RECOMBINANTE
CONCEITOS BÁSICOS
• Essa tecnologia foi desenvolvida a partir da
década de 70 quando foram descobertas as
endonucleases de restrição ou enzimas de
restrição.
ENZIMAS DE RESTRIÇÃO
CÉLULA HOSPEDEIRA
DNA LIGASE
SELEÇÃO
CONCEITO DE CLONAGEM
A origem do termo clonagem vem da genética bacteriana
INSERTO TRANSFORMANTE
VETOR OU CÉLULA
TRANSFORMADA
DNA
RECOMBINANTE
TRANSFORMAÇÃO
ENZIMAS DE RESTRIÇÃO
• Enzimas Especializadas em degradar DNA
exógeno em bactérias.
• Endonucleases de restrição.
• DNA ligases
• Existem três tipos de endonucleases de
restrição: I, II e III;
ENZIMAS DE RESTRIÇÃO
IMPORTÂNCIA
FAMÍLIA ÚNICA DE
FRAGMENTOS
DNA LIGASE
• Promove a ligação dos fragmentos de DNA em
vetores previamente clivados por
endonucleases de restrição.
Junção de duas fitas de DNA
A DNA ligase requer um grupo OH livre na extremidade 3' de uma das cadeias de
DNA e um grupo fosfato na extremidade 5' da outra cadeia
CONSTRUÇÃO DO DNA
RECOMBINANTE
A função das ligases na célula é
reparar quebras em fitas individuais,
que surgem em moléculas de DNA de
fita dupla durante a replicação do DNA
MICROINJETADOS
TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO
• Xenotransplante
• Biorreatores
• Terapia gênica
QUESTÕES RELACIONADAS COM A
TRANSGENIA
• Bioéticas
• Ecológicas
• Econômicas
• Científicas