ENZIMAS DE LA DIGESTIÓN

Las ENZIMAS que participan en la Digestión son:

En la BOCA, los alimentos son procesados y sufren una transformación física que afecta a su
estado pero no a su composición. Esta transformación se produce por la acción de las
GLÁNDULAS SALIVALES tienen la función de elaborar la SALIVA. Están constituídas por 3 pares
de glándulas: a) Parótidas, b) Submaxilares y c) Sublinguales, de diferente ubicación y su principal
papel lo cumplen en la Boca con la introducción del alimento, al cual empapan de saliva y lo
transforman físicamente en Bolo Alimenticio. En la saliva se encuentra una enzima llamada
AMILASA SALIVAL, que actúa sobre el almidón.

En el ESTÓMAGO, se encuentra la MUCOSA GÁSTRICA en la que existen células glandulares

productoras de MUCUS y del JUGO GÁSTRICO, que contiene ENZIMAS y ÁCIDO
CLORHÍDRICO. Su función es realizar la DIGESTIÓN ESTOMACAL o GÁSTRICA.
Las ENZIMAS presentes en el Jugo Gástrico son:
a) La RENINA o FERMENTO LAB que actúa coagulando la Caseína (Proteína de la leche) para su
posterior transformación.
b) La PEPSINA, encargada de descomponer las cadenas que constituyen las moléculas de
Proteínas, fragmentándolas en moléculas más simples llamadas Polipéptidos

En el INTESTINO DELGADO: Lo conforman el DUODENO y el YEYUNO - ÍLEON.

El DUODENO corresponde al a1ra sección del Intestino delgado. En su Mucosa existen Glándulas
productoras de Jugo Intestinal, el que contiene enzimas que actúan en el proceso digestivo. Las
ENZIMAS que se encuentran en el Jugo Intestinal son:
a) AMILASA que actúa sobre el Almidón
b) SACARASA que actúa sobre la Sacarosa o azúcar común.
c) MALTASA que actúa sobre la Maltosa.
d) LACTASA que actúa sobre la Lactosa o Azúcar de leche transformándola en sencillas moléculas
de Monosacáridos.

El HÍGADO, Glándula voluminosa del aparato digestivo tiene la función es segregar la BILIS, que al
unirse con el jugo Pancreático y el Jugo Intestinal va a producir la formación del QUILO en el
Duodeno. No contiene Enzimas y su función es EMULSIONAR las GRASAS dividiéndolas en
pequeñas gotitas.

El PÁNCREAS, Glándula del aparato digestivo que cumple la función de segregar el JUGO
PANCREÁTICO, que al unirse con la Bilis y el Jugo Intestinal también provoca la formación del
Quilo en le Duodeno. Las gotitas de grasa que se habían originado en el Hígado por acción de la
Bilis, son descompuestas por acción de una Enzima, la ESTEAPSINA o LIPASA PANCREÁTICA
que las transforma en ÁCIDOS GRASOS y GLICERINA. La transformación de Proteínas que se
había inciado en el Estómago continúa por acción de 2 Enzimas: la EREPSINA del Jugo Intestinal
y la TRIPSINA contenida en el Jugo Pancreático, las que descomponen a los Polipéptidos en
moléculas sencillas de Aminoácidos.
  Prueba TSI (Triple Sugar Iron ó Triple Azúcar Hierro)
El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad de producción de
ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un único medio. Tambien permite la
identificación de la producción de SH2.
Esta es una prueba específica para la identificación a nivel de género en la
familia Enterobacteriaceae, con objetivo de diferenciar entre:
 bacterias fermentadoras de la glucosa
 bacterias fermentadoras de la lactosa
 bacterias fermentadoras de sacarosa
 bacterias aerogénicas
 bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgánicas que contengan azufre.

Prodedimiento:
Inocular los tubos de TSI con punta (alambre recto). Para eso introducir la punta hasta 3 a 5
mm. del fondo del tubo. Tras retirar el alambre del fondo, estriar el pico con un movimiento
hacia uno y otro lado. Incubar a 35° durante 24 horas. Posteriormente se debe medir el pH de
los cultivos.
Resultados:
 Pico alcalino/fondo alcalino : no hay fermentación de azucares. Característica de bactrias no
fermentadoras como Pseudomonas sp.
 Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada,lactosa ni sacarosa fermentadas. Shigella spp.
 Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada, ni lactosa ni sacarosa fermentadas, producción de ácido
sulfhídrico. Salmonela spp.
 Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa fermentadas. Puede producirse SH2 o
no. Escherichia coli.

A estos resultados se les agrega el resultado de la producción de gas.

 Rojo Metilo
Una de las características taxonómicas que se utilizan para identificar los diferentes géneros
de enterobacterias lo constituyen el tipo y la proporción de productos de fermentación que se
originan por la fermentación de la glucosa. Se conocen 2 tipos generales: La fermentación
ácido-mixta y la fermentación del 2,3 butanodiol. En la fermentación ácido mixta se forman
fundamentalmente láctico, acético y succínico, además de etanol, H2 y CO2. En la vía del
butanodiol se forman cantidades menores de ácido (acetato y succinato) y los principales
productos son el butanodiol, etanol, H2 y CO2.
El rojo de metilo es un indicador de pH con un intervalo entre 6,0 (amarillo) y 4,4 (rojo), que se
utiliza para visualizar la producción de ácidos por la vía de fermentación ácido mixta.
Procedimiento:

Inocular el caldo Rojo Metilo con un cultivo puro de no más de 24 horas del microorganismo
en estudio. Incubar a 35°C durante 48 horas. Luego de finalizado el tiempo de incubación
agregar unas gotas del reactivo de rojo de metilo. La prueba es positiva si se desarrolla de un
color rojo estable. Esto indica que la producción de ácido es suficiente para producir el viraje
del indicador y el microorganismo fermentó la glucosa por la vía de ácido mixta. Un color
anaranjado, intermedio entre el rojo y el amarillo no es considerado como positivo.

Las enterobacterias son anaerobios facultativos que usan la glucosa en dos fases:
1º Degradan la glucosa por la vía oxidativa hasta que consumen el oxigeno del
medio. 2º Metabolizan la glucosa por la vía fermentativa, que puede ser de dos
tipos:

- Fermentación ácido mixta: los productos finales son ácidos orgánicos, que
disminuyen el pH del medio, lo que se manifiesta con el Rojo de metilo.

- Fermentación butilén-glicólica: los productos finales, como butanodiol y etanol,

son neutros y producen como intermediarios acetoina, que puede detectarse con
el reactivo de Voges Proskauer, el react. A que es KOH, y el B alfa-naftol, estos
reaccionan con la acetoina originando coloraciones violáceas.

Para realizar el ensayo, dividimos el medio inoculado y que ha incubado tres días
en dos tubos (la mitad en cada uno) y revelamos con los reactivos.
 Indol
El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. Las
bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptofano con
producción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. La producción de indol es una característica
importante para la identificación de muchas especies de microorganismos. La prueba de indol
está basada en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo
aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído. Este es el principio activo de los reactivos de
Kovacs y Ehrlich. El medio de cultivo utilizado debe ser rico en triptofano.
Procedimiento:
Inocular el caldo triptofano con el organismo en estudio e incubar a 35°C durante 18 a 24
horas. Al finalizar este período, añadir 5 gotas de reactivo de Kovacs por la pared interior del
tubo. El desarrollo de un vivo color rojo fucsia en la interfase del reactivo y el caldo, segundos
después de añadir el reactivo indica la presencia de indol y una prueba positiva.
Resultados:
(+) Escherichia coli
( - ) Klebsiella pneumoniae

 Prueba de la Catalasa
El Objetivo es buscar la presencia de la enzima catalasa
El peróxido de hidrógeno se produce al utilizar la bacteria el azúcar por vía oxidativa. Al ser
éste un compuesto muy oxidante las bacterias la eliminan mediante la producción de la
enzima catalasa (H2O2 -> H2O + ½ O2).
Prodecimiento:

Agregamos aproximadamente 5 ml. de peróxido de hidrógeno al 3% a un tubo de ensayo

previamente esterilizado a continuacion tomamos una muestra de la cepa del microorganismo
a estudiar y la introducimos por el tubo de ensayo, la muestra solamente debe acercrse a la
muestra de la solucion liíquida de peróxido de hidrogeno y debemos observar la reacción de
esta.

La prueba se considera como positiva si observamos burbujas de oxígeno.

Resultados:
(+) Staphylococcus aureus
( - ) Streptococcus spp.