a. Pembuatan media agar untuk kultur bakteri P. gingivalis
Media kultur bakteri P.gingivalis adalah BHI-A yang diperkaya hemin dan vitamin K. untuk membuat 100 ml BHI-A dibutuhkan hemin solution sebanyak 50μl, vitamin K 10μl, BHI-A 37 gram dalam 100 ml aquadest steril dan yeast extract 500μl. Media tersebut dibagi empat, lalu dimasukkan kedalam petridish @25 ml dan ditunggu sampai padat. Satu ose Bakteri P. gingivalis murni (F0) diinokulasikan pada masing-masing petridish kemudian diinkubasi selama 2x24 jam.
b. Pembuatan suspensi bakteri P. gingivalis
Media cair 10 ml dibuat dari 0,37 gram BHI-B , 1μl vitamin K, 5μl hemin dan 50μl yeast ekstrak. P.gingivalis Media cair tersebut dibagi menjadi 2 bagian @ 5 cc, pada masing-masing media cair diberi satu ose bakteri P.gingivalis yang berasal dari pembiakan di media agar BHI-A. suspensi bakteri P. gingivalis yang didapat lalu dimasukkan desicator dan dinkubasi selama 2x24 jam. Setelah diinkubasi, suspensi bakteri P. gingivalis diukur konsentrasinya hingga didapatkan 1,5x106. Kemudian dibuat preparat dengan pengecatan gram untuk mengetahui bahwa bakteri dalam keadaan baik dan tidak terkontaminasi.