UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

VICERRECTORADO DE INVESTIGACIÓN
INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN DE ESPECIALIZACIÓN EN AGROINDUSTRIA-IIEA

INFORME

“ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO

ETANÓLICO DEL ROMERO Rosmarinus
officinalis L.”

AUTOR:

RAFAEL TAIPE KATHERIN MARGOT

CALLAO-ABRIL-2018

PERU
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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO ETANÓLICO DEL

ROMERO

Rosmarinus officinalis L.

En este trabajo se evaluó la actividad antimicrobiana del extracto etanólico de

Rosmarinus officinalis L. y se determinó la Concentración Inhibitoria Mínima del
extracto, sobre microorganismos de interés alimentario como Escherichia Coli.

Se sembró placas con el microorganismo Escherichia coli y a cada una se le

agrego tres concentraciones diferentes del extracto, obteniéndose que la
Concentración Inhibitoria Mínima de 1.2 ml.
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1. DIAGRAMA DE BLOQUES DEL PROCESO

SECADO

EXTRACCION
•Etanol 95%
durante 48horas

CONCENTRADO

PRUEBA DE LA
ACTIVIDAD
ANTIMICROBIANA

CURVA DE
CRECIMIENTO
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2. DETALLES DE LOS PRINCIPALES PROCESOS

• Secado
Secar las hojas de romero a una temperatura de 37°C por 48 horas
• Extraccion
Pesar 0.5 Kg de hojas y hacer la extraccion con 1L de Etanol al 95%
durante 48horas.
• Concentrado
Se realizo en el equipo de rotavapor por 3 horas aproximadamente.
• Prueba de la actividad antimicrobiana
1. Desinfeccion y esterilizacion de materiales
 Desinfectar la camara de sembrado con una solucion de
hipoclorito (lejia).
 En la estufa esterilizar placas petri, botellas y pipetas y tubos de
ensayo a 120 C° por 2 horas.
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 Despues de utilizar los materiales del sembrado, llevar al

autoclave para esterilizarlos a alta presión durante unos 15 a 20
minutos.

2. Siembra y recuento de microorganismos

 Preparar el medio de cultivo (agar nutritivo) en placas petri, 4
placas por concentracion de extracto etanolico.
 Preparar el medio diluyente (agua peptonada), verter en las
botellas
90 ml de solucion para 3 diluciones.
 Preparacion del inoculo
Medir 10 ml de la muestra (E. Coli) en forma aséptica, realizando
la operación cerca de un mechero encendido y transferir a un
botella que contenga 90ml de agua de peptona. Hacer diluciones
sucesivas hasta (10-3).
En tubos de ensayo que contengan 9ml de medio, agregar 10 ml
de la suspensión microbiana (hacerlo por triplicado)
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Medir 1 ml con pipeta estéril de la dilución a sembrar (cada tubo de

ensayo), verterla en una placa de Petri. Agregar 10 a 12 ml de medio
Agar Nutritivo fundido. Tapar rápidamente e imprimir a la placa
movimientos circulares suaves en un sentido y otro (aproximadamente 5
veces cada sentido). Dejar solidificar, invertir la placa de manera que la
tapa quede en la base, y llevar a estufa de cultivo a 37°C.
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• Prueba de la actividad antimicrobiana

CONCENTRACION 0.4

Tiempo(h) log(
UFC/ml)
0 4.924279286
2 4.963787827
13.83333333 4.924279286
14.83333333 4.77815125
16.33333333 5.041392685

5.1

5.05

5
log(UFC/ml)

4.95

4.9

4.85

4.8

4.75
0 5 10 15 20
Tiempo(h)
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CONCENTRACION 0.8

Tiempo(h) log(
UFC/ml)
0 5.10720997
2 5.004321374
13.83333333 5.012837225
14.83333333 4.968482949
16.33333333 4.462397998

5.2

5.1

5
log(UFC/ml)

4.9

4.8

4.7

4.6

4.5

4.4
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Tiempo(h)

CONCENTRACION 1.2

Tiempo(h) log(
UFC/ml)
0 5.149219113
2 5.133538908
13.83333333 5.037426498
14.83333333 4.986771734
16.33333333 0
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4
log(UFC/ml)

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Tiempo(h)

CONTROL
Tiempo(h) log(
UFC/ml)
0 5.511
2 7.968
13.83333333 8.071
14.83333333 7.986
16.33333333 8.169

9
8
7
6
log(UFC/ml)

5
4
3
2
1
0
0 5 10 15 20
Tiempo(h)
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6
log(UFC/ml)

5
0.4
0.8
4
1.2
Control
3

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Tiempo

Se conserva que la concentración óptima de extracto etanolico de

Rosmarinus officinalis L. es de 1.2 ml a un tiempo de 16.3 horas