1.

Calcular la concentración (µg/100g) de retinol en la muestra, con los siguientes datos:

a. Preparación del estándar: Se pesaron 9.5 mg de estándar de retinol y se llevó a 10 mL con metanol
en un matraz volumétrico. Se tomaron diferentes alícuotas y cada una se llevó a 10 mL con
metanol.
b. Preparación de la muestra: Se pesan aproximadamente 500 mg de la muestra homogenizada (200 g
con 40 mL de acetona), se colocan en un vial de 5 mL, se adicionan 0.5 mL de KOH (ac. 50%), 1 mL de
etanol y 25 mg de ácido ascórbico, la mezcla se coloca a reflujo por 30 min. Posteriormente se realiza
una extracción líquido-líquido con 1 mL (x 3) de éter etílico. El extracto étereo se lava 3 veces con
una solución de cloruro de sodio al 10%. El extracto étero se pasa a través de de una columna con
sulfato de sodio anhidro, y después en una columna con fase C18. El extracto étero obtenido, se
evapora hasta 0.5 mL y se resuspende en 1mL de metanol, el cual se lleva a un volumen final de 5 mL
en un matraz volumétrico.

Alícuota de Alícuota de
Concentración Concentración
estándar Área estándar Área
(ppm) (ppm)
(µL) (µL)
10 0.95 8425 400 38 447788
50 4.75 46695 600 57 676081
100 9.5 106623 800 76 909399
200 19 212682 1000 95 1538239
38

Muestra Área
Peso (g) = 0.4903 838229

Calculo de la concentración de estándar de retinol:

9.5 𝑚𝑔 𝑟𝑒𝑡𝑖𝑛𝑜𝑙 1 1000𝑚𝑙

0.01 ml alícuota de estandar(10 𝑚𝑙 𝑚𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙) (10𝑚𝑙 𝑎𝑓𝑜𝑟𝑜) ( 1𝐿
)= 0.95 ppm
9.5 𝑚𝑔 𝑟𝑒𝑡𝑖𝑛𝑜𝑙 1 1000𝑚𝑙
0.05 ml alícuota de estandar(10 𝑚𝑙 𝑚𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙) (10𝑚𝑙 𝑎𝑓𝑜𝑟𝑜) ( 1 𝐿 )= 4.75 ppm

Curva patrón de retinol y = 14708x - 58668

R² = 0.959
1800000
1600000
1400000
1200000
1000000
Area

800000
600000
400000
200000
0
-200000 0 20 40 60 80 100
Concentración retinol ppm

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Cálculo de concentración de retinol en una muestra:

Interpolación

Y=14708-58668

838229+58608 1000 𝑚𝑔
X= 14708
=60.97 mg retinol/L( 1µ𝑔
)=60970µg retinol/L

0.005 𝐿 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙

60970µg retinol/L( 0.4903 𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
)x100= 621.76 µg retinol/100g

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 2. Determinar el contenido de benceno en tolueno con los siguientes datos.
a. Solución estándar de benceno: 0.5 mg/mL
b. Solución estándar de clorobenceno (estándar interno): 0.5 mg/mL
c. Preparación de curva de calibración:

Volu Concentració
Vol. (mL) Vol. (mL) Concentració Área del Área del
Estánda men n de estándar
estándar estándar n de estándar estánda bencen
r final de benceno
benceno interno interno (ppm) r interno o
(mL) (ppm)
100 0 1382
1 0 2 10 12198
100 50 12559
2 1 2 10 14657
100 100 20039
3 2 2 10 11992
100 150 41592
4 3 2 10 19890
100 200 76827
5 4 2 10 28585
Cálculo de las concentraciones de los estandares:

0.5 𝑚𝑔 1 1000 𝑚𝑙
1 ml clorobenceno( )( )( )=100 ppm
1 𝑚𝑙 10 𝑚𝑙 1𝐿

0.5 𝑚𝑔 1 1000 𝑚𝑙
1 ml benceno( 1 𝑚𝑙
) (10 𝑚𝑙) ( 1 𝐿 )=50 ppm

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