Preparación De extracto y prueba material

Para preparar extractos para cribado de la actividad antibacteriana, se maceraron 20 g de

material vegetal polimerizado en 100 ml de etanol al 50% durante 7 días a Temperatura
ambiente con agitación ocasional. Después de la filtración con un papel de filtro Whatman nº
2, se colocaron 50 \ mu l de macerado en discos de papel curvados por absorción esterilizados
(6 mm de diámetro, 0,6 mm de espesor) y se secaron sobre una campana microbiológica de
flujo laminar.

Las cepas bacterianas utilizadas fueron: Escherichia coli enteropatógena Poli BO: 119,
Salmonella enteritidis, typhi Salmo-nella (ATCC 65391, dysenteriae Shigellu y Shigellu flexneri
(ATCC 120221. Las colonias se inocularon en caldo de tripticasa de soja o caldo Muller Hinton,
se incubaron durante 6-8 h a 35ºC y se diluyeron con caldo para leer en un espectrofotómetro
la densidad equivalente a lo6 bacterias / ml, de acuerdo con el tubo nefelométrico MacFarland
No. 0,5. Esta suspensión se extendió uniformemente sobre la superficie de las placas de Agar
Muller-Hinton con un hisopo de algodón. Los discos impregnados se colocaron en lugares
específicos elegidos de manera aleatoria, se presionaron suavemente para asegurar el
contacto, y se incubaron a 35ºC durante 24 h.

Las zonas de inhibición se midieron con una regla transparente y se registraron como el
diámetro en mm. Desafíos se llevaron a cabo al menos seis veces con la interpretación
seguimiento-ción: positivo (+ 1, los que demostró consistentemente una zona mensurable de
inhibición (> 8 mm); intermedio (f), los que tienen zonas de inhibición claras (6-8 mm) o que
carecen de reproducibilidad; negativo (- 1, los que no tienen ninguna zona de inhibición (<6
mm); y, no se realiza (01.