GC-MS adalah kombinasi dari dua teknik untuk membentuk satu metode tunggal untuk

menganalisis campuran bahan kimia. Kromatografi gas, khususnya kromatografi gas-cair,

melibatkan sampel yang diuapkan dan disuntikkan ke kepala kolom kromatografi. Sampel
diangkut melalui kolom dengan aliran fase gerak inert dan gas. Kolom itu sendiri berisi fase
diam cair yang teradsorpsi ke permukaan padatan inert. Parameter waktu retensi (RT)
didefinisikan sebagai waktu yang dibutuhkan senyawa untuk melakukan perjalanan dari port
injeksi ke detektor.

Dalam GC-MS, sampel berada dalam fase uap, dan kedua teknik tersebut menggunakan
jumlah sampel yang kira-kira sama (biasanya <1 ng). Keakuratan kuantitatif dikendalikan
dengan kalibrasi keseluruhan metode analisis. Dengan menggunakan standar internal isotop,
reproduktifitas data terukur dengan menggunakan kromatografi gas harus <1% standar deviasi
relatif. Dalam kasus minyak nabati, ini bisa dicapai dalam praktek.

yang sesuai [13,12]. Metodologi semacam itu biasanya digunakan untuk menyiapkan
FAME dari lipid baik melalui hidrolisis dasar yang diikuti dengan metilasi FAs bebas (FFAs)
atau dengan transesterifikasi lipida menggunakan asam atau basa yang dikatokrolisis sebagai
metode cepat dan sederhana [3,13,15]. Namun, masing-masing prosedur ini memiliki kelebihan
dan kekurangan masing-masing.
Selain itu, untuk mendapatkan hasil kuantitatif yang akurat, perlu untuk mengatasi
kesulitan prosedural yang potensial, seperti konversi FA yang tidak lengkap ke FAME,
pembentukan artefak dan kontaminasi, perubahan profil FA asli selama esterifikasi (isomer
posisional dan / atau geometris, yaitu , Isomer TFA) dan kerusakan kolom GC berikutnya
Sebuah detektor ionisasi nyala (FID) adalah detektor lain yang digunakan dengan
kromatografi gas dan dianggap sebagai salah satu detektor paling sensitif untuk hidrokarbon dan
digunakan secara universal untuk senyawa organik. FID umumnya digunakan karena biaya dan
operasi yang murah, serta kemampuan mendeteksi berbagai konsentrasi senyawa organik,
mencakup 7 urutan besarnya dengan respons linier. Namun, kelemahan menggunakan FI D
adalah bahwa ia memiliki tahap pembakaran yang destruktif dan terbatas pada sampel organik.
Dalam detektor ionisasi nyala api, sampel melewati nyala hidrogen dimana reaksi pembakaran
terjadi yang mengarah pada produksi ion yang menghasilkan sinyal listrik terukur (Gambar 1.4).
Ada hubungan proporsional antara ion yang dihasilkan dan konsentrasi senyawa organik dalam
aliran gas. Ion-ion tersebut dideteksi dengan menggunakan dua elektroda yang dipelihara pada
berbagai potensi untuk menghasilkan arus dan untuk menarik ion. Elektroda positif ditempatkan
pada kepala nosel, yang bertanggung jawab untuk mengusir kembali ion karbon yang dihasilkan
oleh nyala api. Sedangkan elektrode negatif ditempatkan di atas api dan juga disebut sebagai
pelat kolektor. Hal ini bertanggung jawab untuk menarik ion dan menghasilkan arus saat
menabrak piring. Ion kemudian dideteksi oleh sebuah electrom yang mengirimkan sinyal ke
integrator yang bertanggung jawab untuk mengintegrasikan area puncak untuk menghasilkan
kromatogram waktu retensi versus intensitas.
Namun, kelemahan utama adalah bahwa hal itu hanya berlaku pada sampel volatil yang
tidak terdekomposisi pada suhu tinggi.
 Kromatografi gas digunakan untuk memisahkan campuran kimia kompleks menjadi
komponen individual. Ini dibagi menjadi dua fase, fase gerak dan fase diam, di mana fase gerak,
yang juga dikenal sebagai gas pembawa, biasanya merupakan gas inert seperti argon, helium
atau nitrogen tergantung pada jenis detektor yang digunakan. Fungsi gas pembawa adalah
mengatur dan memasok tekanan ke seluruh instrumen, dan untuk memindahkan analit melintasi
kolom. Pemisahan dengan GC dicapai dengan memasukkan sejumlah kecil sampel melalui split
atau inlet tanpa belah. Kedua jenis inlet ini adalah teknik injeksi yang berbeda yang mengangkut
sampel ke kepala kolom

Biasanya kromatografi gas menunjukkan puncak yang tajam dan simetris. Meskipun
demikian, resolusi kromatografi gas sangat bergantung pada panjang kolom dan polaritas fasa
diam yang digunakan. Pada dasarnya, pilihan jenis kolom kapiler, polaritas fase stasioner dan
panjang kolom sangat penting untuk mendapatkan resolusi dan pemisahan yang baik dalam
analisis kromatografi gas.

Flion ionization detector (FID) adalah detektor yang paling umum dan banyak digunakan
dalam analisis kromatografi untuk deteksi asam lemak bebas. Selain itu, detektor FID juga
mampu mendeteksi berbagai senyawa sekecil konsentrasi tingkat pictogram.
Biasanya kromatografi kromatografi gas menunjukkan puncak yang tajam dan simetris.
Meskipun demikian, resolusi kromatografi gas yang ditafsirkan sangat bergantung pada panjang
kolom dan polaritas fasa diam yang digunakan. Pada dasarnya, pilihan jenis kolom kapiler,
polaritas fase stasioner dan panjang kolom sangat penting untuk mendapatkan resolusi dan
pemisahan yang baik dalam analisis kromatografi gas. Masalah dengan analisis kromatografi gas
adalah mungkin menghadapi kesulitan saat berhadapan dengan sampel non-volatile
dibandingkan dengan yang mudah menguap. Untuk memperbaiki keterbatasan ini, asam lemak
bebas harus diesterifikasi sebelum disuntikkan ke kolom kromatografi gas. Dalam GC / FID,
perbandingan waktu retensi antara standar dan sampel digunakan untuk mengidentifikasi asam
lemak bebas Namun, kompleksitas komposisi asam lemak dan keterbatasan standar asam lemak
jelas merupakan kesulitan utama untuk mengidentifikasi beberapa puncak dengan detektor FID
konvensional. Identifikasi dengan menggunakan GC / FID mungkin juga tercermin dari adanya
kontaminan atau senyawa penggabungan. Selain itu, penggunaan GC / FID memerlukan standar
dan standar yang memadai tidak tersedia untuk beberapa asam lemak untuk senyawa asam lemak
yang rumit seperti asam lemak tak jenuh ganda. Oleh karena itu, analisis asam lemak dapat
dilakukan dengan mengubah asam lemak bebas menjadi metil ester asam lemak (FAME)
sebelum disuntikkan ke kolom kromatografi gas. Kombinasi GC / FID dan GC / Mass
spectrometry (GC / MS) dapat diterapkan untuk memastikan identifikasi puncak yang tepat
sebesar 37,38. Beberapa karya telah dilaporkan dalam literatur untuk penentuan asam lemak
bebas dalam berbagai jenis minyak sawit dan minyak nabati39-41
 Analisis GC kualitatif dan kuantitatif yang optimal dari campuran kompleks
mengandaikan: (1) resolusi yang baik, seperti yang ditunjukkan oleh puncak yang tajam dan
simetris; (2) pengulangan dan reproduktifitas waktu retensi yang tinggi; (3) ketepatan dan
akurasi tinggi dalam kuantisasi berdasarkan pengukuran area puncak, yaitu tidak ada
diskriminasi komponen melalui volatilitas, polaritas atau konsentrasi; (4) dekomposisi termal
dan katalitik minimum komponen sampel sensitif [17]. Penggunaan kolom kapiler leburan silika
dengan inertness permukaan yang ditingkatkan, stabilitas termal dan resolusi [18]. Terbaik
memenuhi sebagian besar persyaratan ini. Di
GC kapiler resolusi puncak, dinyatakan dalam bentuk efisiensi kolom, faktor pemisahan
dan retensi [19]. Terutama dipengaruhi oleh polaritas fasa diam, panjang kolom, diameter dalam
dan ketebalan film [20, 21,
22]. Berbagai kolom dengan berbagai sifat tersedia. Selain itu, kolom silika silika sangat
sesuai dalam pekerjaan praktis karena fleksibilitas dan kesederhanaan dalam penanganan dan
hubungan yang mudah dengan GC dan massa.
spektrometer [23]. Untuk meningkatkan sensitivitas analisis GC, penting juga untuk
menguji pengaruh laju alir gas pembawa, serta aliran gas dalam FID, untuk mengurangi
kebisingan dari nyala hidrogen [24]. Gas pembawa, biasanya hidrogen atau helium, dan
kemurniannya juga dapat mempengaruhi resolusi [20

Prosedur yang mapan ini digabungkan dengan deteksi ionisasi nyala (GC-FID) sangat
efisien dan cepat bila campuran kompleks dengan rentang berat molekul yang luas harus
dianalisis.

Mengapa pakai GC FID

Beda detektor
Lain kelebihan dan kekurangan (sensitifitasnya dll)

Kromatografi gas - spektrometri massa (GC-MS) adalah alat tunggal yang paling penting
dan teknik yang sangat sesuai untuk identifikasi dan kuantifikasi senyawa organik volatil dan
semi-volatil dalam campuran kompleks. Teknik ini sangat berguna untuk penentuan berat
molekul dan komposisi unsur senyawa tersebut. Kromatografi gas dan instrumen kromatografi
cair banyak disukai dalam analisis asam lemak secara real-time, terutama dalam penelitian skala
mikro. Kromatografi digunakan dalam pemisahan berbagai lemak biasa
asam dan senyawa terkait yang ditemukan pada jaringan hewan dan tumbuhan. ini
juga digunakan dalam kuantifikasi polutan dalam air minum, air limbah dan
atmosfer, kuantifikasi obat-obatan dan metabolitnya dalam darah dan urin
 baik aplikasi farmakologis maupun forensik, identifikasi senyawa organik yang tidak
dikenal di tempat limbah berbahaya, identifikasi produk reaksi oleh ahli kimia organik sintetis
dan analisis produk industri untuk pengendalian mutu. Pembuatan kolom kapiler tabung terbuka
memberikan kemajuan penting dalam isolasi kromatografi gas dari asam. Namun, metode ini
memiliki kelemahan dengan akurasi yang lebih rendah, yang dapat diatasi dengan menggunakan
kolom kapiler silika silika dan fasa cair.

Sementara tingkat tinggi asam lemak jenuh diinginkan untuk meningkatkan stabilitas
minyak, di sisi lain nutrisi mereka menjadi tidak diinginkan, karena kadar asam lemak jenuh
yang tinggi sering dianggap memiliki mempengaruhi peningkatan konsentrasi low density
lipoproteins (LDL), yang mempengaruhi rasio LDL terhadap HDL (high density lipoprotein),
mempromosikan pakaian dan proliferasi otot polos vaskular [12, 13]. Diet dengan meningkatnya
asupan asam linoleat dan linolenat meningkatkan kolesterol HDL dan menurunkan kolesterol
LDL, sementara asupan asam oleat yang lebih tinggi menurunkan kolesterol LDL, namun tidak
mempengaruhi kadar kolesterol HDL [14]
memprediksi sifat-sifat dari minyak tertentu, dan untuk mengetahui apakah minyak
tersebut memberikan sifat yang diharapkan atau tidak.
Komposisi jenis asam lemak bebas dalam minyak akan menentukan kualitas dan
kemudahan dalam mengalami kerusakan minyak. Oleh karena itu, pengetahuan mengenai
komposisi asam lemak dari minyak menjadi penting untuk menentukan
Umumnya, kadar asam lemak tidak jenuh yang tinggi menyebabkan minyak menjadi
semakin rentan terhadap kerusakan oksidatif, sehingga

asam lemak jenuh dengan kadar yang tinggi juga diperlukan untuk meningkatkan
stabilitas minyak. Namun, dari segi nutrisi, kadar asam lemak jenuh yang tinggi menjadi tidak
diinginkan, karena sering dianggap dapat mempengaruhi kesehatan seperti memicu penyakit
kolesterol. Oleh karena itu, kandungan asam lemak dan rasio antara asam lemak tak jenuh dan
asam jenuh menjadi parameter penting yang harus dianalisis agar dapat mengidentifikasi
karakteristik produk seperti stabilitas dan sifat kimiawinya, menentukan nilai gizi dan kualitas
dari minyak tertentu, serta untuk mengembangkan formulasi makanan, pengolahan makanan dan
produk baru (Kostik et al. 2013; Sathianathan et al 2014; Kelly et al. 2014; Taufik et al. 2016).

Oleh karena itu,

( Al-Qudah, 2011; Basconcillo dan McCarry, 2008; Christie dan Han, 2010; Jumat et al.,
2006). Biasanya, kebanyakan metodologi yang digunakan untuk menentukan FA adalah
ekstraksi lipid yang diikuti oleh konversi FA menjadi metil ester (FAME) yang sesuai (Brondz,
2002; Delmonte et al., 2009). Metodologi semacam itu biasanya digunakan untuk menyiapkan
FAME dari lipid
 baik dengan hidrolisis dasar yang diikuti dengan metilasi FAs bebas atau dengan
transesterifikasi lipida menggunakan asam atau basa yang dikatalisis sebagai metode cepat dan
sederhana (Alrouh et al., 2012; Delmonte dan Rader, 2007). Namun, masing-masing prosedur ini
memiliki kelebihan dan kekurangan masing-masing
Teknik yang paling banyak digunakan untuk menganalisis komposisi asam lemak adalah
(Martínez et al., 2009). Deteksi ionisasi nyala cukup untuk aplikasi analisis asam lemak (Petrovic
et al., 2010). Teknik ini berdasarkan pada AOAC Official Method 991.39 (AOAC, 2012).
Metode resmi ini pada dasarnya memberikan panduan yang jelas untuk menganalisis komposisi
asam lemak dalam minyak ikan.

Beberapa metode telah diperkenalkan untuk mengetahui komposisi asam lemak minyak nabati
dan hewani. Yang paling
Teknik yang banyak digunakan untuk menganalisis komposisi asam lemak adalah kromatografi
gas yang digabungkan dengan detektor ionisasi nyala (GC-FID) (Martínez et al., 2009). Deteksi
ionisasi nyala cukup untuk aplikasi analisis asam lemak
(Petrovic et al., 2010). Teknik ini berdasarkan pada AOAC Official Method 991.39 (AOAC,
2012). Metode resmi ini pada dasarnya memberikan panduan yang jelas untuk menganalisis
komposisi asam lemak dalam minyak ikan.