La forma actual de cultivar ostras se está volviendo bastante más

invasiva que en las últimas décadas, todo esto, debido a las nuevas técnicas de
criadero, en la cual se pueden realizar mejores evaluaciones tanto reproductivas
como lo es la maduración de las gónadas e inducir el desove; y productivas como
muestreos de tejidos de investigación [ CITATION But08 \l 13322 ]. Esto ha llevado
a la necesidad de encontrar metodologías que permitan realizar estos trabajos sin
generar la muerte del individuo (muestreos no destructivos), por tanto, los
relajantes musculares permiten realizar procedimientos invasivos no letales en
especies comerciales de ostras[ CITATION Cul92 \l 13322 ] [ CITATION Nor96 \l
13322 ] (culloty y mulcahy,1992: Norton et al.,1996).

Su uso minimiza el estrés de muestreo asociado a la manipulación la

sobrepoblación o el transporte y reduce la mortalidad relacionada con la
investigación (Ross y Ross, 1999).

El prototipo ideal de relajantes utilizados en acuicultura deben tener una

respuesta rápida, ser 100% efectivos, el cual permita la recuperación completa del
animal expuesto y no ser tóxicos tanto para los animales cultivados como para el
operador.[ CITATION Aco07 \l 13322 ]

Un relajante de ostras debe ser un producto de fácil administración y no

presentar amenazas posteriores para la salud humana [ CITATION Aco07 \l
13322 ].

Los relajantes musculares se han utilizado en la industria de ostras

perlíferas para reducir el estrés durante el proceso quirúrgico, utilizando
comúnmente benzocaína[CITATION Nor96 \t \l 13322 ] (Norton et al.,1996).

Estudios han demostrado que el cloruro de magnesio (MgCl 2), deprime

el movimiento de los cilios en la ostra americana, Crassostrea virgínica y se ha
utilizado para inducir la apertura en la ostra del Pacifico, C. gigas. El MgCl2
también es un buen relajante muscular para muchos otros bivalvos [ CITATION
Gra17 \l 13322 ]
 Sin embargo, los efectos de la relajación a nivel fisiológico son casi
desconocidos en los invertebrados marinos, pero algunos estudios con bivalvos,
gasterópodos, y erizos de mar informan la secreción de moco, manto y
decoloración y colapso de las branquias, inducción de desove espontáneo e
incluso la muerte[ CITATION Aco97 \l 13322 ] (Acosta-Salmón y Rangel-Davalos,
1997).

En los bivalvos, el muestreo de tejido a menudo se basa en métodos

destructivos, ya que el caparazón debe ser eliminado para obtener
muestras de tejido. Un protocolo confiable de anestesia y muestreo de
tejido para la ostra plana europea permitiría llevar a cabo experimentos
sin sacrificar animales y, por lo tanto, también permitir muestreos
sucesivos del mismo individuo. Esto facilitaría estudios descriptivos tales
como aquellos sobre la gametogénesis, mientras se evitan las
variaciones interpoblacionales de los resultados observados durante los
muestreos sucesivos usando un método destructivo. Además, evitar el
sacrificio de ostras en la acuicultura es particularmente valioso para los
animales seleccionados.

El cloruro de magnesio se ha utilizado con éxito para inducir la anestesia

en la vieira Pecten fumatus ( Heasman et al., 1995 ), la ostra australiana
Saccostrea glomerata ( Butt et al., 2008 ) y la ostra del
Pacífico Crassostrea gigas ( Namba et al., 1995 ). con baja mortalidad
posterior. En la ostra del Pacífico, se encontró que el uso de cloruro de
magnesio agrícola era tan efectivo como una marca de laboratorio, pero
considerablemente menos costoso ( Suquet et al., 2009 ).
demás, evitar el sacrificio de ostras en la acuicultura es particularmente valioso para los
animales seleccionados.

El cloruro de magnesio se ha utilizado con éxito para inducir la anestesia en la

vieira Pecten fumatus ( Heasman et al., 1995 ), la ostra australiana Saccostrea
glomerata ( Butt et al., 2008 ) y la ostra del Pacífico Crassostrea gigas ( Namba et
al., 1995 ). con baja mortalidad posterior. En la ostra del Pacífico, se encontró que
el uso de cloruro de magnesio agrícola era tan efectivo como una marca de
laboratorio, pero considerablemente menos costoso ( Suquet et al., 2009 ).

El examen del desarrollo reproductivo de la ostra plana requiere el desarrollo de

herramientas adaptadas a esta especie, incluido un protocolo práctico de
anestesia y muestreo de tejido que permita la determinación del sexo y la
descripción de la gametogénesis. Algunos elementos de tal protocolo ya han sido
publicados ( Culloty y Mulcahy, 1992)), que muestra que el cloruro de magnesio
induce anestesia rápida y recuperación de ostras planas. Sin embargo, las
variaciones en los resultados debido a las diferencias en las condiciones de
anestesia no se documentaron completamente en este estudio. Quedaba la
necesidad de examinar los efectos de los diferentes tipos de cloruro de magnesio
utilizados, la concentración anestésica, la duración del tratamiento anestésico, el
peso de la ostra, la temperatura del agua y los efectos del muestreo de gónadas
en la subsiguiente supervivencia de la ostra. Un examen detallado de estos
parámetros bajo condiciones controladas ayudaría a establecer un protocolo
práctico de anestesia y muestreo para la ostra plana.

Los experimentos preliminares realizados en nuestro laboratorio mostraron que la

adición de microalgas con el tratamiento con cloruro de magnesio, las ostras
muertas de hambre antes del tratamiento o la modificación de la intensidad de la
luz, no tuvieron un efecto significativo en el éxito de la anestesia.

2 . materiales y métodos
Las ostras planas de 20 meses (peso medio ± DE: 29,9 ± 8,5 g) se
transfirieron desde el norte de Bretaña (Francia) al criadero experimental
Argenton (oeste de Bretaña). Estas ostras se mantuvieron en tanques de
agua de mar de flujo continuo a 19 ° C y se alimentaron diariamente de
acuerdo con Chavez-Villalba et al. (2002) .

BENZOCAINA: La benzocaína es un anestésico local poco soluble, un éster

de
ácido para-aminobenzoico. Meyler's Side Effects of Drugs (Sixteenth
Edition) The International Encyclopedia of Adverse Drug Reactions and Interactions , 2016,
Pages 858–862