Ejercicio 1. Curva de desnaturalización del DNA del bacteriófago Q9 (inciso D de la práctica No.

1 del
manual de prácticas de genética microbiana8) se obtuvieron los siguientes resultados:

Tabla 3. Absorción de luz de 260 nm por el DNA de Q9 tratado a diferentes temperaturas

°C As 260nm
67 0.233
71 0.233
75 0.253
79 0.272
83 0.283
92 0.283

Elabore usted la curva de desnaturalización del DNA de Q9 y calcule su Tm y su contenido de G+C y

A+T.

Cálculos.

II.A Determinación del valor de Tm del bacteriófago Q9 mediante la siguiente ecuación.

As maxima−As minima 0.283−0.233

Asmedia = = = 0.025
2 2
Asmedia = As máxima – 0.025 = 0.283 – 0.025 = 0.258

Al interpolar el valor de la absorbancia media obtenida (0.258) en la gráfica 3, se obtiene un valor de

Tm de 76°C

II.B Obtención del %(G+C) y %(A+C) del DNA del bacteriófago Q9.

Con el valor de Tm y aplicando la siguiente formula

Tm = 69.3 + 0.41 (G+C):

Tm−69.3 76−69.3
(G+C):= 0.41 = 0.41 = 16.34
(G+C)+(A+T) = 100%

Por lo tanto:

(A+T) = 100% - (G+C)

(A+T) = 100% - (16.34)
(A+T) = 83.66%

Para evaluar diferentes parámetros tales como longitud, secuencia y %GC en un

oligodesoxiribonucleotido, se realizara el siguiente ejercicio.