Reaksi gelap adalah tahap kedua dalam proses fotosintesis yang disebut juga
dengan nama siklus Calvin. Reaksi gelap menggunakan karbondioksida (CO2)
untuk membentuk gliseraldehida 3 fosfat (G3P) yang merupakan gula berkarbon
3. Dalam sekali siklus Calvin akan dikeluarkan 1 molekul G3P, tumbuhan perlu
melakukan 2 kali siklus untuk menghasilkan 2 molekul G3P yang kemudian akan
disatukan menjadi glukosa (Gula berkarbon 6).
Langkah-langkah reaksi dalam siklus Calvin terbagi menjadi 3 fase, yaitu fiksasi,
reduksi, dan regenerasi.
Reaksi gelap terjadi pada bagian stroma kloroplas. Reaksi gelap disebut siklus
karena reaksi-reaksi yang berlangsung berjalan berputar-putar dan kembali
menjadi molekul asalnya. Disebut reaksi gelap karena dalam tahap-tahap
reaksinya tidak membutuhkan cahaya matahari sebagai sumber energi.