Ririn Astri Sabdowati-FKIK PDF
Ririn Astri Sabdowati-FKIK PDF
SKRIPSI
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar sarjana Farmasi
ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINILITAS
Skripsi ini adalah hasil karya saya sendiri, dan semua sumber baik yang dikutip
NIM : 1111102000040
Tanda Tangan :
iii
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING
Disetujui Oleh:
Pembimbing I
Pembimbing II
Mengetahui,
Kepala Program Studi Farmasi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
iv
HALAMAN PENGESAHAN
Telah berhasil dipertahankan di hadapan Dewan Penguji dan diterima sebagai bagian
persyaratan yang diperlukan untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program
Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri
(UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta
DEWAN PENGUJI
Ditetapkan di : Jakarta
Tanggal : 8 Juni 2015
v
ABSTRAK
Kata Kunci : Suspensi spironolakton, spironolakton, stabilitas, kadar, pH, persen degradasi
vi
ABSTRACT
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL........................................................................................................ ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINILITAS ............................................................. iii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................................. iv
LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI.............................................................................. v
ABSTRAK ...................................................................................................................... vi
ABSTRACT ................................................................................................................... vii
KATA PENGANTAR .................................................................................................. viii
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH .................................... x
DAFTAR ISI ................................................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR .................................................................................................... xiii
DAFTAR TABEL ......................................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................................. xv
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................................... 1
I.1. Latar Belakang ....................................................................................................... 1
I.2. Rumusan Masalah .................................................................................................. 3
I.3. Tujuan Penelitian ................................................................................................... 3
I.4. Manfaat Penelitian ................................................................................................. 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................... 4
2.1. Stabilitas Obat ....................................................................................................... 4
2.2. Stabilitas Obat Terhadap pH ................................................................................. 6
2.3. Degradasi Obat ..................................................................................................... 7
2.4. Tablet Salut .......................................................................................................... 10
2.5. Spironolakton ...................................................................................................... 10
2.6. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) ....................................................... 14
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................................. 18
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................................. 18
3.2. Alat dan Bahan .................................................................................................... 18
3.3. Prosedur Kerja ..................................................................................................... 18
3.3.1 Pembuatan Fase Gerak ............................................................................. 18
3.3.2 Preparasi Standar ...................................................................................... 18
3.3.3 Optimasi dan Validasi ............................................................................... 19
3.3.4 Preparasi dan Pengujian Sampel .............................................................. 20
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................................... 22
4.1. Penentuan Panjang Gelombang Optimum........................................................... 22
4.2. Pemilihan Fase Gerak .......................................................................................... 22
4.3. Uji Kesesuaian Sistem ......................................................................................... 22
4.4. Pembuatan Kurva Kalibrasi................................................................................. 23
4.5. Uji Akurasi dan Perolehan Kembali .................................................................... 24
4.6. Uji Presisi ............................................................................................................ 25
xi
4.7. Pengukuran Kadar Spironolakton dalam Sampel ................................................ 26
4.8. Uji Statistik Nilai Normalitas .............................................................................. 29
4.9. Uji Statistik Nilai Homogenitas dan ANOVA .................................................... 29
4.10. Pembahasan Pengukuran Kadar Spironolakton dalam Sampel ......................... 30
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................................... 34
5.1. Kesimpulan .......................................................................................................... 34
5.2. Saran .................................................................................................................... 34
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................... 35
xii
DAFTAR GAMBAR
xiii
DAFTAR TABEL
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
xv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Stabilitas dalam arti luas dapat didefinisikan sebagai ketahanan suatu produk
sesuai dengan batas-batas tertentu selama penyimpanan dan penggunaanya atau
umur simpan suatu produk dimana produk tersebut masih mempunyai sifat dan
karakteristik yang sama seperti pada waktu pembuatan. (David B. Troy, 2006;
USP 30)
Obat dibuat dalam berbagai bentuk sediaan disesuaikan dengan cara dan
tujuan pemakaian, pertimbangan sifat bahan obat dan sebagainya. Bila bentuk
suatu sediaan obat diubah seperti dilarutkan, diserbuk, ditambahkan bahan
tambahan lain atau dilakukan modifikasi faktor lingkungan seperti pada kondisi
penyimpanan, kemungkinan dapat terjadi perubahan pada stabilitas obat tersebut.
(Connors et al, 1992)
Ada beberapa parameter yang perlu dipertimbangkan dalam memformulasi
suatu sediaan obat yang stabil. Diantaranya sifat kimia, sifat fisik, mikrobiologi,
efek terapi, efek toksik. Evaluasi stabilitas sediaan tidak hanya memperhitungkan
zat aktif farmasi, tetapi juga eksipien dan kemasan produk obat. Selanjutnya,
karena kemudahan dan ketersediaan bahan, pada praktek umum dilakukan
pembuatan cairan suspensi oral yang disiapkan dari bentuk sediaan padat seperti
tablet atau kapsul yang tersedia. Oleh karena itu potensi interaksi tambahan dapat
terjadi antara obat. (Niazi, Sarfaraz, 2006)
Beberapa hal yang dapat mempengaruhi stabilitas dari sediaan farmasi salah
satunya adalah interaksi bahan aktif dengan bahan aktif lain dalam
penggunaannya, faktor lingkungan seperti temperatur juga mempengaruhi
stabilitas obat. Demikian pula faktor formulasi seperti pH, sifat dalam air dan sifat
pelarutnya dapat mempengaruhi stabilitas obat (David B. Troy, 2006; USP. 30)
Secara fisiologis, larutan obat harus diformulasikan sedekat mungkin ke pH
stabilitas optimumnya karena besarnya laju reaksi hidrolitik yang dipengaruhi atau
dikatalisis oleh gugus hidroksi. (Ansel, 1994; Lachman et al,2007)
Kebanyakan molekul obat baik asam atau basa lemah akan terionisasi
yang ditentukan oleh pKa senyawa dan pH cairan biologis dimana obat itu akan
terlarut. pH dari larutan obat mungkin memiliki efek yang besar pada stabilitas,
bergantung pada mekanisme reaksinya. Ketika obat diformulasikan dalam bentuk
larutan, penting untuk mengetahui pH optimum sediaan. Kebanyakan obat akan
berkontak dengan air dan bahkan obat berbentuk solid dapat kontak dengan air.
Oleh karena itu, hidrolisis menjadi reaksi yang paling banyak ditemukan.
Hidrolisis sering menjadi jalur degradasi dari obat-obat yang memiliki gugus ester
dan amida. (Banker, Gilbert S and C T Rhodes, 2002; Min Li, 2012)
Spironolakton umumnya dibuat dalam bentuk tablet salut film dengan
kekuatan dosis 25, 50 dan 100 mg tidak dalam bentuk larutan ataupun suspensi.
Spironolakton praktis tidak larut dalam air dan larut dalam alkohol. Sedikit larut
dalam kondisi basa. Sediaan larutan oral yang dibuat dengan spironolakton stabil
setidaknya selama 30 hari dan biasanya memiliki nilai pH akhir 3.5 – 6.5.
(Mahmoud, Ismail M et al, 2014)
Spironolakton merupakan senyawa ester yang memiliki struktur lakton yang
mudah terhidrolisis. Struktur lakton merupakan salah satu dari senyawa karbonil
labil yang memiliki pusat elektropositif yang mudah bereaksi dengan nukleofil.
(Banker, Gilbert S and C T Rhodes, 2002)
Lakton merupakan ester siklik. Menurut studi oleh Kaufman, antara
hidrolisis menghasilkan reaksi campuran yang sama dibawah katalis asam.
Lovastatin dan simvastatin, dua anggota dalam golongan obat untuk
hyperlipidemia yang mengandung lakton yang mudah terhidrolisis. Kaufman
mempelajari kinetika hidrolisis dan termodinamika kedua obat. Karena struktur
dari dua obat hanya berbeda oleh kelompok metilen yang jauh dari bagian lakton,
dua obat ini ditemukan memiliki parameter kinetik dan termodinamika yang
sangat mirip. Energi aktivasi untuk hidrolisis kedua obat harus berada di
lingkungan di ph 2. Sedangkan daptomycin adalah antibiotik lipopeptida yang
mengandung cincin makrosiklik ester dihubungkan dengan sembilan ikatan amida
dan satu ikatan ester. Energi aktivasi untuk hidrolisis ikatan ester terjadi pada pH
10. (Min Li, 2012)
Secara reaksi kimia, zat aktif dapat terurai karena beberapa faktor
diantaranya ialah oksigen (oksidasi), air (hidrolisa), suhu (oksidasi), cahaya
(fotolisis), karbondioksida (turunnya pH larutan), sesepora ion logam sebagai
katalisator reaksi oksidasi. Jadi jelasnya faktor luar juga mempengaruhi
ketidakstabilan kimia seperti, suhu, kelembaban udara dan cahaya (Attwood dan
Florence, 2011).
Stabilitas mikrobiologi suatu sediaan adalah keadaan tetap di mana sediaan
bebas dari mikroorganisme atau memenuhi syarat batas miroorganisme hingga
batas waktu tertentu. Stabilitas mikrobiologi diperlukan oleh suatu sediaan
farmasi untuk menjaga atau mempertahankan jumlah dan menekan pertumbuhan
mikroorgansme yang terdapat dalam sediaan tersebut hingga jangka waktu
tertentu yang diinginkan (Attwood dan Florence, 2011).
Stabilitas sediaan farmasi merupakan salah satu kriteria yang amat penting
untuk suatu hasil produksi yang baik. Ketidakstabilan produk obat dapat
mengakibatkan terjadinya penurunan sampai dengan hilangnya khasiat, obat dapat
berubah menjadi toksik atau terjadinya perubahan penampilan sediaan (warna,
bau, rasa, konsistensi dan lain - lain) yang akibatnya merugikan bagi pemakai.
(Connors et al, 1994)
Obat dibuat dalam berbagai bentuk sediaan disesuaikan dengan cara dan
tujuan pemakaian, pertimbangan sifat bahan obat dan sebagainya. Bila bentuk
suatu sediaan obat diubah seperti dilarutkan, diserbuk, ditambahkan bahan
tambahan lain atau dilakukan modifikasi faktor lingkungan seperti pada kondisi
penyimpanan, kemungkinan dapat terjadi perubahan pada stabilitas obat tersebut.
(Connors et al, 1994)
Ketidakstabilan suatu sediaan farmasi dapat dideteksi melalui perubahan
sifat fisika, kimia serta penampilan dari suatu sediaan farmasi. Besarnya
perubahan kimia sediaan farmasi ditentukan dari laju penguraian obat melalui
hubungan antara kadar obat dengan waktu, atau berdasarkan derajat degradasi dari
suatu obat yang jika dipandang dari segi kimia, stabilitas obat dapat diketahui dari
ada atau tidaknya penurunan kadar selama penyimpanan.
Sistem pH dapar yang biasanya terdegradasi dari asam atau basa lemah
dan garamnya biasanya ditambahkan ke dalam sediaan cair ditambahkan untuk
mempertahankan pHnya pada rentang dimana terjadinya degradasi obat minimum.
(Min Li, 2012)
2.3 Degradasi Obat
Substansi obat yang digunakan dalam farmasetikal memiliki struktur
molekul yang berbeda-beda. Oleh karena itu rentan terdegradasi oleh banyak dan
berbagai macam jalur degradasi. Jalur degradasi antara lain adalah hidrolisis,
dehidrasi, isomerisasi dan rasemisasi, eliminasi, oksidasi, photodegradasi dan
interaksi kompleks dengan eksipien ataupun dengan obat lain. Ini sangat berguna
untuk memperkirakan ketidakstabilan kimia yang terjadi berdasarkan struktur
melekulnya. Banyak obat yang cukup stabil, tetapi kelompok dengan gugus
fungsional seperti ester dan cincin laktam yang terdapat pada beberapa obat rentan
terhadap hidrolisis dan gugus fungsional seperti katekol dan fenol cukup mudah
teroksidasi. (Min Li, 2012; Lee, David C, M L Webb, 2009)
a. Hidrolisis
Hidrolisis merupakan salah satu dari reaksi utama dari degradasi obat
terutama dalam bentuk larutan. Hidrolisis adalah proses dua tahap, dimana
nukleofil, seperti air dan ion hidroksi yang ditambahkan yang kemudian akan
membentuk senayawa intermediet dari leaving group yang terlepas pada tahap
kedua. Struktur senyawa mempengaruhi tingkat hidrolisis, dimana semakin
kuat asam konjugasi yang terlepas maka reaksi yang terjadi semakin cepat.
Banyak obat yang mengandung gugus fungsional yang sangat rentan terhadap
hidrolisis.
Contoh dari dua tipe reaksi hidrolisis (Niazi, Sarfaraz, 2006):
Hidrolisis tipe satu dapat dikatalisasi baik oleh asam dan basa, oleh karena
itu kontrol pH formulasi merupakan salah satu hal yang mempengaruhi tingkat
dekomposisi (Niazi, Sarfaraz, 2006):.
b. Oksidasi
Reaksi penguraian kedua yang paling umum adalah melalui reaksi
oksidasi. Penguranga/ oksidasi (redoks) merupakan reaksi yang melibatkan
baik transfer oksigen atau hidrogen ataupun elektron. Oksidasi disebabkan
oleh adanya oksigen dan reaksi yang dapat diinisasi oleh pemanasan, cahaya,
dan paparan logam yang menghasilkan radikal bebas organic. Radikal ini
menyebarkan reaksi oksidasi yang berlangsung hingga inhibitor
menghancurkan radikal atau sampai terbentuknya reaksi samping yang
memutuskan rantai. Sensitivitas masing-masing entisitas obat baru terhadap
oksigen atmosfir harus dievaluasi untuk mententukan apakah produk akhir
perlu dikemas dalam kondisi kedap udara dan jika harus mengandung
antioksidan (Niazi, Sarfaraz, 2006).
Obat mungkin akan terdegradasi menjadi substansi toksik. Oleh karenanya
penting untuk mengetahui tidak hanya berapa banyak obat tersebut berkurang tapi
juga apa yang menyebabkannya terdegradasi. Beberapa kasus, zat pendegradasi
mungkin berupa zat toksik. Contohnya obat pralidoxine yang terdegradasi melalui
dua jalur pH. Di kondisi pH basa, produk toksik cyanid terbentuk, pada obat lain,
Contohnya zat pendegradasi dari tetrasiklin adalah epianhydrotetrasiklin diketahui
dapat menyebabkan sindrom fanconi. Terkadang, hasil reaksi intermediet yang
terbentuk diketahui atau dicurigai memiliki efek toksik. Contohnya adalah
penisilin pada pH asam akan berubah menjadi asam penicilenik yang dicurigai
berkontribusi dalam efek alergi terhadap penisilin. (Yoshioka, Sumie and Stella,
Valentino J, 2000)
Degradasi obat mungkin akan membuat obat berubah bentuk secara
estetika sehingga tidak dapat digunakan. Produk yang diduga dapat
mengkontaminasi jika didapati perubahan yang signifikan, seperti perubahan
warna dan bau. Contohnya adalah epinephrine yang teroksidasi menjadi
adrenochrome akan berubah warna menjadi warna merah pekat. Produk
epinephrine yang berubah warna menjadi pink sudah dianggap tercemar.
Meskipun obat mungkin akan stabil dalam formulasinya, formulator harus juga
membuat obat dapat stabil di kondisi pH dalam saluran GI dan pada usus halus.
(Yoshioka, Sumie and Stella, Valentino J, 2000)
o Fisikokimia :
Pemerian : hablur krem muda hingga coklat muda, bau lemah seperti
merkaptan dan stabil di udara.
Kelarutan : praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam benzene
dan kloroform, larut dalam etil asetat dan alkohol, sukar larut dalam
minyak lemah.
o Stabilitas :
Spironolakton tersedia secara komersial dalam beberapa kekuatan tablet
untuk pemberian oral untuk orang dewasa dan anak-anak. Namun, ada kalanya
digunakan untuk mengobati pasien lansia atau koma yang memerlukan persiapan
dan penggunaan suspensi oral. The United States Pharmacopeia (USP) telah
menetapkan beyond use dating (BUD) untuk sediaan oral dan topikal dalam
berbagai kegunaan. Tujuan BUD adalah untuk memastikan pasien menyadari
manfaat terapeutik produk suspensi oral yang disiapkan. Studi telah dilakukan
untuk menentukan stabilitas spironolakton ketika disiapkan dalam suspensi di
masa lalu.
Satu studi yang dilakukan oleh Nahata et al mengemukakan stabilitas
suspensi spironolakton selama setidaknya 90 hari ketika suspensi disimpan di
bawah pendinginan dan pada suhu kamar. Sebuah studi serupa yang dilakukan
oleh Mathur et al meneliti tiga konsentrasi suspensi spironolakton (2,5, 5, dan 10
mg mL -1) pada tiga suhu yang berbeda (5°C, suhu kamar lingkungan, dan 30°C)
untuk jangka waktu empat minggu. Hasil ini menunjukkan bahwa suspensi yang
stabil untuk masa studi empat minggu. Sebuah studi oleh Allen dan Erickson
(1996) mengevaluasi 25 mg mL -1 suspensi spironolakton disimpan pada suhu 5 °
C dan 25 ° C selama periode enam puluh hari dan menemukan stabilitas kimia
spironolakton dapat diterima sesuai standar USP. (Basusarkar et al, 2013)
Spironolakton merupakan senyawa ester yang memiliki struktur lakton yang
mudah terhidrolisis. Struktur lakton merupakan salah satu dari senyawa karbonil
labil yang memiliki pusat elektropositif yang mudah bereaksi dengan nukleofil.
(Banker, Gilbert S and C T Rhodes, 2002s 4th Ed)
f. Fase Gerak
Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat
bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya elusi dan
resolusi. Daya elusi dan resolusi ini ditentukan oleh polaritas keseluruhan
pelarut, polaritas fase diam, dan sifat komponen-komponen sampel Dalam
kromatografi cair komposisi pelarut atau fase gerak adalah satu variabel
yang mempengaruhi pemisahan.(Johnson, 1991).
Gelembung udara (degassing) yang ada harus dihilangkan dari pelarut,
karena udara yang terlarut keluar melewati detektor dapat menghasilkan
banyak noise sehingga data tidak dapat digunakan (Johnson, 1991).
C. Validasi
Validasi adalah suatu tindakan terhadap parameter tertentu pada prosedur
penetapan yang dipakai untuk membuktikan bahwa parameter tersebut
memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Parameter analisis yang
ditentukan pada uji kesesuaian system adalah akurasi, presisi, batas
deteksi, batas kuantitasi, spesifikasi, linieritas dan rentang, kekasaran
(Ruggedness) dan ketahanan (Robutness). (WHO, 1992)
a. Presisi
Merupakan ukuran keterulangan metode analisis dan biasanya
diekspresikan sebagai relatif standar deviasi (RSD) dari sejumlah
sampel yang berbeda secara signifikan secara statistik.
b. Batas deteksi (limit of detection, LOD)
Didefinisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang
masih dapat terdeteksi.
c. Batas kuantitasi (limit of quantitation, LOQ)
Didefinisikan sebagai konsentrasi analit terendah dalam sampel yang
dapat ditentukan dengan presisi dan akurasi yang dapat diterima pada
kondisi operasional metode yang digunakan.
d. Linieritas
Merupakan kemampuan suatu metode untuk memperoleh hasil hasil
uji yang secara langsung proporsional dengan konsentrasi analit pada
kisaran yang diberikan (Rohman, 2007).
c. Pengujian Sampel
5.1. Kesimpulan
Sedangkan pada pH 5 pada menit ke-0 saja yang masih memenuhi syarat.
5.2. Saran
kromatogram sampel
DAFTAR PUSTAKA
Adnan, M, 1997, Teknik Kromatografi untuk Analisis Makanan, Penerbit Andi Alim,
Yogyakarta
Haywood, Alison and Beverley, Glass, 2013, Liquid Dosage Forms Extemporaneously
Prepared from Commercially Available Products- Considering New Evidence
on Stability, J Pharm Sci 441- 455
Kher, Govind et al, 2013, Development and Validation of a HPTLC Method for
Simultaneous Determination of Furosemide and Spironolactons in Its Tablets
Formulation, Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical
Sciences, ISSN: 0975-8585
Lachman, L., Lieberman, H. A., Kanig, J. L., 2007, Teori dan Praktek Farmasi Industri,
Edisi ketiga, diterjemahkan oleh: Suyatmi, S., Penerbit Universitas Indonesia,
Jakarta, 760-779, 1514 – 1587
Lemke, Thomas L et al, Foye’s Principles of Medical Chemistry Sixth Edition, Wolters
Kluwer Health Lippincott Williams & Wilkins
Min Li, 2012, Organic Chemistry of Drug Degradation, The Royal Society of
Chemistry, Cambridge
Yoshioka, Sumie and Stella, Valentino J, 2000, Stability of Drugs and Dosage Forms,
Library of Congress Cataloging in Publication Data
Optimasi HPLC
Analisa
degradasi kadar
dengan KCKT
Presentase
Degradasi
M1V1 = M2V2
1000V1 = 25.5
V1 = 0,125ml ~ 125µl
M1V1 = M2V2
1000V1 = 50.5
V1 = 0,25ml ~ 250µl
M1V1 = M2V2
1000V1 = 75.5
V1 = 0,375ml ~ 375µl
M1V1 = M2V2
1000V1 = 100.5
V1 = 0,5ml ~ 500µl
M1V1 = M2V2
1000V1 = 125.5
V1 = 0,625ml ~ 625µl
M1V1 = M2V2
1000V1 = 150.5
V1 = 0,750ml ~ 750µl
Kromatogram Tablet
KURVA KALIBRASI
300
250
Luas Area (MaU)
200
50
0
0 50 100 150 200
Konsentrasi
Keterangan :
a = 2,5175
b = 1,7856
R2 = 0.9998
x y
25 47.2483
50 91.3069
75 138.0929
100 179.1573
125 226.1239
150 270.6301
LOD 1.542
LOQ 4.672
absorbansi
konsentrasi absorbansi
hasil
(ppm) hasil analisis
sesungguhnya
No x A B %diff %recovery
1 80 137.7063 145 -5.2689 94.7311
2 80 137.0563 145 -5.7161 94.2839
3 80 135.9134 145 -6.5023 93.4977
4 80 141.6781 145 -2.5366 97.4634
5 80 137.9539 145 -5.0986 94.9014
No x A B %diff %recovery
1 100 188.6883 181.0775 4.2031 104.2031
2 100 183.0111 181.0775 1.0678 101.0678
3 100 188.0929 181.0775 3.8743 103.8743
4 100 188.8325 181.0775 4.2827 104.2827
5 100 189.8036 181.0775 4.8190 104.8190
No x A B %diff %recovery
1 120 217.489 216.7895 0.3227 100.3227
2 120 218.6431 216.7895 0.8550 100.8550
3 120 215.5631 216.7895 -0.5657 99.4343
4 120 217.9314 216.7895 0.5267 100.5267
5 120 215.6712 216.7895 -0.5158 99.4842
rata-rata 217.05956 216.7895 0.1246 100.1246
Hasil Rata-Rata
Kons Jam ke- SD RSD
Abs (x-x)2 Abs
137.7063 0.1262
137.0563 1.0106
0 135.9134 138.0616
4.6148 2.5052 1.8145
141.6781 13.0791
137.9539 0.0116
137.9379 2.4823
137.2315 5.2073
139.51344
9 141.4005 3.5610 2.2756 1.6308
141.5838 4.2864
139.4135 0.0100
80
138.4703 18.0095
142.7564 0.0018
24 141.6631 1.1045 142.71406 2.3223 1.6391
143.8523 1.2956
146.8282 16.9261
138.7054 6.8295
143.2192 3.6117
48 139.2323 4.3532 141.31874 2.0611 1.4659
141.2514 0.0045
144.1854 8.2177
188.6883 1.0052
183.0111 21.8517
187.68568
0 188.0929 0.1658 2.7819 1.4822
188.8325 1.3152
189.8036 4.4856
190.3298 1.0047
188.5502 0.6041
9 187.6504 2.8125 189.32746 1.1378 0.6029
188.3746 0.9079
191.7323 5.7833
190.3298 3.0692
100
188.5502 12.4715
192.0817
24 187.6504 19.6364 1.1378 0.6029
188.3746 13.7426
205.5035 180.1447
190.0256 84.9055
190.8484 70.4193
48 190.5707 75.1571 199.24002 0.6573 0.3456
189.3587 97.6405
235.3967 1307.3055
217.489 0.1844
218.6431 2.5076
217.05956
0 215.5631 2.2394 1.3178 0.6061
217.9314 0.7601
215.6712 1.9275
217.9159 0.2481
218.9111 2.2299
217.41782
9 216.7765 0.4113 0.8936 0.4104
217.4779 0.0036
216.0077 1.9884
120
217.593 0.0905
218.11 0.0468
24 217.2847 0.3710 217.89378 1.3285 0.6086
220.2309 5.4621
216.2503 2.7010
217.7155 0.0253
216.1244 3.0630
217.87454
48 216.9025 0.9449 0.6514 0.3004
216.8165 1.1194
221.8138 15.5178
Lampiran 12. Perhitungan Preparasi Sampel dan Perhitungan Luas Area secara
Manual
M1V1 = M2V2
500V1 = 100.1500
V1 = 300 µl
x = mAu
y = 1.7856x + 2.5175
diketahui :
y = Luas Area
x = Konsentrasi Spironolakton
x 100%
Konsentrasi Konsentrasi
Waktu Area / SD Persen Kadar (%)
Awal (ppm) Akhir (ppm)
PH 3
PH 5
PH 7
Ph 9
120.0000
100.0000
80.0000
konsentrasi
ph 3
60.0000
ph 5
40.0000 ph 7
ph 9
20.0000
0.0000
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu
PH Statistic df Sig.
KONSENTRASI PH 3 .834 5 .148
PH 5 .978 5 .925
PH 7 .962 5 .824
PH 9 .861 5 .231