Anda di halaman 1dari 10

TUGAS TEKNOLOGI OBAT BAHAN ALAM

“ FORMULASI DAN KARAKTERISASI


NANOPARTIKEL KAEMPFEROL “

Disusun Oleh :

NAMA : NUR ALIFAH


NIM : 17.01.357
KELAS : TRANSFER C (2017)

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI


MAKASSAR
2018
Formulasi dan Karakterisasi Nanopartikel Kaempferol
Ganju Kuldeep1, Ganju Eisha2
1
Kepala Sekolah, Sagar Institute of Pharmacy and Technology, Bhopal, 462001.
2
Asst. Prof., Departemen Farmasi, Sekolah Farmasi, Universitas Rakyat,
Bhopal, 462026.

Abstrak
Nanopartikel Kaempferol dibuat menggunakan berbagai macam polimer dengan
rasio PLGA (50:50) sebagai polimer, menggunakan metode pemindahan pelarut.
Nanopartikel yang disiapkan diskrining untuk beberapa studi seperti penentuan
ukuran dan bentuk menggunakan penghamburan cahaya dan SEM. Profil
antioksidan in-vitro dari nanopartikel yang disiapkan dipelajari dan dibandingkan
dengan metode Kaempferol bebas menggunakan metode DPPH. Nanopartikel
dengan ukuran seragam disiapkan, rasio polimerEE % adalah 20 : 1 ternyata
maksimal dan Aktivitas mencari radikal bebas dari Kaempferol yang terjebak
dalam nanopartikel bahkan meningkat ketika dibandingkan dengan bentuk
bebasnya.
Kata kunci: Nanopartikel, Kaempferol, PLGA & antioksidan.

I. Pendahuluan
 Kaempferol adalah flavonotip alami dari flavonoid, itu telah diisolasi dari
teh, brokoli, Delphinium, Witch-hazel, grapefruit, kol, kale, beans, endive,
daun bawang, tomat, stroberi, anggur, brussels sprouts, apel, Kaempferia
galanga, Opuntiaficus-indica var. saboten dan sumber tanaman lainnya.
 Kaemferol berwarna kuning padat kristalin dengan titik leleh 276-278° C.
 Kaempferol dan glukosidanya dapat diisolasi dari ekstrak metanol dari
daun pakis Phegopteris connectilis.
 Tujuan Penelitian :
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk meng-enkapsulasi kaempferol
dalam polimer nanopartikel, menggunakan poli kopolimer biokompatibel
(D, L lactide-co-glycolide) (PLGA) dan karakterisasi sifat fisikokimia dan
antioksidannya. Salah satu Aspek terpenting dari penelitian ini adalah
penentuan efisiensi enkapsulasi dan profil pelepasan invitro.
 Manfaat dan Kegunaan Kaempferol :
1. Beberapa penelitian epidemiologi ditemukan hubungan positif antara
konsumsi makanan yang mengandung kaempferol dan mengurangi
risiko mengembangkan beberapa kelainan seperti kanker dan penyakit
kardiovaskular.
2. Sejumlah penelitian preklinis telah menunjukkan kaempferol dan
beberapa glikosida kaempferol memiliki berbagai macam aktivitas
farmakologis, termasuk antioksidan, antiinflamasi, antimikroba,
antikanker, kardioprotektif, neuroprotektif, antidiabetes,
antiosteoporosis, anxiolytik, analgesik, dan antialergi.
3. Banyak glikosida kaempferol, seperti kaempferitrin dan astragalin,
telah diisolasi sebagai produk alami dari tanaman. Konsumsi
Kaempferol pada teh dan brokoli dikaitkan dengan penurunan risiko
penyakit jantung.
4. Sifat antidepresan telah dilaporkan dalam tes pada hewan.
5. Studi selama delapan tahun menemukan bahwa konsumsi tiga
flavonol (kaempferol, quercetin, dan myricetin) dikorelasikan dengan
risiko rendah kanker pankreas di kalangan perokok aktif. tapi bukan
bukan-perokok dan mantan perokok.
6. Konsumsi Kaempferol juga dikorelasikan dengan berkurangnya
kejadian kanker paru-paru.
7. Kaempferol bisa menjadi profilaksis yang ampuh melawan
neurodegenerasi NOX-mediated.
8. Kaempferol telah Ditemukan untuk menghambat enzim asam lemak
amida hidrolase (FAAH).
9. Sistem pengiriman terkendali, seperti nanopartikel, telah
menunjukkan potensinya untuk melindungi, mengendalikan
melepaskan, dan meningkatkan kerja senyawa bioaktif yang berbeda.
II. Bahan dan Metode
II. 1. Bahan
Kaempferol, Polivinil alkohol (PVA), 50: 50 Poli (DL lactide-co-
glycolide) (PLGA), aseton, metanol, Fosfat Buffer, DPPH, metanol.
II. 2. Metode
II. 2. 1. Pembuatan Nanopartikel Polimer
Nanopartikel PLGA disiapkan dengan metode pemindahan pelarut dengan
sedikit modifikasi menggunakan protokol yang telah dijelaskan sebelumnya.
PLGA (200 mg) dilarutkan dalam 20 ml aseton dengan magnetik stirer
selama 30 menit pada 25° C. Larutan PLGA yang dihasilkan kemudian
ditambahkan secara perlahan ke larutan encer PVA 5% (40 ml) dengan
menggunakan syringe. Larutan kemudian dihomogenisasi menggunakan
mixer tekanan tinggi pada 19.000 rpm selama 5 menit. Pelarut organik dan
air diuapkan selama 30 menit di bawah vakum menggunakan rotary
evaporator. Nanopartikel yang terbentuk dicuci dengan air suling dan
disentrifugasi ultra pada 20.000 rpm selama 20 menit pada suhu 5 ° C. Pelet
disuspensikan kembali ke dalam air suling selama 24 jam dan kemudian
disimpan selama 12 jam pada suhu -20 ° C di dalam freezer. Dispersi
nanopartikel di beku-keringkan pada suhu -70 ° C (10-3 Torr) selama 48
jam dengan menggunakan freeze drier komersial. Dispersi partikel
terliofilisasi disimpan dalam desikator yang mengandung garam
pendehidrasi pada suhu 25 ° C sampai digunakan. Untuk mempersiapkan
nanopartikel PLGA kaempferol, secara terpisah, kaempferol (10 mg, 20mg,
30mg dan 40mg) dilarutkan ke dalam larutan PLGA-aseton sebelum sintesis
nanopartikel disiapkan larutan polimer rasio 5: 1 (Form A), 10: 1 (Form B),
15: 1 (Form C) dan 20: 1 (Form. D): dan nanopartikel tanpa kaempferol juga
disiapkan (Form E). Dua batch nanopartikel PLGA secara bebas disiapkan
dengan atau tanpa kaempferol untuk karakterisasi fisikokimia dan
antioksidan.
II. 2. 2. Karakterisasi
Pengukuran ukuran Partikel
Diameter partikel rata-rata nanopartikel ditentukan oleh penghitung
hamburan cahaya dinamis. Sampel diencerkan dengan air suling untuk
memastikan bahwa jumlah partikel dihitung per detik berada dalam kisaran
sensitivitas instrumen. Pengukuran dilakukan pada sudut 90° selama 180
detik pada suhu 25°C. Muatan listrik pada nanopartikel diukur dengan
elektroforesis partikel setelah diencerkan dengan air deionisasi untuk
menghindari banyak Efek hamburan dan kemudian ditempatkan di sel
kapiler terlipat (25°C). Pengukuran dilakukan secara rangkap tiga, dan
hasilnya ditunjukkan sebagai mean ± standard error.
Morfologi
Studi SEM tentang nanopartikel yang disiapkan (Form.D) dan hanya PLGA
nanopartikel (Form.E) yang dilakukan.
Penentuan Persentase Pemberian Obat
Efisiensi (% EE) Kandungan obat ditentukan dengan mensentrifugasi
suspensi nanopartikel redispersi pada 15000 rpm selama 40 menit. pada
25°C untuk memisahkan nanopartikel dari obat bebas. Supernatan
dikumpulkan dan konsentrasi kaempferol di dalamnya ditentukan dengan
mengambil penyerapan.
Efisiensi enkapsulasi kaempferol itu ditentukan dengan menggunakan
sebagai berikut:
EE (%) = Amt. dari Kaempferol dalam jebakan - jumlah Kaempferol dalam
supernatan x 100 Jumlah total Kaempferol dalam formulasi

II. 2. 3. Pelepasan In-Vitro Obat dari Nanopartikel


Uji pelepasan in vitro obat dilakukan dengan menggunakan protokol
elektrokimia yang dijelaskan. Nanopartikel PLGA Kaempferol-loaded (5
mg) ditambahkan ke dalam Fosfat Buffer, pH disesuaikan sampai 7,4 dan
digerakkan secara magnetis selama 32 jam. Jumlah kaempferol yang
dilepaskan dari nanopartikel dipantau pada suhu 30, 60, 90, 120, 150, 180
dan 210 jam.

II. 2. 4. Kapasitas Antioksidan Bebas/Enkapsulasi Nanopartikel


Free Radical Scavenging Activity Assay
Aktivitas antioksidan Kaempferol dan Kaempferol gratis dimuat
Nanopartikel (Form.D) ditentukan dengan menggunakan sampel yang sama.
konsentrasi dengan adanya 2,2-difenil-1-pikrylhydrazyl (DPPH) dan
dibandingkan dengan asam askorbat yang diambil sebagai standar. Semua
sampel disiapkan dan dianalisis secara rangkap tiga. Pengujian didasarkan
pada pengurangan DPPH. Karena elektron ganjilnya, DPPH memberikan
daya serap maksimal sebesar 517 nm (warna ungu) dengan spektroskopi
yang terlihat. Sebagai elektron aneh dari radikal menjadi berpasangan
dengan adanya donor hidrogen, yaitu antioksidan pembasmi radikal bebas,
intensitas penyerapannya menurun, dan hasilnya decolourization adalah
stochiometric sehubungan dengan jumlah elektron yang ditangkap.
Larutan DPPH (0,004% b/v) disiapkan dalam metanol 95%. Sampel
dicampur dengan 95% metanol untuk menyiapkan larutan stok (5 mg/ml).
Larutan DPPH yang baru disiapkan (0,004% b/v) diambil pada tabung
reaksi dan nanopartikel Kaempferol yang disintesis ditambahkan dalam
pengenceran seri (20 μg sampai 120 μg) ke setiap tabung reaksi sehingga
volume akhir adalah 3 ml dan setelah 10 menit, absorbansi dibaca pada 517
nm menggunakan spektrofotometer (spektrofotometer balok ganda
Labmed). Asam askorbat digunakan sebagai acuan standar dan dilarutkan
dalam air suling untuk membuat larutan stok dengan konsentrasi yang sama
(5 mg/ml). Sampel kontrol yang disiapkan mengandung volume yang sama.
95% metanol berfungsi sebagai blank. Penguapan radikal bebas DPPH
diukur. Nilai IC50 diperoleh dengan menggunakan grafik antara konsentrasi
dan persentase inhibisi.
III. Hasil
III.1 Sifat Morfologi dan Listrik Nanopartikel Polimer
Sifat morfologi dan listrik dari nanopartikel yang disiapkan mempengaruhi
fungsi-fungsinya. Dengan demikian ukuran nanopartikel, penampilan dan
potensi zeta dipelajari. Nilai potensial ukuran dan zeta ditunjukkan pada
Tabel.1 dan angka SEM Form.D & Form.E ditunjukkan pada Gambar 2 & 3.

Nanopartikel dengan diameter rata-rata dari 245 sampai 500 nm diperoleh.


Ukuran nanopartikel dipengaruhi oleh banyak faktor seperti sifat polimer,
solvabilitas, viskositas, dan lain-lain. Kuantitas listrik dari nanopartikel
polimer padat kaempferol bebas dan sarat negatif pada pH 7, sebuah
pengamatan yang dapat dikaitkan dengan kehadiran gugus karboksil terionisasi.
pada matriks PLGA. Perbedaan nilai juga diamati antara nanopartikel bebas
kaempferol dan nanopartikel PLGA mengandung-kaempferol (-33,2 mV & -
46,6 mVresp.). Hasil ini menunjukkan bahwa kehadiran masing-masing
kaempferol spesifik mengubah muatan listrik dari nanopartikel polimer.

III.2 Sifat Enkapsulasi dari Polimer Nanopartikel


Efisiensi enkapsulasi (EE) kaempferol dalam PLGA nanopartikel sekitar
73%, 79%, 82% dan 85% untuk Formulasi A, B, C dan D masing-masing.Hasil
ini menunjukkan rasio polimer 20:1 menjadi optimum untuk penjebakan
kaempferol dalam matriks PLGA.

III.3 Pelepasan Kaempferol dari Nanopartikel


Pada bagian ini, pelepasan kaempferol dari PLGA nanopartikel sebagai
fungsi waktu yang ditentukan.
III.4 Kapasitas Antioksidan (studi DPPH)

IV. Pembahasan
PLGA dienkapsulasi nanopartikel kaempferol disiapkan. The% EE 20:
1 polimer rasio obat yang ditemukan menjadi 85% (maksimum) seperti yang
ditunjukkan dalam Grafik. 1 dan karenanya formulasi D selanjutnya digunakan
untuk penelitian antioksidan. Studi ukuran partikel menunjukkan nanopartikel
seragam (Gambar 2 & 3) dari kisaran ukuran 55 sampai 196 nm seperti
ditunjukkan pada Tabel 1. Contoh pelepasan obat kumulatif menunjukkan
bahwa semua partikel nano menunjukkan awal yang cepat dan kemudian
pelepasan yang lebih stabil. dari obat, namun profil pelepasan formulasi D telah
terbukti paling stabil di antara semua formulasi seperti yang ditunjukkan pada
Grafik 2. Studi antioksidan menunjukkan peningkatan IC50 kaempferol saat
dimuat dalam matriks PLGA, jika dibandingkan dengan kaempferol bebas
seperti ditunjukkan pada Tabel 2.
V. Kesimpulan
Kaempferol (3,4',5,7-tetrahydroxyflavone) merupakan flavonoid penting
yang terdistribusi secara luas. Ini memiliki banyak sifat farmakologis termasuk
agen pencegahan kanker karena aktivitas antioksidannya. Metabolisme hati
yang pertama melalui glukuronidasi membatasi bioavailabilitasnya pada ~ 2%.
Enkapsulasi flavonoid ke dalam matriks polimer PEG, dalam berbagai rasio
polimer, memberikan pelepasan yang lebih mantap, namun rasio polimer 20:1
memberikan hasil yang paling memuaskan. Aktivitas penangkapan radikal
bebas dari flavonoid telah meningkat setelah enkapsulasi. Hal ini pada
gilirannya dapat meningkatkan aktivitas farmakologisnya seperti antikanker.
Efek dari aksi enkapsulasi pada sel kanker apoptosis menjadi subjek yang
menarik untuk dipelajari.