menentukan isi ukuran dan
hemoglobin sel darah merah. Mereka terdiri dari volume sel hidup rata-rata (MCV), Mean
corpuscular hemoglobin (MCH), dan Mean konsentrasi hemoglobin sel hidup (MCHC).Dengan
meluasnya penggunaan counter sel otomatis yang secara rutin menentukan indeks RBC pada setiap
sampel darah diuji, indeks yang biasa digunakan sebagai bantuan dalam diagnosisng dan
membedakan anemia.
Mean corpuscular volume (MCV)
MCV dihitung dari jumlah RBC dan hematokrit dan menunjukkan volume rata-rata RBC di
femtoliters (FL).

Rumusnya:
Hct x 103fL
MCV = -----------------
RBC/L
Contoh:
Hct = 45% (or 0,45 L)
RBC = 5.0x10l2/L
1L = 1015/L
0.45 x 1015/L
MCV = ------------------
5.0 x 1012/L
= 0.09 x 103 fL
= 90 fL

Normal range untuk MCV: 80 sampai 100 fL

8
Mean corpuscular hemoglobin (MCH)
MCH dihitung dari HB dan RBC count, menunjukkan berat rata-rata Hb di RBC, dan harus
selalu berkorelasi dengan MCV dan MCHC.

Rumusnya:
Hb (g/L)
MCH = -------------- pg
RBC/L

Contoh :
Hb = 15.0 g/dL
RBC = 5.0 x 1012/L
1g = 1012 pg

15 x 1013 pg/L
MCH = ---------------------
1.0 x 1012/L
15 x 10pg/L
= -------------------
5.0/L
= 30 pg

Normal range untuk MCH: 27 sampai 31 pg

Konsentrasi mean corpuscular hemoglobin (MCHC)


MCHC dihitung dari Hb dan Hct dan merupakan ekspresi dari konsentrasi rata-rata Hb di
RBC.

Rumusnya:

Hb (g/dL) x 100%
MCHC = -------------------------
Hct
atau,

9
Hb g/dL
MCHC = ---------------------------------------
Hct (expressed as a fraction)

Contoh:
Hb = 15.0 g/dL
Hct = 45% (or 0.45)
1g = 1012 pg
15.0 g/dL x 100%
MCHC = --------------------------
45 g /dL
= 0.333 x 100%
= 33.3%
atau ,

15.0 g/dL
MCHC = ----------------
0.45
= 33.3 g /dL

Normal range untuk MCHC: 31 sampai 36%, atau 31 sampai 36 g/dL

A.6. PERIPHERAL FILM DARAH


Pemeriksaan apus darah perifer (PBF) adalah bagian penting dari setiap pemeriksaan
hematologis dan dapat memberikan banyak petunjuk untuk membantu diagnosis klinis.Film darah
harus dipersiapkan dengan baik, juga ternoda dan diperiksa secara sistematis.

PERSIAPAN: harap ingat bagaimana mendapatkan hapusan darah ideal (laboratorium skiII itu
pedoman blok 8)

PROSEDUR
Film ini pertama harus diperiksa di bawah daya yang rendah untuk menilai kualitas dari
persiapan, jumlah dan distribusi, dan pewarnaan sel, dan untuk mencari daerah di mana sel-
sel merah yang merata dan tidak terdistorsi.

10
Periksa hapusan darah menggunakan kekuatan objektif (10x) rendah.
Sel-sel darah merah dan putih dan trombosit harus benar ternoda
Periksa bahkan ada distribusi dari sel darah putih pada smear.
Perkirakan jumlah sel darah putih (dengan mencatat jumlah sel putih / lapangan dan jumlah
sel darah putih dalam kaitannya dengan jumlah sel darah merah). Ini harus setuju dengan hasil
tes yang diperoleh. Jika tidak, jumlah putih harus diulang.
Periksa tepi perifer tipis dari BTA (ekor) jika pap baji sedang digunakan). Jika ada peningkatan
jumlah sel darah putih di daerah ini jumlah sel diferensial mungkin tidak akurat. Jika ada
gumpalan trombosit, tubuh Pap kemudian dapat menunjukkan penurunan trombosit. Dalam
situasi seperti itu, hapusan darah harus dibuang dan satu lagi dibuat.
Ketika memindai hapusan darah, penting untuk dicatat sesuatu yang tidak biasa atau tidak
teratur, seperti besar, sel-sel abnormal atau mencari rouleaux pembentukan sel darah merah.
Pilih daerah hapusan darah di mana penghitungan perbedaan adalah untuk memulai,
menempatkan setetes minyak pada slide dan hati-hati mengubah ke tujuan minyak imersi
(100 x)

Setelah memilih area yang cocok, perbesaran 40 x dapat digunakan untuk penilaian yang
lebih kritis. Akhirnya, tujuan daya tinggi (100 x) harus digunakan untuk melihat detail halus dalam
sel-sel atau sesuatu yang mencurigakan. Sel-sel merah, dan platelet Ieucocytes semua harus
sistematis diperiksa.
Ketika mempelajari Pap bernoda, tidak maju terlalu jauh ke daerah tebal slide. Karakteristik
morfologi dari sel-sel sulit untuk membedakan di daerah ini. Sebaliknya, tidak menggunakan
porsi yang sangat tipis pap mana sel-sel darah merah tampak terisi penuh dengan
hemoglobin, umumnya terdistorsi dan tidak menunjukkan gambaran morfologi benar.
Morfologi abnormal tersebut dapat dinilai sebagai 1+ (ringan), 2+ (moderat) atau 3+ (ditandai)
untuk menunjukkan derajat keparahan.

11
DAFTAR ISTILAH YANG DIGUNAKAN UNTUK DESCRIBE MORFOLOGI SEL MERAH
Periksa morfologi sel darah merah adalah daerah tipis slide dimana daerah terbaik pada
hapusan darah untuk sel merah yang hampir menyentuh tetapi tidak tumpang tindih hanya sedikit
dari sel-sel darah merah yang sedikit tumpang tindih. Perhatikan setiap variasi dari normal dan
mengklasifikasikan penyimpangan ini sebagai ringan, sedang, atau ditandai (atau 1 +, 2 +, 3 +).
Sel darah merah biasanya ukuran seragam dan bentuk. Mereka memiliki bulat, garis halus
dan noda dengan komponen zat warna eosin Romanowsky, terutama di pinggiran sel karena bentuk
cekung ganda.

Pada penyakit, kelainan pada gambar merah-sel berasal dari empat penyebab utama:
1. Abnormal eritropoiesis
2. Tidak memadai sintesis hemoglobin
3. Kerusakan pada sel setelah meninggalkan sumsum tulang
4. Upaya oleh sumsum tulang untuk mengkompensasi anemia dengan mempercepat
eritropoiesis.

12
SEL DARAH MERAH

Periksa untuk:
a) Ukuran dan bentuk
b) Relatif isi hemoglobin
c) Polychromatophilia
d) Inklusi
e) Pembentukan rouleaux atau aglutinasi

DIBANDINGKAN DENGAN UKURAN


Anisocytosis: variasi dalam ukuran. Ini adalah penemuan yang umum dan tidak spesifik
Normositik: ukuran normal. Mean diameter sel (MDC) = 7,2 im
Makrositik: lebih besar dari biasanya. Mungkin menunjukkan perubahan megaloblastik atau
retikulositosis
Mikrositik: lebih kecil dari biasanya. Anemia mikrositik termasuk defisiensi Fe dan talasemia

DIBANDINGKAN DENGAN WARNA


Normokromik: warna sel normal (pucat di tengah lebar <1/3 rd dari sel)
Hipokromik: kurangnya warna (pucat >1/3 rd lebar). Defisiensi Fe adalah yang paling umum
tetapi tidak satu-satunya penyebab
Polychromasia: warna biru abu-abu. Mencerminkan adanya retikulosit yang mengandung RNA
basofilik.

BENTUK RELATIF
Poikilocytosis: Variasi dalam bentuk. Panjang non spesifik. Mungkin mencerminkan
dyserythropoiesis atau kerusakan pada sirkulasi sel.
Ovalocytosis: berbentuk oval atau telur, misalnya keturunan ovalocytosis. Macrocytes oval
fitur pada anemia megaloblastik
Elliptocytosis: Sel adalah elips (berbentuk cerutu), misalnya keturunan elliptocytosis. "sel
pensil " terlihat pada defisiensi Fe
Sferositosis: keturunan bulat atau akibat dari kerusakan sel, misalnya luka bakar hemolisis,
kekebalan atau sepsis
Schistocytosis: fragmentasi (fragmen kurang dari setengah volume sel merah normal),
misalnya kerusakan mekanis.

13
Stomatocytes: sel memiliki celah-seperti daerah pucat pusat, misalnya keturunan jenis,
penyakit hati dan sindrom Rhnull.
Sasaran sel: patri daerah Pusat. Relatif kelebihan membran terhadap isi sel. Penyakit hati, Hb-
pathies
Sel tear drop: pear berbentuk memanjang dengan titik tunggal atau ekor. Fitur ekstra-
medullar eritropoiesis
Helm Sel / Sel Bite: satu permukaan yang tidak teratur dengan proyeksi penunjuk (tanduk)
pada satu atau kedua ujungnya
Sickle cell: sel merah berbentuk sabit, karakteristik penyakit sel sabit, misalnya HbSS, HbSC,
HbSD

Spiculated Sel Merah


a) Echinocytes / Crenation: regulary berspekulasi (biasanya reversibel). 10-30 distribusi merata
spikula
b) Acanthocytes: tidak teratur berspekulasi (ireversibel). Spikula 5-10 dari berbagai panjang,
tidak teratur didistribusikan. "ceil duri" istilah telah bingung dengan baik (a) dan (b) dan
dengan demikian telah kehilangan dukungan

14
15
INKLUSI SEL MERAH

Erythroblastaemia: eritroblast (berinti sel darah merah) dapat ditemukan dalam setiap anemia
berat, misalnya β thalassemia mayor. Karakteristik penyakit hemolitik pada bayi baru
lahir. Sejumlah kecil dapat ditemukan pada bayi normal saat lahir dan jumlah besar pada bayi
prematur.
Bodies Howell-Jolly: Ini adalah sisa-sisa nuklir (DNA) dan ditemukan ketika limpa telah dihapus
atau tidak berfungsi. Juga fitur anemia megaloblastik.
Basofilik stippling: Hasil dari agregasi dari RNA
a) Belang-belang (baik) Basophilia: terkait dengan polychromasia
b) Kursus basofilik stippling: didefinisikan dengan baik, hitam inklusi, tersebar di sel
Siderotic / Pappenheimer Badan: butiran yang mengandung besi. Indikasi anemia
sidferoblastic

PEMBAGIAN SEL
Rouleaux Formasi: Non-spesifik fenomena ditingkatkan dengan protein plasma tinggi.Sel-sel
merah agregat dan kebohongan tatap muka di sisi mereka seperti tumpukan koin.
Autoagglutination: Sel agregat menjadi gumpalan besar. Biasanya karena jenis dingin
autoantibody

16
PEMERIKSAAN SEL DARAH PUTIH

1. Periksa pemerataan dan memperkirakan jumlah ini (juga, mencari adanya kelainan kasar hadir
pada smear)
2. Lakukan hitungan diferensial leukosit
3. Istilah meninggalkan shift dan shift kanan mengacu pada tingkat Iobulatio ditemukan di
neutrophiIs. Jika jumlah yang berbeda menunjukkan adanya sel-sel granulocytic belum
matang, ini dinamakan pergeseran ke kiri dan dapat ditemukan pada gangguan seperti
Ieukemias dan infeksi bakteri. Pergeseran ke kanan mengacu pada peningkatan jumlah
neutrofil hypersegmented
4. Pemeriksaan untuk kelainan morfologi

PERHITUNGAN JUMLAH LEUKOSIT

Perbedaan manual jumlah sel darah putih dilakukan untuk menentukan jumlah relatif
masing-masing jenis sel darah putih hadir dalam darah. Selalu ada beberapa distribusi yang tidak
merata dari jenis sel dalam setiap film darah:
Neutrofil dan monosit lebih memilih tepi dan ekor
Limfosit cenderung tinggal di tengah film
Distribusi tergantung pada perbedaan gravitasi lengket, ukuran dan sel spesifik.

Pada saat yang sama, sebuah studi sel darah merah, sel darah putih dan trombosit morfologi
dilakukan. Diferensial dan review smear harus dilakukan setelah jumlah darah telah selesai. Dalam
cara ini, pemeriksaan Pap juga dapat digunakan untuk memeriksa jumlah sel darah putih.
Dalam keadaan penyakit jenis sel darah putih tertentu dapat menunjukkan peningkatan
mutlak dalam jumlah dalam darah. Umum penyakit yang menunjukkan peningkatan jumlah jenis sel
tertentu.
Jika jumlah yang berbeda menunjukkan adanya sel-sel granulocytic belum matang, ini
dinamakan pergeseran ke kiri dan dapat ditemukan pada gangguan seperti Ieukemias dan infeksi
bakteri. Pergeseran ke kanan mengacu pada peningkatan jumlah neutrofil hypersegmented.
Semua Ieucocytes ditemui harus diklasifikasikan. Hasil dari setiap jenis sel ini kemudian
dinyatakan sebagai persentase atau, lebih tepat sebagai jumlah mutlak dari jumlah total sel putih.

17
Neutrofil
Berikut ini adalah fitur untuk mencari.
Butiran: Berat, pewarnaan gelap, butiran beracun merupakan ciri khas dari infeksi
bakteri. Sebuah polys granular berhubungan dengan Ieukaemias myeloid.
Vakuola: Tidak biasanya jelas tetapi sering ditemukan pada infeksi bakteri. Vacuolation dapat
berkembang pada darah normal didiamkan in vitro.
Inti: Istilah meninggalkan shift dan shift kanan mengacu pada tingkat Iobulatio ditemukan di
neutrofil. Pergeseran ke kiri, dengan band dan metamyelocytes, adalah umum pada sepsis
berat. Pergeseran ke kanan dengan hypersegmentation (5 atau lebih lobus) menyimpulkan
perubahan megaloblastik. Pelger-Huet anomali adalah karakteristik diwariskan jinak di mana
netrophils tidak pernah memiliki lebih dari dua lobus. Bentuk Pelgeroid (pseudo-Pelger-Huet)
ditemukan dalam hubungan dengan leukemia.

Eosinofil dan basofil


Hypersegmentation, agranularity dan inklusi tubuh fitur abnormal pada cosinophils dan
basofil. Temuan tersebut paralel mungkin neutrofil morfologi dan mungkin juga mencerminkan
kondisi klinis atau warisan yang mendasarinya.

Monosit
Mungkin berisi inklusi abnormal. Seperti dengan granulosit ini bisa menunjukkan salah satu
dari berbagai kondisi diwariskan. Phagocytosed merah sel dapat dilihat pada anemia hemolitik
autoimun.

Limfosit
Limfosit atipikal merupakan ciri khas dari infeksi virus, misalnya campak influenza, hepatitis
atau demam berdarah. Sel-sel yang digambarkan sebagai "pIasmacytoid" jika sitoplasma
mereka sangat biru, yaitu menyerupai sel plasma.
"Limfosit reaktif" khas dari mononukleosis menular. Sel-sel ini cenderung besar dan
menyerupai monosit dengan basophilicedges ke sitoplasma mereka.

18
PEMERIKSAAN TROMBOSIT

Trombosit:
1. Perkiraan jumlah saat ini
2. Periksa untuk kelainan morfologi

Perkiraan jumlah ini atau perkiraan jumlah trombosit juga dibuat.


Seperti yang disebutkan sebelumnya, estimasi platelet dilakukan underthe 100 x lensa
minyak imersi objektif. Dalam suatu daerah pap mana sel-sel darah merah hampir tidak menyentuh,
jumlah trombosit di 10 Bidang perendaman Minyak berbeda dihitung. Rata-rata jumlah trombosit
per OIF X 20000 mendekati jumlah trombosit. Sebagai contoh, 12 - 16 trombosit per OIF akan sama
dengan sekitar 280.000 platelets/mm3 (280x109/L) dan akan dianggap memadai. Normal (baji)
preparat (jumlah sel darah merah yang normal dan jumlah trombosit normal) harus menunjukkan
sekitar 8 sampai 20 trombosit per bidang di daerah ini.
Sebuah menyatakan perkiraan kasar bahwa jika ada 7-25 trombosit per OIF, jumlah platelet
adalah cukup, asalkan ada sekitar 200 sel darah merah per OIF. Dalam situasi di mana pasien anemia
atau memiliki erythrocytosis, proporsi relatif dari trombosit pada sel-sel darah merah yang
diubah. Dalam hal ini, formula yang lebih terlibat untuk perkiraan trombosit dapat digunakan:

Rata-rata no. trombosit X Total jumlah sel darah merah


-------------------------------------------------------------------------------
200

200 adalah rata-rata jumlah sel darah merah per OIF di apatient dengan jumlah sel darah merah
yang normal.

Periksa untuk kelainan morfologi


Dalam keadaan patologis tertentu, trombosit mungkin muncul butiran atau
diperbesar.Trombosit besar atau raksasa muncul dalam hubungan dengan omset trombosit
meningkat (gangguan perdarahan) atau bisa menunjukkan cacat trombosit, misalnyaBernard Soulier
sindrom. Trombosit biasanya rumpun jika film dibuat langsung membentuk jari-tusukan. Kegagalan
untuk melakukannya dapat menunjukkan kelainan pada fungsi.

19
Satellitosis trombosit adalah fenomena yang hanya terjadi dalam darah EDTA. Trombosit
mematuhi neutrofil dan muncul seperti satelit di sekitar sel. Mungkin tidak ada signifikansi klinis
untuk fenomena ini. Jumlah trombosit yang rendah secara salah sebagai "satelit" tidak
termasuk. Darah harus teringat langsung ke dalam sistem menipiskan panduan trombosit
(menghindari EDTA) untuk mendapatkan jumlah trombosit akurat.

20
B. SESI 2

B.1. WAKTU PERDARAHAN (METODE IVY)


Prinsip
Sebuah manset tekanan darah ditempatkan pada lengan pasien di atas siku, inflasi, dan
dipertahankan pada tekanan konstan sepanjang prosedur. Satu (atau dua) sayatan standar yang
dibuat pada permukaan volar lengan bawah. Lamanya waktu yang diperlukan untuk menghentikan
perdarahan dicatat sebagai waktu perdarahan.

Reagen dan Peralatan


1. Manset tekanan darah
2. Perangkat saat pendarahan
3. Stopwatch
4. Kertas filter sirkular
5. Alkohol persiapan bantalan
6. Perban kupu-kupu

Prosedur
1. Cari area untuk waktu perdarahan. Lengan pasien harus diperluas dengan permukaan volar
menghadap ke atas. Dimulai pada jari tengah bergerak ke atas lengan dalam garis lurus
sampai 5 cm di bawah lipatan bawah. Daerah ini di bagian otot dari permukaan Volar lengan
bawah, 5 cm di bawah lipatan dalam siku, adalah situs tes standar untuk menusuk. Daerah ini
harus bebas dari vena permukaan, memar, bekas luka, dan pembengkakan. (Mencukur daerah
tersebut jika rambut berlebihan hadir)
2. Bersihkan situs dengan spons alkohol dan biarkan kering
3. Tempatkan manset tekanan darah pada lengan pasien di atas siku. Meningkatkan tekanan
sampai 40 mm Hg dan tahan tekanan ini tepat untuk seluruh prosedur. Sayatan harus dibuat
dan waktu perdarahan dimulai dalam waktu 30 sampai 60 detik setelah manset tekanan darah
telah meningkat.
4. Siapkan perangkat waktu perdarahan. Posisi itu dalam arah yang benar dan daerah yang
sesuai pada lengan, dengan hanya menggunakan bahwa jumlah tekanan ke bawah sehingga
kedua ujung yang menyentuh kulit dan perangkat tidak menyebabkan lekukan.(Terlalu banyak
tekanan Jika diterapkan dan perangkat menekan kulit, sayatan akan terlalu dalam)

21
5. Aktifkan memicu dan memulai stopwatch. Hapus perangkat sekitar 1 detik setelah membuat
sayatan.
6. Menghapuskan darah dari situs tusukan pada bagian yang bersih dari kertas saring melingkar
setiap 30 detik. Kertas saring tidak boleh menyentuh luka setiap saat.
7. Bila perdarahan berhenti, stop watch dan melepaskan manset tekanan darah. Catat
hasilnya. Ulangi pemeriksaan dua kali, melaporkan hasil rata-rata.
8. Tempatkan pembalut kupu-kupu di atas lokasi tusuk, dan menyarankan pasien untuk menjaga
perban di tempat selama 24 jam.

B.2. JUMLAH TROMBOSIT (METODE LANGSUNG; REES-ECKER)


Pendahuluan
Jumlah trombosit adalah penting dalam membantu untuk mendiagnosis gangguan
perdarahan. Trombosit berfungsi terutama dalam hemostasis (penghentian perdarahan) dan dalam
menjaga integritas kapiler. Trombosit adalah sulit untuk menghitung. Mereka kecil, hancur dengan
mudah, dan sulit dibedakan dari kotoran.

Prinsip Metode
Darah diencerkan dengan larutan yang mengandung Biru cresyl Brilliant sehingga trombosit
tampak biru cerah. Trombosit kemudian dihitung menggunakan hemositometer. Hasil digandakan
diperiksa dengan pemeriksaan trombosit pada Pap Wright / Giemza ternoda.

Spesimen
Seluruh darah (1 mL), menggunakan EDTA sebagai antikoagulan tersebut. Darah kapiler juga
dapat digunakan.

Reagen dan Peralatan


1. Rees-Ecker (untuk mencairkan trombosit):
Sodium sitrat 3,8 g
Brilliant cresyl biru 0,1 g
Formaldehid 40% 0,2 ml
Air suling 100 mL
Campur dan saring sebelum digunakan.
2. Pipa eritrosit

22
3. Hemositometer
4. Obyek kaca, Wright / Giemsa stain
5. Mikroskop
6. Cawan petri
7. Kertas saring

Prosedur
1. Mengambil darah sampai persis tanda 0,5 dalam pipet hitungan merah dan encerkan sampai
tanda 101 dengan jumlah cairan merah menipiskan, sehingga membuat 1:200 pengenceran
darah.
2. Campur pengenceran selama 3-5 menit. Bersihkan ruang penghitungan
3. Siapkan ruang lembab sebagai berikut: mendapatkan cawan petri dan selembar kertas filter
kira-kira diameter yang sama dengan cawan petri. (Entah atas atau cawan petri bawah dapat
digunakan). Seksama membasahi kertas saring dan tempat di bagian atas cawan petri
sehingga mematuhi piring.
4. Ketika sampel darah diencerkan secara memadai dicampur, mengisi satu sisi dari ruang
penghitungan dengan dilusi tersebut.
5. Tempatkan ruang lembab lebih hemositometer dan memungkinkan persiapan untuk duduk
selama 15 sampai 20 menit.
6. Hitung trombosit:
a. Hati-hati tempat hemositometer pada tahap mikroskop.
b. Menggunakan daya yang rendah (10 x objektif) menempatkan alun-alun pusat besar di
tengah bidang penglihatan. Hati-hati mengubah ke tujuan kering tinggi (40x). Trombosit
muncul sebagai kecil, bulat, oval, atau memanjang partikel yang sangat ditarik dan noda
warna kebiruan cahaya.
c. Hitung trombosit dalam 2 kotak besar di alun-alun sudut. Kotak disarankan untuk
menggunakan adalah mereka diberi label dengan W (Gambar 2)

23
7. Hitung jumlah trombosit / L seperti berikut:

# Sel dihitung Koreksi x untuk Pengenceran x 106


PLTS / L = ---------------------------------------------------- -----------------
Koreksi untuk Volume

# Sel terhitung x 200 x 106


PLTS / L = ---------------------------------------
2 x 1 x 1 x 0,1

Sebagai contoh:
# Sel dalam dua kotak besar = 400
Pengenceran = 1: 200
Volume dihitung = 2 kotak besar
Konversi ke liter = x 106

24
400 x 1,0 x 200 x 106
PLTS / L = ----------------------------------
0.2
= 4,0 x 1011

8. Scan smear dengan pewarnaan Wright atau Giemza dan memperkirakan jumlah trombosit
untuk cross check dengan hasil atas. Estimasi jumlah lubang / mmc dengan metode tidak
langsung (hapusan darah) = jumlah lubang pada 20 pandangan perendaman x 1000

B.3. PT (PROTHROMBIN TIME)


Prinsip
Kalsium dalam darah keseluruhan terikat dengan natrium sitrat, sehingga mencegah
koagulasi. Jaringan tromboplastin, yang telah ditambahkan kalsium, adalah dicampur dengan
plasma, dan waktu pembekuan dicatat. (Faktor VII bereaksi dengan faktor jaringan [tromboplastin]
dengan adanya ion kalsium untuk mengaktifkan faktor X. Mekanisme koagulasi berlanjut dari sana.)

Reagen dan Peralatan


1. Tabung air, 37°C
2. Reagen tromboplastin-kalsium klorida
3. Normal plasma kontrol
4. Uji tabung, 13 x 100 mm
5. Stopwatch

Spesimen
Citrated plasma: 1 bagian natrium sitrat 0,11 M sampai 9 bagian seluruh darah (0,5 ml sitrat
+ 4,5 ml darah utuh). Pengujian harus dilakukan dalam waktu 2 jam setelah spesimen diambil ketika
plasma dipertahankan pada suhu kamar dan dalam waktu 2 sampai 5 hari ketika plasma disimpan
pada -20 ° C.

Oksalat Plasma: 1 bagian natrium oksalat dan 9 bagian darah.

Prosedur
1. Sentrifuge spesimen segera mungkin setelah pengumpulan darah untuk memperoleh plasma
miskin trombosit (10 menit, 3000 rpm)

25
2. Pengujian harus dilanjutkan segera, atau tutup tabung disentrifugasi atau plasma dan
menyelesaikan prosedur dalam 2 jam.
3. Pipet 0,2 mL reagen tromboplastin-kalsium dalam jumlah yang sesuai dari 13 100 mm x
tabung reaksi. Hangatkan tabung reaksi dalam penangas air selama minimal 1 menit, sampai
mereka telah mencapai 370C. Masa inkubasi campuran ini tidak kritis setelah mencapai 37°C
4. Menetaskan plasma untuk 2 sampai 3 menit, hingga mencapai 37°C, plasma harus diinkubasi
selama tidak lebih dari 5 menit setelah mencapai 37°C
5. Paksa Pipet 0,1 mL plasma pasien ke dalam tabung reaksi berisi 0,2 ml tromboplastin-kalsium
campuran dan sekaligus memulai stopwatch.
6. Campur isi tabung, keluarkan tabung dari air mandi, dan lap kering. Dengan lembut
memiringkan tabung bolak-balik sampai bentuk gumpalan, di mana titik waktu
dihentikan.Catat waktu koagulasi.
7. Setiap plasma uji dan kontrol harus dilakukan dalam rangkap ketika metode manual yang
digunakan.
8. Rata-rata dua kali pembekuan dan melaporkan hasil pasien bersama dengan kisaran normal
untuk tes seperti yang dilakukan di laboratorium Anda.

B.4. APTT (AKTIF PARSIAL WAKTU TROMBOPLASTIN)


APTT adalah prosedur yang paling berguna untuk skrining rutin gangguan koagulasi dalam
sistem intrinsik, untuk mendeteksi adanya sirkulasi antikoagulan (inhibitor), dan untuk pemantauan
terapi heparin. lt mengukur faktor-faktor tersebut hadir dalam mekanisme koagulasi intrinsik kecuali
untuk trombosit dan faktor XIII (VLL faktor tidak diukur karena dalam sistem ekstrinsik).

Prinsip
Kalsium dalam darah keseluruhan terikat oleh antikoagulan natrium sitrat untuk mencegah
koagulasi. Plasma, setelah sentrifugasi, berisi semua faktor intrinsik kecuali kalsium dan
platelet. Kalsium, sebagai pengganti untuk fosfolipid trombosit (tromboplastin parsial), dan
penggerak (untuk memastikan aktivasi maksimal), ditambahkan dengan plasma. Waktu yang
diperlukan untuk plasma untuk membeku adalah waktu tromboplastin parsial teraktivasi.

Reagen dan Peralatan


1. Tabung air, 37°C
2. Kalsium klorida, 0,025 M:
Kalsium klorida-anhidrida 1,38 g

26
Aquades 500 ml
3. Partial tromboplastin mengandung penggerak.
4. Normal kontrol plasma
5. Uji tabung, 13 x 100 mm
6. Stopwatch
7. Tabung es
8. Mikropipet 0,1 ml

Spesimen
Citrated plasma: 1 bagian natrium sitrat 0,11 M sampai 9 bagian darah.

Prosedur
1. Sentrifuge spesimen sesegera mungkin setelah pengumpulan untuk memperoleh plasma
miskin trombosit. Centrifuge pada 3000 rpm dalam 10 menit, kemudian menempatkan plasma
di tabung es.
2. lnkubasi jumlah yang cukup kalsium klorida 0,025 M pada 37°C.
3. Pipet 0,1 ml kontrol plasma (atau plasma pasien) ke dalam tabung reaksi 13x100 mm, taruh
dalam penangas air selama 1 menit.
4. Pipet 0,1 ml parsial tromboplastin (berisi aktivator) ke dalam tabung reaksi yang berisi kontrol
(atau pasien) plasma.
5. Campur isi tabung dengan cepat dan tempatkan dalam bak air 370 C selama 2-3 menit.
6. Setelah tepat 3 menit, paksa pipet 0,1 ml pra-hangat klorida kalsium ke dalam tabung, dan
sekaligus memulai stopwatch.
7. Campur tabung tes segera setelah menambahkan kalsium klorida. Biarkan tabung reaksi untuk
tetap air mandi sementara lembut memiringkan tabung setiap 5 detik. Pada akhir tabung 20
detik, menghapus, tabung uji dari air mandi. Cepat menyeka bagian luar tabung reaksi dengan
kain kasa bersih sehingga isi tabung terlihat jelas.
8. Dengan lembut miringkan tabung reaksi bolak-balik sampai bentuk gumpalan, di mana titik
waktu dihentikan.
9. Ketika pengujian manual dilakukan, kontrol dan pasien spesimen plasma harus dijalankan
dalam rangkap dua, dan hasilnya dirata-ratakan untuk memperoleh laporan akhir.

27
B.5. PENGELOMPOKAN DARAH
Prinsip
Prosedur tes ini didasarkan pada prinsip aglutinasi. Sel darah merah pengolahan antigen
akan mengaglutinasi saat diuji dengan antibodi yang sesuai.

Koleksi spesimen
Gambarlah sebuah spesimen darah dengan atau tanpa antikoagulan, dengan menggunakan
teknik proses mengeluarkan darah dapat diterima. Pengujian harus dilakukan sesegera mungkin
untuk meminimalkan kemungkinan reaksi negatif palsu positif atau palsu yang terjadi karena
kontaminasi atau penyimpanan yang tidak tepat dari spesimen.

Reagen dan Peralatan


Monoklonal reagen ABO dibuat dari supernatans budaya invitro dari hibridisasi
imunoglobulin yang mensekresi garis mouse sel. Antibodi Setiap diencerkan dalam buffer fosfat yang
mengandung natrium klorida, EDTA dan sapi albumin untuk memberikan reagen yang dioptimalkan
untuk digunakan dalam tes tabung, slide dan lempeng. Anti-A dengan asam berwarna biru (paten
biru) pewarna, Anti-B adalah berwarna dengan asam (tatrazine) pewarna kuning, dan Anti-A, B tidak
berwarna. Reagen ini mengandung natrium azida 0,1% sebagai pengawet dan harus digunakan
sebagai disediakan.

Prosedur (teknik-slide Test)


1. Siapkan suspensi eritrosit 10%:
Isi tabung gelas dengan 3 tetes darah dan garam, tutup dengan parafin atau plastik dan
campuran lembut. Centrifuge 1000 rpm dalam waktu 1 menit dan limbah supernatan.
Ulangi 3 kali, lalu encerkan dengan 27 tetes garam sehingga mendapatkan suspensi
eritrosit 10%.
2. Taruh di atas slide kaca pada suhu kamar (18-25°C):
1 volume reagen pengelompokan ABO
1 volume sel 10% tersuspensi dalam plasma sendiri atau kelompok mereka kompatibel
atau serum
3. Menggunakan aplikator bersih, mencampur reagen dan sel di area seluas sekitar 20x40 nm.
4. Perlahan-lahan miringkan slide maju mundur dan mengamati untuk aglutinasi untuk jangka
waktu tidak lebih dari dua menit.

28
Catat hasilnya:

Recipient (pasien) ditambah sel merah

ABO group (Reagent) Anti-A (Reagent) Anti-B (Reagent) Anti-A,B

A ++++ - ++++
B - ++++ ++++
AB ++++ ++++ ++++
O - - -

B.6. UJI SILANG = LINTAS PENCOCOKAN


Definisi:
Ujian besar adalah pemeriksaan serum pasien dan eritrosit donor.
Tes kecil adalah pemeriksaan serum plasma donor / dan eritrosit pasien.

Tujuan:
Untuk mendeteksi antibodi lengkap atau tidak lengkap yang terkandung dalam serum pasien
atau donor untuk menghindari transfusi hemolitik.

Prosedur:
1. Tahap I atau ruang fase suhu, dilakukan dalam medium garam. Antibodi dingin (antibodi
lengkap dari kelas M lg) dapat terdeteksi dalam contoh fase:
a) golongan darah yang tidak kompatibel sistem ABO.
b) Dingin Ab: anti M, anti N, anti A1, anti Lewis, anti l dan anti IH.
Uji mayor:
Pipet dua tetes serum pasien ke dalam tabung reaksi kecil dan tambahkan dengan satu tetes
suspensi sel 5% donor.
Uji minor:
Pipet dua tetes plasma donor ke dalam tabung reaksi kecil dan tambahkan dengan satu tetes
suspensi sel 5% donor.
Kocok dan disentrifus masing-masing tabung pada 1000 ppm selama 1 menit atau 3400 ppm
selama 15 detik. Watch dasar tabung. Jika ada aglutinasi atau hemolisis, hasilnya positif, tetapi
jika tidak ada aglutinasi atau hemolisis, hasilnya adalah negatif. Setelah itu, lanjutkan ke tahap
kedua.

29
Fase I
Fase I Fase I
Tab I Tab 2

Serum pasien 2 tetes -


Bersihkan
5% donor eritrosit Tambahkan 2
1 tetes - eritrosit
susp tetes 22%
kemudian
Donor bovine albumin
- 2 tetes tambahkan
serum/plasma untuk semua
dengan 2 tetes
5% pasien tabung
- 1 tetes Coomb’s serum
eritrosit susp.

2. Tahap Il atau 37 ° C inkubasi fase, dilakukan di 22% dari media albumin sapi. Antibodi yang
dapat direaksikan dalam fase ini adalah Rhesus antibodi sistem (anti D, anti E, anti C) dan anti
Lewis. Pada fase ini antibodi yang tidak lengkap dapat eritrosit dilapisi sehingga dalam fase III,
hasilnya akan positif setelah penambahan serum Coomb itu.
Pipet 2 tetes sapi 22% albumin untuk setiap tabung, goyang dan menetaskan pada 37 ° C
selama 15 menit, dari sentrifus pada 1000 ppm selama 1 menit atau 3400 ppm selama 15
menit.
Perhatikan dasar tabung, cuaca hasilnya positif atau negatif.
Jika hasilnya negatif, lanjutkan ke tahap III.
3. Tahap III atau tahap uji antiglobulin (Coombs test)
Pada fase ini, Ab lengkap: D anti, anti E, anti C, anti Duffy, anti K, dll anti S yang memiliki
eritrosit dilapisi akan memiliki aglutinasi setelah penambahan Coombs serum (globulin anti
manusia). Cuci eritrosit di dalam tabung dengan garam tiga kali, setelah yang menambah
sedimen dengan 2 tetes serum Coomb, kocok dan disentrifus pada 1000 ppm selama 1 menit
atau 3400 ppm selama 15 detik. Watch dasar cuaca tabung ada aglutinasi atau hemolisis. Jika
hasilnya negatif dengan menambahkan satu tetes sel kontrol Coombs kemudian
disentrifus. Hasilnya harus positif.

30
PARASITOLOGY

I. DARAH PROTOZOA: PLASMODIA

Tujuan:
Dalam rangka untuk mendiagnosis infeksi malaria, siswa harus dapat mempersiapkan
sampel untuk pemeriksaan mikroskopis dan mengidentifikasi apakah ada atau tidak ada Plasmodium
dalam film darah.

GIO
Memahami morfologi berbagai tahap parasit malaria manusia (Plasmodium) dalam film
darah dan dapat mengidentifikasi spesies tersebut. Menghitung parasitemia berdasarkan film darah
tipis dan tebal.

SIO
1. Menjelaskan morfologi karakteristik dari Plasmodium vivax pada tahapan yang berbeda.
2. Menjelaskan morfologi karakteristik dari Plasmodium falciparum pada tahapan yang berbeda.
3. Menggambarkan karakteristik morfologi malariae Plasmodium pada tahap yang berbeda
4. Melakukan hapusan darah tipis dan tebal dan menghitung jumlah parasitemia.

MORFOLOGI DARI PLASMODIUM DALAM FILM DARAH TIPIS

Plasmodium vivax
Penampilan RBC terparasit: ukuran dan bentuk sekitar 1,5-2 kali lebih besar dari biasanya,
mungkin ukuran normal sampai cincin mengisi setengah dari sel.
A. Tahap trophozoite
1. Trofozoit muda
a. Bentuk cincin, inti merah, sitoplasma biru
b. Vakuola didalam
c. Penebalan sitoplasma di nukleus
d. Plasmodium ditempatkan terpusat di dalam sel darah merah, biasanya hanya satu
Plasmodium dalam sel darah merah.
2. Trofozoit dewasa

31
a. Bentuk amoeboid
b. Sitoplasma tidak teratur
c. Biasanya dengan itu stippling Schuffner

B. Tahap skizon
1. Belum menghasilkan skizon
a. Bentuk bulat, sekitar satu setengah diameter dari sel darah merah.
b. Compact sitoplasma tanpa vakuola
c. Inti terbagi atau massa kromatin
d. Berbeda hematin atau malaria pigmen
e. Jelas terlihat Scuffner yang stippling
2. Skizon matang
a. Inti dibagi menjadi 12-24 berongga
b. Sitoplasma terbagi untuk membentuk 12-24 merozoit
c. Hampir mengisi sel darah merah
d. Rumpun cokelat keemasan pigmen di pusat
e. Jelas terlihat Schuffner yang stippling

C. Tahap gametocyte
1. Microgametocyte
a. Bentuk bulat, lebih kecil dari macrogametocyte
b. Kromatin menyebar bahan terletak di dekat bagian tengah dari parasit
c. Cahaya biru sitoplasma
d. Jelas terlihat pigmen
2. Macrogametocyte
a. Bentuk oval atau bulat, lebih besar dari microgametocyte, hampir mengisi sel darah
merah
b. Massa kromatin perifer yang terletak kompak
c. Sitoplasma biru
d. Tersebar pigmen malaria

Sel darah merah yang terinfeksi ganda dapat terjadi pada infeksi berat.

32
Plasmodium falciparum
Penampilan RBC terparasit: baik ukuran dan bentuk normal.
A. Trophozoite
1. Trofozoit muda
a. Kecil, bentuk cincin halus sekitar 1/10-3/10 dari diameter sel darah merah.
b. Sitoplasma halus dan lembut dari cincin, kadang-kadang terletak di sepanjang
pinggiran sel darah merah, dan mungkin tampak berbaring di luar sel (bentuk accole)
c. Inti di tepi sel darah merah, sekitar 2 mm, warna merah, kadang-kadang dua kali
lipat terinfeksi sel darah merah mengandung cincin dengan titik-titik kromatin
ganda.
2. Trofozoit dewasa
a. Bentuk amoeboid
b. Titik Maurer atau sumbing bisa dilihat
c. Satu atau dua nukleus (cincin schizontic)
d. Berbeda pigmen butiran
e. Sitoplasma mengelilingi vakuola

B. Tahap skizon
1. Skizon muda
a. Sekitar 1/2 ukuran dari sel darah merah
b. Hampir bentuknya bundar
c. Terbagi inti, belum untuk sitoplasma
d. Pigmen butiran antara inti
e. Maurer 'titik-titik tidak terlihat
2. Skizon matang
a. Sitoplasma: sekitar 3/4 dari sel darah merah
b. Inti: dibagi menjadi 15-30
c. Sitoplasma: dibagi untuk membentuk merozoit
d. Pigmen gumpalan di bagian tengah

C. Gametocyte
1. Microgametocyte
a. Pisang atau bentuk ginjal
b. Merah pucat sitoplasma

33
c. Menyebar dan tersebar kromatin
d. Pigmen gelap butiran terletak di bagian tengah.
2. Macrogametocyte
a. Pisang bentuk
b. Biru sitoplasma
c. Massa kromatin kompak terletak di pusat
d. Pigmen hitam mengelompok lebih kromatin

Beberapa infeksi bisa terjadi, 2 sampai 7 parasit dalam satu sel darah merah.

Plasmodium malariae
Penampilan RBC terparasit: bentuk normal, ukuran mungkin normal atau sedikit lebih kecil.
A. Tahap trophozoite
1. Trofozoit muda
a. Cincin bentuk, inti merah, sitoplasma biru dengan vakuola dalam
b. Menyerupai P. vivax dan tidak dapat dengan mudah dibedakan dari itu
c. Bentuk cincin lebih besar dibandingkan dengan P. falciparum.
2. Trofozoit dewasa
a. Parasit mengisi sel darah merah berukuran normal
b. Amoeboid
c. Sitoplasma karakteristik dalam bentuk band dengan kromatin membentang dan
butiran pigmen mencolok

B. Tahap skizon
1. Belum menghasilkan skizon
a. Sitoplasma hampir kompak, mengisi seluruh sel darah merah
b. Terbagi inti
c. Pigmen butiran di sekitar inti
2. Skizon matang
a. Rosette bentuk
b. Mengisi seluruh sel darah merah
c. Delapan merozoit disusun sekitar rumpun pigmen dalam bentuk roset
d. Pigmen kuning ini muncul bukan coklat tua

34
C. Tahap gametocyte
1. Microgametocyte
a. Bentuk bulat, hampir penuh mengisi sel darah merah dengan sitoplasma pucat
merah.
b. Kromatin difus terletak perifer dalam organisme bukan terpusat.
c. Tersebar butiran pigmen.
2. Macrogametocyte
a. Oval atau bulat bentuknya, lebih besar dari microgametocytes.
b. Biru sitoplasma
c. Kromatin ini kompak dan perifer yang terletak
d. Sitoplasma mengandung coklat gelap butiran pigmen.

35
MORFOLOGI DARI PLASMODIUM DALAM FILM DARAH TEBAL

Plasmodium vivax
Dalam film darah kental dengan Giemsa stain
a. Stroma sel darah merah segaris dengan penampilan ungu kemerahan (sel hantu)
b. Scuffner itu stippling dalam 'hantu' sel darah merah terutama pada tepi film.
c. Leukosit dengan inti ungu kebiruan
d. Semua tahapan P. vivax bisa dilihat.
e. Ada tiga komponen dari parasit malaria yang dapat dilihat dalam film patri: sitoplasma (tubuh)
yang noda biru, kromatin (inti) yang noda merah atau ungu, dan pigmen (hematin) yang tidak
noda tetapi bervariasi dari cokelat keemasan untuk hitam.
f. Parasit lebih besar dari inti limfosit.

Plasmodium falciparum
Dalam darah film tebal dengan Giemsa stain.
a. Biasanya hanya muda, tumbuh dan trophozoites! atau gametosit matang dapat dilihat.
b. Penampilan seragam trophozoites muda seperti bintang di langit, terutama pada infeksi berat.
c. Parasit lebih kecil dari inti limfosit.

Plasmodium malariae
Dalam darah film tebal dengan Giemsa stain.
a. Biasanya hanya beberapa parasit pada film darah.
b. Semua tahapan dapat dilihat yang menimbulkan penampilan yang tidak seragam.
c. Kompak dan parasit berkerah dalam.

Keuntungan dari film darah tebal dibandingkan apus darah tipis


a. Film tebal lebih disukai untuk diagnosis karena memungkinkan pemeriksaan yang cukup cepat
dari sejumlah besar darah, dan sering mengungkapkan infeksi ringan yang tidak terjawab pada
film tipis.
b. Frekuensi parasit ditemukan bisa 20 kali lebih banyak dari pada film tipis di satu bidang
mikroskopis.

36
Kekurangan dari film tebal:
Sel-sel darah merah yang segaris, oleh karena itu fitur morfologi parasit mungkin kurang
jelas dan kurang khas dari pada film tipis.

Memuaskan film darah tebal dapat diperoleh dengan persiapan yang cermat dan pewarnaan
yang sesuai prosedur. Karakteristik film darah memuaskan tebal adalah:
a. Stroma sel darah merah sebagai latar belakang homogen ungu kebiruan slide.
b. Dalam kebiruan ungu inti Ieucocytes, butir tidak jelas, butir eosinofil saja.
c. Rumpun merah keunguan trombosit.
d. Parasit kecil dengan sitoplasma mencolok.
e. Maurer di titik-titik dan titik-titik tidak jelas Zieman itu.
f. Schuffner itu stippling sebagai daerah kemerahan.
g. Tidak seragam sitoplasma: cincin biru agak tipis, atau bentuk seperti tanda koma atau tanda
seru dan bentuk accole terlihat pada film darah tebal.
h. Pigmen malaria terlihat pada tahap trofozoit berkembang.
i. Amoeboid sitoplasma tahap trofozoit P. vivax.

37
KRITERIA DIAGNOSA PLASMODIUM
DALAM FILM DARAH TEBAL

Plasmodium vivax
a. Tidak seragam penampilan, cincin bentuk trofozoit muda menyerupai P. falciparum.
b. Sitoplasma amoeboid dari trofozoit adalah karakteristik untuk P. Vivax
c. Skizon P. vivax. lebih besar daripada yang lain.
d. Gametosit adalah pigmen besar, bulat dan tersebar dalam parasit.
e. Jumlah parasit adalah kurang dari P. falciparum.

Plasmodium falciparum
a. Biasanya hanya trophozoites muda terlihat.
b. Trophozoites Tumbuh dapat ditemukan
c. Besar jumlah trophozoites muda memberikan penampilan bintang di langit.
d. Skizon: massa kecil, bulat dan kompak.
e. Bentuk pisang gametosit bisa tampil. Sulit untuk membedakan antara makro dan mikrogamet.

Plasmodium malariae
a. Trofozoit muda menyerupai P. vivax atau P. falciparum.
b. Trofozoit Tumbuh memiliki sitoplasma kompak, vakuola tidak jelas, pigmen mencolok, warna
yang dalam.
c. Skizon Kecil memiliki penampilan roset.
d. Gametocyte putaran memiliki satu inti dan pigmen.
e. Jumlah parasit lebih kecil dari P. vivax.

Perbedaan karakteristik eritrosit yang terinfeksi dan plasmodia manusia dalam film tipis bernoda

Characteristics P. falciparum P. vivax P. ovale P. maIariae

Diperbesar terinfeksi eritrosit - + ± -

Eritrosit yang terinfeksi


+ - ± +
tidak membesar

Terinfeksi RBC oval,


- - + -
marjin crenated *

Terinfeksi RBC decolorized - + + -

38
RBC yang terinfeksi, titik-titik yang
- + + -
Scuffner *

Terinfeksi RBC Maurer yang titik-


+ - - -
titik *

Beberapa infeksi pada RBC * + Rare - -

Parasit, semua bentuk dalam


- + + +
darah perifer

Parasit, cincin kasar besar - + + +

Parasit, titik-titik kromatin ganda* + Rare - -

Parasit, bentuk accole + Rare - -

Parasit Band pertanian - - - +

Parasit, cresentic gametosit + - - -

Jumlah merozoit 8-24(32) 12-24 8-12 6-12

* Tidak berubah-ubah, tetapi penting jika dilihat

Perubahan sel-sel darah merah yang terinfeksi dengan parasit malaria manusia seperti terlihat
dalam film tipis

P. falciparum P. vivax P. ovale P.maIariae

Normal dalam ukuran. Lebih besar dari banyak yang terinfeksi Tentang ukuran
Beberapa infeksi eritrosit biasanya, lebih pucat, eritrosit diperbesar normal atau
sangat sering. Beberapa sering sedikit dan pasti oval sedikit lebih kecil.
kekuningan sel, terdistorsi. membentuk Stippling tidak
tampaknya memiliki Titik Scuffner yang sedangkan parasit itu terlihat
tepi tebal hadir di hampir semua bulat atau oleh pewarnaan n
(sel nakal). Tidak ada sel yang terinfeksi memanjang. Dalam ormal. Tidak
celah Schuffner yang stip kecuali untuk cincin garis besar sel ada infeksi ganda
pling tetapi tidak sangat muda. infedted sering atau eritrosit,
teratur (titik Maurer ini) d Beberapa infeksi oleh compang-camping sebagai sebuah
apat dilihat dalam film parasit beberapa tidak (fimbriated). aturan.
overstained. Pigmen biasa. Pigmen Schuffner di titik-titik Pigmen dilihat
granular dengan kecoklatan di batang menonjol pada semua bahkan pada
kecenderungan untuk tersebar pendek. tahap parasit. pigmen tahap awal,

39
coalese. Dalam kecoklatan mirip butiran gelap
gametosit (Cresent) garis dengan P. vivax. daripada batang
besar eritrosit hampir kecil, sering
tidak terlihat. terlihat di
pinggiran sel.

MENGHITUNG PARASIT MALARIA DALAM FILM DARAH TEBAL DAN TIPIS

Metode yang berbeda digunakan untuk menetapkan jumlah parasit.


"Plus-sistem": sebuah metode sederhana untuk menghitung parasit di apusan darah tebal
untuk penggunaan klinis sehari-hari di pusat-pusat kesehatan.
Memperkirakan angka parasit / uL darah dengan menghitung parasit terhadap WBC (White
Blood Cells) dari sediaan tebal.
Menghitung persentase sel merah terparasit di pap tipis.

Catatan: Sebelum mulai menghitung, setara 0.25μL darah (sekitar 100-200 bidang menggunakan
perbesaran mata 10x dan 100x minyak imersi) harus diperiksa inthe film tebal untuk menentukan
spesies parasit dan tahapan yang mungkin ada.

Sistem Plus:
Ini adalah metode sederhana menghitung parasit di apusan darah tebal untuk penggunaan
klinis sehari-hari di pusat-pusat kesehatan dan seharusnya hanya digunakan jika tidak
memungkinkan untuk melakukan penghitungan lebih dapat diterima dari parasit.

Sistem ini memerlukan kode sebagai berikut (dalam film tebal):


Kurang dari 40 parasit dalam 100 helds mikroskopis: jumlah parasit aseksual.
1-10 parasit per 100 bidang mikroskopis +
11-100 parasit per 100 bidang mikroskopis ++
1-10 parasit per satu bidang film tebal +++
Lebih dari 10 parasit per satu bidang film tebal ++++

NB: gametosit disebutkan secara terpisah sebagai angka "gametosit" per 100 bidang film tebal

40
Memperkirakan numbers/µL parasit darah dengan menghitung parasit terhadap sel putih dari film
tebal:
Berikut sebagai metode praktis dengan akurasi yang memadai. Hal ini didasarkan pada
jumlah parasit per uL darah dalam sediaan tebal, ini dihitung dalam kaitannya dengan jumlah yang
telah ditetapkan Ieucocytes. Rata-rata 8000 Ieucocytes per µL adalah standar.
Meskipun ketidakakuratan karena variasi dalam jumlah Ieucocytes antara individu dalam
kesehatan yang normal dan variasi yang lebih besar dalam kesehatan yang buruk, standar ini
memungkinkan untuk perbandingan yang wajar. Sebelum penghitungan dimulai, setara 0.25μL
darah (sekitar 100 bidang dengan tujuan minyak imersi 10x) harus diperiksa dalam film tebal untuk
menentukan spesies parasit dan tahapan yang mungkin ada. Saat ini telah didirikan, metode
menghitung cocok untuk film darah positif adalah:

Dua golnya counter diwajibkan untuk menghitung parasit dan Ieucocytes secara terpisah.
1. Pilih bagian dari film tebal di mana ia sel darah putih yang merata dan parasit juga ternoda.
2. Sistematis menghitung sel darah 200white (WBC) dan semua parasit (aseksual).Dalam setiap
kasus, jumlah parasit dalam kaitannya dengan jumlah leukosit dapat diubah menjadi parasit
per uL dengan rumus matematika sederhana:

8000 x jumlah parasit dihitung


------------------------------------------------- = ........ parasit / µL
Jumlah ini WBC

3. Contoh:
680 parasit / 200WBC
Menghitung jumlah parasit per pL darah sebagai berikut:

Jika pasien WBC count = 8000/μL


Jumlah parasit dihitung = 680
Kemudian:
8000 x 680
---------------- = 27.200 parasit / uL
200
NB: Ini berarti bahwa, jika 200 di WBC yang dihitung, parasit dikalikan dengan 40.

41
Penting:
1. Menghitung semua parasit ini. Sertakan hanya parasit stadium aseksual dalam hitungan.
2. Hitung seksual (gametocyte) tahap secara terpisah dengan menggunakan metode
penghitungan yang sama diuraikan di atas.
3. Pap negatif akan memerlukan bahwa tidak ada parasit dilihat pada sedikitnya 200 bidang daya
tinggi.
4. Jika, setelah menghitung 200 di WBC, jumlah parasit adalah 9 atau kurang, terus menghitung
sampai Anda mencapai 500 itu WBC dan kemudian bagi dengan 500.

42
MENGHITUNG PERSENTASE PARASIT
DI SEL MERAH PADA APUSAN TIPIS

Hitung persentase sel merah terparasit ketika ada parasitemia tinggi. Ini dapat membantu
untuk memonitor respons pasien terhadap pengobatan. Sebuah metode sederhana menghitung
persentase sel merah terparasit adalah sebagai berikut:
1. Menggunakan perbesaran 100 x, pilih area tilm tipis dimana jumlah sel darah merah adalah
sekitar 250 per lapangan.
2. Hitung jumlah sel darah merah parasitisized dalam 40 bidang (= N), yaitu sekitar 10.000 sel (40
x 250).
3. Bagi 100 untuk menghitung persentase (%) dari sel parasit

N
----------- X 100% = --------- .... %
10,000

Contoh:
83 parasit di 10.000 RBC
Persentase: 83
----------- X 100% = 0,83%
10,000

Menghitung jumlah parasit per µL darah sebagai berikut:


Jika hitung RBC pasien = 4.000.000 / µL
Kepadatan: 4.000.000
-------------------- X 83 = 33.200 parasit / µL
10,000

43
PRAKTIKUM

Tujuan:
Memahami protozoa darah: Plasmodium
a. Memahami morfologi beberapa tahapan Plasmodium apakah dalam film darah tebal atau
tipis.
b. Meneliti film darah di bawah mikroskop dan mengidentifikasi Plasmodium.
c. Menghitung jumlah parasit dalam film darah tebal dan tipis.

Plasmodium vivax
Film darah tipis dengan pewarna Giemsa.

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Trophozoit muda:
a. Bentuk cincin (1/3 dari sel darah merah)
b. Pembesaran sel darah merah
c. Stippling Schuffner yang berbeda

Trophozoit matang:
a. Bentuk amoeboid
b. Pembesaran sel darah merah
c. Stippling Schuffner yang berbeda.

Beberapa infeksi:
a. Lebih dari 1 parasit dalam sel darah merah
b. Tahap trophozoit
c. Pembesaran sel darah merah
d. Schuffner stippling yang berbeda

Tahap skizon muda:


a. Inti dibagi menjadi 2-8
b. Pembesaran sel darah merah
c. Schuffner stippling yang berbeda

44
Tahap skizon matang:
a. Jumlah merozoit: 12-24
b. Pigmen coklat keemasan.
c. Pembesaran RBC
d. Stippling Schuffner yang berbeda

Tahap gametocyte:
Macrogametocyte
a. Kecil, merah, inti kompak
b. Pigmen tersebar
c. Sitoplasma biru

Microgametocyte
a. Besar, pucat, inti menyebar
b. Pigmen tersebar
c. Sitoplasma biru pucat
d. Scuffner stippling yang berbeda

Plasmodium vivax
Film darah tebal dengan pewarna Giemsa

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Tahap trophozoite dengan satu inti


a. Kompak atau amoeboid sitoplasma
b. Schuffner stippling sebagai zona
kemerahan di sekitar parasit.

RBC normal:
a. Segaris RBC
b. Inti dari leukosit, netrophil, dan limfosit
terlihat pada film
c. Trombosit

45
Tahapan trofozoit dan skizon:
Penampilan tidak seragam
Beberapa tahapan P. vivax terlihat pada film.
a. Trofozoit muda: massa kompak nukleus
dan sitoplasma
b. Trofozoit matang: massa kompak nukleus
dengan sitoplasma amoeboid
c. Skizon muda: inti dibagi
d. Pertumbuhan skizon: 12-24 nuklei
e. Schuffner stippling sebagai zona redish
sekitar parasit

Skizon matang dan gametocyte:


a. Skizon matang: 12-24 inti (merozoit)
b. Pigmen malaria
c. Schuffner stippling yang dipandang sebagai
zona redish sekitar parasit
d. Microgametocyte: bentuk bulat, inti
kompak merah, pigmen tersebar
e. Macrogametocyte: bentuk bulat, inti
menyebar merah, pigmen tersebar

Plasmodium falciparum
Film darah tipis dengan pewarna Giemsa

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Tahap trofozoit muda;


Tahap sering ditemukan
a. Ukuran normal sel darah merah
b. Berbentuk cincin yang halus
c. Sitoplasma: cincin kecil biru pucat halus
d. Kromatin: 1 atau 2 titik merah kecil
e. Beberapa infeksi: lebih dari 1 parasit dalam
1 RBC

46
f. Maurer yang terpecah
g. Bentuk Accole: mungkin tampak tergeletak
di luar sel

Skizon muda (sangat jarang dalam film darah


kecuali pada infeksi berat)
a. Ukuran normal sel darah merah
b. Terbagi inti (2-6)
c. Pigmen gelap coklat-hitam

Skizon matang:
a. Parasit mengisi 2/3 RBC
b. Merozoit: 18-32
c. Pigmen gelap coklat-hitam

Gametocyte;
Cukup sering ditemukan.
Macrogametocyte
a. Normal ukuran RBC
b. Bentuk pisang atau sabit
c. Massa merah muda kemerahan kompak
kecil inti
d. Sitoplasma biru padat
e. Beberapa pigmen butiran hitam di tengah
sitoplasma

Microgametocyte
a. Bentuk pisang atau sabit
b. Difusi kromatin
c. Sitoplasma biru pucat atau pink
d. Pigmen tersebar

47
Plasmodium falciparum
Film darah tebal dengan pewarna Giemsa

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Trofozoit muda;
a. Segaris sel darah merah
b. Rupa bentuk cincin halus
c. Bentuk koma
d. Bentuk tanda seru
e. Inti dari Ieucocytes

Gametocyte
Macrogametocyte
a. Bentuk pisang atau sabit
b. Massa merah muda kemerahan kompak
inti kecil
c. Sitoplasma biru padat
d. Beberapa pigmen butiran hitam di sekitar
inti

Micrcgametocyte
a. Bentuk pisang atau sabit
b. Difusi kromatin
c. Sitoplasma biru muda atau pink
d. Pigmen tersebar
e. Inti dari Ieucocyte

48
Plasmodium malariae
Film darah tipis dengan pewarna Giemsa

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Trofozoit muda;
a. Normal ukuran RBC
b. Cytoplasm: tebal, padat, cincin biru dengan
beberapa butiran pigmen hitam
c. Kromatin: 1 titik merah besar

Trofozoit matang:
a. Sitoplasma: baik (1) bulat, kompak, biru
tua, dengan partikel hitam banyak pigmen,
atau (2) dalam bentuk band (dalam film
tipis saja)
b. Kromatin: titik bulat atau pita merah

Skizon muda:
a. Normal ukuran RBC
b. Terbagi inti: 2-6
c. Pigmen butiran

Skizon matang:
a. Parasit di RBC
b. Merozoit: 8-12, masing-masing tempat
merah besar enclsed dengan sitoplasma
pucat, 8 spot dapat disusun beraturan
(bentuk muda) atau dalam rosette.
c. Pigmen selalu terlihat

Gametocyte (cukup sering ditemukan)


Microgametocyte:
a. Bentuk besar, oval atau bulat
b. Sitoplasma berwarna biru muda atau
merah muda
c. Titik kromatin berdifusi

49
d. Butiran pigmen hitam besar dalam
sitoplasma

Macrogametocyte:
a. Bentuk besar, oval atau bulat
b. Sitoplasma biru padat
c. Satu putaran spot kromatin merah
melawan salah satu ujung
d. Butiran pigmen hitam besar dalam
sitoplasma

Plasmodium malariae
Film darah tebal dengan pewarna Giemsa

Gambar
Karakteristik
Perbesaran (10 x 100)

Trophozoites muda dan dewasa:


a. Segaris RBC
b. Inti dari leukosit
c. Besar titik merah kromatin
d. Tebal, padat, sitoplasma cincin biru

Skizon
Skizon muda:
a. Terbagi inti : 2-6
b. Pigmen Kasar

Skizon matang:
a. 8-12 merozoit
b. Kasar pigmen di pusat
c. Inti dari leucocyte

50
Gametocyte
Macrogametocyte:
a. Kecil inti kompak
b. Sitoplasma biru

Microgametocyte:
a. Difusi titik kromatin
b. Sitoplasma berwarna biru pucat atau
merah muda

51
PEMBUATAN FILM DARAH UNTUK
MENDIAGNOSA INFEKSI MALARIA

Tujuan:
Dalam rangka untuk mendiagnosis infeksi malaria, siswa diharapkan dapat mempersiapkan
film darah tebal dan tipis, pewarnaan dengan Giemsa stain, dan juga harus mampu untuk memeriksa
dan mengidentifikasi spesies Plasmodium dalam film darah.

GIO:
Memahami dan mampu mendiagnosa infeksi malaria dengan pemeriksaan mikroskopis dari
sampel darah.

SIO
1. Memahami dan mampu mempersiapkan film darah tebal dan tipis.
2. Memahami dan mampu mempersiapkan pewarnaan dengan pewarna Giemsa.
3. Mampu mendiagnosa infeksi malaria berdasarkan film darah tebal dan tipis.

Praktikum
1. Pembuatan film darah tebal dan tipis
2. Pewarnaan film darah tebal dan tipis dengan pewarna Giemsa
3. Meneliti film darah tebal dan tipis di mikroskop dan mengidentifikasi spesies Plasmodium

PEMBUATAN FILM DARAH

Dua jenis film darah dipersiapkan untuk diagnosis infeksi parasit darah, film tipis dan film
tebal. Dalam film tipis, darah tersebar di slide dalam lapisan tipis dan sel-sel darah merah yang utuh
setelah pewarnaan. Dalam film tebal, darah terkonsentrasi di daerah kecil dan beberapa lapisan sel
yang dalam. Selama pewarnaan, sel-sel merah yang segaris, dan hanya sel darah putih, trombosit,
dan parasit (jika ada) akan terlihat. Film tebal lebih disukai untuk diagnosis karena berisi 16 sampai
30 kali lebih banyak darah per bidang mikroskopik seperti halnya film tipis, sehingga meningkatkan
kemungkinan mendeteksi infeksi ringan. Dalam dipersiapkan dengan baik film tebal, sekitar jumlah
yang sama darah dapat diperiksa dalam lima menit dengan lensa minyak imersi, dibandingkan
dengan 30 menit untuk film tipis.

52
Spesies parasit biasanya dapat ditentukan dari film tebal oleh pemeriksa berpengalaman.
Namun, karena karakteristik morfologi, terutama yang dari parasit malaria, lebih khas dalam film
tipis, persiapan ini diperlukan untuk identifikasi spesies positif dalam beberapa kasus. Oleh karena
itu, untuk pemeriksaan rutin, kedua film tebal dan tipis harus disiapkan.
Film-film darah dapat dipersiapkan pada slide terpisah, tapi slide kombinasi, dengan lapisan
tipis pada satu ujung dan film tebal di sisi lain, sering digunakan. Karena film tebal harus benar-benar
kering sebelum dapat diwarnai, sebuah film tipis dapat disiapkan untuk pemeriksaan langsung, dan
sebuah film kombinasi tebal dan tipis untuk pemeriksaan yang lebih lengkap dan handal kemudian.
Film tebal membutuhkan beberapa jam (delapan atau lebih) benar-benar kering karena
mereka tidak benar kecuali noda benar-benar kering. Slide tidak harus dipanaskan karena ini
menyebabkan fiksasi sel darah merah. Ketika sebuah diagnosis cepat diperlukan, film tebal yang
sedikit lebih tipis dari yang direkomendasikan dapat dibuat, dan diwarnai setelah satu jam.
Darah kehilangan afinitas untuk noda setelah sekitar tiga hari, karena itu untuk hasil terbaik,
film darah harus ternoda dalam 72 jam setelah persiapan, dan sebaiknya dalam waktu 24 jam. Film
tipis biru tua akan bernoda, dan organisme akan diferensiasi buruk.Film tebal lama tidak akan
dehemoglobinize benar, menyebabkan penghapusan lengkap hemoglobin dan, seperti film tipis, juga
akan diwarnai biru, membuat diagnosis sulit.
Sampel darah untuk persiapan film tebal dan tipis dapat diperoleh dengan jari tongkat, tusuk
telinga lobus, atau venipuncture. Jika diperoleh dengan venipuncture, penurunan pertama darah
(anti-koagulan gratis) dari jarum digunakan untuk mempersiapkan film.Film, terutama untuk
diagnosis malaria, tidak boleh dibuat dari darah atau antikoagulan bergumpal. Antikoagulan
menyebabkan distorsi organisme dan mengganggu pewarnaan, khususnya tahapan malaria lebih tua
yang mungkin noda palely dan muncul merosot.

Koleksi spesimen

Parasite Spesimen Pewarnaan Cairan Fixatif Waktu

Plasmodium sp. Film darah tebal Pewarna - ± 24 jam


dan tipis Giemsa
Film tipis: + methyl ± 1 minggu
alcohol dan keringkan

Film tebal: hemolisis +


methyl alcohol dan ± 1 minggu
keringkan

53
Pembuatan Film Darah Tipis dan Tebal dan Pewarnaan dengan Pewarna Giemsa

Mempersiapkan film tipis


1. Tempatkan setetes darah di salah satu ujung slide bersih
2. Menyebar dengan cara biasa dengan slide kedua yang diselenggarakan pada sudut (30°)
3. Kriteria: sel darah single layer merah di sekitar tepi dan ujung terminal, yang harus dibulatkan
dan bulu

Mempersiapkan film tebal


1. Tempatkan dekat salah satu ujung slide jika membuat film kombinasi.
2. Siapkan baik dalam dua cara:
a. Sentuh bawah permukaan slide untuk drop darah dan memutar kontak dengan darah.
b. Tempat tiga atau empat tetes darah erat dan "genangan" dengan sudut lain slide, sebuah
tongkat aplikator, atau tusuk gigi untuk membentuk film tebal.
3. Keringkan dalam posisi horizontal, jika miring, darah akan mengumpulkan di satu sisi dan akan
mengelupas saat kering.
4. Hindari panas, seperti inkubator, untuk pengeringan, biarkan mengering pada suhu
kamar. Panas akan menyebabkan fiksasi darah dan mengganggu dehemoglobinization.
5. Kriteria:
a. Ukuran: 1 sampai 1,5 cm
b. Kepadatan sehingga baik cetak hanya dapat dibaca melalui bagian tengah ketika
basah. Jika terlalu tebal, darah akan retak dan terkelupas saat kering. Jika terlalu tipis,
keuntungan dari film tebal hilang.
c. Tebal pusat dengan tepi luar tipis

Kriteria untuk film kedua tipis dan tebal berlaku terlepas dari apakah film adalah pada slide terpisah
atau dalam kombinasi.

54
Teknik pembuatan film darah tipis dan tebal:
A-D : Aapusan darah tipis.
A : Satu tetes darah di sisi slide
B : Spreader (kaca slide lain) dengan sudut 30-45 ° dekat darah
C : Membuat film tipis
D : Apusan darah tipis.

E-F : film darah tebal.


E : Empat tetes darah
F : Film darah tebal terbuat dari 4 tetes darah.
GH : Tebal dan tipis film darah dalam satu slide.

55
Pewarnaan dari Film Tipis dan Tebal dengan Pewarna Giemsa

Bahan:
a. Kering film darah tebal dan tipis
b. Buffer solusi untuk hemolyse sel darah merah
c. Metil alkohol absolut untuk fiksasi sel darah merah
d. Larutan pewarna Giemsa 1: 20-50 dilusi saham Giemsa
e. Aquadest atau air keran

Teknik untuk Film Darah Tipis


a. Perbaiki film di metil alkohol absolut selama 30 detik. Hal ini dapat dilakukan dengan
menjatuhkan alkohol ke smear dengan slide secara vertikal atau miring atau dengan
mencelupkan smear secara singkat dalam botol atau gelas coplin alkohol.
b. Biarkan kering pada suhu kamar
c. Stain dalam pengenceran 1:20 dari Giemsa selama 30 menit. Tambahkan 1 ml saham Giemsa
stain dengan 20 ml air buffered netral. ATAU Stain dalam pengenceran 1:50 dari Giemsa
selama 50 menit. Tambahkan 1 ml saham Giemsa stain dengan 50 ml air buffered netral.
d. Cuci sebentar dengan mencelupkan slide dalam dan keluar dari botol atau gelas air buffered
netral.
e. Biarkan kering dalam posisi vertikal.
f. Meneliti apus darah tipis di bawah lensa minyak imersi pada mikroskop dengan lensa objektif
100x

Teknik untuk Film Darah Tebal


a. Memungkinkan film untuk benar-benar kering selama beberapa jam atau semalam. Sebuah
kipas dapat digunakan untuk mempercepat pengeringan.
b. Jangan memperbaiki.
c. Warnai dengan pengenceran 1: 20 atau 1:50 Giemsa dari dalam botol Coplin selama 20 atau
50 menit.
d. Cuci dengan menempatkan dalam air buffered selama 3 sampai 5 menit
e. Biarkan kering dalam posisi vertikal
f. Periksa film darah tebal di bawah lensa minyak imersi pada mikroskop dengan lensa objektif
100x

56
Film darah tipis Film darah tebal
Species of Plasmodium
Ring Troph Schi Gam Ring Troph Schi Gam

Plasmodium vivax

Plasmodium falciparum

Plasmodium malariae

Plasmodium ovale

57
II. Cacing Tambang
Necator americanus dan Ancylostoma duodenale

Tujuan:
Dalam rangka untuk mendiagnosis infeksi cacing tambang, siswa harus dapat mengetahui
perbedaan antara Necator americanus & Ancylostoma duodenale dewasa dan larva.

GIO:
1. Untuk memahami aspek morfologis dari Nematoda telur, larva dan dewasa yang
menyebabkan anemia (Necator americanus & Ancylostoma duodenale)
2. Untuk mendiagnosa infeksi cacing tambang pada manusia

SIO
1. Para siswa harus dapat menjelaskan bentuk dan ukuran telur cacing tambang itu.
2. Para siswa harus dapat menjelaskan karakteristik larva cacing tambang filariform.
3. Para siswa harus dapat menjelaskan karakteristik N.americanus dewasa dan A.duodenale
4. Para siswa harus dapat mendiagnosis infeksi cacing tambang dengan pemeriksaan feses
langsung dan tidak langsung.
5. Para siswa harus mampu melakukan budidaya feses untuk diagnosis larva cacing tambang.

Praktikum
Memahami:
1. Telur, larva filariform, bursa copulatrix dari buccalis kapsula pria dan wanita dari N.americanus
2. Telur, larva filariform, bursa copulatrix dari buccalis kapsula pria dan wanita dari A.duodenale.
3. Membuat budidaya kotoran: Harada Mori metode (demonstrasi)

HARADA MORI metode budidaya:


Untuk identifikasi larva cacing tambang menetas di filariform budidaya.

Bahan:
1. Bambu batang / spatula
2. Kantong plastik / tabung: 15x20 cm
3. Aquadest 5 cc

58
4. Filter kertas: 3x15 cm

Metode:
1. Menggunakan tongkat bambu menyebar sejumlah kecil spesimen feses sepanjang strip dari
kertas saring (meninggalkan 4-5 cm terakhir bersih untuk dimasukkan ke air).
2. Masukkan strip dari kertas saring ke dalam kantong plastik containg aquadest 2,5-3 cm.
3. Catat nama pasien dan tanggal budidaya.
4. Jauhkan kantong plastik selama 5-7 hari pada suhu kamar dan tergantung di rak.
5. Periksa larva di dasar kantong plastik (memotong ujung kantong plastik, masukkan air yang
mengandung larva pada tabung)
6. Menggunakan solusi soludine untuk membedakan larva filariform dari cacing tambang.

Perbesaran 10 x 10
1. Telur Cacing tambang
Ukuran: 60x40 mm
Bentuk: oval
Kulit: sangat tipis, bening, lapisan 1
muncul sebagai garis hitam
Isi: bervariasi sesuai tingkat
kematangan (biasanya 4-8 abu-abu
sel granular)

Perbesaran 10 x 10
2. Filariform larva cacing tambang
Ukuran: 600 mm
Bentuk: memanjang cylindris
Esofagus: 1/3 dari panjang tubuh
Mulut: ditutup
Tail: menunjuk

Perbesaran 10 x 10
3. N.americanus cacing dewasa
Makroskopik: ukuran 1 cm
Bentuk: kecil, cylindris, kurva kepala
Berlawanan dengan lengkungan

59
tubuh (seperti bentuk S)
Jantan: posterior berakhir dengan
bursa Copulatrix
Betina: ekor runcing

Perbesaran 10 x 10
4. N.americanus (bagian mulut)
1 pasang pelat pemotongan
semilunar

Perbesaran 10 x 10
5. N.americanus (bursa copulatrix)
Panjang, lebar dan bulat
Sirip punggung kecil, bipartited

Perbesaran 10 x 10
6. A.duodenaIe cacing dewasa
Makroskopik: ukuran 0,8-1 cm
Bentuk: kecil, cylindris, kurva kepala
Dalam arah yang sama dengan
lengkungan tubuh (seperti bentuk C)
Jantan: posterior berakhir dengan
bursa copulatrix
Betina: ekor runcing

Perbesaran 10 x 10
7. A.duodenaIe (bagian mulut)
Dua pasang gigi ventral melengkung
Hampir ukuran yang sama, pasangan
batin yang belum sempurna

Perbesaran 10 x 10
8. A.duodenale (bursa copulatrix)
Lebih luas dari panjang
Tripartit punggung sinar

60
LAMPIRAN

61
62
63
64
65
Siklus Hidup dari Cacing Tambang
(Ancylostoma Duodenale dan Necator americanus)

66
Telur Cacing Tambang

Filariform larva dari Necator Amricanus

67
Kapsula bucalis dari Necator Americanus

Bursa kopulatrix dari Necator Americanus

68
Kapsula Buccalis dan bursa Kopulatrix dari N. Americanus

Kapsula buccalis dari Ancylostoma duodenale

69
Bursa Kopulatrix dari Ancylostoma duodenale

Kapsula Buccalis dan bursa kopulatrix dari Ancylostoma duodenale

70
MIKROBIOLOGI

UJI HEMAGLUTINASI INHIBISI


DAN DENGUE BLOT

Tujuan
Untuk menentukan adanya infeksi virus dengue pada suspect pasien klinis

Latar Belakang:
Test untuk mengukur antibodi seperti hemaglutinasi inhibisi (HI), fiksasi komplemen (CF),
dan tes netralisasi mengeksploitasi tanda-tanda biologis virus dengue. Ada tes yang dapat
diandalkan untuk mengukur antibodi, tetapi mereka tidak membedakan IgM dari IgG. Untuk alasan
ini tes ini biasanya membutuhkan contoh pasangan (akut dan konvalesen) untuk membuat
diagnosis. Teknik serologi yang lebih baru seperti ELISA, antibodi fluorescent dan tes dot blot telah
dikembangkan untuk mengukur antibodi kelas individual.
Uji HI telah menjadi uji standar Organisasi Kesehatan Dunia untuk konfirmasi dan klasifikasi
serologi infeksi dengue. Pengujian tergantung pada kemampuan antibodi untuk menghambat virus
gIycoprotein tergantung aglutinasi dari goose atau manusia sel darah merah tipe O. Spesimen serum
untuk pengujian harus diperlakukan untuk menghapus inhibitor aglutinasi non-spesifik dengan
aseton atau ekstraksi kaolin diikuti oleh adsorpsi sel darah merah. Titik akhir titrasi adalah
pengenceran tertinggi serum yang menghambat aglutinasi dari jumlah standar antigen. Empat kali
lipat perubahan atau lebih titer serum HI dipasangkan dianggap diagnostik untuk infeksi baru.
Interpretasi tes HI didasarkan pada titer dan waktu setelah timbulnya gejala. Pada infeksi
primer, terdeteksi antibodi HI yang umumnya muncul setelah hari kelima dan naik perlahan-lahan
selama beberapa minggu, titer umumnya tidak melebihi 1/640. Dalam kasus infeksi sekunder atau
tersier, ada respon anamnestic, yang menghasilkan peningkatan cepat titer dalam onset beberapa
hari. Titer 1/2560 to 1/20480 sering dicapai dalam sampel sembuh dan dapat bertahan selama
beberapa minggu.
Dengue Blot (dot blot) tes, tes yang tidak memerlukan peralatan yang diperlukan untuk tes
serologi konvensional, sederhana dan cepat. Keterbatasan tes ini, bagaimanapun, adalah bahwa
mereka tidak berguna untuk menguji sejumlah besar sampel, karena individu strip kertas atau
membran harus ditangani untuk setiap serum yang diuji. Selain itu tes ini mahal. Keuntungan dari tes

71
ini adalah bahwa mereka dapat digunakan untuk membedakan IgG dari IgM dan untuk mengukur
titer antibodi IgG secara semi kuantitatif.
Tes dot blot spesifik untuk anti dengue IgM memiliki model setelah IgM menangkap ELISA
untuk menghindari efek yang mengganggu dari antibodi IgG dari infeksi sebelumnya. Ini bisa dicapai
dengan menggunakan membran nitroselulosa dilapisi dengan anti-human antibodi IgM.
Sebuah dot blot tes untuk antibodi IgG memiliki potensi untuk menggantikan tes serologi
yang lebih rumit seperti HI dan tes ELISA IgG. Masalah dengan jenis tes adalah sifat subjektif dari
kuantifikasinya, karena memerlukan penilaian visual intensitas warna. Pada pengenceran 1: 1000 tes
ini tidak cukup sensitif untuk mendeteksi titer antibodi IgG yang rendah dari infeksi sebelumnya,
sampel serum tunggal sehingga cukup untuk identifikasi infeksi baru.

PERALATAN DAN BAHAN


Uji hemaglutinasi inhibisi:
96-well microtiter plate
Mikropipet
Inkubator
Kaolin
Serum
Dengue antigen
Goose eritrosit

Dengue Blot:
Plate
Kertas pengering
Membran dengan dot-blotted antigen dengue
Konjugasi
Substrat
Aquades
Buffer pembersih
Buffer pengencer

72
PROSEDUR:
Uji hemaglutinasi inhibisi:
1. Ekstrak sampel serum dengan kaolin untuk menghilangkan inhibitor non-specitic
2. Absorbsi sampel dengan goose eritrosit untuk menghilangkan agglutinin
3. Membuat pengenceran dua kali lipat dari sampel mulai dari pengenceran 1/10 sampai
1/10240
4. Memasukan sampel yang diencerkan pada well nos. 1 - 11. Well no. 12 diisi dengan serum
yang diencerkan 1: 1 dan berfungsi sebagai kontrol
5. Tambahkan 25 ul (4 unit) dari antigen dengue untuk setiap well. Inkubasi pada 4°C semalam.
6. Pada hari berikutnya menambahkan 25 ul goose eritrosit tersuspensi pada VAD (pH
6.2). Inkubasi piring pada 36 ° C selama 45 menit.
7. Hasil positif akan menunjukkan eritrosit utuh terakumulasi di bagian bawah wells

Dengue blot:
1. Membersihkan buffer persiapan : 10 ml dengan 20 x konsentrasi buffer pembersih + 190 ml
aquadest (dapat disimpan untuk seminggu)
2. Buffer penyangga : 20 ml buffer pembersih + 1 gram susu skimmed tanpa lemak. Aduk rata
(harus yang baru saja dibuat)
3. Persiapan sampel: 5 ul buffer serum + 500 ul buffer pengencer
4. Masukan membran ke dalam well
5. Isi well dengan 450 ul buffer pengencer
6. Tambahkan 50 ul sampel yang diencerkan, tutup plate dengan kertas, dan simpan pada suhu
kamar selama 60 menit
7. Mengambil cairan dari well, mencuci membran dengan buffer pembersih 3 kali (3 menit setiap
kali)
8. Persiapan conjugate: 6 ul konjugat + 3 ml bufer pengencer
9. Isi well dengan 250 ul konjugat, inkubasi pada suhu kamar selama 60 menit
10. Mengambil cairan dari well, mencuci membran dengan buffer pembersih seperti dijelaskan di
atas
11. Persiapan substrat: 1,5 ml substrat A + 1,5 ml substrat B (persiapkan sebelum digunakan)
12. Tambahkan 250 ul larutan substrat ke dalam well
13. Menutupi plate, simpan pada suhu kamar selama 30 menit
14. Mengambil cairan dan menambahkan aquades ke dalam well
15. Periksa pengembangan titik berwarna pada membran

73
PATOLOGI ANATOMI

LIMFOID LESI

1. LYMPHOMA NON HODGKlN (JENIS DIFUSI)


Informasi klinis:
Seorang pria berusia 70 tahun dengan massa yang padat, besar, tanpa rasa sakit, dan
beberapa lobulated di leher, axilla dan inguinal, sejak 6 bulan yang lalu. Lesi melekat pada jaringan
sekitarnya. Dia merasa lemah dan pucat. Biopsi dilakukan dan spesimen dikirim ke Departemen
Patologi.
Pemeriksaan makroskopik:
Sebuah jaringan yang solid dan berkapsul, diameter 3 cm, berwarna putih kecoklatan.
Gambaran mikroskopis:
Spesimen terdiri dari menyebar, dua jenis sel besar. Sel-sel besar yang sampai empat sampai
lima kali ukuran limfosit normal. Sel-sel memiliki inti dibelah dan non-dibelah, dengan nukleolus
menonjol dan sitoplasma cukup melimpah.
Bagian dari sel, ada beberapa sel varian immunoblastic. Sel-sel memiliki inti vesikuler bulat
atau multilobulated besar dengan satu atau dua nukleolus menonjol tengah.Sitoplasma adalah
sangat bernoda atau jelas. Sejumlah mitosis rese ditemukan.

Hasil pewarnaan imunohistokimia:


LCA pewarnaan: positif
CD20 pewarnaan: positif
CD 3 pewarnaan: Negatif
Perbesaran Lemah Perbesaran Kuat

74
LYMPHOMA HODGKIN (JENIS CAMPURAN-CELLULARITY)

Informasi Klinis:
Seorang pria berusia 50 tahun dengan massa yang besar dan padat, tanpa rasa sakit, dan
beberapa lobulated, di leher, ketiak dan inguinal. Lesi yang melekat pada jaringan sekitarnya. Dia
juga menderita demam dan hepatomegali. Biopsi dilakukan dan spesimen dikirim ke Departemen
Patologi.

Pemeriksaan makroskopik:
Sebuah jaringan yang solid dan berkapsul, diameter 8 cm, putih kecoklatan.

Gambaran mikroskopis:
Spesimen terdiri dari banyak sel Reed-Sternberg yang cukup merata di massa sel neoplastik
limfositik dengan eosinofil dewasa menonjol, histiosit dan sel plasma. Reed-Sternberg sel adalah sel
besar dengan berlimpah, sitoplasma biasanya sedikit eosinophylic dan memiliki inti multilobate atau
berinti banyak dengan besar, bulat, nukleolus menonjol. Khususnya karakteristik dua cermin citra
inti, masing-masing berisi besar (inklusi-suka) acidophilic nucleolus dikelilingi oleh zona bening
khas. Bersama-sama mereka memberikan penampilan mata Owi itu. Membran nuklir
berbeda. Sejumlah mitosis ditemukan di tumor ini. Nekrosis fokal mungkin ada, tetapi fibrosis harus
minimal atau tidak ada.

Perbesaran Lemah Perbesaran Kuat

75
MIKOSIS FUNGOIDES

Informasi klinis:
Seorang pria berusia 60 tahun menderita plak besar dan kulit eritematosa umum bersisik lesi
sejak setahun lalu. Sebuah biopsi exicisional dilakukan oleh dokter.

Pemeriksaan makroskopik:
Sebuah jaringan kulit 2x1x0, 5 cm diterima, berwarna coklat dengan sebuah plakat coklat di
tengah kulit dieksisi berbentuk elips.

Gambaran mikroskopis:
Jaringan kulit yang disusupi oleh sel T neoplastik pada epidermis dan dermis. Sel-selnya
menyerang pada epidermis membentuk microabscess Pautrier, atau bahkan lebih sering, untuk
berbaris secara individu sepanjang lapisan basal epidermis.
Sel T memiliki limfosit berukuran kecil atau sedang dengan inti cerebroid, ditandai dengan
kontur yang tidak teratur dari membran tebal. Sejumlah mitosis dapat ditemukan.

Hasil pewarnaan imunohistokimia:


LCA pewarnaan: positif
CD 3 pewarnaan: positif
CD 20 pewarnaan: Negatif
CD 4 pewarnaan: positif

Perbesaran Lemah Perbesaran Kuat

76
LIMFADENITIS KRONIS TIDAK SPESIFIK

Informasi klinis:
Seorang wanita berusia 24 tahun dengan lymphadenopaty leher, 1 cm diameter, mobile,
sejak 2 pekan lalu.

Pemeriksaan makroskopik:
Sebuah firm jaringan, berkapsul, diameter 1 cm, berwarna putih kecoklatan.

Gambaran mikroskopis:
Spesimen ini terdiri dari jaringan limfoid dengan hiperplasia folikel, keunggulan venula
postcapillary, peningkatan jumlah immunoblasts, sel plasma, dan hystiocytes, dan fibrosis.Kapsul
dapat muncul meradang dan atau fibrotic, dan proses ini dapat memperpanjang ke dalam jaringan
perinocial.
Arsitektur kelenjar getah bening yang diawetkan, dengan jaringan limfoid normal antara
pusat-pusat germinal folikel. Nodul limfoid memiliki varian dalam bentuk dan ukuran. Di pusat
germinal, ada populasi campuran limfosit dalam berbagai tahap transformasi "ledakan", dan
aktivitas fagositik menonjol.

Perbesaran Lemah Perbesaran Kuat

77
METASTASIS KARSINOMA UNDIFFERENTIASI
BERDASARKAN KELENJAR GETAH BENING

Informasi klinis:
Seorang pria berusia 48 tahun dengan massa yang padat, berada leher. Pasien juga
menderita ketulian dan epistaksis. Foto scanning menunjukkan tumor difus nasopharinx
Biopsi lesi dilakukan oleh dokter.

Makroskopik:
Sebuah jaringan, padat dienkapsulasi diterima, diameter 2 cm, berwarna putih kecoklatan.

Gambaran mikroskopis:
Spesimen ini terdiri dari jaringan limfoid dengan sarang sel tumor epitel. Sel-sel yang atipikal
dan polimorfik, dengan inti spindel hyperchromatic atau inti vesikuler dengan nukleolus
menonjol. Banyak mitosis dapat ditemukan di tumor ini.

Perbesaran Lemah Perbesaran Kuat

78