SECRETARIA DE AGRICULTURA,
GANADERIA, DESARROLLO RURAL,
PESCA Y ALIMENTACION
PROYECTO DE NORMA OFICIAL
MEXICANA PROY-NOM-059-PESC-
2004, QUE REGULA EL USO DE
ANTIMICROBIANOS EN EL CULTIVO
DE CRUSTÁCEOS EN LA
REPÚBLICA MEXICANA.
LILIA ISABEL OCHOA MUÑOZ,
Coordinadora General Jurídica de la
Secretaría de Agricultura, Ganadería,
Desarrollo Rural, Pesca
Alimentación, con lo dispuesto en los
artículos 35 fracciones IV y XXI de la
Ley Orgánica de la Administración
Pública Federal; 1o., 2o. y 3o.fracción
VIII de la Ley de Pesca; 1o., 2o.,
fracciones VIII. XIII y XVI, , 129
fracción II y 137 de su Reglamento; 40
fracciones I, II, III, X, XI, XII y XIIII, 41,
43, 44, 45, 46, 47, 56 y 57 de la Ley
Federal sobre Metrología
Normalización;, 28, 30, 32, 33 y otros
de su Reglamento, así como en los
artículos 1o., 2o. Fracciones IV, XXV y
XXVI, 3º. Fracciones IV y XXXX, 32, 33
fracción V, 35 fracción XX, 37, 39
fracciones XVI, XX, XXIII y XXIV, 42
fracciones I, II, V y VI, 49 fracciones I,
II, III, IV, VI, VII, XII, XIV, XVI, XXIV,
XXVII y XXIX del Reglamento Interior
de la Secretaría de Agricultura,
Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y
Alimentación; expido el siguiente
Proyecto de Norma Oficial Mexicana
PROY-NOM-059-PESC-2004 que
regula el uso de antimicrobianos en el
cultivo de crustáceos en la República
Mexicana.
El presente Proyecto fue aprobado
por el Comité Consultivo Nacional de
Normalización de Pesca Responsable
en su sesión efectuada el 10 de
Agosto del 2004; el que se expide para
consulta pública, de conformidad con
el precepto legal antes invocado, a
efecto de que dentro de los siguientes
60 días naturales, contados a partir de
la fecha de su publicación en el Diario
y Oficial de la Federación, los
interesados presenten comentarios al
citado Comité, en la Planta Baja del
edificio ubicado en la Av. Camarón
Sábalo s/n, esquina con calle Tiburón,
Fraccionamiento Sábalo Country Club,
C. P. 82100, Mazatlán, Sinaloa, para
que en los términos de la Ley, dichos
comentarios sean considerados.
y Durante este lapso, los estudios que
sirvieron de base para la elaboración
del citado proyecto de Norma, así
como la manifestación de impacto
regulatorio a que se refiere el artículo
45 de la Federal Sobre metrología y
Normalización, pueden ser consultados
en la Dirección General de
Ordenamiento Pesquero y Acuícola de
la Comisión Nacional de Acuacultura y
Pesca, de la Secretaría de Agricultura,
Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y
Alimentación, sita en el domicilio
señalado en el párrafo anterior.
PREFACIO
Se constituyó el Grupo de Trabajo
de “Crustáceos”, para contribuir en la
formulación del Anteproyecto de
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Norma Oficial Mexicana que regula el Sinaloa

uso de antimicrobianos en el cultivo de
crustáceos en la República Mexicana. Nayarit

Este Grupo de Trabajo estuvo Dirección General de Inspección

integrado por personal técnico y Fitozoosanitaria.
representantes de algunas
dependencias integrantes del Comité AVIMEX, S .A. DE C. V.
Nacional, otras autoridades federales
competentes en la materia, SCHERING-PLOUGH, S. A. DE
instituciones de investigación, C. V.
empresas acuícolas y asociaciones de
productores acuícolas y de fabricantes PB ANIMAL HEALTH DE
de alimentos balanceados y MÉXICO.
fabricantes de antibióticos, según se
detalla a continuación: COPROVET.

Secretaría de Agricultura, Ganadería, HALVET.

Desarrollo Rural, Pesca y
Alimentación, por conducto de: LAPISA.

Dirección General de ANIMAL CARE.

Ordenamiento Pesquero y
Acuícola. PREVESON.

Dirección General de Inspección Centro de Investigación en

y Vigilancia. Alimentación y Desarrollo,
Unidades Mazatlán, Sin. y
Instituto Nacional de la Pesca, a Hermosillo, Son.
través de la Dirección General
de Investigación en Acuacultura. Centro de Investigaciones
Biológicas del Noroeste, S. C.
Servicio Nacional de Sanidad, Unidades La Paz y Hermosillo,
Inocuidad y Calidad Son.
Agroalimentaria, a través de la
Dirección de Sanidad Acuícola y Asociación Nacional de
de los siguientes Comités Productores de Larvas de
Estatales de Sanidad Acuícola: Camarón.

Sonora

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Alimentos Balanceados 5. Grado de concordancia con

(CANACINTRA).
Maricultivos del Pacífico.
Asociación Nacional de
Importadores y Exportadores de
Productos Pesqueros y
Acuícolas,A. C.
SYAQUA de México.
Cámara Nacional de la Industria
Pesquera y Acuícola. Sección
Sinaloa.
A continuación se presenta el texto
de la Norma Oficial Mexicana que
se pretende publicar:
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-
059-PESC-2004, QUE REGULA EL
USO DE ANTIMICROBIANOS EN
EL CULTIVO DE CRUSTÁCEOS EN
LA REPÚBLICA MEXICANA.
ÍNDICE
0. Introducción
1. Objetivo y campo de aplicación
2. Referencias
3. Definiciones
4. Regulación en el uso de
antimicrobianos en el cultivo de
crustáceos en la República
Mexicana.
normas y recomendaciones
internacionales.
6. Bibliografía
7. Evaluación de la conformidad
8. Observancia de esta Norma
0. Introducción
0.1 Los cultivos de camarón que se
han realizado desde hace varios años,
han sido afectados, tanto en la
producción larvaria como en la
engorda, por mortalidades de diferente
magnitud causadas por diversos
patógenos, entre los que destacan los
virus, bacterias, hongos y parásitos.
0.2 De los patógenos causales de
enfermedad en el camarón cultivado
citados en el apartado 0.1, excepto los
virus que causan hasta el cien por
ciento de mortalidad de las
poblaciones afectadas, el resto de
estos patógenos, son susceptibles de
ser controlados mediante la aplicación
de una gran variedad de sustancias
químicas.
0.3 A nivel mundial, se han
establecido una serie de regulaciones
para usar antibióticos y
quimioterapeuticos en el tratamiento de
enfermedades bacterianas y
parasitarias que afectan a los
organismos en cultivo, incluido también
el camarón. Entre los requisitos
establecidos para prevenir el impacto

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negativo que producen los residuos y
desperdicios de estos fármacos,
destaca la dosis a ser aplicada, ya que
usar concentraciones menores o
mayores a las óptimas, se ha
demostrado que ocasiona resistencia
de las bacterias que están causando la
enfermedad, ya que usar
concentraciones no adecuadas,
pueden inducir a resistencia bacteriana
de los agentes patógenos o residuos
del fármaco que se acumulan en el
sedimento, causando resistencia en las
bacterias presentes en los estanques
de cultivo, característica ésta, que
puede ser transmitida a otros
microorganismos que habitan en los
cuerpos de agua receptores de las
descargas provenientes de las
unidades de producción.
0.4 Para establecer la dosis óptima,
se requieren realizar estudios de
fármacocinética en las especies
acuícolas que recibirán este
tratamiento, lo que implica determinar
la distribución de antibióticos y
quimioterapeuticos en los distintos
órganos y tejidos, la concentración
durante y después de haber terminado
el tratamiento, lo que permitirá
establecer límites máximos de residuos
en los organismos tratados y el período
de retiro del fármaco, medidas que en
conjunto permiten proteger la salud del
consumidor.
0.5 Con base en los estudios
mencionados en el numeral 0.4, las
autoridades competentes en estas
materias, en países como los Estados
Unidos de América y los que
conforman la Unión Europea, entre
otros, han autorizado el uso de varios
fármacos para el tratamiento de
enfermedades de origen bacteriano y
parasitarias en la acuacultura,
restringiendo otros, en tanto se genera
la información necesaria para permitir
su uso y prohibiendo aquellos que
científicamente se ha demostrado
representan un riesgo para la salud
humana, tal es el caso del
cloranfenicol, los nitrofuranos,
nitroimidazoles y sulfonamidas.
0.6 La administración de
antimicrobianos se realiza de dos
formas principales, una de manera
directa, disolviendo el fármaco en el
agua de la instalación que contenga a
los organismos a ser tratados,
conocida como “baño” y otra, a través
de la incorporación del antibiótico
durante la fabricación del alimento
balanceado. La primera se utiliza
principalmente en los laboratorios
productores de postlarvas de
camarones peneidos, mientras que la
segunda, se usa específicamente en
las unidades de producción acuícola
que se dedican a la engorda del
camarón.
0.7 Para aplicar tratamientos con
fármacos y quimicos para el control de
enfermedades bacterianas y
parasitarias en el cultivo de crustáceos,
se requiere disponer de un diagnostico
presuntivo de la enfermedad, mismo
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que deberá ser confirmado con la posterior preparación en las

identificación del agente causal de la presentaciones comerciales que
enfermedad así como los demanda la camaronicultura para el
antibiogramas en su caso. tratamiento de enfermedades de origen
bacteriano y parasitario.
0.8 Las patógenos causales de
enfermedades en la acuacultura, 0.11 En los países que cuentan
pueden presentarse desde el momento con regulaciones vigentes para el uso
en que son introducidos a las de antibióticos, productos químicos,
instalaciones de cultivo y durante el farmacéuticos, biológicos y alimenticios
tiempo en que permanecen en ellas, utilizados en acuacultura, la
hasta alcanzar su talla comercial, por comercialización se realiza en
lo que para prevenir y evitar las expendios autorizados
pérdidas por la mortalidad que
producen, se aplican antimicrobianos, 0.12 En la camaronicultura
motivo por el que con el objeto de no nacional se han presentado
afectar la salud humana, se solicita al mortalidades de diferente magnitud,
productor la presentación de un habiéndose identificado como agentes
documento en que la autoridad causales de las mismas, bacterias
competente, haga constar que los gram negativas de los géneros Vibrio,
organismos cosechados están libres Aeromonas, Pseudomonas,
de antimicrobianos, aplicando esta Leucothrix, bacilos gram positivos y
disposición tanto para el consumo bacterias intracelulares, para cuyo
nacional, como la exportación y la control se han utilizado antimicrobianos
importación. disponibles comercialmente en el país.

0.9 Internacionalmente se ha 0.13 En el marco de la

establecido que la aplicación de
tratamientos para el control de
enfermedades en general y de origen
bacteriano en particular, debe
prescribirse y administrarse por un
profesionista calificado y acreditado
por la autoridad competente en la
materia.
0.10 Además de la producción
nacional de antimicrobianos, otra
fuente de aprovisionamiento es la
importación de sales puras, para su
globalización, México ha firmado varios
Tratados de Libre Comercio, entre
otros, con los Estados Unidos de
América y Canadá, con la Unión
Europea y con varios países de
Centroamérica y América del Sur,
derivándose de los compromisos
contraídos, el cumplimiento de las
disposiciones que en materia de
calidad e inocuidad se establecen en
estos Tratados.
1.- Objetivo

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Esta Norma Oficial Mexicana tiene
por objeto regular el uso de
antimicrobianos en el cultivo de
crustáceos en la República Mexicana.
2. Referencias
Esta Norma Oficial Mexicana
complementa con:
2.1 Norma Oficial Mexicana NOM-
012-ZOO-1993, Especificaciones para
la regulación de productos químicos
farmaceúticos, biológicos y propiedades inhibitorias o destructoras
alimenticios para uso en animales o
consumo por éstos, publicada en el
Diario Oficial de la Federación el 3 de
junio de 1998.
2.2 Norma Oficial Mexicana NOM-
022-Z00-1995, Características y 3.3
especificaciones zoosanitarias para las
instalaciones, equipo y operación de
establecimientos que comercializan
productos químicos, farmacéuticos,
biológicos y alimenticios para uso en
animales o consumo por éstos,
publicada en el Diario Oficial de la
Federación el 31 de enero de 1996.
2.3 Norma Oficial Mexicana NOM-
025-ZOO-1995, Características y de diagnostico II (parasitología,
especificaciones zoosanitarias para las
instalaciones, equipo y operación de
establecimientos que fabriquen
productos alimenticios para uso en
animales o consumo por éstos.
2.4 Norma Oficial Mexicana NOM-
040-ZOO-1995. Especificaciones para
la comercialización de sales puras de
antimicrobianos para uso en animales
o consumo por éstos.
3. Definiciones
Para los efectos de esta Norma se
se entiende por:
3.1 Antimicrobiano: Sustancia
producida por bacterias u hongos, o
bien elaborada mediante procesos de
síntesis o semisíntesis, con
del crecimiento o reproducción de
bacterias.
3.2 CONAPESCA: Comisión
Nacional de Acuacultura y Pesca.
Crustáceos: Organismos
pertenecientes al Phyllum Crustacea
3.4 Diagnostico presuntivo:
Diagnostico preliminar basado en
observaciones en grueso y evidencia
circunstancial;
3.5 Diagnóstico definitivo: Basado
en técnicas de laboratorio debiendo
usarse realizarse usualmente a niveles
bacteriología, micología e
histopatología) e incluso de nivel III
(virología, microscopia electrónica,
biología molecular e inmunología).
3.6 Fármaco: Sustancia química
que interacciona con un sistema
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biológico modificando su
comportamiento.
3.7 Límite máximo de residuos: Es
la concentración máxima de residuos
resultante del uso de un medicamento
veterinario, expresada en microgramos
por kilogramo (μg/kg) del peso del
producto fresco.
3.8 Período de retiro: Lapso de
tiempo que transcurre desde la última
vez que se aplicó algún antibiótico al
crustáceo en cultivo, que permite
asegurar la eliminación de residuos por
debajo de las concentraciones
establecidas por las regulaciones
nacionales e internacionales en esta
materia.
3.9 Resistencia bacteriológica a
una bacteria o cepa: Cuando la
bacteria o cepa es capaz de soportar
una concentración de antibiótico más
elevada que la que inhibe el desarrollo
de la mayoría de otras bacterias y
cepas de la misma especie o de los
individuos del mismo cultivo.
3.10 Resistencia clínica de una
bacteria o cepa: Cuando la
concentración del antibacteriano que
puede soportar una bacteria, es
notablemente superior al nivel que se
puede conseguir in vivo.
3.11 Sales puras: Antimicrobiano
no mezclado con ningún otra sustancia
química o componente.
3.12 Terapéutica: Es la rama de la
farmacología que se encarga del uso
de los fármacos en clínica para tratar
enfermedades y la organización de
regímenes de dosificación.
3.13 Terceros especialistas:
Laboratorios de diagnóstico de
enfermedades en organismos
acuáticos cultivados y para la
determinación de residuos de fármacos
en el camarón cultivado, de los que se
auxilia la Secretaría para evaluar la
conformidad de las Normas Oficiales
Mexicanas vigentes en materia de
sanidad acuícola, previa aprobación
por la misma Secretaría.
3.14 Secretaría: Secretaría de
Agricultura, Ganadería, Desarrollo
Rural, Pesca y Alimentación.
3.15 SENASICA: Servicio Nacional
de Sanidad, Inocuidad y Calidad
Agroalimentaria.
4. Especificaciones.
4.1 Regulación para el uso de
antimicrobianos en el cultivo de
crustáceos.
4.1.1 Para el control de
enfermedades bacterianas en el cultivo
de crustáceos en las unidades de
producción acuícola que se dedican a
su engorda, se autoriza únicamente el
uso de los antimicrobianos en
premezcla incorporada a la formulación
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de alimento balanceado que hayan
cumplido con las disposiciones de los
numerales 4.1.2 y 4.1.2.1 de este
Proyecto de Norma y en las dosis de
control mínimas y máximas que se
especifican en el Anexo 1 de este
Proyecto de Ordenamiento.
4.1.1.1 Queda prohibido el uso de
sales puras de antimicrobianos para el
tratamiento de enfermedades
bacterianas y parasitarias en el cultivo
de crustáceos en las unidades de
producción acuícola que se dedican a
su engorda,
4.1.1.2 Para el tratamiento de
enfermedades bacterianas y que se usan de conformidad con las
parasitarias que afectan a los
crustáceos durante la etapa de
engorda, queda prohibida la
combinación de dos antimicrobianos, a
menos que se trate de un solo
producto combinado y se cumpla con
los requisitos del apartado 4.1.2 de
este Proyecto de Norma y se
demuestre su sinergismo a través de
pruebas de isobologramas.
4.1.1.3 Para el control de las
enfermedades de origen bacteriano y
parasitario que afectan a los
crustáceos, en la producción de
nauplios y postlarvas y en la engorda,
se prohíbe el uso de los
antimicrobianos denominados
cloranfenicol, nitrofuranos,
nitroimidazoles, sulfonamidas y β-
lactámicos.
4.1.1.4 Para el control de
enfermedades bacterianas y
parasitarias en la engorda de
crustáceos, se prohíbe el uso de los
siguientes antimicrobianos:
aminoglicósidos, aminociclitoles,
polimixinas, lincosamidas, macrólidos,
quinoxalinas, y polipéptidos.
4.1.1.5 Para todos los
antimicrobianos autorizados para el
control de enfermedades bacterianas y
parasitarias, que afectan a los
crustáceos durante la etapa de
engorda, que se especifican en el
Anexo 1 de este Proyecto de Norma, y
especificaciones de este ordenamiento
jurídico, deberá suspenderse el uso de
alimento medicado, treinta días antes
de realizar la cosecha de los
organismos. En el caso de realizar una
cosecha de emergencia de camarones
que están recibiendo alimento
medicado, en el o los estanques a
cosechar, se deberá observar el
siguiente procedimiento:
I. Informar por escrito a la
Subdelegación de Pesca de la entidad
federativa correspondiente, de la
cosecha de emergencia realizada,
indicando en un croquis de la granja, el
o los estanques cosechados, la
cantidad y tallas de camarón que se
extrajeron y nombre, dirección y
teléfono del comprador del producto.
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II. Tomar una muestra aleatoria del o laboratorios aprobados por la

los estanques tratados con Secretaria, incluidos en el Anexo 3 de
antimicrobianos a cosechar y enviarlos, esta Norma, firmada por los
al laboratorio tercero especialista que responsables de las áreas técnica, de
seleccione el interesado del Anexo 3 producción y de control de calidad del
de este Proyecto de Norma, para la registrante, cuyo nombre y cédula
determinación de residuos de profesional deberán aparecer al calce
antimicrobianos. de cada proceso:

III. En el caso de que los resultados 4.1.2.1 Presentar solicitud en escrito

de las pruebas de laboratorio sean
negativos a los residuos de los
antimicrobianos objeto de este
Proyecto de Norma, el interesado
podrá disponer libremente del volumen
cosechado del o los estanques
muestreados.
libre ante la Dirección General de
Ordenamiento Pesquero y Acuícola,
conteniendo la siguiente información:
I. Nombre de la persona física o
razón social de la persona moral
solicitante;

IV. Cuando las pruebas de II. Dirección, teléfono, fax y en su

laboratorio realizadas indiquen la caso, dirección de correo
presencia de residuos de electrónico;
antimicrobianos, queda prohibido
comercializar el producto cosechado, III. Nombre y fórmula química del
procediéndose al decomiso del mismo antibiótico, químico, fármaco o
por parte del personal de la pesticida y la cantidad de
CONAPESCA o SENASICA y a su principio activo.
destrucción por incineración a costa
del interesado. IV. Presentación;

4.1.2 Para el registro de premezclas V. Etiqueta del producto;

antimicrobianas que se elaboren con
los fármacos listados en el Anexo 1 de
esta Norma para su uso en unidades
de engorda, el solicitante deberá
presentar la información que se
establece en el apartado 4.1.2.1,
obtenida a través de estudios
realizados con el producto para el que
se solicita el registro en la
camaronicultura nacional, en los
VI. Farmacocinética del principio
activo del producto para el que se
solicita el registro, a la dosis
recomendada por el fabricante
como biológicamente activa y
propuesta en su etiqueta como la
indicada para el tratamiento de
enfermedades de crustáceos
realizada en condiciones de

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salinidad de 40 partes por mil
utilizando agua marina.
VII. Pruebas de permanencia del
fármaco para el que se solicita el
registro, en tejido comestible
(período de retiro).
VIII. Pruebas de permanencia del
fármaco para el que se solicita el
registro, en el sedimento de
estanques y del cuerpo receptor
del agua de descarga de las
unidades de producción acuícola
de camarón.
IX. Pruebas de estabilidad del
antimicrobiano del que solicita el
registro, al proceso de
fabricación, peletizado o extruido
y postacondicionamiento.
X. Demostración de la eficacia
clínica. Pruebas de efectividad
antimicrobiana in vitro
(Concentración Inhibitoria
Mínima) del producto para el que
se solicita el registro, con cepas
pertenecientes a los principales
géneros bacterianos y las
parasitarios susceptibles que
afecten a los camarones, de
conformidad con el Anexo 4 de
este Proyecto de Norma, excepto
bacterias intracelulares
XI. Pruebas de demostración de la
eficacia clínica (al menos una
prueba por especie de
crustáceo).
XII. Queda prohibido el uso de
antimicrobianos para el
tratamiento de enfermedades
bacterianas que afectan a los
crustáceos en cultivo, cuando la
etiqueta del producto no contenga
el número de registro otorgado
por la CONAPESCA
4.1.3 La Dirección General de
Ordenamiento Pesquero y Acuícola
resolverá la solicitud para obtener el
número de registro de los
antimicrobianos antes mencionados,
en un plazo de 30 días hábiles,
contado a partir de la recepción de los
documentos autorizando o negando la
solicitud recibida.
4.1.4. La comercialización de los
antimicrobianos en cualquier
presentación, que son objeto de este
Proyecto de Norma, deberán incluir en
la etiqueta de los recipientes que los
contengan, el número de registro que
obtenga de la Dirección General de
Ordenamiento Pesquero y Acuícola de
la CONAPESCA, de conformidad con
disposiciones del presente
ordenamiento.
4.1.5 Para iniciar el uso de alimento
medicado, el acuacultor de engorda de
crustáceos deberá disponer de un
diagnóstico presuntivo con base en la
historia clínica de ciclos de producción
anteriores y pruebas de sensibilidad de
no más de 7 días de haber sido
realizadas, del género bacteriano que
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afecta su producción, mismos que
deberán ser solicitados a los
laboratorios aprobados por esta
Secretaría enlistados en el Anexo 8 de
esta Norma, en tanto se dispone del
diagnostico confirmativo, que deberá
ser realizado en un plazo no mayor de
5 días. Las bacterias intracelulares
quedan exentas de la realización de
las pruebas de sensibilidad.
4.1.5.1 El representante legal de la
unidad de producción acuícola
dedicada a la engorda, deberá solicitar
por escrito a la fábrica que elabore o
provea el alimento balanceado,
informándoles del diagnóstico, el
antimicrobiano a incorporar al alimento
balanceado y el tipo de producto que
requiere, debiendo mantener esta
solicitud en sus archivos, durante al
menos 12 meses, para que pueda ser
verificada por personal de la
Secretaría, cuando lo considere
necesario.
4.1.5.2 La fabrica de alimentos
podrá mantener en inventario un lote
de alimento medicado, mismo que no
será liberado hasta recibir del
productor el diagnostico
correspondiente.
4.1.5.3 El gerente de producción o
el técnico responsable de la unidad de
producción acuícola, deberá también
mantener una bitácora en la que se
registre la información de los
estanques medicados, fecha de inicio y
de término del tratamiento, resultados
del diagnóstico y los resultados
después de la medicación. La bitácora
deberá permanecer en los archivos de
la granja, al menos durante 12 meses
para ser verificada por personal de la
Secretaría, cuando así lo considere
necesario.
4.1.5.4 Para el tratamiento de los
parásitos pertenecientes al grupo de
las gregarinas, se autoriza el uso de
los antimicrobianos en las dosis y con
la duración del tratamiento que se
establecen en el Anexo 2 de esta
Norma.
4.1.6 El fabricante de alimento
balanceado debe solicitar al proveedor
del antimicrobiano, además del número
de registro vigente, otorgado por la
Dirección General de Ordenamiento
Pesquero y Acuícola, el certificado de
análisis de garantía, de cada lote que
sea entregado, debiendo permanecer
esta información en sus archivos al
menos durante 12 meses.
4.1.7 Los fabricantes de alimento
deben informar mensualmente a la
Dirección General de Ordenamiento
Pesquero y Acuícola y al SENASICA,
el nombre de la granja que solicita el
alimento medicado, volumen
suministrado, los tipos y dosis de
fármacos que se incorporaron a los
alimentos cuya fabricación se solicitó,
debiendo tener esta información en sus
archivos durante 12 meses.
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4.1.8 El alimento balanceado
medicado, deberá ser conservado en
las granjas en un almacén de
alimentos, bajo sombra, que disponga
de estructuras que impidan la entrada
de insectos, roedores y otros animales
que deterioren el alimento.
4.1.9 El alimento deberá ser
debidamente etiquetado de
conformidad con las disposiciones de
la Norma Oficial Mexicana NOM-012-
ZOO-1993, publicada en el Diario
Oficial de la Federación el 17 de
enero de 1995 y modificada el 27 de
enero de 2004, a efecto de que sea
fácilmente identificado, debiendo
indicar también en la etiqueta, la marca
del alimento, el número del lote al que
pertenece y la fecha de caducidad, así
como la leyenda siguiente: ALIMENTO
MEDICADO, indicando además el
producto comercial, el ingrediente
activo y su concentración en el
alimento.
4.1.10 En caso de no detectar
respuesta clínica, como disminución de
la mortalidad, o incremento del
consumo de alimento, el tratamiento
deberá ser suspendido, debiendo
tomar muestras adicionales para
realizar un nuevo diagnostico.
4.1.11 Para determinar la dosis del
antimicrobiano a incorporar al alimento
balanceado, deberá calcularse con
base en la biomasa del camarón o
crustáceo en el estanque, de acuerdo
con la siguiente fórmula:
K= 100/(%)(D/C)
Donde:
K= Kilogramos de producto
comercial por tonelada de
alimento;
100= Factor constante;
%= Porcentaje de consumo de
alimento sobre peso vivo;
D= Dosis;
C= Cantidad en gramos activos en
un kilogramo de producto
comercial.
En el caso de no contar con la
información de la biomasa y la dosis, el
fabricante de alimento balanceado
deberá utilizar la dosis en kilogramos
que se especifica en la etiqueta de la
premezcla del antimicrobiano por
tonelada de alimento.
4.1.12 El productor veintiún días
antes de realizar la cosecha de los
camarones peneidos o crustáceos en
cultivo de engorda, por cada veinte
hectáreas de estanquería, se deberá
tomar una muestra de 1,000 gramos
de camarón, la cual una vez colectada,
se procederá a su congelación o
conservación en hielo seco y en
seguida a colocarlos en una caja de
poliuretano, añadiendo suficiente
refrigerante, que permita mantener en
12
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buenas condiciones a los organismos
muestreados, y enviarse a alguno de
los laboratorios que seleccione de la
relación contenida en el Anexo 3 de
este Proyecto de Norma para la
detección de residuos de
antimicrobianos, Estos gastos serán
cubiertos por el interesado y los
resultados de la determinación de
residuos, deberán estar de acuerdo a
los límites máximos permitidos que se
establecen en el Anexo 5 de este
precepto jurídico.
4.1.12.1 Cada muestra deberá ser
debidamente identificada, señalando el
nombre, domicilio, teléfono, fax y en su
caso correo electrónico de la unidad de
producción acuícola que solicita el
servicio y la identificación del estanque
o estanques de los que se colectaron
los crustáceos.
4.2 En materia de importación,
almacenamiento, materias primas,
producción, control de calidad,
envases, embalajes y etiquetado de los
antimicrobianos objeto de este
Proyecto de Norma, se sujetarán en lo
conducente, a los señalamientos de la
Norma Oficial Mexicana NOM-012-
ZOO-1993, Especificaciones para la
regulación de productos químicos
farmacéuticos, biológicos, biológicos y
alimenticios para uso en animales o
consumo por éstos, publicada en el
Diario Oficial de la Federación el 3 de
junio de 1998 y modificada el 27 de
enero de 2004 y la Norma Oficial
Mexicana NOM-040-ZOO-1995,
especificaciones para la
comercialización de sales puras de
antimicrobianos para uso en animales
o consumo por éstos, publicada en el
Diario Oficial de la Federación el 10 de
abril de 1996..
4.3 Las disposiciones en materia de
instalaciones, y equipo para la
fabricación de antimicrobianos
destinados al control de enfermedades
en el cultivo de crustáceos, en lo que
corresponda, se deberán cumplir las
disposiciones de la Norma Oficial
Mexicana NOM-025-ZOO-1995,
Características y especificaciones
zoosanitarias para las instalaciones,
equipo y operación de
establecimientos que fabriquen
productos alimenticios para uso en
animales o consumo por éstos,
publicada en el Diario Oficial de la
Federación el 16 de octubre de 1995.
4.4 Disposiciones para el uso de
antimicrobianos en los laboratorios
productores de nauplios y postlarvas.
4.4.1 Para el uso de
antimicrobianos en los laboratorios
productores de nauplios y postlarvas,
se autorizan únicamente los enlistados
en el Anexo 1 de este Proyecto de
Norma, apegándose a las
disposiciones de los numerales 4.1.2 y
4.1.2.1 de este mismo ordenamiento.
4.4.2 Se prohíbe el uso profiláctico
de antimicrobianos en los laboratorios
productores de nauplios y postlarvas.
13
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PESCA Y ALIMENTACION
Esto es, el uso de antimicrobianos para
prevenir la aparición de enfermedades
bacterianas que normalmente pueden
evitarse mediante buenas prácticas de
operación y limpieza.
4.4.3 En el uso de antimicrobianos
en laboratorios de producción de
nauplios y postlarvas, se deberá
observar que las descargas de los
tanques a los que se les aplica la
medicación sean vertidas a lagunas de
sedimentación y no directamente al
mar, estero, laguna, río o zona de
humedal.
4.4.4 El vendedor de cualquier
antimicrobiano para usarse en el
cultivo de crustáceos, deberá entregar
al comprador el certificado de análisis
de garantía, número de registro
otorgado por la Dirección General de
Ordenamiento Pesquero y Acuícola,
número de lote y fecha de vencimiento,
así como las especificaciones de uso y
residualidad.
4.4.5 El gerente de producción o el
técnico responsable del laboratorio,
deberá mantener una bitácora en la
que se registre la información de los
tanques medicados, fecha de inicio y
de término de la medicación y los
resultados obtenidos del tratamiento
aplicado. Esta bitácora deberá
permanecer en los archivos de dicha
unidad de producción al menos
durante 12 meses para ser verificada
por personal de la Secretaría, cuando
así lo considere necesario.
5. Grado de concordancia con
normas y recomendaciones
internacionales.
Esta norma está parcialmente en
concordancia con la Directiva 96/23/CE
del Consejo de 29 de abril de 1996
relativa a las medidas de control
aplicables respecto de determinadas
sustancias y sus residuos en los
animales vivos y sus productos y por la
que se derogan las Directivas
85/358/CEE y 86/469/CEE y las
decisiones 89/187/CEE y 91/664/CEE.
6. Bibliografía.
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shrimp (Penaeus californiensis)
Comparative Biochemical and
Physiology, vol. 106A, pp. 299-303
7. Evaluación de la conformidad
7.1 La evaluación de la conformidad
J. del presente Proyecto de Norma Oficial
Mexicana, se realizará por la
Secretaría de Agricultura, Ganadería,
Desarrollo Rural, Pesca y
Alimentación, a través de la Dirección
General de Ordenamiento Pesquero y
Acuícola de la CONAPESCA, mediante
la revisión de la información que
entregue el solicitante de registro de
antimicrobianos y expidiendo, cuando
se cumplan los requisitos que
establece este Proyecto de
Ordenamiento Jurídico, el número de
registro del o los antimicrobianos que
solicita.
7.2 La revisión de las solicitudes de
importación de los antibióticos
autorizados para usarse en el
tratamiento de enfermedades de origen
bacteriano que afectan a los
crustáceos en cultivo, que en el caso
de cumplir con los requisitos que
establece la normatividad en materia
de sanidad animal que complementa a
este Proyecto de Norma, la
CONAPESCA a través de la Dirección
General de Ordenamiento Pesquero y
Acuícola, expide el certificado de
importación correspondiente.
8. Observancia de esta Norma.
8.1 La vigilancia del cumplimiento
de la presente Norma Oficial Mexicana,
corresponde a la Secretaría, por
conducto de la Comisión Nacional de
17
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Acuacultura y Pesca (CONAPESCA) o

del Servicio Nacional de Sanidad,
Inocuidad y Calidad Agroalimentaria Lilia Isabel Ochoa Muñoz
(SENASICA) y a la Secretaría de
Marina, en el ámbito de sus
respectivas atribuciones. Las
violaciones a las disposiciones
contenidas en esta Norma se
sancionarán en los términos
establecidos en la Ley Federal de
Metrología y Normalización y su
Reglamento, la Ley de Pesca, y su
Reglamento y demás disposiciones
legales aplicables.
8.2 La Secretaría podrá verificar en
cualquier tiempo y lugar el
cumplimiento de las disposiciones
contenidas en la presente Norma.

TRANSITORIOS
PRIMERO.- Provéase la
publicación de esta Norma en el Diario
Oficial de la Federación.

SEGUNDO.- La presente Norma

Oficial Mexicana entrará en vigor al día
siguiente de su publicación en el
Diario Oficial de la Federación.

México, D. F., a __ de
_________________ de 2004.

La Coordinadora General Jurídica

de la Secretaría de Agricultura,
Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y
Alimentación.

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ANEXO 1.

Listado de antimicrobianos autorizados para su uso en el control de las

enfermedades bacterianas que afectan a los crustáceos cultivados.

Antimicrobiano Dosis Tratamiento

(Agente activo) (mg/kg de (Días)
biomasa)*
Oxitetraciclina 120-40 7-12
Sarafloxacina 10-15 7-12
Enrofloxacin 4-10 10-15
Florfenicol * 4-10 10-15
Fosfomicina * 4-10 10-15

* Dosis sujetas a modificación.

ANEXO 2.

Listado de antimicrobianos autorizados para el uso en el control de las

enfermedades causadas por protozoarios parásitos que afectan a los
crustáceos cultivados.

Antimicrobiano Dosis Tratamiento

(Agente activo) (g/tonelada (Días)
de
alimento)*
Monensina 200-400 7
Salinomicina 120-300 7-10
Semduramicina 50-150 7-10

* Dosis sujetas a modificación.

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ANEXO 3.

Relación de laboratorios terceros especialistas aprobados por la Secretaría

de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación para la
determinación de residuos de antimicrobianos en crustáceos cultivados

1. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, FMVZ-UNAM.

Dr. Luis Ocampo Camberos y Dr. Héctor Sumano López.
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Circuito de la Investigación
Científica . Ciudad Universitaria. México, D.F. 04510.
Tel: 01(55)5622-5980, 5622-5908 y 5622-5980.
Correo electrónico: ocampo@fmvz.unam.mx y sumano@servidor.unam.mx

2. Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo CIAD, Hermosillo, Son.

Dra. Luz Vázquez Moreno.
Km. 0.6 Carretera a la Victoria. Apdo. Postal 1735. Hermosillo, Sonora, México,
83000.
Tel: 01(662)289-2400 Ext. 219.
Fax: 01(662)280-0058.
Correo electrónico: lvazquez@cacabel.ciad.mx

3. Centro Nacional de Constatación de Salud Animal (CENAPA).

MVZ Hugo Fragoso. y MVZ Ofelia Flores
Carretera Federal Km 11.5. Colonia Progreso. Jiutepec, Mor. C.P. 62550
Tel: 01(777)319-2848 y 319-2850.

4. Centro de Investigación y Estudios Avanzados Unidad Mérida, Yuc. Instituto

Politécnico Nacional.
Dr. Víctor Vidal López.
Carretera Antigua a Progreso Km. 6, Mérida, Yucatán. 97310.
Tel: 01(999)981-2960, Ext. 281.
Fax: 01(999)981-2931.
Correo electrónico: vvidal@kin.creamer.conacyt.mx

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ANEXO 4.

Métodos analíticos para la determinación de antimicrobianos.

Charm II.
Cromatografía liquida de alta resolución. (AOAC)
Cromatografía liquida-espectrometría de masas. (AOAC).

Reconocidos por la American Organization of Analytical Chemistry o publicados en

revistas científicas con arbitraje y que su sensibilidad alcance los denominados
Niveles Máximos de Residuos (MRL).

ANEXO 5

Límites máximos permitidos de residuos de antimicrobianos en crustáceos

cultivados

Oxitetraciclina 0.1 ppm

Enrofloxacina 20 ppb
Sarafloxacina 20 ppb
Fluorfenicol 0.3 ppb

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ANEXO 6.

Métodos para la determinación de la concentración mínima inhibitoria.

El método para estimar la Susceptibilidad a Antimicrobianos en Medio Líquido aquí

expuesto se basa en las recomendaciones de la National Comittee for Clinical
Laboratory Standards (NCCLS, por sus siglas en Inglés) con modificaciones para
permitir el crecimiento de bacterias marinas (Roque et al., 2001; Alderman and Smith,
2001).

Preparación de soluciones madre de antimicrobianos (Hindler, 1992).

Los antimicrobianos abiertos deben ser guardados en un desecador y algunos deben

incluso ser refrigerados en el desecador, todos, de preferencia, en vacío. Es
importante mantenerlos deshidratados y no permitir la formación de condensación.
Esta prueba sólo debe realizarse con antimicrobianos grado Standard (Standard-
grade) de laboratorio y no con grado farmacéutico (pharmacy-grade). Los
antimicrobianos deben ser disueltos perfectamente en su correspondiente solvente
(ver Tabla 1) y luego diluidos para obtener la concentración requerida. La cantidad de
solvente debe ser la mínima necesaria para disolverlo, pueden ser sólo unas cuantas
gotas.

Tabla 1. Solventes y diluentes para los

antimicrobianos aprobados.
Antimicrobiano Solvente Diluente cita
Florfenicol Propilenglicol Agua
destilada
Enrofloxacin
Sarafloxacin Metanol y Agua (Stamm
agua destilada et al.,
destilada1 1986)
Oxitetraciclina Metanol Agua
destilada
Fosfomicina Metanol 50% Agua
destilada
1
hervir en baño Maria para disolverlo.

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Para la preparación de la solución madre, es necesario filtrar los antimicrobianos

mediante un filtro de membrana estéril. La soluciones madre deben guardarse a -70
°C o menos y son viables por aproximadamente seis meses. Una solución madre de
1,000 µg/ml (o 1 mg/ml) es suficiente para la mayoría de los casos. Para
oxitetraciclina, preparar una solución madre a 5,000 µg/ml (5 mg/ml).

Medio de cultivo

El medio de cultivo a emplear deberá ser caldo Mueller-Hinton (MHB) ajustado con
cationes de Ca+ y Mg+ (CAMHB) y adicionado con cloruro de sodio para permitir el
crecimiento de bacterias marinas (CAMHB+NaCl). Para el método de placas de
multipozos, es necesario preparar este medio concentrado (2X).

Para preparar un litro:

MHB: 42 g
NaCl: 20 g
Agua destilada: 1000 ml

Dispensar el MHB en el agua destilada y añadir el NaCl; lentamente llevarlo a

ebullición para que el medio se disuelva, siempre mantenerlo en agitación. No
hervirlo mucho ni aplicarle fuego directo ya que el medio se puede quemar; usar una
parrilla de calentamiento con agitación constante. Esterilizar a 121 °C por 15-20
minutos. Dejar enfriar el recipiente y luego llevarlo a 2-8 °C, dejarlo en esa
temperatura por varias horas.

Preparar las siguientes soluciones de cationes:

Solución madre de calcio

7.36 g de CaCl2*2H2O
100 ml agua desionizada

Poner el CaCl2 en un matraz volumétrico de 100 ml y añadir el agua a aforar,

agitar bien hasta la completa disolución. Dispensar en frascos y esterilizar a 121 °C
por 15 min y guardar en refrigeración hasta por un año.

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Solución madre de magnesio

8.36 g de MgCl2*6H2O
100 ml agua desionizada

Poner el MgCl2 en un matraz volumétrico de 100 ml y añadir el agua a aforar,

agitar bien hasta la completa disolución. Dispensar en frascos y esterilizar a 121 °C
por 15 min y guardar en refrigeración hasta por un año.

Ver en la etiqueta del medio MHB la concentración de calcio y magnesio que tiene y
calcular cuanto es necesario adicionarle de las soluciones madre de cationes. A la
concentración final deseada (50 mg de CaCl 2 y 25 mg de MgCl2) restarle la
concentración que ya tiene el medio. Agregar 0.1 ml en frío de la solución madre de
cada uno de los cationes por cada incremento de 1 mg/l necesario para obtener la
concentración deseada.

Mantener todo el tiempo el medio MHB y las soluciones de cationes en hielo para
evitar la precipitación de los cationes. Guardar el medio en refrigeración
perfectamente cerrado.

Inóculo bacteriano

De un crecimiento bacteriano puro de 24 h, incubadas por una noche (overnight), se

toman varias colonias y se suspenden en 5.0 ml de solución salina estéril (SSE, 1.5
% de NaCl en agua destilada) hasta alcanzar una densidad similar al 0.5 del
estándar de McFarland (equivalente a 1.5 x 10 8 células bacterianas por mililitro).

El estándar de McFarland se prepara en un tubo de vidrio con tapa de rosca

perfectamente lavado y esterilizado al igual que las pipetas a utilizar. Se agregan 0.5
ml de una solución de BaCL2 al 1.175 % a 99.5 ml de una solución de H 2SO4 al 1.0
%. Ambas soluciones se preparan en agua destilada.

Notas: Antes de utilizar el estándar de McFarland se agitará el tubo; en un mezclador

Vortex.

El tubo deberá estar perfectamente tapado y de ser posible sellado con papel
parafilm ó parafina, para evitar evaporación.

Si el estándar preparado presenta aglutinación ó evaporación, se desecha el tubo.

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Después de tres meses el estándar se revisará mensualmente y se leerá la densidad

óptica para verificar que aún está dentro del rango aceptable (0.08 a 0.1 a 610 nm);
hasta por un tiempo de doce meses.

Almacenar a temperatura ambiente, protegidos de la luz envolviéndolo en papel

aluminio.

Método miniaturizado en placas de multipozos.

La ventaja de este método radica en que en una sola placa (8*12 pozos), se pueden
probar hasta ocho cepas bacterianas (una cepa por fila) a diez concentraciones
diferentes de un mismo antibiótico, además incluye un control de crecimiento positivo
y una negativo (para asegurarse que no existe contaminación de la placa).

Preparación de las placas

1. Se usan placas de 96 multipozos de 250 l de capacidad estériles y con tapa

(Figura 1).
2. Las concentraciones de las placas serán de 64, 32, 16, 8, 4, 2, 1, 0.5, 0.25 y
0.125 µg/ml para todos los antibióticos en los cuales se usó la solución madre de 1.0
mg/ml. Para el caso de oxitetraciclina, que se usó una solución madre de 5 mg/ml,
las concentraciones de lo pozos serán 512, 256, 128, 64, 32, 16, 8, 4, 2 y 1 µg/ml.
Según las recomendaciones de (Roque et al., 2001) y (Amsterdam, 1996).
3. Preparar las siguientes soluciones:
3.1. Medio de cultivo: preparar CAMHB+NaCl como se explicó anteriormente,
concentrado 2X.
3.2. Solución madre de antimicrobianos como se explicó anteriormente.
3.3. Solución salina estéril (SSE), 100 ml de agua destilada y 3.0 g de NaCl.
Esterilizar a 121 °C por 15 min.
4. Se llenan los pozos de las placas de multipozos como se explica en la Tabla 2.
Para las columnas 3 a la 12, es importante mezclar perfectamente las soluciones
antes de proseguir con el llenado de los subsiguientes pozos. Al final del llenado,
todos lo pozos tendrán 100 l.

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Tabla 2. Preparación de la placa de multipozos para la determinación de la CIM.

Colum Nombre Contenido
na
1 Control positivo 100 l de CAMHB+NaCl 2X
2 Control negativo 100 l de CAMHB+NaCl 2X
3 Máx. concentración 187.2 l de CAMHB+NaCl 2X  12.8 l de la solución madre de
antibiótico.
Para oxitetraciclina usar 179.5 l de CAMHB+NaCl 2X  20.5 l
de la solución madre del antibiótico.
4-11 Concentraciones 100 l de CAMHB+NaCl 2X + 100 l tomados del pozo anterior.
intermedias
12 Mín. concentración 100 l de CAMHB+NaCl 2X + 100 l tomados de pozo anterior.
Tomar 100 l y descartar.

5. Se incuba la caja a 30C durante 24 horas para probar la esterilidad y se observa

que no halla contaminación en las placas de multipozos (turbidez).
6. Las placas se pueden guardar inmediatamente en congelación a -20 °C por varias
semanas o incluso un año a -70 °C. Meter las placas en bolsas y sellarlas, rotularlas
adecuadamente con la fecha y contenido.

Inoculación de las placas

1. Preparar un inóculo bacteriano como se describió anteriormente. Diluir este

inóculo: 67 µl en 9.93 ml de SSE para obtener una densidad final de 1.0 x 10 6 cel/ml.
2. Las placas se inocularán de la siguiente manera: del inóculo diluido, se tomarán
100 µl y se agregarán al pozo A1 (control positivo); esto se repite para los pozos A3
hasta el A12 (concentraciones decrecientes del antibiótico). 100 µl de SSE se
agregarán al pozo A2 (control negativo). Al final, todos los pozos tendrán 200 µl. Usar
la misma SSE que se usó para preparar el inóculo bacteriano.
3. El procedimiento anterior se repetirá para cada uno de los inóculos (cepas)
preparados, un inóculo por fila.
4. Se incuba las placas de multipozos a 30C durante 24 h.

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Figura 1. Placa de 96 multipozos usada para determinar la

Concentración Mínima Inhibitoria.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A
B
C
D
85 m m

E
F
G
H

125 m m

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Lectura de resultados

1. Después de la incubación, registrar como positivos los pozos que presenten

turbidez por el crecimiento bacteriano. Asegurarse que el control positivo presente
turbidez (columna 1) y el negativo es totalmente transparente (control de
contaminación).

2. La Concentración Mínima Inhibitoria será aquella igual a la que contenga el pozo

con mayor concentración del antibiótico que no tenga turbidez (crecimiento negativo).
Las placas multipozos se pueden también leer en un lector de placas a una a 610nm.
Reportar

1. Concentración Mínima Inhibitoria (CMI): µg/ml del antibiótico para cada una de las
cepas probadas.

2. CMI promedio de todas las cepas probadas, desviación estándar y moda.

Control de calidad

Es necesario realizar un control de calidad de los procedimientos para ver que éstos
se ajusten a lo esperado. Para esto se usa la cepa de E. coli ATCC 25922 que debe
de dar un intervalo como se muestra en la Tabla 3 Para realizar este control de
calidad, los medios y soluciones se deben preparar sin sal, se emplea suero
fisiológico estéril (0.85 % NaCl) para preparar el inóculo y el control de crecimiento
negativo.

Tabla 3. Intervalos aceptados de CMI para la E. coli ATCC 25922

Antimicrobiano Intervalo CIM Cita
(µg/ml)
Enrofloxacin 0.008-0.03 (Shryock and Altier, 2001)
Florfenicol 2-8 (Marshall et al., 1996)
Sarafloxacin 0.008-0.03 (Shryock and Altier, 2001)
Oxitetraciclina Por determinar -
Fosfomicina 0.5-2 (NCCLS, 1999)

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ANEXO 7. Diagnóstico presuntivo de vibriosis en camarones juveniles y

adultos

Definición de diagnóstico presuntivo: Diagnostico preliminar basado en

observaciones en grueso y evidencia circunstancial. Cuando mas de un agente
infeccioso puede ser el agente causal de una enfermedad puede ser requerido un
diagnóstico definitivo, usualmente niveles de diagnostico II (parasitología,
bacteriología, micología e histopatología) y III (virología, microscopia electrónica,
biología molecular e inmunología). Bondad-Reantaso, M., McGladdery, S., East, I
and Subasinghe, R. 2001. Asia Diagnostic Guide to Aquatic Animal Diseases, FAO
Fisheries Technical Paper 402/2.

El diagnóstico presuntivo de vibriosis se establece cuando se observan varios signos

conductuales, macro y microscópicos en los camarones afectados (Lightner, 1993;
Lavilla-Pitogo, 1995), así como altos números de vibrios en la hemolinfa de acuerdo
a la Tabla 4, ya que algunos vibrios pueden ser detectados en la hemolinfa de
organismos sanos(Gomez-Gil et al., 1998).

Signos conductuales

Letargia, camarones nadando lentamente en la superficie de los estanques o en el

fondo en las orillas. Pueden perder la reacción de escape.
Anorexia, los camarones no consumen alimento y por lo tanto se observan con el
tracto digestivo vacío.

Signos morfológicos macro y microscópicos

Coloración oscura o rojiza, por la expansión de cromatóforos.

El músculo se puede observar opaco o blanquecino.
Las branquias pueden tener una coloración café.
Infestación por epibiontes en la cutícula y branquias.
Erosiones melanizadas en apéndices y en ocasiones necrosis.
Un examen en fresco puede mostrar el tracto vacío o con un líquido acuoso
blanquecino, también se pueden observar puntos negros en el órgano linfoide.

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Conteo de bacterias en la hemolinfa

Reactivos

Preparar el anticoagulante SIC-EDTA (Vargas-Albores et al., 1993):

450 mM NaCl
10 mM KCl
10 mM buffer HEPES

Disolver bien en agua destilada y ajustar el pH a 7.3, agregar 10 mM EDTA-Na y

filtrar a 0.22 µm. Dispensar 0.1 ml en tubos tipo Eppendorf de 1.5 ml estériles.
Mantener en refrigeración hasta su uso.

Procedimiento

1. Un examen bacteriológico sólo puede ser llevado a cabo en animales vivos.

Obtener al menos cinco camarones grandes o diez chicos sospechosos de vibriosis
con base en los signos expuestos anteriormente.

2. Desinfectar la superficie externa del camarón con un algodón impregnado en

alcohol al 70%. Esperar a que el alcohol se evapore.

3. Con una jeringa hipodérmica de insulina de 0.5 o 1.0 ml, (dependiendo del
tamaño del camarón), conteniendo el anticoagulante en una proporción 1:1 extraer
directamente del corazón o del seno ventral aproximadamente 20 µl de hemolinfa
en camarones grandes o 10 µl en camarones chicos. Vaciar el contenido en tubos
Eppendorf; acumular un volumen final de 200 µl de hemolinfa y anticoagulante.
Tener cuidado de no penetrar hepatopancreas. Si la hemolinfa se ve muy turbia y con
color rojizo, es probable que se haya contaminado con líquido del hepatopáncreas,
observar si también en el corazón se observa contaminación. Registrar el número de
camarones usados para obtener los 100 µl de hemolinfa. Mezclar perfectamente la
mezcla invirtiendo el tubo varias veces.

4. Sembrar 100 µl de la mezcla hemolinfa-anticoagulante esparciéndola

perfectamente en agar TCBS por medio de un rastrillo de vidrio.

5. Incubar las cajas de Petri inoculadas a 29-30ºC durante la noche, contar las
Unidades Formadoras de Colonias (UFC) al día siguiente.

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6. Calcular: UFC/ml/camarón = (UFCs contadas X 20)/ No. de camarones

muestreados.

7. Registrar:

7.1. UFC por ml de hemolinfa por camarón en agar TCBS (UFC/ml/camarón).

7.2. Porcentaje de colonias verdes en agar TCBS.

7.3. Presencia de colonias luminiscentes. Nula = cero colonias, baja = menos de

10 %, media = menos de 50 % y alta = mas de 50 % del conteo total.

8. Interpretación. De acuerdo a la Tabla 1.

Tabla 4. Interpretación de los niveles

de bacterias del género Vibrio en
hemolinfa de camarones juveniles o
adultos.
Tipos de UFC Hemolinfa
en agar TCBS (UFC/ml)
>103 <103
Verdes
luminiscentes muy grave grave
100%
Verdes >50% serio-grave serio
serio – moder
Verdes <50%
moderado ado
Amarillas moderado normal
Nada normal

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ANEXO 8.
Listado de laboratorios terceros especialistas aprobados por la
Secretaría de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación
para el diagnóstico de enfermedades en el cultivo de camarón.

1.- Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C. La Paz, B.C.S.

Dr. Jorge Hernández López.
Tel: 01(662)213-1593
Fax: 01(662)212-1201
Correo electrónico: jhlopez04@cibnor.mx

2.- Universidad de Sonora, Departamento de Investigación Científica y Tecnológica de la

Universidad de Sonora
Responsable: Ing. León Armando Pérez Alvidrez.
Tel: 01(662)212-1995.
Correo electrónico: lperez@guayacan.uson.mx

3.- Universidad de Occidente. Los Mochis, Sin.

Responsable: M. en C. Josefina Audelo del Valle.
Tel: 01(688)816-1000
Correo electrónico: jaudelo@mochis.udo.mx

4.- Centro de Ciencias de Sinaloa. Culiacán, Sin.

Responsable: M. en C. Martha Zaraín Herzberg
Tel: 01(667)712-2939
Correo electrónico: martha@computo.ccs.net.mx

5.- Centro de Investigación y Desarrollo, A. C. Mazatlán, Sin.

Responsable: M. en C. Leobardo Montoya Rodríguez
Tel: 01(669)988-0157

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Correo electrónico: montoya@victoria.ciad.mx

6.- Diagnóstico Integral en Organismos Acuáticos, A.C. Culiacán, Sin.

Responsable: M. en C. Juan Carlos Martínez A.
Tel: 01(667)7609296
Correo electrónico: acuadiag@prodigy.net.mx

7.- Universidad Autónoma de Nuevo León. Facultad de Ciencias Biológicas. Monterrey, N.L.
Responsable: Dr. Lucio Galaviz Silva.
Tel: 01(818)352-4425
Correo electrónico: lgalaviz@ccr.dsl.uanl.mx

8.- Universidad Autónoma de Tamaulipas. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia.

Ciudad Victoria, Tamps.
Responsable: MVZ Ned Iván de la Cruz
Tel: 01(834)312-4867
Correo electrónico: nidelacruz@fmvz.uat.mx

9.- Instituto Politécnico Nacional. Laboratorio de Biotecnología Animal I. Reynosa, Tamps.

Responsable: Dra. Ana María Sifuentes Rincón.
Tel: 01(899)924-3627 y 925-1656.
Correo electrónico: ana@mail.cbg.ipn.mx

10.- Centro de Investigación y Estudios Avanzados Unidad Mérida. Mérida, Yuc.

Responsable: Dr. Víctor M. Vidal Martínez.
Tel: 01(999)981-2923 y 981-2919.
Correo electrónico: info@mda.cinvestav.mx

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