Transkripsi

Pada organisme eukariot, terdapat DNA pada nukleus walaupun terjadinya sintesis
protein pada sitoplasma. DNA tidak dapat menyediakan template secara langsung untuk
sintesis protein. Strand tunggal DNA disebut strand sense yang digunakan sebagai template
untuk sintesis mRNA atau pre-messenger RNA yang nantinya akan diterjemahkan. Peristiwa
ini disebut transkripsi. mRNA membawa informasi genetik dari nukleus ke ribosom pada
sitoplasma. Sintesis mRNA pada nukleus selanjutnya akan dikirimkan pada sitoplasma yang
direkam dengan eksperimen pulse-labelling, eksperimen pulse-chase labelling, dan
autoradiografi. Sebelum dilakukan autoradiografi, gangguan radioaktifitas ditemukan untuk
ditransportasikan ke sitoplasma. Proses eksperimen pulse-chase labelling ialah (1)
sedimentasi sel dari medium radioaktif, (2) penambahan kelebihan prekusor nonradioaktif
karena mencairkan prekusor, konsentrasi radioaktif diabaikan.
Bukti kuat terdapat pada percobaan yang menggunakan fag T2 yang menginfeksi sel
E-coli. Protein fag disintesis di ribosom pada sel yang menginfeksi sebelumnya. Penentuan
sekuen asam amino polipeptida bukan bagian integral dari struktur ribosom. E. Volkin dan L.
Asirachan mendemonstrasikan bahwa terdapat sintesis RNA setelah penginfeksian fag T2 tapi
hidupnya pendek. Molekul RNA memiliki komposisi nukleotida yang sama degan DNA fag
T2 dan tidak sama dengan DNA inang. RNA yang tidak stabil ditunjukkan pada segmen
strand DNA pada kromosom fag. Fag mRNA yang diisolasi menunjukkan sintesis langsung
protein fag spesifik dengan sintesis protein.
Molekul RNA polymerase yang lengkap yang berisi 𝛼-polypeptida disebut holoenzim
dan 1 polipeptida pada setiap tipe: 𝛽, 𝛽′, 𝜔 dan 𝛼. Setelah inisiasi, sintesis RNA, factor 𝛼
dilepaskan dan terjadi elongasi yang dikatalis core enzyme (enzim teras) yang tersusun dari
2𝛼, 𝛽, 𝛽′, 𝜔. Fungsi sigma yaitu mengikat RNA polymerase untuk membenarkan situs inisiasi
(promoter) pada DNA.RNA core polymerase (tidak adanya sigma) akan mengkatalis sintesa
RNA dari template DNA in vitro. Holoenzim (adanya sigma) menginisiasi in vitro hanya pada
situs yang digunakan in vivo.
Dua sekuen pendek yang tidak memiliki promoter akan terkonservasi. Titik tengah
dari sekuen terkonservasi terjadi kira-kira 10 dan 35 pasang nukleotida sebelum transkripsi
situs inisiasi. Peristiwa ini disebut -10 sequence (pribnow box) dan -35 sequence (recognition
sequence). -10 sequence adalah TATAAT. -35 sequence adalah TTGAGA.
Terdapat tiga RNA polymerase yang berbeda pada eukariotik yaitu RNA polymerase
I, II, III. RNA polymerase I terletak pada nucleolus dan mengkatalis sintesis rRNA. RNA
polymerase II dan III berada pada nukleoplasma. RNA polymerase III memberikan gen pada
RNAs dan tRNAs. Pelekatannya terletak diantara gen dan dimulai pada 5’ atau upstream.
 RNA polymerase II mentranskrip gen struktural inti yang bertanggung jawab dalam
sintesis mRNA. Promoter atau RNA polymerase II terletak pada pasangan nukleotida 25 dan
75 sebelum transkripsi dimulai. Sekuen untuk -25 sequences (Hognes box/ TATA box) dan -75
sequence (CAAT box) yaitu TATAAAA dan GGCCAATCT.
Mekanisme sintesis RNA analog dengan sintesis DNA kecuali (1) prekusor
ribonukleosida tripospat (2) segmen terbatas dari strand tunggal yang dikopi (3) RNA
pelengkap yang dilepas dari template akan disintesis.
Terminasi dari transkripsi terjadi pada sekuen terminator khusus pada DNA.
Kebanyakan terminasi mRNA prokariotik dengan sekuen 5’UUUUUUA3’ merangsang
sekuen 3’AAAAAAU5’ pada untai sense. Sinyal terminasi transkripsi menyediakan
keberadaan protein, dikenal dengan rho.
Walaupun hanya satu strand yang ditranskripsikan, tapi kedua strand berpartisipasi
pada transkripsi dengan mRNA yang ditranskripsikan dari satu mRNA ke mRNA lain.

Question
1. Ada berapa macam RNA polymerse pad eukariotik?
2. b
3. c
4. d
Answering
1. Terdapat tiga RNA polymerase yang berbeda pada eukariotik yaitu RNA polymerase
I, II, III. RNA polymerase I terletak pada nucleolus dan mengkatalis sintesis rRNA.
RNA polymerase II dan III berada pada nukleoplasma. RNA polymerase II
mentranskrip gen struktural inti yang bertanggung jawab dalam sintesis mRNA. RNA
polymerase III memberikan gen pada RNAs dan tRNAs.