Anda di halaman 1dari 2

BAB III

METODE PRAKTIKUM

3.1 Waktu dan Tempat


Praktikum ini dilaksanakan pada hari Selasa, 27 Maret 2018 pukul 10.50 s.d selesai
bertempat di di Laboratorium Bioteknologi, Jurusan Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian,
Universitas Sultan Ageng Tirtayasa.

3.2 Alat dan Bahan


Alat yang digunakan pada praktikum ini adalah Laminar Air Flow (LAF), alat diseksi,
cawan petri, bunsen, botol kultur, rak kultur jaringan, lampu neon, pendingin ruangan, dan alat
gelas. Sedangkan bahan yang digunakan adalah batang dan daun stevia, media MS dengan 1 ppm
2,4D dan 0,5 ppm BAP, media MS kontrol tanpa ZPT, alkohol 96%, aluminium foil, seal, label,
dan ATK.

3.3 Cara Kerja


3.3.1 Persiapan Ruang Penanaman
1. Sebelum digunakan Laminar Air Flow (LAF) disterilkan dengan sinar UV selama 30
menit atau dengan menyemprotkan alkohol 96% ke bagian tangan dan botol yang
berisi media
2. Alat-alat yang digunakan diatur dengan rapi pada LAF, posisi scalpel dan pinset serta
alcohol 96% yang digunakan untuk mensterilkan dissecting kit (scalpel dan pinset)
disebelah kiri Bunsen, sedangkan botol kultur disebelah kanan.
3. Petridish diletakan dibagian tengah, setiap selesai eksplant dipotong petridish ditutup
kembali untuk menghindari kontaminasi.
4. Selesai digunakan alat disterilkan dengan alkohok dan dibakar dengan Bunsen.
5. Sebelum masuk kedalam LAF semua alat dan bahan seperti botol dan tangan harus
disterilkan dengan alcohol 96%.
6. Setiap selesai menggunakan pinset maupun scalpel, lalu dicelupkan kedalam alkohol,
lalu dibakar pada nyala api bunsen.
3.3.2 Penyiapan Eksplan
1. Eksplan tanaman stevia dikeluarkan dari botol kultur dengan hati-hati mengguakan
pinset yang sebelumnya dicelupkan ke dalam alkohol dan dibakar cepat dengan
bunsen.
2. Dipilih organ tanaman stevia yang bagus.
3. Bagian organ tanaman yang diinginkan dipotong dengan scalpel yang telah steril.
4. Untuk organ daun, eksplan dipotong pada helai daun tanpa tulang daun.
5. Untuk organ batang, eksplan dipotong pada batang atau tangkai daun.

3.3.3 Penanaman Eksplan


1. Diambil potongan eksplan yang sudah siap untuk ditanam dengan pinset yang telah
steril.
2. Dibuka botol kultur yang telah berisi media dan dibakar pada bagian mulut botol
dengan api bunsen.
3. Eksplan diletakan kedalam media dengan hati-hati.
4. Botol ditutup dengan kertas aluminium foil dan diseal.
5. Botol kultur diletakan pad rak kultur di ruang inkubasi.
6. Diamati perkembangan eksplan.