BIOPROSPECCIÓN

Curso de Biotecnología para no

Biotecnólogos.
2018
Mauricio Bernal Morales
Nubia Moreno Sarmiento
Dolly Montoya C.
Universidad Nacional de Colombia
 INDICE

• Bioprospección y su relación con los Recursos

genéticos y Biotecnología.

• Qué buscamos en la Biodiversidad y Cómo encontrar

material biológico?

• Bioprospección: Cómo pasar de la biodiversidad a la

industria?

• Estudios de caso en el IBUN

 INDICE

• Bioprospección, Recursos genéticos y

Biotecnología.
• Qué buscamos en la Biodiversidad y Cómo
encontrar material biológico?
• Bioprospección: Cómo pasar de la
biodiversidad a la industria?
• Estudio de caso en el IBUN
Biodiversidad o diversidad biológica, es el
término por el que se hace referencia a la
amplia variedad de seres vivos sobre la Tierra
y los patrones naturales que conforma,
resultado de miles de millones de años de
Evolución según procesos naturales y también,
de la influencia creciente de las actividades
del ser humano (Convenio Internacional sobre la Diversidad Biológica).
 BIOPROSPECCIÓN

Exploración y evaluación del material biológico Nativo para

buscar productos de alto valor agregado. ( Artuso A. 2002)
Uso sostenible de la biodiversidad: Bioprospección

Biodiversidad y Ciencias básicas

recursos
Biotecnología Ingeniería
genéticos

Legislación
Regulación

Productos Bionegocios
y Mercadeo
 Búsqueda
Sorcerer II expedition
http://www.sorcerer2expedition.org/version1/HTML/main.htm

Agosto 2003- mayo2004

Venter Institute,
Universidades e
Instituciones Norte
Americanas

http://www.sorcerer2expedition.org/version1/HTML/main.htm
 INDICE

• Bioprospección y su relación con los

Recursos genéticos y Biotecnología.
• Qué buscamos en la Biodiversidad y Cómo
encontrar material biológico?
• Bioprospección: Cómo pasar de la
biodiversidad a la industria?
• Estudio de caso en el IBUN
 Historia siglo XIX.
• Cazadores de microbios con un potencial uso.
Levaduras (Schwann, 1837)

Bacterias.(Pasteur, 1857)

Virus (Ivanowsky, 1892)

 Historia siglo XX
• Cazadores de genes. (Biología Molecular)

DNA.

Proteínas.

Secuencia de genomas.
 Que buscamos?
Genes

Enzimas

Biomoléculas
 Para que nos sirve?
• Farmacéutica. • Industriales.
Antivirales. Plásticos
Antibióticos. biodegradables.
Anticancerígenos. Detergentes.
Reductores del Polímeros.
colesterol. Alimentos.
Antioxidantes. Biorremediación
 INDICE

• Bioprospección y su relación con los Recursos

genéticos y Biotecnología.

• Qué buscamos en la Biodiversidad y Cómo encontrar

material biológico?

• Bioprospección: Cómo pasar de la biodiversidad a la

industria?

• Estudio de caso en el IBUN

 BIOPROSPECCIÓN
PROCESAMIENTO
INSUMOS / COMERCIAL
MATERIA PRIMA
B
I
O Biotecnología
P Bioproductos
R
Biofarmacia
- Biodiversidad Biomedicina
- Salud O
Bioinformática
(Humana y Animal) C Biocombustibles BIONEGOCIOS
- Minería E Bio-agro-insumos Spin-offs
S Semillas
O Mat. Vegetal
S
Lixiviados

Eje Recursos Humanos - Recursos Financieros – Infraestructura -

transversal Innovación y Desarrollo – Políticas -
Sociedad CIVIDA: Ciudadela ID&I en Ciencias de la Vida
 Del laboratorio al mercado
Generación de ideas Desarrollo del prototipo Introducción al mercado

Orientación Valoración y selección de ideas Desarrollo en serie

estratégica

UGI EN BIOTECNOLOGIA
UNIVERSIDAD INDUSTRIAL, AGROALIMENTARIA Y EMPRESA
SALUD

Bancar la empresa
ENLACE PARA EL DESARROLLO
CONOCIMIENTO E TECNOLÓGICO Y PROTOTIPOS PRODUCCIÓN Y
INVESTIGACIÓN COMERCIALIZACIÓN

GENERACIÓN DE NUEVAS IDEAS

VALORACIÓN DE IDEAS NACIONALES
ESCALAMIENTO INDUSTRIAL
DEFINICIÓN DE PROPIEDAD E INTERNACIONALES DE PRODUCTOS
INTELECTUAL Y SERVICIOS

APLICACIÓN DE NORMAS DE CALIDAD,

ESTABLECIMIENTO DE REGLAS DE
BIOSEGURIDAD Y MDIO AMBIENTE
NEGOCIACIÓN

APLICACIÓN DE NORMAS ÉTICAS Y

NICHOS DE MERCADO
LEGALES
PLANES DE NEGOCIOS

Fuente: Dr. Utz Dornberger. INNOAYS GmbH

 INDICE

• Bioprospección y su relación con los

Recursos genéticos y Biotecnología.
• Qué buscamos en la Biodiversidad y Cómo
encontrar material biológico?
• Cómo pasar de la biodiversidad a la
industria?
• Estudio de caso en el IBUN
 Aislamiento de Clostridios productores de
solventes

155 muestras
de suelo 178 aislamientos de 13 cepas
Clostridios promisorias

Cepa mejor
Evaluación
productora Cuantificación mejores
productoras
 Ingeniería metabólica en cepas nativas de
Clostridios productores de solventes

Evaluación ruta metabólica

Cepas
promisorias
Caracterización bioquímica y
molecular Secuenciamiento operón

• Componentes nutricionales
(Sustratos, microlementos)
• Componentes ambientales
(pH, To, Agitación, etc.)
Fermentación
Hierarchical Cluster Analy sis

0% C beijNCIMB8052

0% C sacpbaNI-4

0% IBUN137K

CbutDSM2478

IBUN140B

IBUN22A
0%
IBUN64A

C aceDSM1732

IBUN125C

IBUN158B

0% IBUN18Q

IBUN18A

IBUN18S

IBUN62B

IBUN95B

IBUN13A

5
 DESARROLLOS EN EL MICROORGANISMO
ATP
INGENIERÍA GENÉTICA
NAD+ ADP GLICEROL H2O
NADH NAD+
4 7
NADH 3-Hidroxipropionaldehído
NADH
Dihidroxiacetona NAD+
Biomasa
ATP 6
5
ADP
Glucosa 1,3-propanodiol
2 ATP Dihidroxiacetona-P

2 ADP
Gliceraldehído-3-P
ADP NAD+
13
ATP NADH CO2 ADP ATP

Fosfoenolpiruvato Succinato
ADP 2 NADH 2 NAD

NAD+ NADH
ATP
CO2 CO2
Lactato Piruvato acetolactato acetoina
H2 H2
HSCoA CO2 NAD+
NADH Fd ox NADH
2 1 12 Fd ox
3 NADH
Fd red
NAD+ Fd red 1 NAD+
2,3-butanodiol
2 H+ Formiato
2 H+
Construcción del vector de clonación
CO2 HSCoA
H2
NADH Acetil-CoA Acetoacetil-CoA
NAD+
HSCoA NADH
8 Pi
HSCoA NAD+
Acetaldehído Acetil-P 3-Hidroxibutiril-CoA
NADH ADP H2O
9
NAD+ ATP Crotonil-CoA
NADH
Etanol Acetato NADH NAD+
+
NAD Butiril-CoA
10 Pi
HSCoA

Butirilaldehído Butiril-P
NADH ADP
11
NAD+ ATP
n-butanol Butirato

Mutagénesis integracional para

evaluar la regulación de la expresión
metabólica en la cepa de Clostridium
sp IBUN 158B
Ruta metabólica de la fermentación de glicerol. (Propuesto por Biebl et al. y Saint et al.)
 DESARROLLOS EN EL MICROORGANISMO
PROTEÓMICA
Análisis proteómico de la cepa nativa Clostridium sp. IBUN 158 B en condiciones de
producción de 1,3- propanodiol

Spots exclusivos en la fase de latencia y la fase exponencial. Electroforesis bidimensional (gel de poliacrilamida al 12%). a) En
círculos de color café, proteínas intracelulares de la fase exponencial. b) En círculos de color rojo, proteínas intracelulares de la fase
de latencia de la cepa nativa Clostridium sp. IBUN 158 B.
Comba N. 2011. Tesis de Maestría
Proceso de Biodiesel con PDO integrado

PRODUCCIÓN PURIFICACIÓN
BIODIESEL BIODIESEL

BENEFICIO DE
GLICERINA 80%
ANAERÓBICA

PRODUCCIÓN
BIOLÓGICA SEPARACIÓN
PDO PDO

Modelo de Producción de Biodiesel: M.J. Haas et al. / Bioresource Technology 97 (2006) 671–678
Componentes del Programa

Proyecto 1

Ingeniería
Mejoramiento
Diseño Planta
Microorganismo
Piloto
PDO
PDO

Escenarios
Económicos Bio -
fabrica

Proyecto 2
 El concepto integrado de Biorefinería

Fuente: Royal Belgian Academy Council of Applied Science, Industrial Biomass: Source of Chemicals Materials and Energy, 2011 (adapted from US DOE).
2016
 Evolución Del precio internacional para algunos fertilizantes

450% P

436% K

222% N

Inflación 6.49% 5.50% 4.85% 4.48% 5.69% 4.15%

Inflación Total 31.16%

Fuente: Portafolio 24 de junio de 2008

 El sistema como un todo
para entender el
Proceso y las interacciones
del suelo cultivable

5% - 21%
fotosintato

Amino ácidos, ácidos orgánicos, azucares

fenoles, polisacáridos y proteínas
Walker et al 2003. (Plant Physiology 132: 44-51)
 Agricultura Moderna

Productividad combinada con calidad y

sostenibilidad

Para Maximizar la actividad benefica de los

microorganismos del suelo

Manejo del cultivo y

del suelo

Adicion de inoculantes
 Los bioinsumos: biocontroladores,
bioinsecticidas o biofungicidas y los
biofertilizantes, fertilizantes
biológicos o inoculantes, son productos
tecnológicos basados en microorganismos,
hongos y bacterias,
promotores del crecimiento vegetal.
Pueden sustituir parcial o totalmente
a los productos químicos,
por lo que son de gran importancia para
la sustentabilidad de la agricultura,
particularmente en regiones
económicamente deprimidas.
 Cultivo de Arroz
• Consumo de fertilizantes aumentó de 80 a 280 Kg/Ha
• Para este cultivo se recomienda que la fertilización tenga altos contenidos de
Nitrógeno, fósforo y potasio, necesitándose desde 150kg N /ha para que esta
sea apreciable.
• La eficiencia de los fertilizantes usualmente es baja.

Nitrógeno: 50%
Fósforo: 10 - 25%
Potasio: 40%

• Los costos de los fertilizantes

y el control de plagas corresponde a
uno de los rubros más altos que debe
pagar el agricultor
 Papel Agro-Ecológico de
Microorganismos PGPR
• Auxinas (AIA) Producción de
• Citoquininas Reguladores de
crecimiento vegetal
Biofertilización
Promoción
Antagonismo de crecimiento Bio-disponibilidad
vegetal de nutrientes

Directo Indirecto • Solubilización de

P y S inorgánico
• Mineralización
de P orgánico
• Antibióticos • Colonización • Descomposición de
minerales de
• HCN • Resistencia aluminiosilicato
• Sideróforos inducida • Degradadores de
compuestos xenobióticos
• Amonificación • Ciclo del N
• Oxidación del Mn
II. ACCIONES

CONVENIO
 Los Bioinsumos

Productos
Productos

Campo
Campo
Invernadero

Invernadero
Laboratorio
Laboratorio

Seleccion y potencialidades
Seleccion y potencialidades

Asociación con grupos de investigación

 Producción de Bioinsumos
Evaluación a nivel laboratorio y banco

ESCALAMIENTO
ACTIVIDAD
Propagación masiva
planta piloto y nivel comercial

Formulación

Empaque
 Evaluación de actividades
Reducción del acetileno
Inyección de
Acetileno acetileno
etileno

Incubación

Crecimiento en
Lectura en cromatógrafo
medio semisólido
de gases
Solubilización de Prueba
Cualitativa SRS NBRIP
fosfatos
Prueba Prueba colorimétrica
Cuantitativa
Molibdovanadato
Prueba
Producción de Ácido colorimétrica con
Indol Acético y sin triptófano

Metabolitos volatiles
Actividad 80
60
antagónica 40
20
0

R.…
Botr…

Colle…
Colle…
Colle…
Fusa…
Colonización de R. Alternaria sp. (Clavel)
solani (arroz) por Colonización de B. Control T. viride
T. viride Plato pre- cinerea por T. viride
 Propagación Masiva del
Ingrediente Activo
PREINÓCULO INÓCULO FERMENTACION
CEPA
0.01 X 0.1 X X

Agitación: 200 rpm

Temperatura: 30 ºC Agitación: 150 rpm
Temperatura: 30 ºC
Aireación: max 1 vvm
 FORMULACIÓN
Objetivos:
• Mantenimiento de la vida útil del producto.
• Conservación de la actividad.
• Protección de microorganismo.
• Ayuda al manejo y aplicación del producto
• Permite al microorganismo reactivarse, ajustarse
fisiológicamente, propagarse y establecerse.
 Talco Selección
de los
Zeolita Ingrediente mejores
Turba Activo prototipos
Cascarilla
de arroz
Soporte Estabilidad
Inerte y pureza

3. FORMULACIÓN
Protección
osmótica : Mezcla
sacarosa
Molienda
Protector UV: Operaciones
Adyuvantes Secado
riboflamina Unitarias
Antioxidantes:
ácido ascórbico
Esterilización
Dispersantes:
almidón de maíz Materias
• Esterilización con calor seco
primas
Adherentes:
• Esterilización con vapor
melazas
• Esterilización con gases
Surfactantes:
Tween • Esterilización con radiaciones
 Molienda

Incubadora Mezclado

Selladora
 EMPAQUE
-Completo aislamiento del ingrediente activo
-Protección en embalaje y transporte
-Protege el ingrediente activo en lugares cálidos
-Diseñado para el empaque aséptico del producto.
II. ACCIONES - PROYECTOS

Convenio Instituto de Biotecnología de la Universidad Nacional (IBUN):

Para adaptar dicha tecnología a las condiciones del país.
a) Disminución Fertilizantes químicos.
b) Disminución de insecticidas y fungicidas químicos.
c) Aislamiento de cepas nativas
d) Producción de Organismos Biológicos aplicables a la agricultura.
e) Control de Calidad
REACTORES DE TANQUE AGITADO
DIFERENTES ESCALAS
 DESARROLLO DEL PROYECTO

1. Montaje de la Planta Piloto en el IBUN, con equipo de

BIOCULTIVOS en comodato a la planta del IBUN.
La Planta Piloto en la UN
 ACCIONES
3. Convenio con Federación Nacional de Arroceros: Para evaluación y
desarrollo en campo de los productos.
a) Efectos en el Cultivo
b) Dosis
c) Épocas de Aplicación.

4. Se creo el departamento técnico de Biocultivos S.A., con el fin de hacer

desarrollo en otros cultivos como pastos, maíz, caña de azúcar,
hortalizas, frutales y flores.
5. Se creo el departamento comercial de Biocultivos S.A., con el fin de
ofrecer tecnologías biológicas que den soluciones a nuestros usuarios
del sector agropecuario haciendo un acompañamiento técnico de
posventa hasta el final de sus cosechas.
 0.60
3.35

1.28
1.35
4.20 ASEO

2.00
área 6,70 m2 OFICINA DE
RECURSOS HUMANOS

1.65
6.00 7.20 área 11.40 m2
1.35

3.50

0.60
2.30 1.55 2.20

ALMACENAMIENTO CEPARIO

5.80
3.00
0.15
área 10.50 m2
3.82 2.79 INSUMOS 0.95 3.80
área 22,40 m2 LOCKERS CAFETERÍA
PLANTA

3.74
área 8,30 m2
AUXILIAR RECEPCIÓN 4.75
2.85

área 11.40 m2 área 31.45 m2

9.77
LABORATORIOS INÓCULOS

3.40
3.77
área 69.85 m2 área 11.90 m2 6.45
ALMACENAMIENTO
MANTENIMIENTO
LABORATORIO

3.74
área 9,00 m2
ALMACENAMIENTO área 12,70 m2
3.24

área 12,22 m2 ENFERMERÍA

0.15 área 8,30 m2
3.50
2.45 3.45

6.00
CUARTO
ATEMPERADO

3.00
3.77 2.20
0.15
área 10.50 m2
MOLIENDA LAVA OJO

1.20
2.78
(INICIO PROCESO) AUTO CLAVE Y DUCHA
LOCKERS
área 25,85 m2
3.39

área 12,80 m2

0.15
26.00

0.15
3.78 2.77 6.00 3.70 2.85 4.85 4.85 CUARTO FRIO
área 12.60 m2
REACTOR DE
BACTERIAS INCUBACIÓN MEZCLADO

6.30
3.65 3.85
3.22

(LIQUIDOS) BODEGA

3.58
área 17,45 m2 área 17.45 m2
MANEJO DE área 24,73 m2

7.50
PRODUCTO
4.85

AGUA
TERMINADO
área 18.30 m2
0.15

REACTOR
PREPARACIÓN SECADO
FOSFOSOL LAVADO MOLIENDA Y
3.22

9.98

2.54
área 24.73 m2 DE TORTA área 12,12 m2
EMPACADO Y área 15,25 m2
área 12,12 m2 EMPACADO

7.83
ENVASADO área 47.20 m2
3.81

COMPRESORES
ENVASADORA

área 14,40 m2
REACTOR
INCUBACIÓN MEZCLADO

3.60
0.15

TRIFESOL
3.23

área 17,45 m2 área 17.45 m2

área 24,73 m2
3.85

PANELES
CALDERAS
3.81

área 14,40 m2
2.80

38.00
 El propósito

Cubrir las necesidades de

los clientes individuales
mediante la entrega de
inoculantes de alto valor:
Prestar servicio técnico,
Asistencia
 Ubicación

Ibagué

Área 1.200.000 Km2

A. Cultivable 2.400.000 Ha
NUESTRA PLANTA DE PRODUCION
LABORATORIO
 EQUIPOS PARA SUMINISTRO DE
SERVICIOS

CALDERA TANQUE SUAVIZADOR DE

AGUA
COMPRESOR AUTOCLAVE
SISTEMA DE RED DE AIRE TANQUE DE TRATAMIENTO Y
CLASIFICADO TORRE DE ENFRIAMIENTO DE
AGUA
 EQUIPOS DE PROCESO
PRODUCCION DE LIQUIDOS

REACTORES DE TANQUE DOSIFICADORA DE LIQUIDOS

AGITADO
 PRODUCCION DE SOLIDOS

INCUBADORAS
TANQUE DE MEZCLA
MEZCLADORA SECADOR DE LECHO FLUIDO
 CUARTO FRIO

MOLIENDA
 MARCO M ovimientos de las grandes
cor poraciones de
16

COMPETITIVO agroquímicos en el sector

BAYER CROP SCI ENCES (USD $ 8 m il SYNGENTA (USD $ 10 mil millones crop
m illones) protection)
BAYER BI OLOGI CS
2011: Acuerdo de distribución con Marrone Bio
2010: Adquisición bio fungicida Agrogreen (Israel) Innovations en Suiza
2011: Acuerdo con Monsanto desarrolló 2011: Acuerdo de distribución con Pasteuria
bioinsecticidas bioscience
2012: Adquisición de Agraquest (USD $450 Millones) 2011: Acuerdo con Pasteuria para desarrollo de
(Agraquest: ventas 2011 USD $36 millones; inversión bionematicida
acumulativa mayor a USD $100 millones) 2012: Adquisición de Pasteuria Bioscience (USD $113
2013: Adquisición de Prophyta millones)

M ONSANTO (USD $ 3 m il m illones crop BASF (USD 4,6 m il m illones crop solutions)
protection)
2009: Becker Underwood acuerdo de licenciamiento
2010: Acuerdo con Agraquest desarrolló de biopesticida plant bioscience limited (UK)
2011: Acuerdo con Bayer desarrolló de un bioinsecticida 2010: Adquisición de productos de control biológico
2012: Lanza BioDirect™ plataforma productos biológicos Becker Underwood
2013: Adquisición de activos de Agradis 2012: Adquisición de Becker Underwood, (USD $1.020
2013: Acuerdo con Synthetic Genomics Inc (SGI) millones) (Becker Underwood: ventas 2011
desarrolló de productos biológicos. Inversión de capital biopesticidas USD $28 millones

DOW AGROSCIENCES
66
Cortesia ECOFLORA
El objetivo
Obtener productos
que sean seguros,
efectivos y fáciles de
usar en manos del
agricultor a precios
razonables
Evaluación en Invernadero

Mediciones
•Desarrollo de la planta
•Peso seco
•Desarrollo radicular
•Control de enfermedad
•Fosforo asimilado
Hacienda: Providencia
Biocultivos 154 Bts
Municipio: Armero
Lote: 730-170
Testigo 130 Bts
 TRIFESOL
como controlador de
hongos patógenos
1 Aplicación de biológicos sin químicos 2 Aplicaciones químicas
 FOSFOBIOL
Solubilizador de fosfatos
PGPR
 Aplicación de P. j en arroz

BIOCULTIVOS
Reducción de
30% de Nitrógeno químico
TESTIGO
50% de fósforo
Aumento de 5 a 10% de producción
EFECTO DE BACTERIAS PROMOTORAS DE CRECIMIENTO EN EL LLENADO DE
GRANO DE FEDEARROZ 50

RENDIMIENTO
Tratamiento Kg/Ha
Dimargón 0,5 + Fosfobiol 0,5 (IPF) 5187
Dimargón 0,5 (IPF) 5133
Testigo 4336

Castilla La Nueva, (Meta) 2006A

Fuente: I.A. Dario Pineda- Dpto Tecnico Fedearroz

 PASTOS

TESTIGO

BIOCULTIVOS

LOTE: PORFIN - FINCA: LA ESTRELLA

Biocultivos 460 Pacas
- VARIEDAD: PANGOLA Testigo 380 Pacas
BIOCULTIVOS

ALGODON

TESTIGO
 COSTO BENEFICIO
I. TOTAL COSTO $ 144.000

II. DISMINUCION DEL COSTO

Disminución 1 bulto DAP $ 125.000
Disminución 4 bultos UREA $ 262.000
Disminución 1 Aplicación fungicida $ 112.000
Total $ 499.000

BENEFICIO ECONOMICO $ 355.000

III. BENEFICIO COLATERAL

1. Disminución en control de malezas por mejor macollamiento
2. Aumento producción – Sanidad de las plantas
3. Mejoramiento de calidad de grano
4. Recuperación de suelos - Restablecimiento del equilibrio ecológico
5. Conservación del medio Ambiente
 CONCLUSIONES

1. Formación de TALENTO Humano conectado con la realidad del país.

2. Aplicación de la investigación al desarrollo del sector agropecuario nacional. Para
ayudar a resolver los dos grandes conflictos de la Humanidad ALIMENTICIO-
ENERGETICO
3. Apoyo a la competitividad del sector AGROPECUARIO
a) Disminución en costo producción del 8%.
b) Aumento de Producción del 7%.
c) Mejor Calidad
4. Disminución del impacto negativo al medio ambiente.
a) Racionalización del uso químicos

b) Recuperación de la microbiología del suelo.

Gracias