Control Biológico: como herramienta para disminuir, inhibir o lisar colonias de

Serratia marcescens

Fabián. C. Corredor 1, Lizeth. D. Quiroga 2

1. Laboratorio de Microbiología General Departamento de Farmacia.Universidad
Nacional de Colombia, fccorredorg@unal.edu.co
2. Laboratorio de Microbiología General Departamento de Farmacia.Universidad
Nacional de Colombia, ldquirogar@unal.edu.co

Resumen
Los métodos de control Microbicidas son ampliamente utilizados en diferentes sectores
(alimentos, farmacéuticos, microbiológicos, y otros sectores de la industria) ya que este es
el principal control de calidad para la prevención de enfermedades y su proliferación, en el
presente se muestra los métodos químicos y físicos principales para la disminución,
inhibición o destrucción de colonias de S. marcescens. Mostrando que S. marcescens es
capaz de resistir a diferentes medicamentos antibióticos, y no presenta casi inhibición a
agentes desinfectantes, antisépticos ni colorantes (como métodos químicos) y se destruye
en casi todos los casos cuando se aplican temperaturas y radiación baja para su control a
excepción de la congelación que sirve como método de preservación de corto plazo (como
métodos físicos).

Palabras Clave

Serratia marcescens, Antibióticos, antisépticos, desinfectantes, colorantes, Radiación UV,

Ebullición, Evaporación, Pasteurización, Calor seco y Congelación.

Abstract

Microbicide control methods are widely used in different sectors (food,

pharmaceutical, microbiological, and other industry sectors) since this is the main
quality control for the prevention of diseases and their proliferation, in the present
shows the methods chemical and physical factors for the decrease, inhibition or
destruction of S. marcescens colonies. Showing that S. marcescens is capable of
resisting different antibiotic medications, and has almost no inhibition to
disinfectants, antiseptics or dyes (as chemical methods) and is destroyed in almost
all cases when temperatures and radiation are applied low for its control. exception
of freezing that serves as a short-term preservation method (such as physical
methods).

Keywords

Serratia marcescens, Antibiotics, antiseptics, disinfectants, dyes, UV radiation, boiling,

evaporation, pasteurization, dry heat and freezing.

Introducción
El control microbiano persigue, fundamentalmente, eliminar o inhibir los microorganismos,
cuyas actividades son nocivas para el hombre. Para lograr aquel propósito, se cuenta con
una gran cantidad de agentes físicos y químicos, los cuales pueden actuar de muy diversas
formas. Se parte de que los microorganismos además de sobrevivir son capaces de
replicarse en ambientes a específicas condiciones físicas y químicas, sin embargo existen
límites de tolerancia que pueden ser resultar letales para las bacterias, entre los cuales se
encuentran sustancias químicas que actúan mediante métodos de control, como lo son:
Asepsis, remoción, desecación, radiación, entre otras.
A continuación se evaluarán los diferentes métodos de control microbiológico como
desinfección y esterilización, en donde se reconocerán las diferencias en modo de acción
de cada uno específicamente en el cultivo de Serratia marcescens. Se esperan encontrar
inhibiciones correspondientes a una bacteria Gram (-), anaerobia facultativa y de
comportamiento mesófilo.(1)

Materiales y Métodos

Cerebro Corazón Infusion Agar. (BHI) (2)

Composición (en gramos por litro)

Infusión de cerebro de ternera 200.0
Infusión corazón vacuno 250.0
Peptona 10.0
Cloruro de sodio 5.0
Glucosa 2.0
Fosfato disódico 2.5
Agar 15.0
pH final: 7.4 ± 0.2

En este medio se Sembró por aspersión y estrías Serratia marcescens dividido en 5 tubos
(como medio Fluido) y en 5 placas junto con un control de la siguiente manera:

Tabla No. 1: Distribución de los métodos de Control

Tipo de
Método Control Medio BHI
Método
Ebullición a 92 °C /15 min
Pasteurización a 63 °C /30 min
Autoclavado a 121 °C/ 12 LbmP/ 20 min En tubo y Fluido
Físico Calor Seco (horno) a 150 °C/ 15 min
Congelación a -15 °C
Radiación
5 min En placa y Sólido
Ultravioleta
1: Doxiciclina
En placa y Sólido y el
Químicos Antibióticos 2: Dicloxacilina
método de control en pozo
3: Amoxicilina
 4: Eritromicina
5: Omeprazol
6: Trimetropin
Sulfametoxazol
1: Listerine
2: Noraver
3: Agua Oxigenada
Antisépticos
4: Isodine
5: Lamisil
6: Noraver
1: Azul Clean
2: Ao Sept Plus
En placa y Sólido y el
3: Hipoclorito
Desinfectantes método de control en
4: Baygan
papel filtro
5: Blancox
6: Easy off Br
1: Lugol
2: Verde de malaquita
3: Fucsina de Gram
Colorantes
4: Cristal Violeta
5: Azul de Metileno
6: Azul de Lactofenol

Todos los medios se llevaron a incubación a 37 °C por 24 Horas, a excepción del tubo de
congelación, el cual se mantuvo a esta temperatura por 48 horas.

Resultados
Tabla No. 2: Métodos de Control frente a Serratia marcescens
Método Control Antes y Después Descripción

Imagen No. 1: Inhibe el

crecimiento de S.
Ebullición a 92 °C /15 min marcescens, pero se
observa en el fondo
residuos de la misma.

Imagen No. 2: Inhibe el

crecimiento de S.
Pasteurización a 63 °C /30 min marcescens, pero se
observa en el fondo
residuos de la misma.
 Imagen No. 3: Inhibe el
crecimiento de S.
a 121 °C/ 12
Autoclavado marcescens, y se
LbmP/ 20 min
observa lisis de las
colonias.

Imagen No. 4: Inhibe el

crecimiento de S.
Calor Seco a 150 °C/ 15
marcescens, y se
(horno) min
observa la lisis de las
colonias.

Imagen No. 5: Inhibe y

Congelación a -15 °C conserva el crecimiento
de S. marcescens.

Imagen No. 6: Se
observa resistencia de
S. marcescens,en la
Radiación
5 min mitad de la placa
Ultravioleta
expuesta y excelente
crecimiento en la parte
no expuesta.

Imagen No. 7: Se
observa el disco de
aplicación (A), además
Antibióticos 1: Doxiciclina tiene un halo de
Inhibición de 0,6 cm (B)
para el crecimiento de
S. marcescens.
 Imagen No. 8: Se
observa el disco de
aplicación (A), además
2: Dicloxacilina tiene un halo de
Inhibición de 1,0 cm (B)
para el crecimiento de
S. marcescens.

Imagen No. 9: Se
observa el disco de
aplicación (A), además
tiene un halo de
3: Amoxicilina Inhibición de 1,05 cm
(B) para el crecimiento
de S. marcescens y se
divisan residuos de 3
en el fondo.
Imagen No. 10: Se
observa el disco de
aplicación con
residuos(A), además
tiene un halo de
4: Eritromicina
resistencia de 0,5 cm
(C) para el crecimiento
de S. marcescens y
difusión del antibiótico
(B).

Imagen No. 11: No hay

inhibición del
crecimiento de S.
5: Omeprazol marcescens (A), se
observa exceso del
antibiótico.

Imagen No. 12:No

Inhibe el crecimiento de
S. marcescens, no se
6: Trimetropin
observa halo de
Sulfametoxazol
sensibilidad (A), no se
divisan residuos del
antibiótico.
 Imagen No. 13: Inhibe
el crecimiento de S.
marcescens de manera
1: Listerine reducida, se observa
muy poco la formación
de un halo de
sensibilidad (B).

Imagen No. 14: No hay

inhibición ni resistencia
2: Noraver
de crecimiento de S.
marcescens

Imagen No. 15: Se

observa el disco de
aplicación (A), la
3: Agua inhibición del
Oxigenada crecimiento de S.
marcescens, tiene un
halo de inhibición de
0,2 cm (B).
Antisépticos
Imagen No. 16:Se
observa el disco de
aplicación (A), además
tiene un halo de
resistencia de 0,6 cm
4: Isodine
(B) para el crecimiento
de S. marcescens y
difusión e inhibición del
producto (C).

Imagen No. 17: No hay

inhibición del
5: Lamisil crecimiento de S.
marcescens

Imagen No. 18: No hay

inhibición del
6: Noraver crecimiento de S.
marcescens
 Imagen No. 19: Se
observa el disco de
aplicación (A), la
resistencia del
crecimiento de S.
1: Azul Clean
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,9 cm (B).

Imagen No. 20: Se

observa el disco de
aplicación (A), la
resistencia del
2: Ao Sept Plus crecimiento de S.
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,2 cm (B).

Imagen No. 21: Se

observa el disco de
aplicación (A), la
resistencia del
Desinfectantes 3: Hipoclorito crecimiento de S.
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,7 cm (B).

Imagen No. 22: No hay

inhibición ni resistencia
4: Baygan del crecimiento de S.
marcescens (B)

Imagen No. 23: Se

observa el disco de
aplicación (A), la
inhibición del
crecimiento de S.
5: Blancox
marcescens, tiene un
halo de inhibición de
0,2 cm (B) y un halo de
resistencia de 0,9 cm
(C).
 Imagen No. 24: Se
observa el disco de
aplicación (A), la
resistencia del
6: Easy off Br
crecimiento de S.
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,6 cm (B).

Imagen No. 25: No hay

inhibición del
1: Lugol crecimiento de S.
marcescens

Imagen No. 26: Se

observa el disco de
aplicación (A), la
resistencia del
2: Verde de
crecimiento de S.
malaquita
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,2 cm (B).

Imagen No. 27: No hay

inhibición del
crecimiento de S.
3: Fucsina de
Colorantes marcescen. Se observa
Gram
difusión del colorante.

Imagen No. 28: No hay

inhibición del
4: Cristal
crecimiento de S.
Violeta
marcescen. Se observa
difusión del colorante.

Imagen No. 29: No hay

inhibición del
5: Azul de
crecimiento de S.
Metileno
marcescen. Se observa
difusión del colorante.
 Imagen No. 30: Se
observa el disco de
aplicación (A), la
6: Azul de resistencia del
Lactofenol crecimiento de S.
marcescens, tiene un
halo de resistencia de
0,3 cm (B).

Discusión

A partir de los resultados mostrados en la tabla No. 2 se pretende establecer el principio o

función de la Inhibición, resistencia o no de cada uno de los métodos de control:

Tabla No. 3: Principio y función de los métodos de Control Físicos.

Método Control Función

La ebullición aunque no es método para esterilización, ya que
algunos microorganismos resisten estas temperaturas y
además algunas endosporas, si permite la eliminación de
Ebullición T = 92°C microorganismos coliformes éste procedimiento físico permitir
la eliminación de S. marcescens como se observa en la
imagen No. 1, reduciendo significativamente la carga
microbiana. (3)
La pasteurización tiene por objeto reducir e inhibir al mínimo
la cantidad total de coliformes y micobacterios, además de
Pasteurización T = 63°C algunos protozoos y levaduras. en la imagen No. 2 se
observa la inhibición de S. marcescens, disminuyendo
significativamente la carga microbiana. (3)
El autoclavado consiste en eliminar la mayor cantidad de
microorganismos de un material por medio del flujo de calor
húmedo con el fin de que se produzca la muerte de las
células por diferencia de presión osmótica y la inhibición total
Autoclavado T = 121°C
de endosporas, esta operación se lleva a cabo por 30 minutos
para efectuar este proceso sobre todas las células, en la
Imagen No. 3 se observa la muerte o lisis celular ya que no
hay crecimiento de los microorganismos en el medio. (3)
Por el contrario el calor seco evapora el agua alrededor de la
célula inhibiendo así su división y por tanto llevando a la
Calor Seco
T = 150°C muerte celular, en la Imagen No. 4 se observa la disminución
(horno)
del volumen por la evaporación y además la muerte e
inhibición total de S. marcescens.
La congelación es un método para preservar y/o conservar a
S. marcescens y los microorganismos en general, por esta
razón cuando se baja la temperatura el crecimiento se
suspende, ya que las enzimas que generan los procesos
Congelación T = -15°C normales de las células se inhiben (sin funcionar), el la
Imagen No. 5 se observa que la cantidad sembrada fue igual
a la cantidad después de la congelación lo que muestra que
éste es un excelente método para preservar microorganismos
por tiempos no prolongados. (3)
Radiación 5 min a 200 En el laboratorio se utilizó luz ultravioleta (UV) cuyo efecto
 Ultravioleta nm biocida se debe a que provoca la formación de dímeros de
timina en el DNA. Esta radiación tiene muy baja capacidad de
penetración por lo que su uso se ve restringido al tratamiento
de superficies o a la esterilización del aire en "salas limpias",
como se observa en la Imagen No. 6 en la mitad de la caja
expuesta hay formación de colonias, por tanto éste método no
es tan efectivo para medios de cultivo ni para colonias de S.
marcescens. (3)

Los métodos físicos utilizados para controlar el crecimiento de S. marcescens no en todos

los casos son tan efectivos debido a que se debe exponer a más tiempo como en el caso de
la radiación UV y además depende de la cantidad de Bacterios que se hayan sembrado
inicialmente, por otro lado la congelación es un excelente método de preservación corta.

Por otro lado se evalúan algunos de los métodos químicos de inhibición y resistencia para
S. marcescens como los antibióticos, los Antisépticos, los desinfectantes y los colorantes.

Tabla No. 4: Composición, Principio y función de los métodos Químicos.

Compos
Método Control Función
ición
La doxiciclina es un antibiótico del grupo de las
tetraciclinas que previene el crecimiento y
propagación de las bacterias Gram positivas(+)
y Gram negativas(-).
Se usa para tratar algunas infecciones en
1: Doxiciclina diferentes órganos y tejidos del cuerpo,
100 incluyendo neumonía y otras infecciones en las
mg/2 mL vías respiratorias, acné, infecciones de la piel,
BHI de los genitales, del sistema urinario y
carbunco (ántrax). Como se observa en la
Imagen No. 7, S. marcescens se inhibe con un
halo bastante grande lo que indica que este
medicamento es factible para el tratamiento de
este bacterio. (4)
Antibióticos
Antibacteriano. AntiGram+. De la familia de las
penicilinas. Resistente a B-lactamasas.
Como se observa en la Imagen No. 8 S.
2: Dicloxacilina marcescens presenta un halo de inhibición
microcida a este medicamento, debido a que
ésta ejerce su acción bactericida sobre el
500
crecimiento y división de la pared celular
mg/2 mL
bacteriana. Los peptidoglicanos mantienen la
BHI
pared celular bacteriana rígida, protegiendo a la
bacteria contra ruptura osmótica. Las
bencilpenicilinas inhiben el paso final de la
unión de peptidoglicano mediante su unión a
transpeptidasas, proteínas fijadoras de
penicilinas, que se encuentran en la superficie
 interior de la cubierta celular bacteriana,
inactivándolas. Otros mecanismos implicados:
lisis bacteriana a causa de la inactivación de
inhibidores endógenos de autolisinas
bacterianas. (4)
La amoxicilina solo es útil para tratar las
infecciones producidas por bacterias que sean
sensibles.

Este medicamento es un antibiótico y se usa

3: Amoxicilina
para tratar algunas infecciones en diferentes
250 mg/
órganos y tejidos del cuerpo; principalmente
2 mL
garganta, oídos, nariz, pulmones, estómago e
BHI
intestinos así como también, en combinación
con otros medicamentos, para tratar la
infección por Helycobacter pylori.
Éste actúa sobre las paredes de
peptidoglicanos inhibiendo a S. marcescens.
como se observa en la Imagen No. 9 (4)
La Eritromicina se usa para el tratamiento de
infecciones del tracto respiratorio superior, la
piel y tejidos blandos causados por organismos
4: Eritromicina susceptibles (principalmente cocos Gram
positivos), y especialmente en pacientes
500 mg/
alérgicos a las penicilinas.
2 mL
La eritromicina es un antibiótico que pertenece
BHI
a una clase de medicamentos llamados
macrólidos.
S. marcescens resiste a este medicamento y su
inhibición es baja o nula, como se observa en la
Imagen no. 10.(4)
Pertenece al grupo de los inhibidores de la
secreción gástrica ácida.
5: Omeprazol Su actuación es sobre pH cercanos a 1,0,
20 mg /
donde inhibe las funciones enzimáticas de
2 mL
estos bacterios como se observa en la Imagen
BHI
No. 11 no inhibe a S. marcescens, debido a
que la función enzimática de esta es con ph
superiores. (4)
6: Trimetoprin

La trimetoprima es un bacteriostático derivado

de la trimetoxibenzilpirimidina, mientras que el
sulfametoxazol es una sulfonamida de acción
80 mg T intermedia. en S. marcescens no es capaz de
+ 400 actuar ya que su concentración es muy baja
mg/ 2 para lograr afectar e ingresar a la célula y por
mL BHI ende No actúan sobre la ruta de síntesis del
Sulfametoxazol tetrahidrofolato, cuya inhibición provoca
finalmente que las bacterias afectadas no
puedan sintetizar purinas. (4)

Antisépticos 1: Listerine Cada El timol se caracteriza por su poder

 100 ml desinfectante y fungicida.
de El salicilato de metilo se utiliza tiene algunas
producto propiedades como antiséptico. Como se
contiene: observa en la Imagen No. 13 no hay inhibición
Alcohol peros si una leve resistencia de S. marcescens
28.4 ml; a los antisépticos que presenta este producto.
Timol (4)
0.06 g;
Eucalipt
ol 0.09
g;
Salicilato
de Metilo
0.05 g;
Mentol
0.04 g;
Ácido
Benzoic
o 0.150
g
Contiene fenol es un antiséptico y
desinfectante, activo contra un amplio rango de
microorganismos que incluye hongos y virus.
Su eficacia se disminuye a bajas temperaturas
y en medios alcalinos. Es mucho más eficaz en
soluciones acuosas que en lípidos o glicerina.
La acción bactericida del fenol se lleva a cabo
uniéndose a las proteínas de la membrana
formando un complejo fenol-Proteína que las
desnaturaliza por completo. El fenol es difusible
y penetra a los tejidos, por lo tanto se absorbe
a través del tracto gastrointestinal y por
mucosas. Además de la acción antiséptica, el
medicamento exhibe una acción anestésica
2: Noraver
tópica a concentraciones bajas, lo cual ha
hecho que se utilice en el alivio del dolor en
afecciones de la cavidad bucal y la orofaringe.
El fenol actúa como un anestésico local
bloqueando la transmisión de los impulsos
nerviosos a lo largo de las fibras nerviosas
aferentes. La acción anestésica no causa daño
a las membranas mucosas de la boca y la
faringe, sin embargo no fue evidente su
capacidad inhibitoria, como se observa en la
imagen 18 debido a la volatilidad de este
componente, ya que se debe tener en cuenta
el tiempo y la temperatura a la que la bacteria
estuvo expuesta.(6)
El agua oxigenada tiene como principio activo
el peróxido de hidrógeno, el mecanismo de
3: Agua acción del peróxido de hidrógeno es la
Oxigenada producción de iones hidroxilo y de radicales
libres que actúan oxidando componentes
esenciales del microorganismo como lípidos y
 proteínas. (8). Alrededor del sensidisco 3 se
observó un halo de sensibilidad, S. marcescens
es un microorganismo que se clasifica como
anaerobio facultativo, es decir que puede
crecer tanto en presencia como en ausencia de
oxígeno, esto gracias a la presencia de
enzimas como la superóxido dismutasa (SOD)
y la catalasa encargadas de degradar especies
reactivas de oxígeno (ROS) entre ellas el
peróxido de hidrógeno (7). Las condiciones de
la siembra fueron de aerobiosis así el
microorganismo estaba haciendo uso de sus
enzimas para degradar las ROS producto de su
respiración, al agregar un agente que
aumentaba la cantidad de ROS en el medio, la
concentración de las mismas aumento y
aunque el microorganismo contaba con las
enzimas necesarias para la degradación de
estas especies, su acción no fue suficiente y la
toxicidad producto de las altas concentraciones
de ROS inhibió el crecimiento bacteriano. El
halo observado tiene un tamaño de 0,2 cm. de
radio.
La yodopovidona, mejor conocida como
isodine, es uno de los antisépticos más antiguo
y más eficaz. Posee un nivel de acción
intermedio sobre algunos virus, hongos y
bacterias. Los compuestos yodados, son
compuestos que alteran la síntesis proteica y
las membranas celulares, formando complejos
con los aminoácidos y los ácidos grasos
insaturados. La yodopovidona es un yodóforo,
es decir, es una combinación de yodo con otra
sustancia orgánica que sirve para controlar la
4: Isodine
liberación del mismo en el sitio de acción (9).
Se puede observar en la imagen 16, la acción
del isodine sobre S. marcescens fue buena , sin
embargo es importante tener en cuenta que el
tiempo de exposición en los que se presentan
efectos eficaces, tanto bactericidas como
esporicidas, del yodo es bastante prolongado,
por lo que las endosporas del microorganismo
pudieron sobrevivir y crecer alrededor del sitio
de aplicación del isodine.

Posee terbinafina, la cual interfiere de modo

específico en el primer paso de la biosíntesis
del esterol fúngico. Esto conduce a una
deficiencia en ergosterol y a una acumulación
5: Lamisil intracelular de escualeno, lo que produce la
muerte celular del hongo. La terbinafina actúa
por inhibición de la escualeno epoxidasa en la
membrana celular del hongo.(6) Por lo cual su
inhibición no fue posible en esta bacteria, ya
 que es específicamente para hongos.
Tiene como principio activo el cloruro de
benzalconio (Imagen 3), su acción se ha
atribuido a la inactivación enzimática, a la
desnaturalización de las proteínas celulares
esenciales y a la ruptura de la membrana
celular. Estos mecanismos de acción parecen
ser debidos a su estructura anfipática; gracias a
las cadenas carbonadas (hidrófobas) penetra
en las membranas, mientras que a través del
nitrógeno catiónico (hidrófilo) interacciona con
los fosfatos de los fosfolípidos. Por esta
1: Azul Clean
alteración se produce una salida del material
citoplasmático hacia el exterior y la alteración
celular. Son considerados desinfectantes de
bajo nivel ya que su actividad bacteriostática o
bactericida depende de su concentración y de
las condiciones de la zona a desinfectar. Es
importante resaltar en este punto, que las
bacterias Gram (-) han mostrado mayor
resistencia intrínseca que las bacterias Gram
(+) a sales de amonio cuaternario como lo es el
cloruro de benzalconio.(6)
AOSEPT PLUS es un sistema de
mantenimiento para todo tipo de lentes de
contacto, ya que posee peróxido de hidrógeno
al 3%, los cuales se encargan desinfectar y
Desinfectantes limpiar los lentes de contacto, por lo cual ocurre
2: Ao Sept Plus algo similar que en el agua oxigenada, gracias
a la presencia de enzimas como la superóxido
dismutasa (SOD) y la catalasa encargadas de
degradar especies reactivas de oxígeno (ROS)
entre ellas el peróxido de hidrógeno (7), lo cual
ya se profundizó anteriormente.
El poder desinfectante del cloro radica en su
capacidad de oxidación en presencia de agua
(solvente presente en la disolución)
produciendo así ácido hipocloroso, es esta
forma la que tiene mayor poder de óxido
reducción; el mecanismo de acción de los
derivados clorados es doble pues actúa por
oxidación de los microorganismos y por la
combinación con proteínas dando lugar a la
formación de cloraminas, así se inactivan las
3: Hipoclorito
reacciones enzimáticas y se produce
desnaturalización de proteínas. La eficacia del
poder desinfectante se reduce con el periodo
de almacenamiento de este modo, es un
desinfectante de amplio espectro pero por un
tiempo limitado. (8 y 9)
El cultivo realizado y posteriormente sembrado
fue observado pasadas las 48 horas, esto
explica el porqué hubo crecimiento bacteriano
en la placa, aunque no es seguro, puede que
 en los primeras horas el hipoclorito inhibiera el
crecimiento bacteriano, sin embargo, y al ser
amplio el tiempo y la cantidad de
microorganismos al que está expuesto su
efecto oxidante se fue reduciendo de tal modo
que hubo buen crecimiento bacteriano
alrededor del sensidisco que contenía este
desinfectante.

Su principio activo propoxur, carbamato,

pertenece al grupo de los organofosforados los
cuales , actúan sobre el sistema nervioso de los
parásitos como inhibidores de la colinesterasa,
una enzima implicada en la transmisión de los
impulsos nerviosos. Se unen a esta enzima
bloqueandola de modo irreversible, lo que
4: Baygan
interrumpe completamente la transmisión de
impulsos nerviosos en el parásito que queda
paralizado y muere. (6) sin embargo se inhibió
el crecimiento de S. marcescens debido a que
los organofosforados son muy volátiles con
apenas unos días de poder residual y
adicionalmente es especifico para parásitos.
El componente activo del blancox es el
hipoclorito de sodio, por lo que es considerado
un desinfectante halogenado. Como se puede
observar en la imagen 2, el blancox fue una de
las sustancias desinfectantes que inhibió el
crecimiento de S. marcenscens , presentando
un halo de inhibición. Los hipocloritos actúan
inhibiendo las reacciones enzimáticas
5: Blancox
esenciales en la bacteria, ejerciendo así su
acción bacteriostática. Sin embargo, su eficacia
frente al microorganismo fue debida
principalmente a la acción esporicida que
ejercen los hipocloritos, evitando que éste
creciera alrededor del sitio de aplicación del
blancox en la placa de agar. (9)

Su principio activo es DEET, nombre común

para N, N-dietil-m-toluamida, un repelente de
insectos multiuso, su comportamiento es similar
6: Easy off Br
al de un carbamato, anteriormente ya
explicado, sin embargo esta destinado
específicamente para insectos. (6)
Esta es una solución acuosa de yodo molecular
y yoduro potásico en agua lo que facilita la
formación del anión triyoduro permitiéndole
estabilidad a la solución por el equilibrio que se
Colorantes 1: Lugol forma entre estas especies. El yodo podría
entrar en la pared celular, alterar su
permeabilidad y modificar proteínas
enzimáticas por su acción oxidante; pero al
prepararse con agua destilada su actividad
 antiséptica como yodo molecular se ve
disminuida por la escasa concentración del
mismo.(11) Por lo anterior se infiere que el lugol
podría tener acción bacteriostática sobre las
bacterias presentes en el cultivo pero su
escasa concentración en la disolución lo
impide.

En este caso hay un halo de inhibición pequeño

y en el exterior se encuentra una zona de
crecimiento bacteriano (imagen 26 ), igual que
en el lugol, el microorganismo muestra
resistencia a este colorante, ese pequeño halo
es explicado por el mecanismo del colorante el
cual en su estado básico más lipófilo entra en la
célula, donde se une a a los grupos fosfato de
los ácidos nucleicos generando tensión
estructural e impedimentos para la replicación
del ADN o traducción del ARN. Este mismo
2: Verde de mecanismo los comparten la Fucsina de Gram
malaquita y el Cristal violeta, estos tres colorantes son
clasificados como tinturas de colorantes
básicos, que incluso en pequeñas
concentraciones logran cumplir su función
antibacteriana. Es necesario revisar las
concentraciones de los colorantes usados y
correlacionar la concentración con su habilidad
antibacteriana, esto explicaría como el verde
malaquita logra un halo inhibitorio y en cambio
ni la fucsina de gram ni cristal violeta lo forman
(12).

Se observó la difusión del colorante a través del

medio de cultivo pero no un halo de
sensibilidad como en el colorante verde de
malaquita. Este colorante puede difundir a
través de la membrana por tener una
estructuras no polares como sustituyentes
fenilo. Puede combinarse con estructuras
cargadas negativamente en la célula (como el
peptidoglicano) por lo que podría tener una
actividad bacteriostática o bactericida por lo
3: Fucsina de
menos a nivel de la pared celular. Como se ha
Gram
explicado anteriormente la estructuctura de la
pared celular de la bacteria Gram (-) es menos
sensible a la acción de este compuesto porque
posee una membrana externa y además posee
pocas capas de peptidoglicano por lo cual la
actividad del colorante a nivel de la pared
celular no es significativo para bacterias Gram
(-). De este modo se explica la resistencia de
E. coli al colorante en mención. (12)

4: Cristal Violeta Se esperaba una acción antiséptica leve pero el

 resultado dio una completa insensibilidad a este
componente. En principio se creía que el cristal
violeta por su estructura como derivado de
trifenil como se observa en la imagen 10,
tuviera una actividad sobre la pared celular de
las bacterias.(13) Se explica el anterior
resultado, por la estructura de la pared de la S.
marcescens, se conoce que esta especie
bacteriana es de clasificación taxonómica
Gram(-) por lo tanto, solo contiene una capa
delgada de peptidoglicano a diferencia de las
bacterias Gram (+) y además posee una
membrana externa que le da una mayor
selectividad. La estructura del cristal violeta
tiene sustituyentes polares en los grupos fenilo
y por esta razón se pierde un poco el carácter
liposoluble de la molécula. Por ende al
enfrentarse a la membrana externa, su
estructura le dificulta la entrada y su acción
sobre la célula es ineficaz. Probablemente es
por esta razón que la actividad a nivel de la
pared celular de este microorganismo no tuvo
efectos de sensibilidad sobre el crecimiento de
S. marcescens.

Se esperaba alguna acción bacteriostática

sobre el crecimiento por parte de este
colorante, pero no se observó de esta forma.
Su posible acción bacteriostática depende de
su concentración y se debe a la modificación
del potencial óxido-reductor del medio, lo que
inhibe el desarrollo de las bacterias.(14) En
general, las bacterias Gram (+) son inhibidas
más intensamente por este grupo de sustancias
bacteriostáticas. La explicación que podemos
dar a este resultado se basa en la estructura de
5: Azul de Metileno la pared celular Gram (-) de esta bacteria.
Como se observa en la imagen, la estructura
del azul de metileno es un heterociclo
aromático con grupos polares lo que dificulta su
paso por estructuras lipídicas. la membrana
externa S. marcescens tendrá una mayor
selectividad lo que no permitirá el paso de
cierto componentes en el transporte de
membrana, por ende el azul de metileno no
pudo tener una acción sobre los procesos
metabólicos o la síntesis de membrana en los
cuales podría estar implicado este colorante.
De acuerdo con lo anterior S. marcescens no
es una bacteria sensible al azul de metileno.

Posee fenol, el cual como ya se nombró

6: Azul de
anteriormente, es un desnaturalizante de
Lactofenol
proteínas, sin embargo posee cierta de
 resistencia debido a la volatilidad de este
componente. (6)

Serratia marcescens. Es un organismo

Gram negativo (tipo Coliforme), es un
patógeno humano oportunista que se asocia
cada vez más con infecciones hospitalarias
potencialmente mortales. Es un organismo
ambiental que tiene un amplio rango de
hospederos y es capaz de infectar
vertebrados e invertebrados, así como
también plantas. En los seres humanos,
Serratia marcescens puede causar
meningitis (inflamación de la membrana que
rodea el cerebro y la médula espinal), endocarditis (inflamación del músculo cardíaco) y
pielonefritis (inflamación de los riñones). Muchas cepas son resistentes a múltiples
antibióticos y desinfectantes. (15)

Conclusión

Para concluir se puede decir que S. marcescens es una bacterio que es capaz de resistir a
métodos de control químicos como la exposición a desinfectantes y Antisépticos, por otro
lado se inhibe con la utilización de antibióticos como la doxiciclina y dicloxociclina y
amoxicilina, además los métodos físicos de control de colonias bacterianas utilizados en S.
marcescens son muy efectivos cuando se aplica temperatura ya que en todos los casos se
destruyeron las células, inhibiendo así su formación, en el caso de la congelación es un
método muy veraz para la preservación a corto plazo y la radiación es un método muy
sensible que no logra afectar la totalidad de las células permitiendo así una inhibición muy
baja para S. marcescens.

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