Biossinalização

(transcrição)
(Scheila Maria)

- Vias de Transdução de Sinal: Quando há um ligante ligando-se a um receptor, a ligação ligante-

receptor não é suficiente. Muitas vezes, há uma proteína dentro da célula. É a proteína G, que ativar uma
enzima efetora (adeniliciclase ou fosfolipase C), que vai produzir segundos mensageiros, que vão
desencadear a resposta celular.

- O sinal representa a informação, que é detectada por receptores específicos. O sinal pode ser uma
substância química, luz, hormônio, toque mecânico. Sempre vai haver conversão em uma resposta celular
(contração, relaxamento, divisão, proliferação celular). Vários processos químicos estão envolvidos,
principalmente na formação de segundos mensageiros.

- A conversão da informação, a partir de uma mudança química, é chamada de transdução de

sinal. É um processo universal, de praticamente todas as células vivas.

- Célula responde a: antígenos, sinais de desenvolvimento, fatores de crescimento, hormônios, luz,

toque mecânico, neurotransmissores, odores, sabores.

- Sinalização por moléculas secretadas: endócrina, parácrina, autócrina. Hormônios devem participar
de processos de sinalização celular, pois antes os livros traziam o conceito de que hormônio tinha que ser
uma substância produzida por glândulas.

- Endócrina: o sinal é produzido por uma célula, cai na corrente sanguínea e atua num receptor de
uma célula-alvo distante de onde ele foi produzido.

- Parácrina: Neurotransmissores: Uma célula pré-sináptica secreta substâncias por exocitose e vai
ativar o receptor no neurônio pós-sináptico. O receptor está próximo à célula que produziu a substância.

- Autócrina: A substância é secretada pela célula e o receptor pra substância está na própria célula.
Ex: Prostaglandinas (autacóides). A plaqueta produz tromboxano e receptor para o tromboxano está na
própria plaqueta.

- O tromboxano pode ter sinalização autócrina e parácrina, pois ele também causa vasoconstrição.
Tanto aumenta a agregação de plaquetas pela ativação do receptor na célula, como vai atuar no vaso
sanguíneo. A predominante é a autócrina. Podem existir substâncias com mais de um tipo de sinalização,
mas uma delas será predominante.

- Os receptores que transduzem o sinal transduzem a mensagem hormonal. “A mensagem é mais

importante que o mensageiro.” Independente do mensageiro, a respostas é mais importante, pois se pode
ter uma mesma substância ligando-se a receptores diferentes e produzindo respostas diferentes. Pode-se
ter também substâncias diferentes, ligando-se em receptores diferentes e produzindo a mesma resposta. O
que se altera é a via de transdução que o mensageiro está acoplado.

- Especificidade/complementaridade entre a substância e o receptor. Se não houver, a resposta

não acontece.

- Amplificação por cascatas intracelulares/enzimáticas. O sinal ativa uma enzima efetora,

como a adeniliciclase ou a fosfolipase C, que produz segundos mensageiros(IP3 e DAG). Pode haver a
ativação de outra enzima (PKC), que junto com os segundos mensageiros levam a ativação de outras
enzimas, canais iônicos, proteínas.
 - Dessensibilização, adaptação, taquifilaxia: A substância liga-se ao receptor, mas o efeito
esperado é reduzido ou nulo, pois os receptores estão “insensíveis”. Essa mudança pode ser uma mudança
de conformação no próprio receptor ou o receptor internaliza-se para dentro da célula.
- Receptor Beta-Adrenérgico: Se a adrenalina vem pelo sangue e se liga ao receptor Beta-1
cardíaco, vai ocorrer aumento da força e frequência cardíaca. Essa força e frequência não podem
permanecer ativas o tempo todo, então o receptor muda de conformação e vai perder a sensibilidade ao
ligante.
- Integração: sinais diferentes ligando-se a receptores diferentes, mas produzem a mesma resposta.
Gastrina liga-se ao receptor de gastrina, acetilcolina liga-se ao receptor M3, histamina liga-se ao receptor
H2 e ocorre aumento da produção de HCl no estômago.

Fatores que contribuem para alta sensibilidade da transdução de sinal

- Afinidade dos receptores
- Cooperatividade na interação do ligante com o receptor. O grupo heme da hemoglobina tem a
capacidade de se ligar a 4 moléculas de oxigênio. Cada oxigênio que se liga causa uma mudança na
conformação da molécula de hemoglobina. Quando os quatro se ligam, a hemoglobina encontra-se no
estado relaxado. A calmodulina tem quatro sítios de ligação pro cálcio, cada cálcio que se liga causa uma
mudança conformacional de modo que o quarto cálcio liga-se muito mais facilmente que o primeiro.
- Amplificação por cascatas enzimáticas
- Canal Iônico aberto por ligante: receptor nicotínico da acetilcolina. É um tipo de receptor (canal
iônico) aberto por ligante que tem dois sítios de ligação pra acetilcolina. Quando duas moléculas se ligam
ao receptor, o canal se abre permitindo a entrada de sódio e consequentemente de Ca. Esse receptor
possui o chamado Mecanismo de Comporta. Existe um “portão” que se abre quando a acetilcolina se liga.
Esse portão não pode ficar aberto o tempo todo, então ocorre a fase de dessensibilização, fechando o
canal iônico. A acetilcolina se desliga e pode ser recaptada pelo neurônio pós-sinaptico ou degradada pela
acetilcolinesterase ou tenta ativar novamente o receptor.
- Quando ocorre bloqueio da acetilcolinesterase, há uma ativação do S.N Parassimpático, causando
aumento da produção de HCl, de saliva, de secreção, miose (contração pupilar), diminuição da frequência
cardíaca
- Receptores com atividade de Tirosina-Quinase: também chamados de receptores enzimáticos
ou catalíticos. O receptor se autofosforila ao entrar em contato com a substância e pode transferir o radical
fosfato para um canal iônico, enzima, proteína. Vimos que para haver reação de fosforilação, tem que
haver ativação de uma quinase, a PKC. No caso da insulina, o próprio receptor tem atividade de quinase,
por isso o nome de receptor com atividade tirosina quinase. Os únicos aminoácidos que podem ser
fosforilados são serina, tirosina e treonina. Receptor de insulina é um dímero, tem duas alfa-hélices
transmembrana(visto na aula passada)
- A insulina pode atuar no metabolismo proteico promovendo síntese de novas proteínas. Quando
ela se liga, o receptor se autofosforila e vai transferindo o fosfato para outras enzimas como a MEK, MAPK,
RAFK. No fim, há a síntese de uma nova proteína. (SLIDE 20)
- Ativação da glicogênio-sintase pela insulina: a liberação de insulina provoca ativação da
glicogênio sintase e inativação da glicogênio fosforilase. O glucagon doa radical fosfato para a glicogênio
fosforilase e esta se ativa. Ao mesmo tempo, doa o radical fosfato para a glicogênio-sintase, inativando-a.
A insulina faz o contrário. Ela ativa a fosfatase, que retira o radical fosfato, ativando a glicogênio sintase e
inativando a glicogênio fosforilase.
- Os transportadores de glicose, principalmente o GLUT4 são armazenado no interior de vesículas,
principalmente das células musculares. Quando a insulina se liga ao receptor, este se autofosforila,
transfere radical fosfato pra canal de Ca presente na membrana. O Ca entra e promove a fusão dessas
vesículas. O GLUT4 então será mais expresso na superfície celular. Quanto mais GLUT4, mais glicose
captada pela célula muscular.
- Insulina tem atividade de tirosina-quinase
- Receptores de Serpentina/Metabotrópicos: acoplados a proteína G. Ex: receptor para a
adrenalina. Essa transdução é definida por três componentes essenciais, um receptor de membrana
(metabotrópico), proteína ligadora de nucleotídeos de guanina (liga GDP ou GTP) e uma enzima efetora
que vai gerar segundos mensageiros (adenililciclase ou fosfolipase C). A adrenalina se liga ao receptor
beta-adrenérgico, que é metabotropico e esse receptor está acoplado a proteína G. Se ele estiver ligado a
GDP, a proteína G está inativa. Quando ocorre a ligação, a proteína G (sua subunidade alfa) expulsa o GDP
e encaixa no GTP. Subunidade alfa junto com o GTP chega até a adeniliciclase. Esta é uma enzima efetora
transmembrana que converte o ATP em AMPc. Este ativa a PKA (proteína quinase dependente de AMPc),
que vai fosforilar outras proteínas, canais iônicos.
- A adrenalina liga-se ao receptor beta-1(receptor do músculo cardíaco), beta-2 e beta-3. Todos eles
ativam a adenililciclase. No beta-1, a PKA fosforila canal de Ca, causando contração cardíaca. No beta-
2(pulmonar), a PKA fosforila canais para K, causando relaxamento. O beta-3 é responsável pela lipólise.
*Beta-bloqueadores.

- Receptores Alfa: Os alfa-1 ativam a fosfolipase C. Os alfa-2 inibem a adenililciclase. Se houver

inibição da adenililciclase vai haver diminuição de AMPc, levando a efluxo de K (hiperpolarização.
Relaxamento).
- Agonista alfa-2: Clonidina: utilizada pro tratamento da hipertensão. Ativa o receptor, que inibe a
adenililciclase, diminui AMPc, saída de K
- A PKA tem quatro subunidades, duas regulatórias e duas catalíticas. Quando 4 moléculas de AMPc
ligam-se a subnidade regulatória, elas liberam a subunidade catalítica. Esta pega o fosfato a partir do ATP,
doa pro substrato, liberando este fosforilado.

- A proteína G tem atividade de GTPase. Enquanto o hormônio estiver ligado ao receptor, a via de
transdução está ativada, mas essa ativação não pode existir o tempo todo. Por isso, deve existir alguma
forma de inativação da adenililciclase. A subunidade alfa da proteína G pode quebrar o GTP em GDP,
inativando a proteína G. A subunidade volta pro complexo beta-gama (complexo com a três subunidades
da proteína G: alfa, beta e gama).
- Existem três tipos de proteína G, Gi, Gs e Gq. Gi e Gs estão ligadas a via da adenililciclase. Gs causa
ativação da adenililciclase. Gi causa inativação (diminui AMPc, efluxo de K, hiperpolarização). Gq está
acoplada a via da fosfolipase C.
- O hormônio chega, liga-se ao receptor, que está acoplado a proteína G. A proteína Gq ativa(isto é,
ligada a da GTP) migra pela membrana e ativa a fosfolipase C. O PIP2 presente na membrana vai sofrer
ação da fosfolipase C e vai ser quebrado em IP3 e DAG. IP3 migra pro R.E. e liga-se ao receptor de IP3,
que é um canal para cálcio, aumentando a liberação do íon. Este vai para o citosol e junto com o DAG
ativa a PKC. Esta vai fosforilar canais pra Ca na membrana, o cálcio extracelular entra na célula. O cálcio
que chega ao citosol e vai se ligar a calmodulina( 4 Ca2+ se ligam), tornando-a ativa (complexo cálcio-
calmodulina). Ela vai ativar outra quinase, a MLCK (quinase da cadeia leve da miosina), fosforilando a
cadeila leve da miosina. Então, os filamentos de miosina deslizam pelos filamentos de actina, promovendo
a contração da musculatura lisa (PROVA).

- Receptores de Hormônios Esteroides: são receptores nucleares. Atravessam livremente a

membrana e o receptor deles está localizado no núcleo da célula. O receptor para o hormônio pode estar
no citosol, o hormônio se liga ao receptor e os dois migram para o núcleo. Pode acontecer de o hormônio
“passar direto”, ligando-se a um receptor existente no núcleo. Nos dois casos, sempre haverá regulação da
expressão gênica.
- Tamoxifeno: utilizado no tratamento do câncer de mama, funciona como anatagonista de receptor
de progesterona. Ela é um hormônio esteroidal, atravessa livremente a membrana, liga-se ao receptor do
núcleo e aumenta a divisão celular do tecido mamário.
- Mifepristona: utilizada em pílulas do dia seguinte. A implantação do zigoto depende de
progesterona. A mifepristona bloqueia o receptor de progesterona, causando uma descamação da parede
do útero, impedindo a nidação. O uso prolongado pode causar infertilidade e câncer.

- O potencial de membrana é mantido pela bomba Na-K. Aumento da permeabilidade ao Na causa

despolarização. Despolariza-se, abre canais pra cálcio, o cálcio entra e a célula se torna excitável. Quando
o K sai da célula, repolariza, fecha canal de Na e fecha canal pra Ca. Isso é chamado de potencial de ação
- Receptores serotoninérgicos: de serotonina. Também podem ativar canais iônicos

- Receptores ligados a Guanililciclase: dependem da produção de óxido nítrico. Este é formado a

partir da arginina. Arginina na presença de oxigênio sofre ação da enzima NO-sintase, que vai formar
citrulina+NO. O óxido nítrico ativa a guanililciclase, que vai ser responsável pela conversão do GTP em
GMPc.

- O óxido nítrico é uma substância relaxante, promove vasodilatação. É chamado de EDRF (fator
relaxante derivado do endotélio). Sozinho, provoca relaxamento, mas quando é liberado, ativa a
guanililciclase. O aumento da concentração de GMPc provoca vasodilatação. O GMPc pode levar a ativação
de uma quinase chamada PKG(proteína quinase dependente de GMPc). Esta fosforila canais para potássio,
abrindo os canais de K, causando a saída do íon (hiperpolarização da célula). A hiperpolarização reduz a
entrada de Ca, provocando relaxamento.

- Viagra (Sildenafil): bloqueia a fosfodiesterase(PDE-5). A PDE-5 degrada o GMPc. A impotência é

causada pelo aumento de PDE-5(a enzima está mais ativa) e consequente diminuição do GMPc, então não
ocorre relaxamento. A ereção é causada por relaxamento. Ao bloquear a PDE-5, o sildenafil promove o
relaxamento. Inicialmente utilizado para tratar angina do peito.
- Contra-indicações do sildenafil: Se um indivíduo normotenso ingere o medicamento, sua PA vai
diminuir e será causada uma hipertensão de rebote (o organismo libera aldosterona, adrenalina)

- ANF (Fator Natriurético Atrial): Quando a PA aumenta, devido ao aumento da concentração de Na

no organismo, há a liberação desse fator. Este ativa um receptor com atividade guaniliciclase. A
guanililciclase vai produzir GMPc, que vai causar relaxamento, diminuindo a PA.

- Toxina Colérica (PROVA): A toxina adiciona um resíduo de ADP-ribose a proteína Gs, o que causa
perda da atividade GTPase pela Gs. Ocorre uma ativação permanente da proteína Gs, e consequente
ativação permanente de adenililciclase. Aumenta a produção de AMPc, e isso aumenta o transporte ativo
de sódio, a partir do intestino, causando diarreia intensa e desidratação.

- PDEs, de modo geral, são enzimas que degradam nucleotídeos cíclicos. A PDE-4 degrada o AMPc. A
cafeína (aumenta produção de HCl) e teofilina(usada no tratamento da asma) são inibidores de PDE-4
*Lembrar da via, dos segundos mensageiros e dos efeitos (PROVA)