Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

pengantar

Ultraviolet dan spektrometer terlihat telah digunakan umum untuk 35 tahun terakhir dan selama periode ini telah menjadi instrumen analitis yang paling penting di
laboratorium modern. Dalam banyak aplikasi teknik lain dapat digunakan tetapi tidak ada saingan UV-Visible spektrometri untuk kesederhanaan, fleksibilitas,
kecepatan, ketepatan dan efektivitas biaya.

Deskripsi ini menguraikan prinsip-prinsip dasar bagi mereka yang baru untuk spektrometri UV-Visible. Hal ini dimaksudkan murni sebagai pengantar singkat untuk teknik dan
itu adalah kebijakan Thermo Spectronic untuk terus menambah ini berbagai dokumentasi untuk rincian lebih lanjut, yang telah tersedia.

Definisi dan Unit

Radiasi adalah bentuk energi dan kami terus-menerus mengingatkan kehadirannya melalui rasa kita penglihatan dan kemampuan untuk merasakan panas radiasi. Ini dapat
dianggap dalam hal gerakan gelombang di mana panjang gelombang, λ, adalah jarak antara dua puncak berturut-turut. Frekuensi, ν, adalah jumlah puncak melewati suatu titik
tertentu per detik. Istilah ini terkait sehingga:

c = νλ

di mana c adalah kecepatan cahaya dalam ruang hampa.

Gambar 1 Panjang gelombang λ radiasi elektromagnetik

Penuh spektrum radiasi elektromagnetik kontinu dan masing-masing daerah menyatu perlahan ke berikutnya. Untuk tujuan spektroskopi, kita memilih untuk
mengkarakterisasi cahaya di daerah ultraviolet dan terlihat dalam hal panjang gelombang dinyatakan dalam nanometer. unit lain yang mungkin ditemui, tetapi yang
penggunaannya sekarang berkecil hati, adalah Angstrom (Å) dan millimicron (m μ).

1nm = 1m μ = 10A = 10- 9 meter

Halaman 1 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Untuk kemudahan referensi, definisi dari berbagai daerah spektral telah ditetapkan oleh Komite Bersama Nomenklatur di Applied Spectroscopy:

Wilayah Panjang gelombang (nm)

ultraviolet jauh 10-200

dekat ultraviolet 200-380

Terlihat 380-780

Dekat inframerah 780-3000

Tengah inframerah 3000-30,000

jauh inframerah 30,000-300,000

microwave 300,000-1,000,000,000

Mata manusia hanya peka terhadap sebagian kecil dari total spektrum elektromagnetik antara sekitar 380 dan 780 nm dan dalam daerah ini kita melihat warna
pelangi dari ungu sampai merah. Jika spektrum elektromagnetik penuh yang ditunjukkan pada Gambar 2 telah digambar ulang pada skala linear dan daerah
tampak diwakili oleh panjang satu sentimeter, maka batas antara radio dan gelombang mikro harus ditarik sekitar 25 kilometer jauhnya!

Gambar 2 elektromagnetik spektrum

Sumber radiasi

Selain matahari, sumber yang paling nyaman tersedia radiasi terlihat dengan yang kita kenal adalah lampu tungsten. Jika arus dalam rangkaian memasok seperti lampu
secara bertahap meningkat dari nol, filamen lampu pada awalnya dapat dirasakan untuk memancarkan kehangatan, kemudian bersinar merah kusam dan secara bertahap
mencerahkan sampai itu memancarkan cahaya putih intens dan cukup banyak panas.

Halaman 2 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Radiasi dari padatan panas normal terdiri dari banyak panjang gelombang dan energi yang dipancarkan pada setiap panjang gelombang tertentu tergantung pada suhu padat dan
diprediksi dari teori probabilitas. Kurva pada Gambar 3 menunjukkan distribusi energi untuk filamen tungsten pada tiga temperatur yang berbeda. radiasi tersebut dikenal sebagai
'radiasi benda hitam'. Perhatikan bagaimana kenaikan energi yang dipancarkan dengan suhu dan bagaimana panjang gelombang pergeseran energi maksimum untuk panjang
gelombang yang lebih pendek. Baru-baru ini telah menjadi praktek umum untuk menggunakan varian dari ini - lampu tungsten-halogen. Amplop kuarsa mentransmisikan radiasi
baik ke daerah UV. Untuk daerah UV sendiri sumber yang paling umum adalah lampu deuterium dan UV spektrometer Terlihat biasanya akan memiliki kedua jenis lampu untuk
menutupi seluruh rentang panjang gelombang.

Gambar radiasi filamen 3 Tungsten

Teori kuantum

Untuk memperoleh pemahaman tentang asal-usul spektrometri serapan praktis, pengalihan singkat ke teori kuantum diperlukan. Untuk tujuan ini, yang terbaik adalah
untuk berpikir radiasi sebagai aliran partikel yang dikenal sebagai foton bukan gelombang dianggap sebelumnya. Atom dan molekul yang ada di sejumlah negara energi
ditentukan atau tingkat dan perubahan tingkat membutuhkan penyerapan atau emisi jumlah integral unit energi yang disebut kuantum, atau dalam konteks kita, foton.

Energi dari foton diserap atau dipancarkan selama transisi dari satu tingkat energi molekul yang lain diberikan oleh persamaan

e=hν

di mana h dikenal sebagai konstanta Planck dan ν adalah frekuensi foton. Kita telah melihat bahwa c = νλ .

Oleh karena itu, E = hc / λ

Halaman 3 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Dengan demikian, semakin pendek panjang gelombang, semakin besar energi foton dan sebaliknya.

Sebuah molekul dari zat apapun memiliki energi internal yang dapat dianggap sebagai jumlah dari energi elektron, energi getaran antara atom
penyusunnya dan energi yang terkait dengan rotasi molekul.

Tingkat energi elektronik molekul sederhana secara luas dipisahkan dan biasanya hanya penyerapan foton energi tinggi, yang merupakan salah satu dari panjang gelombang yang sangat
pendek, dapat merangsang molekul dari satu tingkat ke yang lain.

Gambar 4 tingkat Energi molekul

Dalam molekul kompleks tingkat energi yang lebih erat spasi dan foton dari dekat ultraviolet dan cahaya tampak dapat mempengaruhi transisi. Zat-zat ini, oleh karena
itu, akan menyerap cahaya di beberapa daerah ultraviolet dekat dan daerah terlihat.

Keadaan energi getaran dari berbagai bagian dari molekul lebih dekat bersama-sama daripada tingkat energi elektronik dan dengan demikian proton energi yang lebih rendah
(panjang gelombang) yang cukup untuk membawa perubahan getaran. penyerapan cahaya karena hanya untuk perubahan getaran terjadi di wilayah inframerah. Negara-negara
energi rotasi molekul sangat erat spasi bahwa cahaya di daerah inframerah jauh dan gelombang mikro dari spektrum elektromagnetik memiliki energi yang cukup untuk
menyebabkan perubahan-perubahan kecil.

Halaman 4 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Gambar 5 yang diidealkan spektrum penyerapan

Untuk panjang gelombang ultraviolet dan terlihat, yang harus diharapkan dari diskusi ini bahwa spektrum penyerapan molekul (yaitu, sebidang derajat penyerapan terhadap
panjang gelombang radiasi insiden) harus menunjukkan beberapa baris yang sangat tajam. Setiap baris harus terjadi pada panjang gelombang di mana energi dari foton insiden
sama persis dengan energi yang dibutuhkan untuk membangkitkan transisi elektronik.

Dalam prakteknya ditemukan bahwa spektrum ultraviolet dan terlihat paling molekul terdiri dari beberapa gundukan-gundukan daripada garis-garis tajam. gundukan-gundukan ini
menunjukkan dari molekul menyerap radiasi lebih sebuah band dari panjang gelombang. Salah satu alasan untuk band ini, daripada penyerapan line adalah bahwa transisi tingkat
elektronik biasanya disertai dengan perubahan simultan antara tingkat getaran lebih banyak. Dengan demikian, foton dengan energi terlalu banyak atau terlalu sedikit sedikit untuk dapat
diterima oleh molekul untuk transisi 'murni' elektronik dapat dimanfaatkan untuk transisi antara salah satu tingkat getaran yang berhubungan dengan keadaan elektronik yang lebih rendah
untuk salah satu tingkat getaran dari negara elektronik yang lebih tinggi.

Jika perbedaan energi elektronik 'E' dan perbedaan energi vibrasi adalah 'e', ​maka foton dengan energi dari E, E + e, E + 2e, Ee, E-2e, dll akan diserap.

Selanjutnya, masing-masing dari berbagai tingkatan getaran terkait dengan negara-negara elektronik juga memiliki sejumlah besar tingkat rotasi yang terkait dengan itu.
Dengan demikian transisi dapat terdiri dari komponen elektronik yang besar, elemen getaran yang lebih kecil dan perubahan rotasi yang lebih kecil. Kontribusi rotasi
untuk transisi memiliki efek mengisi kesenjangan dalam struktur halus getaran.

Selain itu, ketika molekul erat dikemas bersama-sama karena mereka biasanya dalam larutan, mereka mengerahkan pengaruh atas satu sama lain yang sedikit
mengganggu sudah banyak, dan hampir tak terbatas tingkat energi dan mengaburkan garis spektrum yang tajam ke dalam band. Efek ini dapat dilihat pada spektrum
benzena sebagai uap dan dalam larutan. Dalam uap, transisi antara tingkat getaran yang terlihat sebagai band ditumpangkan pada band transisi elektronik utama.

Dalam solusi mereka bergabung bersama-sama dan pada suhu tinggi atau tekanan bahkan band elektronik dapat mengaburkan untuk menghasilkan pita lebar tunggal seperti yang tertutup oleh
garis putus-putus pada Gambar 6.

Halaman 5 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Gambar 6 uap dan solusi spektrum Benzene

General Chemical Origins

Ketika cahaya putih jatuh pada sampel, cahaya dapat benar-benar tercermin, dalam hal substansi muncul putih atau cahaya dapat benar-benar diserap, dalam
hal substansi akan tampak hitam. Namun, jika hanya sebagian cahaya yang diserap dan keseimbangan tercermin, warna sampel ditentukan oleh cahaya yang
dipantulkan. Jadi, jika violet yang diserap, sampel muncul kuning-hijau dan jika kuning diserap, sampel muncul biru. Warna-warna yang digambarkan sebagai
pelengkap. Namun, banyak zat yang muncul berwarna memiliki spektrum absorpsi. Dalam hal ini, penyerapan akan berlangsung di infra-merah atau ultraviolet
dan tidak di wilayah terlihat. Tabel 1 menggambarkan hubungan antara penyerapan cahaya dan warna.

Halaman 6 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Tabel 1 Hubungan antara penyerapan cahaya dan warna

warna diserap warna diamati radiasi yang diserap (nm)

Ungu Kuning hijau 400-435

Biru Kuning 435-480

Hijau biru Jeruk 480-490

Biru hijau Merah 490-500

hijau Ungu 500-560

Kuning hijau Ungu 560-580

Kuning Biru 580-595

Jeruk Hijau biru 595-605

Merah Biru hijau 605-750

Sebuah hubungan dekat ada antara warna substansi dan struktur elektronik. Sebuah molekul atau ion akan menunjukkan penyerapan di daerah tampak atau ultraviolet ketika
radiasi menyebabkan transisi elektronik dalam strukturnya. Dengan demikian, penyerapan cahaya oleh sampel di daerah ultraviolet atau terlihat disertai dengan perubahan
keadaan elektronik dari molekul dalam sampel. Energi yang diberikan oleh cahaya akan mempromosikan elektron dari orbital keadaan dasar mereka untuk energi yang lebih
tinggi, orbital keadaan tereksitasi atau orbital antibonding.

Berpotensi, tiga jenis orbital keadaan dasar mungkin terlibat:

saya) σ ( ikatan) molekul seperti dalam

ii) π ( ikatan) orbital molekul seperti dalam

Halaman 7 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

iii) n (non-ikatan) atom orbital seperti pada

Selain itu, dua jenis orbital anti mungkin terlibat dalam transisi:

saya) σ * ( Bintang sigma) orbital

ii) π * ( Bintang pi) orbital

(Tidak ada hal seperti n * orbital anti ikatan sebagai n elektron tidak membentuk ikatan).

Sebuah transisi di mana ikatan s elektron tereksitasi ke antibonding σ orbital disebut sebagai σ untuk σ * transisi. Di jalan yang sama π untuk π * merupakan transisi dari
satu elektron dari pasangan bebas (non-ikatan pasangan elektron) ke antibonding π orbital. Dengan demikian transisi elektronik berikut dapat terjadi dengan penyerapan
sinar ultraviolet dan terlihat:

σ untuk σ *,

n untuk σ *

n untuk π *

π untuk π *.

Gambar 7 mengilustrasikan pola umum tingkat energi dan fakta bahwa transisi yang dibawa oleh penyerapan jumlah energi yang berbeda.

Gambar 7 Energi dan transisi molekuler

Keduanya s untuk σ * dan n untuk σ * transisi memerlukan banyak energi dan karena itu terjadi di wilayah yang jauh ultraviolet atau lemah di 180-240nm wilayah. Akibatnya,
kelompok jenuh tidak menunjukkan penyerapan yang kuat di daerah ultraviolet biasa. Transisi dari n untuk π * dan π untuk π * ketik terjadi pada molekul dengan pusat-pusat tak
jenuh; mereka membutuhkan lebih sedikit energi dan terjadi pada lagi

Halaman 8 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

panjang gelombang dari transisi ke σ * orbital anti. Tabel 2 menggambarkan jenis transisi dan panjang gelombang maksimum yang dihasilkan.

Tabel 2 Contoh transisi dan mengakibatkan λ max

Ini akan terlihat saat bahwa panjang gelombang serapan maksimum dan intensitas serapan ditentukan oleh struktur molekul. transisi ke π * antibonding orbital
yang terjadi di wilayah ultraviolet untuk molekul tertentu mungkin terjadi di daerah tampak jika struktur molekul dimodifikasi. Banyak senyawa anorganik dalam
larutan juga menunjukkan penyerapan di wilayah terlihat. Ini termasuk garam dari unsur-unsur dengan lengkap kulit elektron dalam (terutama logam transisi)
yang ion dikomplekskan oleh hidrasi misalnya [Cu (H 2 0 4)] 2+. serapan tersebut berasal dari proses transfer biaya, di mana elektron yang dipindahkan dari satu
bagian dari sistem lain dengan energi yang disediakan oleh cahaya tampak.

Halaman 9 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Korelasi Struktur Molekul dan Spectra konjugasi

π untuk π * transisi, ketika terjadi dalam kelompok-kelompok yang terisolasi dalam suatu molekul, menimbulkan serapan intensitas yang cukup rendah. Namun, konjugasi kelompok tak
jenuh dalam molekul menghasilkan efek yang luar biasa pada spektrum penyerapan. Panjang gelombang serapan maksimum bergerak ke gelombang yang lebih panjang dan intensitas
serapan mungkin sering meningkat.

Gambar 8 Efek meningkatkan konjugasi pada spektrum serapan

Efek yang sama terjadi ketika kelompok yang berisi n elektron terkonjugasi dengan π Kelompok elektron; misalnya,

sistem aromatik, yang mengandung p elektron, menyerap kuat dalam ultraviolet:

Halaman 10 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Secara umum, semakin besar panjang sistem terkonjugasi dalam suatu molekul, semakin dekat λ max datang ke daerah tampak.

Dengan demikian, energi karakteristik transisi dan karenanya panjang gelombang serapan adalah milik sekelompok atom daripada elektron sendiri. Ketika
penyerapan tersebut terjadi, dua jenis kelompok dapat mempengaruhi spektrum penyerapan yang dihasilkan dari molekul: kromofor dan auxochromes.

kromofor

Sebuah kromofor (harfiah warna-bearing) kelompok adalah kelompok fungsional, tidak terkonjugasi dengan kelompok lain, yang menunjukkan spektrum penyerapan
karakteristik di ultraviolet atau daerah tampak. Beberapa kelompok kromoforik lebih penting adalah:

Jika salah satu kromofor sederhana terkonjugasi dengan yang lain (dari jenis yang sama atau jenis yang berbeda) kromofor beberapa terbentuk memiliki pita serapan
baru yang lebih intens dan pada panjang gelombang yang lebih panjang bahwa band yang kuat dari kromofor sederhana.

perpindahan ini dari maksimum penyerapan terhadap gelombang yang lebih panjang (yaitu dari biru menjadi merah) disebut pergeseran batokromik. Perpindahan dari
maksimum penyerapan dari merah ke ultraviolet disebut pergeseran hypsochromic.

Auxochromes

Warna molekul dapat diintensifkan oleh kelompok-kelompok yang disebut auxochromes yang umumnya tidak menyerap secara signifikan di wilayah 200800nm, tetapi
akan mempengaruhi spektrum kromofor yang terpasang. Kelompok auxochromic paling penting adalah OH, NH 2, CH 3 dan tidak 2 dan sifat mereka bersifat asam (fenolik)
atau dasar.

Efek sebenarnya dari auksokrom pada kromofor tergantung pada polaritas auksokrom, kelompok-kelompok misalnya seperti CH3-, CH 3 CH 2- dan Cl- memiliki efek yang
sangat sedikit, biasanya pergeseran merah kecil 5-10nm. kelompok lain seperti -NH 2 dan tidak 2 sangat populer dan benar-benar mengubah spektrum chromophores
seperti:

Halaman 11 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Secara umum itu harus mungkin untuk memprediksi efek auxochromes non-polar atau polar lemah, tetapi efek dari sangat auxochromes kutub sulit untuk
memprediksi. Selain itu, ketersediaan elektron non-ikatan yang dapat masuk ke dalam transisi juga memberikan kontribusi besar terhadap efek auksokrom.

Efek sterik

halangan sterik juga akan mempengaruhi pengaruh auksokrom pada kromofor. sistem elektron konjugasi terbaik ketika molekul planar dalam konfigurasi. Jika
kehadiran auksokrom mencegah molekul dari menjadi planar maka efek besar akan diperhatikan dalam spektrum; misalnya, m- dan p-metil kelompok di
diphenyls memiliki efek diprediksi tapi sedikit pada spektrum dibandingkan dengan difenil itu sendiri. Namun, kelompok metil di o-posisi mengubah spektrum
sepenuhnya.

Isomer cis dan trans dari poliena linier juga menunjukkan perbedaan dalam spektrum mereka. Isomer semua-trans memiliki sistem lama terkonjugasi. λ max adalah pada panjang gelombang yang
lebih panjang dan ε max ( absorptivitas molar atau koefisien kepunahan molar) lebih tinggi dari untuk semua cis atau campuran isomer.

terlihat Spectra

Secara umum senyawa akan menyerap di daerah tampak jika mengandung setidaknya lima kelompok kromoforik dan auxochromic terkonjugasi; misalnya,

Kemampuan untuk kompleks banyak logam, terutama unsur-unsur transisi, dengan molekul organik dan anorganik kompleks yang menyerap di daerah
tampak memberikan dasar untuk analisis spektrometri kuantitatif mereka. Penyerapan adalah karena gerakan elektron antara tingkat energi dari kompleks
organo-logam. Sistem pengompleksan ini disebut reagen spektrometri. Yang paling umum adalah dithizone, azo reagen (PAN, thoron, Zincon),
dithiocarbamate, 8- hydroxyquinoline, formaldoxime dan tiosianat. Selain itu, banyak ion anorganik dalam larutan juga menyerap di wilayah terlihat

misalnya garam dari Ni, Co, Cu, V dll dan terutama unsur-unsur dengan elektron dalam lengkap yang ion dikomplekskan oleh hidrasi misalnya (Cu (H 2 HAI) 4) 2+. serapan
tersebut berasal dari proses transfer biaya di mana elektron yang dipindahkan dari satu bagian dari sistem yang lain karena energi yang disediakan oleh cahaya tampak.

Halaman 12 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

pelarut

Efek pada spektrum penyerapan senyawa bila diencerkan dalam pelarut akan bervariasi tergantung pada struktur kimia yang terlibat. Secara umum, pelarut non-polar dan
molekul non-polar menunjukkan setidaknya efek. Namun, molekul polar menunjukkan perbedaan yang cukup dramatis ketika berinteraksi dengan pelarut polar. Interaksi
antara zat terlarut dan mengarah pelarut band penyerapan perluasan dan pengurangan konsekuen dalam resolusi struktural dan ε max. bentuk ionik juga dapat dibuat dalam
kondisi asam atau basa. Dengan demikian perawatan harus diambil untuk menghindari interaksi antara zat terlarut dan pelarut.

Gambar 9 menggambarkan efek dari iso-oktan dan etanol pada spektrum fenol, perubahan dari hidrokarbon ke hydroxylic pelarut. Hilangnya struktur halus di
kedua adalah karena band h-terikat kompleks pelarut-zat terlarut yang luas menggantikan struktur halus hadir dalam iso-oktan. Struktur halus dalam pelarut yang
terakhir menggambarkan prinsip bahwa non-solvating atau non pelarut chelating menghasilkan spektrum lebih dekat dengan yang diperoleh di negara gas.

Gambar 9 Spectra dari Fenol di Iso-oktan dan di Ethanol

Komersial pelarut yang tersedia dari 'spektroskopi kemurnian' yang tercantum dalam Tabel 3 disertai dengan panjang gelombang cut-off mereka, berdasarkan pada
panjang jalur 10mm. Air dan 0,1 N larutan asam klorida dan natrium hidroksida umumnya digunakan pelarut untuk spektrometri penyerapan. perawatan lagi harus
diambil untuk menghindari interaksi. Di mana metodologi membutuhkan buffering, solusi harus non-menyerap dan umumnya baik komposisi dan pH akan ditentukan.
Namun, jika informasi ini tidak daftar yang tersedia dapat ditemukan dalam literatur. Untuk reaksi dalam 4,2-8,8 pH wilayah, campuran dari 0,1 N dihidrogen natrium
fosfat dan
0,1 N hidrogen disodium fosfat umumnya digunakan.

Halaman 13 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Tabel 3 pelarut yang umum digunakan dan 'cut-off' panjang gelombang mereka

Pelarut Cut-off (nm)

Iso-oktan 202

Etil alkohol 205

sikloheksana 200

aseton 325

Tetrachloroethylene 290

bensol 280

Karbon tetraklorida 265

Khloroform 245

etil eter 220

Isopropyl alkohol 210

metil alkohol 210

Umum Interaksi of Light dan Cetakan

Ketika sinar radiasi menyerang setiap objek dapat diserap, ditransmisikan, tersebar, tercermin atau bisa membangkitkan fluoresensi. Proses ini diilustrasikan
dalam Gambar 10. Dengan hamburan dapat dianggap bahwa radiasi pertama diserap kemudian hampir seketika sepenuhnya kembali dipancarkan seragam di
semua arah, tetapi sebaliknya tidak berubah. Dengan fluoresensi foton pertama diserap dan menggairahkan molekul ke keadaan energi yang lebih tinggi, tetapi
molekul kemudian turun kembali ke tingkat energi menengah dengan re-memancarkan foton. Karena beberapa energi dari foton insiden dipertahankan dalam
molekul (atau hilang oleh proses non-radiasi seperti tabrakan dengan molekul lain) foton yang dipancarkan memiliki sedikit energi dan karenanya panjang
gelombang lebih panjang dari foton diserap. Seperti pencar,

Halaman 14 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Gambar 10 Interaksi cahaya dan materi

Proses yang bersangkutan dalam spektrometri serapan adalah penyerapan dan transmisi. Biasanya kondisi di mana sampel diperiksa dipilih untuk menjaga
refleksi, pencar dan fluoresensi untuk minimum. Di daerah ultraviolet dan terlihat dari spektrum elektromagnetik, band diamati biasanya tidak cukup spesifik
untuk memungkinkan identifikasi positif dari sampel yang tidak diketahui, meskipun data ini dapat digunakan untuk mengkonfirmasi sifatnya disimpulkan dari
spektrum inframerah atau dengan teknik lainnya. Ultraviolet dan spektrometri terlihat hampir seluruhnya digunakan untuk analisis kuantitatif; yaitu, estimasi
jumlah senyawa yang dikenal untuk hadir dalam sampel. Sampel biasanya diperiksa dalam larutan.

(Atau Bouguer) Hukum Lambert

Hukum Lambert menyatakan bahwa setiap lapisan ketebalan yang sama dari media menyerap menyerap fraksi yang sama dari energi radiasi yang melintasi itu.

Fraksi energi radiasi yang ditransmisikan oleh ketebalan tertentu media menyerap independen dari intensitas radiasi insiden, asalkan radiasi tidak mengubah
keadaan fisik atau kimia medium.

Jika intensitas radiasi insiden adalah io dan bahwa dari cahaya yang ditransmisikan adalah l, maka fraksi ditransmisikan adalah:

l / lo = T

Persentase transmisi

% T = l / lo x 100

Halaman 15 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Jika serangkaian piring kaca berwarna ketebalan yang sama ditempatkan secara paralel, setiap lembar yang menyerap seperempat dari insiden cahaya atasnya,
maka jumlah radiasi yang asli lewat lembar pertama adalah:

(1 - 1/4) / 1 x 100 = 75%

dan dengan lembar kedua adalah 56,25%, yaitu 75% dari 75%, dan pada lembar ketiga adalah 42,19%, yaitu 75% dari 56,25%, dan pada lembar-n adalah (0,75) ^ nx 100%.

Sekarang bayangkan sebuah wadah dengan paralel kaca dinding 10mm terpisah diisi dengan larutan menyerap. Jika cahaya monokromatik insiden pada satu wajah dan 75% dari cahaya
ditransmisikan, Hukum Lambert menyatakan bahwa jika sebuah sel yang sama diletakkan di sebelah pertama cahaya yang ditransmisikan akan dikurangi menjadi 56,25%. Jika isi dari dua
kontainer yang diuapkan sampai setengah volume mereka, sehingga menggandakan konsentrasi mereka, dan kemudian diukur dalam satu wadah, maka akan ditemukan bahwa transmisi
akan lagi dikurangi menjadi
56.25%.

Hal ini dapat segera dilihat bahwa untuk menentukan konsentrasi sampel yang tidak diketahui persentase transmitansi dari serangkaian solusi konsentrasi yang
diketahui atau 'standar' dapat diplot dan konsentrasi atau tidak diketahui dibaca dari grafik. Ini akan menemukan bahwa grafik merupakan fungsi eksponensial yang
jelas nyaman untuk memudahkan interpolasi.

Hukum Beer-Lambert

Hukum Beer-Lambert menyatakan bahwa konsentrasi zat dalam larutan berbanding lurus dengan 'absorbansi', A, dari solusi.

Absorbansi A = konstanta x konsentrasi x panjang sel

Hukum hanya berlaku untuk cahaya monokromatik, yaitu cahaya dari panjang gelombang tunggal atau band sempit panjang gelombang, dan dengan ketentuan bahwa
keadaan fisik atau kimia zat tersebut tidak berubah dengan konsentrasi.

Ketika radiasi monokromatik melewati larutan homogen dalam sel, intensitas radiasi yang dipancarkan tergantung pada ketebalan (l) dan konsentrasi (C) dari
solusi.

saya o adalah intensitas radiasi insiden dan saya adalah intensitas radiasi yang ditransmisikan. Rasio I / I o disebut transmisi. Ini kadang-kadang dinyatakan
sebagai persentase dan disebut sebagai% transmitansi.

Halaman 16 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Secara matematis, absorbansi terkait dengan persentase transmitansi T oleh ekspresi:

A = log 10 ( saya Hai/ I) = mencatat 10 ( 100 / T) = KCL

di mana L adalah panjang jalur radiasi melalui sampel, c adalah konsentrasi menyerap molekul di jalan itu, dan k adalah koefisien kepunahan - konstan
tergantung hanya pada sifat molekul dan panjang gelombang radiasi.

Sekarang, dalam contoh di atas, transmitansi dari sampel kami jatuh 75-56,25% ketika konsentrasi dua kali lipat. Apa yang terjadi pada absorbansi dalam
keadaan yang sama?

A = log 10 ( 100 / T) = log 10 ( 100) - log 10 ( T) = 2 - log 10 ( T)

Ketika T = 75%, A = 2-1,875 = 0,125

Ketika T = 56,25% A = 2-1,750 = 0,250

Cukup jelas sebagai absorbansi ganda untuk dua kali konsentrasi, itu jauh lebih nyaman untuk bekerja di absorbansi dari transmitansi untuk keperluan
analisis kuantitatif.

Hal ini berguna untuk diingat bahwa

0% = T ∞ SEBUAH

0,1% = 3.0a

1,0% T = 2.0A

10% T = 1.0A

100% = 0A

Absorbansi dalam literatur yang lebih tua kadang-kadang disebut sebagai 'kepunahan' atau 'kepadatan optik' (OD).

Gambar 11 (a)% T vs konsentrasi (b) Absorbance vs konsentrasi

Halaman 17 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Jika, dalam ekspresi A = kcl, c dinyatakan dalam molar- 1 dan l dalam m, maka k diganti dengan simbol τ dan disebut koefisien absorpsi molar. Satuan τ adalah mol 1 m
2.τ sebelumnya disebut koefisien kepunahan molar dan konsentrasi sering dinyatakan sebagai mol l- 1, mol dm- 3 atau M dan panjang sel dalam cm untuk
memberikan unit mol 1 lcm- 1, mol 1 dm 3 cm- 1 dan M 1 cm- 1

masing-masing.

Atau, jika massa molekul relatif (berat molekul) dari substansi tidak diketahui, maka 1% b / v disiapkan dan absorbansi diukur dalam sel 1 cm. Dalam hal ini, k
diganti dengan E 1% Kadang-kadang panjang gelombang disertakan: E 1% ( 325 nm).

C Kadang-kadang dinyatakan dalam g dm- 3 ( GL- 1) dan l di cm. Dalam hal ini, k diganti dengan A (kadang-kadang E). Sebuah dikenal sebagai koefisien penyerapan tertentu.

Aplikasi Umum

Setelah melihat, meskipun sangat singkat, pada teori dan asal-usul spektrum UV-Visible, mari kita sekarang menyelidiki bagaimana kita dapat menerapkan teknik untuk analisis
kimia dimulai dengan pertimbangan negara sampel.

Dengan sampel padat biasanya ditemukan bahwa materi dalam kondisi tidak cocok untuk spektrometri langsung. Indeks bias bahan yang tinggi dan sebagian besar
radiasi mungkin akan hilang oleh refleksi acak atau pembiasan di permukaan atau di massa. Kecuali sampel dapat dengan mudah dibuat sebagai sebuah blok dipoles
homogen atau film, biasanya untuk menghilangkan antarmuka ini dengan melarutkan dalam pelarut transparan.

Cairan mungkin terkandung dalam wadah yang terbuat dari bahan transparan seperti silika, kaca atau plastik, yang dikenal sebagai sel atau kuvet. Wajah-wajah sel-sel ini melalui
mana melewati radiasi sangat halus untuk menjaga refleksi dan menyebarkan kerugian minimum. Gas mungkin terkandung dalam sel sama yang disegel atau tersumbat untuk
membuat mereka gas ketat. Dengan sampel sekarang siap untuk pengukuran, saya o (insiden intensitas) dapat diatur dengan memindahkan sampel dari balok dan membiarkan
jatuhnya cahaya secara langsung pada detektor. Pada instrumentasi modern saat ini, saya o pengaturan umumnya dilakukan dengan perintah 'autozero'. Dalam prakteknya,
metode seperti ini tidak memperhitungkan proporsi radiasi yang dipantulkan atau tersebar di wajah sel. Hal ini juga tidak memperhitungkan radiasi yang diserap oleh pelarut
apapun dan dengan demikian tidak efektif melewati sampel. Oleh karena itu biasanya untuk mempekerjakan referensi atau sel kosong, identik dengan yang mengandung sampel,
tetapi hanya diisi dengan pelarut dan untuk mengukur cahaya yang ditransmisikan oleh referensi ini sebagai benar atau praktis saya Hai.

Setelah menetapkan saya o atau referensi posisi, prosedur diadopsi untuk analisis akan tergantung pada informasi yang analitis diperlukan. Secara umum ada
dua teknik pengukuran utama; berapa banyak analit dalam sampel (analisis kuantitatif) dan yang analit dalam sampel (analisis kualitatif).

Analisis kuantitatif

Untuk analisis kuantitatif, biasanya memilih untuk menggunakan radiasi dari panjang gelombang di mana k, koefisien kepunahan, adalah maksimum, yaitu pada
puncak band penyerapan, karena alasan berikut:

Perubahan absorbansi untuk perubahan konsentrasi yang diberikan lebih besar, yang menyebabkan sensitivitas yang lebih besar dan akurasi dalam pengukuran

Halaman 18 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Pengaruh relatif dari zat lain atau kotoran lebih kecil.

Laju perubahan absorbansi dengan panjang gelombang lebih kecil, dan pengukuran ini tidak begitu parah dipengaruhi oleh kesalahan kecil dalam pengaturan panjang
gelombang.

Koefisien kepunahan harus memiliki unit yang berkaitan dengan satuan yang digunakan untuk konsentrasi dan panjang jalur sampel.

Hal ini biasanya ditulis sebagai:

nilai k untuk konsentrasi sampel 1% dari ketebalan 1 cm.

atau

ε absorptivitas molar sebelumnya digambarkan sebagai koefisien kepunahan molar;

nilai k untuk konsentrasi sampel dari 1 gram molekul per liter dan ketebalan 1 cm.

Untuk melakukan analisis dari bahan dikenal itu harus mungkin dalam teori untuk mengukur penyerapan sampel maksimum penyerapan, mengukur ketebalan,
memperoleh nilai dari e dari tabel dan menghitung konsentrasi. Dalam prakteknya, nilai-nilai E tergantung pada karakteristik instrumental, nilai-nilai sehingga
diterbitkan dari tabel tidak cukup akurat, dan analis yang handal biasanya akan plot nilai-nilai absorbansi dari serangkaian standar konsentrasi dikenal;
konsentrasi sampel yang sebenarnya kemudian dapat dibaca langsung dari grafik kalibrasi. Menggunakan perangkat lunak didorong modern yang instrumen hari
ini, analis biasanya hanya akan memerlukan satu standar 'atas' yang dapat digunakan untuk mengkalibrasi instrumen sehingga menampilkan konsentrasi sampel
berikutnya langsung di unit yang diperlukan.

Pengukuran tingkat

Studi tingkat melibatkan pengukuran perubahan konsentrasi peserta dalam reaksi sebagai fungsi waktu. Padahal kami sebelumnya telah dianggap pengukuran sampel yang penyerapan karakteristik adalah konstan,
pengukuran tingkat spektrometri melibatkan pengukuran jatuh atau kenaikan serapan pada panjang gelombang yang tetap. Pengukuran ini memberikan informasi tentang perubahan konsentrasi baik reaktan atau
produk. Aplikasi yang paling banyak ditemui pengukuran tingkat spektrometri untuk penelitian enzim (protein yang hadir di semua jaringan hidup). Enzim tidak dapat diukur secara langsung tetapi sifat katalitik mereka
memungkinkan estimasi mereka dari kecepatan reaksi yang mereka mengkatalisasi. Enzim memiliki banyak kegunaan sebagai reagen atau sebagai label yang dapat dilampirkan ke molekul lain untuk mengizinkan
deteksi tidak langsung mereka dan pengukuran. Namun, penggunaan terluas mereka di bidang diagnostik klinis sebagai indikator kerusakan jaringan. Ketika sel-sel yang rusak oleh penyakit, enzim bocor ke dalam
aliran darah dan jumlah ini menunjukkan tingkat keparahan kerusakan jaringan. Proporsi relatif dari enzim yang berbeda dapat digunakan untuk mendiagnosa penyakit, mengatakan dari hati, pankreas atau organ lain
yang jika tidak menunjukkan gejala yang sama. Reaksi paling banyak digunakan dalam ini tes klinis adalah pengurangan dinukleotida nicotinamide adenin (NAD) ke NADH enzim bocor ke dalam aliran darah dan
jumlah ini menunjukkan tingkat keparahan kerusakan jaringan. Proporsi relatif dari enzim yang berbeda dapat digunakan untuk mendiagnosa penyakit, mengatakan dari hati, pankreas atau organ lain yang jika tidak
menunjukkan gejala yang sama. Reaksi paling banyak digunakan dalam ini tes klinis adalah pengurangan dinukleotida nicotinamide adenin (NAD) ke NADH enzim bocor ke dalam aliran darah dan jumlah ini
menunjukkan tingkat keparahan kerusakan jaringan. Proporsi relatif dari enzim yang berbeda dapat digunakan untuk mendiagnosa penyakit, mengatakan dari hati, pankreas atau organ lain yang jika tidak
menunjukkan gejala yang sama. Reaksi paling banyak digunakan dalam ini tes klinis adalah pengurangan dinukleotida nicotinamide adenin (NAD) ke NADH 2. Spektrum NAD dan NADH 2 ditunjukkan pada Gambar 12
dan dapat dilihat bahwa jika absorbansi dipantau di NADH yang 2 puncak pada 340nm membaca akan meningkat sebagai reaksi berlangsung menuju NADH 2.

Halaman 19 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Gambar 12 Spektrum Penyerapan NAD dan NADH

Reaksi lainnya dapat dipantau dengan kopling mereka bersama-sama sehingga produk dari satu reaksi feed berikutnya yang kemudian dapat optik dipantau.

Persamaan umum untuk reaksi enzim adalah:

Dalam enzim reaksi ini X mengkatalisis konversi senyawa A ke B. Reaksi ditambah memanfaatkan NAD dalam reaksi sekunder, penyelesaian yang
tergantung pada konsentrasi produk reaksi primer. misalnya

Persamaan ini, bagaimanapun, hanya akan berlaku ketika reaksi antara B dan NADH 2 hampir seketika. Pertimbangkan reaksi ditambah berikut:

reaksi 1

Reaksi awal adalah konversi L-alanin dan-ketoglutarat menjadi piruvat di hadapan transaminase alanin. Reaksi indikator adalah konversi piruvat (dan NADH 2) laktat
yang dikatalisis oleh enzim dehidrogenase laktat.

Halaman 20 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Efek dari reaksi ini pada absorbansi diilustrasikan pada Gambar 13. sebenarnya penurunan absorbansi yang disebabkan oleh oksidasi NADH 2 dapat dilihat pada
Gambar 12. Laju reaksi ditentukan oleh penurunan rata-rata absorbansi selama periode singkat berikut penambahan-ketoglutarat. Reaksi lainnya melibatkan
pengurangan NAD untuk NADH 2 dengan peningkatan resultan absorbansi.

Gambar 13 reaksi enzim berdasarkan oksidasi NADH ke NAD

Konversi glukosa-6-fosfat menjadi 6-phosphogluconalactone (reaksi dikatalisis oleh dehidrogenase glukosa-6-fosfat di hadapan NADH 2) adalah
contoh dari jenis reaksi.

Persamaan untuk reaksi ini akan menjadi sebagai berikut:

reaksi 2

Gambar 14 reaksi enzim berdasarkan pengurangan NAD untuk NADH

Halaman 21 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Perubahan pada absorbansi ditunjukkan seperti pada Gambar 14. Dalam kasus reaksi 1, yaitu transaminase alanin, laju reaksi dihitung dengan mengukur
penurunan rata-rata absorbansi selama periode waktu dan mengungkapkan sebagai penurunan rata-rata di absorbansi per menit . Dengan reaksi 2,
peningkatan absorbansi diukur.

Berbagai parameter akan mempengaruhi laju reaksi. Mayoritas konsentrasi yaitu substrat, konsentrasi enzim ini dan pH harus diperhitungkan dalam kimia.
Namun, salah satu yang paling penting adalah suhu dan penting untuk secara tepat mengontrol suhu sampel dan reagen segera sebelum dan selama
pengukuran. Untuk persyaratan ini, berbagai macam pemegang sel thermostatted dan sistem kontrol suhu tersedia.

Analisis Campuran

Hal ini relatif jarang untuk menemukan masalah praktis dalam mana yang memiliki campuran yang akan dianalisis dengan hanya satu komponen yang menyerap radiasi. Ketika ada
beberapa komponen seperti yang menyerap pada panjang gelombang yang sama absorbansi mereka menambahkan bersama, dan itu tidak lagi benar bahwa absorbansi sampel
sebanding dengan konsentrasi salah satu komponen (lihat Gambar 15).

Dalam kasus ini, beberapa pendekatan dapat diadopsi dengan menjadi reaksi kimia dan multi-panjang gelombang pengukuran yang paling penting.

Gambar 15 Kesalahan yang disebabkan oleh penyerapan ditumpangkan dalam campuran

Reaksi kimia

Sebuah metode umum analisis adalah untuk mengubah komponen yang diperlukan dengan menambahkan reagen kimia yang bereaksi dengan secara khusus untuk membentuk
senyawa yang sangat menyerap. Contoh ini ditunjukkan pada Gambar 16. Sebuah kuantitas pereaksi ditambahkan ke dalam campuran bereaksi hanya dengan satu komponen dan
kedua meningkatkan penyerapan dan perubahan panjang gelombang serapan maksimum sehingga ada gangguan tidak lagi antara komponen. Analisis tersebut kemudian dikurangi
menjadi kasus sederhana dan yang

Halaman 22 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

sensitivitas ditingkatkan. Banyak ratusan reagen tertentu seperti sekarang tersedia untuk segala macam analisis dan matriks sampel dan secara menyeluruh rinci
dalam literatur.

Gambar 16 Meningkatkan sensitivitas dengan menambahkan reagen kimia

Pengukuran Multiwavelength

Dalam campuran komponen, penyerapan diamati pada panjang gelombang setiap adalah jumlah dari spektrum penyerapan individual dari komponen demikian:

Mengukur absorbansi pada panjang gelombang 1

A1 = E Aal + E bBL + E CCL ...

Demikian pula pada panjang gelombang 2

A '= E' Aal + E' bBL + E' CCL ...

di mana E SEBUAH dan E' SEBUAH adalah absorptivitas komponen A pada panjang gelombang 1 dan gelombang 2 dan A adalah konsentrasi, dll

Panjang jalur sel L umumnya konstan dan karena itu membatalkan. Jika kita kemudian melakukan pengukuran di sejumlah panjang gelombang yang berbeda sama dengan
jumlah komponen, dan jika nilai absorptivitas dikenal dengan pengukuran komponen murni pada masing-masing panjang gelombang yang bersangkutan, kita dapat
memecahkan persamaan simultan untuk menemukan yang dibutuhkan konsentrasi.

Multi-panjang gelombang atau multi komponen teknik analisis telah melihat kebangkitan kepentingan selama beberapa tahun terakhir. Ini telah karena teknik
pengolahan data. Berbagai algoritma tersedia dan analis umumnya diperlukan untuk memasukkan jumlah komponen, panjang gelombang pengukuran dan
nilai-nilai konsentrasi standar. Setelah mengukur

Halaman 23 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

standar, sampel dapat diproses dan hasil yang disajikan tepat. Program jenis ini, termasuk parameter pengukuran, kemudian dapat disimpan pada disk dan
mengingat dan menjalankan dengan minimal intervensi operator, memberikan hasil pada campuran kompleks yang mengandung hingga sepuluh komponen.

Instrumentasi

Dalam bagian sebelumnya kita telah melihat bahwa tujuan dari spektrofotometer adalah untuk memberikan sinar radiasi monokromatik untuk menerangi sampel dan
mengukur rasio I / I Hai. Setiap spektrofotometer akan terdiri dari bagian-bagian komponen diilustrasikan pada Gambar 17.

Gambar 17 Skema diagram spektrofotometer

Ada banyak kombinasi dari sumber, monochromators, sistem dll yang dapat dirakit untuk membentuk spektrofotometer terintegrasi dengan berbagai tingkat
akurasi dan kesesuaian untuk aplikasi tertentu mengukur. Berbagai komponen optik yang terdiri spektrometer tidak akan dibahas di sini.

Halaman 24 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

definisi

Akurasi absorbansi

akurasi absorbansi adalah perjanjian antara absorbansi ditampilkan pada spektrometer dan nilai absorbansi yang benar seperti yang diberikan oleh larutan
standar atau kalibrasi kasa.

absorbansi Reproducibility

Ini adalah kesepakatan (konkordansi) dari serangkaian nilai-nilai absorbansi yang diperoleh ketika solusi yang sama dipindai, yaitu itu adalah seberapa dekat nilai-nilai absorbansi
setuju.

Ketepatan

Keakuratan penentuan dapat didefinisikan sebagai perjanjian (konkordansi) antara itu dan nilai benar atau paling mungkin.

Radiasi benda hitam

Sebuah benda hitam adalah tubuh hipotetis atau permukaan yang akan menyerap semua insiden radiasi atasnya. Sebaliknya, tubuh hitam ini memancarkan
proporsional energi elektromagnetik dengan kekuatan keempat suhu mutlak. The panas tubuh yang lebih pendek panjang gelombang radiasi; sehingga warna tubuh
bercahaya tergantung pada suhu.

Obligasi

Sebuah ikatan merupakan interaksi antara dua atau lebih atom atau kelompok atom yang memegang atom bersama-sama. Interaksi ini hasil dari berbagi elektron dalam
(biasanya) kerang lengkap atom yang berdekatan.

jalur yang diprediksi (orbital) dari elektron ikatan tentang inti memberikan masing-masing atom bentuk tertentu yang mempengaruhi cara ikatan dengan atom-atom
yang berdekatan. orientasi obligasi ini berbeda (orbital) yang disebut:

σ ( sigma)

σ * ( Bintang sigma)

π ( pi)

π * ( Bintang pi)

Sebuah molekul dapat memiliki kombinasi dari berbagai jenis orientasi obligasi.

Bonding terjadi di mana ada elektron tunggal dalam orbital dimaksudkan untuk dua elektron. Antibonding terjadi di mana kedua elektron yang hadir dalam
orbital dan ini menghambat ikatan.

kelat

Sebuah zat yang menggabungkan molekul atau ion terikat pada ion logam.

Halaman 25 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Kompleks

Sebuah jenis senyawa yang molekul atau ion membentuk ikatan dengan atom logam atau ion.

Konjugasi

Senyawa terkonjugasi adalah senyawa dengan bolak ikatan ganda dan tunggal.

Enzim

Enzim adalah protein yang mengkatalisis reaksi biokimia tertentu. Ini menengahi konversi dari satu atau lebih zat (substrat (s)) yang lain dengan
menggabungkan dengan substrat (s) untuk membentuk kompleks menengah.

kepunahan Koefisien

Ekspresi absorptivitas dari senyawa konsentrasi standar diukur dalam panjang jalur kuvet 10 mm. Hal ini dapat dinyatakan sebagai salah satu dari:

atau ini adalah absorbansi dari 1% b / v senyawa yang diukur dalam 10 mm

panjang jalur. Hal ini terkait dengan absorptivitas molar

oleh: = 100 xe / M

Atau

Ε koefisien absorptivitas molar. Ini adalah absorbansi dari larutan molar dalam
panjang jalur kuvet 10 mm. Lihat absorptivitas molar.

Hidrasi

Untuk menyebabkan untuk mengambil atau menggabungkan dengan air atau unsur-unsur air.

Ion

Sebuah atom atau kelompok atom yang membawa muatan listrik sebagai akibat dari setelah memperoleh atau kehilangan elektron.

isomer

Setiap salah satu senyawa yang mungkin timbul dari cara yang berbeda dari pengelompokan atom dalam rumus molekul tertentu. Senyawa dapat memiliki rumus
yang sama tetapi pengaturan tata ruang yang berbeda dari atom.

Halaman 26 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Cis isomer

Grup yang melekat pada sisi yang sama dari ikatan; misalnya,

isomer trans

Grup yang melekat di sisi berlawanan; misalnya,

Molar absorptivitas (e)

Absorbansi pada panjang gelombang tertentu dari larutan senyawa konsentrasi satuan molar diukur dalam panjang jalur 10 mm.

Ini memiliki dimensi M- 1 cm- 1.

monokromator

Ini adalah perangkat yang mengisolasi band yang sangat sempit panjang gelombang cahaya yang datang dari sumber.

Kebisingan

Kebisingan adalah istilah umum yang digunakan untuk menggambarkan jejak yang tidak teratur atau acak diperoleh ketika sinyal dari spektrofotometer dicatat.

orbital

Orbital adalah daerah putaran inti di mana ada probabilitas tinggi untuk menemukan elektron.

polar

Ini adalah suatu kondisi di mana molekul tidak memiliki muatan listrik bersih dan belum menunjukkan polaritas - itu adalah lebih negatif di salah satu ujung dari yang lain. Hal ini
muncul karena beberapa elemen mengikat elektron terluar mereka lebih erat daripada yang lain: dengan atom besar, kerang batin elektron melindungi muatan inti sampai batas
tertentu dan elektron terluar cenderung lebih jauh dari inti dengan atom besar dibandingkan dengan yang kecil.

ketelitian

Presisi dapat didefinisikan sebagai perjanjian (konkordansi) dari serangkaian pengukuran kuantitas yang sama; yaitu, presisi mengekspresikan reproduksi
atau pengulangan pengukuran.

Halaman 27 dari 28
 Dasar UV-Vis Teori, Konsep dan Aplikasi

Teori probabilitas

Hal ini tidak mungkin untuk menentukan lokasi dan lintasan elektron di wilayah atom karena setiap upaya untuk mengamati elektron akan mengubah lokasinya atau gerakan.
Namun demikian, mungkin untuk menyatakan probabilitas bahwa elektron akan berada dalam wilayah tertentu. teori probabilitas ini memungkinkan orbital dari berbagai
elektron di kulit yang akan ditentukan.

reaktan

Senyawa mengambil bagian dalam reaksi kimia.

Reagen

Sebuah pelarut atau larutan yang bereaksi dengan yang lain. Istilah ini biasanya diterapkan untuk bahan kimia laboratorium yang umum digunakan untuk percobaan dan
analisis, misalnya natrium hidroksida dan asam klorida.

Indeks bias

Ukuran jumlah dimana suatu zat membias gelombang. Hal ini sama dengan rasio dari kecepatan transmisi gelombang dalam medium acuan atau vakum untuk
kecepatannya dalam substansi.

Rotasi Energi Amerika

Hanya sebagai kuantum tetap energi yang dibutuhkan untuk mengubah tingkat energi elektron, sehingga juga merupakan kuantum tetap energi yang dibutuhkan untuk
mengubah rotasi molekul. kuanta energi memungkinkan untuk molekul tertentu bergantung pada panjang ikatan dan sudut dalam molekul.

sterik

Hal ini berkaitan dengan efek yang bentuk molekul memiliki pada reaksi nya. Sebuah contoh tertentu terjadi pada molekul yang mengandung kelompok besar
yang menghalangi pendekatan dari reaktan (sterik halangan).

Stray Cahaya

Ini adalah radiasi yang terukur, pada detektor, dari setiap panjang gelombang di luar band sempit diharapkan akan dikirimkan oleh monokromator.

Getaran Energi Amerika

Hanya sebagai kuantum tetap energi yang dibutuhkan untuk mengubah tingkat energi elektron, sehingga juga merupakan kuantum tetap energi yang dibutuhkan untuk
mengubah getaran atom dalam molekul. kuanta energi memungkinkan untuk molekul tertentu tergantung pada kekuatan ikatan dan massa atom dalam molekul.

Panjang gelombang Akurasi

Ini adalah perjanjian antara nilai yang ditampilkan pada spektrofotometer dan nilai sebenarnya.

Panjang gelombang Reproducibility

Ini adalah kesepakatan (konkordansi) dari serangkaian nilai-nilai panjang gelombang yang diperoleh ketika spektrum berulang kali dipindai.

Halaman 28 dari 28