Técnicas de concentración de heces para la recuperación de parásitos intestinales

Introducción

Con frecuencia, el número de formas parasitarias en las muestras fecales es demasiado escaso como
para que logren observarse microscópicamente en fresco o en preparados teñidos. Por tanto se
deben emplear métodos de concentración para detectarlas. Las dos técnicas mas utilizadas
comúnmente son las de flotación y sedimentación. En el laboratorio usaremos el método de
flotación por concentración.

Método de flotación

Fundamento

Los quistes de protozoarios y huevos de helmintos de baja densidad se pueden hacer flotar en la
superficie de una solución de densidad más elevada. La más usada comúnmente es ña solución de
sulfato de zinc (faust) de densidad 1180.

Los huevecillos y quistes de parásitos que flotan en la superficie se pueden recoger de la parte
superior de la solución (reactivo de faust) mediante una asa o una pipeta capilar, o con un
cubreobjetos que se apoya sobre el menisco.

Muestra: materia fecal

Reactivos

Solución de sulfato de zinc ( Faust D ' Antonio y Sawitz) densidad 1180.

Solución de yodo (lugol)

Agua destilada o de la llave

Material

Gradilla para tubos

2 tubos de ensayo de 13x100

1 varilla de vidrio

1 cápsula de porcelana

1 colador de malla fina

1 pipeta de 10 ml

1 portaobjetos

1 cubreobjetos

Aparatos
Centrífuga clínica

Microscopio

Técnica

1. Colocar aproximadamente de 3 a 5g de muestra en la cápsula de porcelana, añadir 10 ml de agua

y mezclar bien con una varilla de vidrio.

2. Pasar la mezcla por el colador.

3. Colocar la emulsión en el tubo de ensayo hasta 3/4 partes del tubo.

4. Centrifugar la mezcla durante un minuto a 1500 rpm.

5. Decantar el líquido sobrenadante.

6. Añadir agua al sedimento y resuspenderlo, utilizando la varilla de vidrio.

7. Centrifugar nuevamente la muestra un minuto a 1500 rpm.

8. Decantar el líquido sobrenadante.

9. Añadir sulfato de zinc (Faust) hasta 3/4 partes del tubo de ensayo.

10. Centrifugar a un minuto a 1500 rpm.

11. Colocar el tubo de ensayo en la gradilla y con mucho cuidado llenar con Faust hasta el borde del
tubo, sin permitir que se derrame el reactivo.

12. Colocar un cubreobjetos sobre el borde del tubo, de manera que este toque el menisco del
líquido.

13. Dejar en reposo durante 10 minutos.

14. Colocar sobre un portaobjetos una gota de lugol, retirar con cuidado el cubreobjetos del tubo de
ensayo y ponerlo sobre el portaobjetos de modo que se mezclen muestra y lugol.

15. Examinar en el microscopio para detectar quistes o huevecillos.

16. Terminar la práctica, limpiar la mesa con una solución de fenol al 5% y lavarse perfectamente las
manos.