Alejandra Palacio 21/09/2017

Ana Belén Álvarez Biología SL

Laura S. Quintero

PRACTICA DE LABORATORIO – OBSERVACIÓN DE CROMOSOMAS DE AJO

Marco teórico:

En esta práctica de laboratorio, se busca principalmente observar mediante las raíces de

Allium sativum (ajo), los cromosomas de este e identificar si sus células se encuentran en
algún punto de la división celular. Esto, con el objetivo de adquirir una mayor comprensión
de los procesos por los que pasan los cromosomas dentro de la célula.

Para ello, hay que tener en cuenta que los cromosomas son estructuras que se
encuentran en el núcleo de una célula, encargándose de transportar largos fragmentos de
ADN. Existen los cromosomas bacterianos, los eucariotas, los autosómicos y los
sexuales. Los cromosomas autosómicos son los pares cromosómicos que no tienen
información ligada a las características sexuales; por otra parte, los cromosomas sexuales
son un par cromosómico que denomina el sexo, y la información ligada a este. En esta
ocasión se estarán tratando cromosomas eucariotas y autosómicos debido a que se trata
del estudio de una planta.

De igual forma, se deben de tener en cuenta las características de los cromosomas, por
ejemplo, su longitud, la posición del centrómero, ya sea metacéntrico, sub-metacéntrico,
acro-centrico o telocentrico, debido a que estos ayudan con la organización y la
diferenciación entre ellos, además de ello, están los telómeros que son regiones de ADN
no codificante ubicado en los extremos de los cromosomas.

Los cromosomas cuentan con una composición de Ácido Desoxiribo-Nucleico (ADN), por
la unión de aminoácidos con orden y secuencia de nucleótidos distintos, identificando así
a cada especie.

Método:

1. Mantener durante 3 o 4 días a una temperatura de 25°C los bulbos de ajo con su base
en agua.

2. Finalizado este lapso de tiempo, cortar las raíces de color amarillo, de

aproximadamente 5mm, del bulbo utilizando un cortador y con ayuda de pinzas
trasladarlas a un vidrio de reloj.

3. Las puntas de las raíces se ponen en una mezcla de colorante que se adhiere a los
cromosomas y de ácido que desliga las conexiones entre las paredes celulares. Diez
partes de aceto -orceína con una parte de 1,0 mol dm-3 de ácido clorhídrico
proporcionarán buenos resultados.
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4. Calentar las raíces con la mezcla de colorante y ácido en una placa calefactora a 80|C
durante 5 minutos. Colocar una de las puntas de las raíces en un portaobjetos de
microscopio, cortar por la mitad y descartar la mitad más alejada de la terminación de la
raíz.

5. Agregar una gota de colorante, colocar un cubreobjetos y presionar la punta de la raíz

para esparcir las células, formando una capa de una sola célula de grosor. Así se pueden
examinar y contar los cromosomas y también se pueden observar las distintas fases de la
mitosis.

6. De la observación en el microscopio es necesario tomar fotografías. Cada fotografía

debe ir acompañada de una descripción breve de lo que se está observando.

Materiales:

 Bulbo de ajo  Portaobjetos

 Regla ± 01mm  Microscopio
 Vidrio de reloj  Cubreobjetos
 Aceto – orceina  Cortador
 Ácido Clorhídrico 1,0 mol dm-3  Pipeta Pasteur
 Placa calefactora  Aceite de inmersión

Resultados:

100x 40x
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En esta imagen se logran divisar las células
La imagen en la parte superior expone parte individuales de la raíz de ajo. Sin embargo,
de la etapa de Anafase. Aunque no se logran dentro de estas no se evidencia algún
ver las otras cromatidas hermanas que se proceso de la división celular.
mueven hacia el otro extremo, en la imagen,
si se evidencia uno de los lados con esta En ciertas de estas células se logra ver
separación. levemente el núcleo, mas no un proceso de
división de esta.
De igual forma, en la parte inferior derecha de
la microscopia se logra divisar un núcleo que Para esta imagen se utilizó un aumento de
no aparenta estar en ninguna fase de 40x en el microscopio.
división.
Para esta imagen se utilizó un aumento de
100x en el microscopio con ayuda de aceite
de inmersión para mayor claridad de la
imagen.

Análisis:

En nuestras observaciones del laboratorio se identificó que no se pudieron visualizar una

gran cantidad de células en el proceso de mitosis, esto puede ser tanto por un mal
proceso en el desarrollo del método.

Esto pudo haber ocurrido por la mala limpieza de los materiales utilizados que pudo haber
influenciado el contacto correspondiente entre las sustancias y el ajo. Se debe tener en
cuenta también el manejo del microscopio con el fin de eliminar posibles errores
sistemáticos en el procedimiento, por ejemplo al cambiar de aumento o al manejar la
platina. Por otro lado, también es importante tener cuidado con la muestra pues es posible
que el corte en el lugar no correspondiente o el uso de la parte del ajo que no estaba
cerca de la raíz, el hecho de que las puntas de las raíces con células de mitosis son de
color amarillo, y las raíces utilizadas eran blancas, haya influenciado los resultados y las
imágenes que fueron visibles en el microscopio. Por último, se recomienda prestar
atención a la manera en la que se suministran las diferentes sustancias a la muestra para
que ésta no se vea afectada por un error de pulso o de cantidad en la adición de la
sustancia.

Estas pudieron ser varias de las razones por las cuales no se pudieron observar un mayor
número de células en diferentes fases de la mitosis, y por lo tanto una gran cantidad de
cromosomas.
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Conclusión

Durante la práctica no se logró ver una gran cantidad de estructuras como se esperaba y
en su mayor parte no hubo células en proceso de división por mitosis.

A pesar de lo anterior, se pudo apreciar la imagen de una célula en la anafase de la

división por lo que se puede concluir de que los errores influenciaron la mayor parte de la
práctica pero no obstruyeron la visibilidad de la célula. Esto significa que la intervención
de los errores tanto sistemáticos como aleatorios no impidió en su totalidad el desarrollo
completo de la práctica. Este resultado se puede interpretar como una invitación a mejorar
en el manejo de cada una de las dificultades para así llegar a obtener lo requerido y llevar
a cabo buenos resultados en el laboratorio.

Preguntas

8. En las fotos y las observaciones se puede distinguir las similitudes entre una de las
fases de la mitosis, esta es la anafase, pues en ambos (fotos y observaciones) se
visualiza como los cromosomas están siendo direccionados a polos de la célula. Por otra
parte, no se pudieron visualizar las demás fases de la mitosis.

9. Los cromosomas son difíciles de ver en dicho caso, sin embargo, se ve cómo se van
reuniendo a uno de los lados de dicha célula.

10. Por la resolución y claridad de la imagen no se puede contar exactamente cuentos

cromosomas tenía la célula observada. Sin embargo, se alcanzan a visualizar entre 4 a 6
cromosomas en la célula.

11. La fase que se pudo reconocer en nuestras observaciones fue la anafase.

12. Lamentable no alcanzamos a llegar a comprobar si se pueden observar los

cromosomas con cualquier trozo de ajo, del mismo modo no pudimos elaborar el proceso
con un tejido de cebolla.

13. En la parte superior de la imagen se logra ver parte de la anafase. Esto se puede
deducir a partir de la distinción de la mitad de las cromátidas hermanas siendo separadas.
Si se compara con la imagen del laboratorio, la figura mostrada en la segunda parte de la
anafase se asemeja a la parte superior de la microscopía.

14. Identifique las fases señaladas con un círculo

 En el medio se encuentra la interfase, en la cual la célula duplica su material

genético y crece.
 Al lado de la interfase está la profase, donde se condensa el material genético y el
desarrollo bipolar del huso acromático.
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 Más arriba y a la derecha se encuentra la metafase, en la cual los cromosomas se
alinean en el ecuador de la célula y los dos cinetocoros de cada cromosoma se
unen a los microtúbulos del huso.
 En la esquina superior izquierda se encuentra la anafase, en la que las cromátidas
hermanas se separan y son jaladas hacia los polos opuestos de la célula.
 De lado derecho está la telofase, donde la célula comienza a restablecer sus
estructuras normales.
 En la etapa mostrada en la esquina superior derecha la célula ya ha terminado de
dividirse y acaba de ocurrir la citocinesis en la cual el citoplasma se divide para
formar dos nuevas células.

Referencias

Audesirk,T.,& Audesirk, G. (1999). Biology: Life on Earth. Upper Saddle River, NJ: Prentice
Hall.