PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK KULIT BUAH JERUK

MANDARIN TERHADAP PENURUNAN KADAR MALONDIALDEHID

(MDA) SERUM PADA TIKUS PUTIH JANTAN STRAIN WISTAR (Rattus
norvegicus) YANG DIPAPAR DENGAN ASAP ROKOK

Christian Eric Kusuma. 2015

e-mail : Ericpresym28@gmail.com________________
Tugas akhir, Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran,
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya.
Pembimbing :Junaidi Soetowo, dr., SpBK

ABSTRAK

Tingginya kadar malondialdehid (MDA) di dalam tubuh dapat disebabkan

oleh menigkatnya aktivitas radikal bebas. Diketahui bahwa asap rokok
mengandung 4800 macam senyawa kimia yang berbahaya, salah satunya yaitu
radikal bebas. Kulit jeruk mandarin mengandung beberapa senyawa yang penting
seperti senyawa flavonoids, phenolic acids dan adrenergic amines.Flavonoid
merupakan senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan.Antioksidan adalah
senyawa pemberi elektron pada senyawa yang memiliki elektron yang tidak
berpasangan (radikal bebas). Antioksidan dapat meredam atau mengurangi
dampak negatif radikal bebas dengan cara mengikatnya lalu mengubahnya
menjadi tidak berbahaya bagi tubuh.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya pengaruh pemberian
ekstrak kulit buah jeruk mandarin terhadap penurunan kadar malondialdehid
(MDA) serum pada tikus putih jantan strain wistar (rattus norvegicus) yang
dipapar dengan asap rokok. Sedangkan populasi atau subjek penelitian ini adalah
Tikus putih strain Wistar (Rattus Norvegiccus). Tikus berkelamin jantan, berat
160-200, usia 2-3 bulan, kondisi fisik sehatdengan besar sampel yang diambil
sebanyak 30 ekor.
Hasil penelitian ada pengaruh pemberian ekstrak kulit buah jeruk mandarin
(Citrus reticulata) terhadap penurunan kadarmalondialdehid (MDA) serum pada
tikus putih jantan strain wistar (Rattus norvegicus) yang dipapar asap rokok, hal
ini diperkuat dengan hasil signifikansi p-value = 0,030 yaitu < α (0.05)

Kata Kunci : Ekstrak Kulit Buah Jeruk Mandarin, Kadar

Malondialdehid (MDA) Serum, Tikus Putih Jantan Strain
Wistar (Rattus Norvegicus), PaparanAsap Rokok

PENDAHULUAN negara pengkonsumsi rokok terbanyak

di dunia setelah Cina, Amerika Serikat,
Indonesia setiap tahunnya meng- Jepang dan Rusia (Haris, 2012).
konsumsi 215 milyar batang rokok, Aktivitas merokok dapat menghasilkan
sehingga menduduki peringkat ke lima asaprokok yang berasal dari proses

Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
1
pembakaranyang tidak sempurna. Di-
ketahui bahwa asaprokok mengandung
4800 macam senyawakimia yang
berbahaya (Valavanidis, 2009),salah
satunya yaitu radikal bebas
(Droge,2002). Di dalam tubuh, radikal
bebas dapat menyebabkan
prosesperoksidasi lipid (Yustika,
2103). Peroksidasi lipid adalah
perusakan oksidatif terhadap asam
lemak takjenuh berantai panjang
(Polyunsaturated Fatty Acid) yang
menghasilkan senyawamalondialdehid
(MDA).Dengan demikian, malon-
dialdehid (MDA)dapat digunakan se-
bagai indeks pengukuranaktivitas radi-
kal bebas dalam tubuh. Tingginya
kadarmalondialdehid (MDA) di dalam
tubuh dapat disebabkanoleh menigkat-
nya aktivitas radikal bebas (Yustika,
2013).
Kulit jeruk mandarin mengan-
dung beberapa senyawa yang penting
seperti senyawa flavonoids, phenolic
acids dan adrenergic amines (Vesna et
al, 2010).Flavonoid merupakan
senyawa yang memiliki aktivitas
antioksidan.Antioksidan adalah senya-
wa pemberi elektron pada senyawa
yang memiliki elektron yang tidak
berpasangan (radikal bebas). Antiok-
sidan dapat meredam atau mengurangi
dampak negatif radikal bebas dengan
cara mengikatnya lalu mengubahnya
menjadi tidak berbahaya bagi tubuh
(wulandari, 2013).Berdasarkan data
data tersebut di dapatkan bahwa buah
jeruk mandarin (Citrus reticulata)
memiliki efek antioksidan yang
dapatmeredam atau mengurangi
dampak negatif radikal bebas sehingga
menurunkan malondialdehid (MDA).
Oleh karena hal di atas, Penulis
ingin meneliti tentang pengaruh pem-
berian ekstrak kulit buah jeruk man-
darin (Citrus reticulata) terhadap penu-
Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
runan kadarmalondialdehid (MDA) se-
rum pada tikus putih jantan strain
wistar (Rattus norvegicus) yang
dipapar asap rokok
METODE PENELITIAN
RancanganPenelitian
Penelitian ini adalah penelitian
eksperimental murni, dengan meng-
gunakan rancangan randomized post
test only control group design
Populasi dan Sampel
Populasi atau subjek penelitian ini
adalah Tikus putih strain Wistar
(Rattus Norvegiccus). Tikus berkela-
min jantan, berat 160-200, usia 2-3
bulan, kondisi fisik sehat dengan besar
sampel yang diambil sebanyak 30 ekor.
Analisis Data
1. Analisis deskriptif
Analisis deskriptif merupakan ana-
lisis dasar statistik inferensial (uji
hipotesis) untuk mengetahui karak-
teristik data yang dimiliki, yaitu
berupa data tentang kadarMalon-
dialdehyde (MDA). Analisis des-
kriptif ini meliputi penghitungan
rata-rata (mean/x̅) dan simpangan
baku (SD/) untuk kadar
Malondialdehyde (MDA)
2. Analisis inferensial
a. Analisis normalitas data pene-
litian.
b. Analisis homogenitas data pe-
nelitian.
c. Analisis komparatif data pene-
litian.
d. Bila terdapat perbedaan yang
signifikan maka dilanjutkan
dengan Uji chi square, untuk
2
 melihat pengaruh antar kelom-
pok penelitian
HASIL PENELITIAN Tabel 3Hasil Uji Homogenitas Data
Variabel
df p Keterangan
Penelitian
Tabel 1 Deskripsi Kadar malon- Kadar 5 0,034 Data tidak
dialdehid (MDA) Serum Perkelom- malondialdehid homogen
pok (MDA) serum
Variabel Kelompok Perlakuan (U/L)
Kadar MDA KKJ KCMC KAR P1 P2 P3
(U/L) 10,29 ± 11,73 ± 13,18 ± 12,27 ± 12,09 ± 10,47 ± Sumber: Data diolah 2015
1,23 0,69 2,79 0,83 0,69 0,72
Sumber: Data diolah 2015 Berdasarkan tabel V.3 diatas,
hasil uji Levene untuk kadar malon-
Berdsarkan tabel di atas dapat dialdehid (MDA) serum mempunyai
diketahui bahwa rata-rata nilai kadar nilai p = 0,034. Hal ini berarti varians
malondialdehid (MDA) serum tertinggi data kadar malondialdehid (MDA)
ada pada kelompok KAR (kelompok serum tidak homogen (p < 0,05).
yang dipapar asap rokok dan Na-CMC Sehingga pengujian ada tidaknya
0,5%) yaitu sebesar 13,18 dan nilai perbedaan antar kelompok digunakan
kadar malondialdehid (MDA) serum uji Kruskal Wallis.
terendah ada pada kelompok KKJ yang
diberikan ekstrak kulit buah jeruk
mandarin dalam Na-CMC 0,5% Tabel 4 Hasil Uji Kruskal Wallis
dengan dosis 500 mg/kg BB/hari yaitu Antar Kelompok
sebesar 10,29. Pada tabel V.1 Variabel
menunjukkan adanya peningkatan p Keterangan
Penelitian
kadar malondialdehid (MDA) setelah Kadar 0,030 Ada
terpapar Asap rokok. malondialdehid perbedaan
(MDA) serum
(U/L)
Tabel 2Hasil Uji Normalitas Sumber: Data diolah 2015
Variabel ̅ ±
𝐗
p Keterangan
Penelitian SD Dari hasil output di atas
Kadar 11,67 0,312 Distribusi menunjukkan signifikansi p-value =
malondialdehid ± data normal 0,030 yaitu < α (0.05) maka ada
(MDA) serum 1,60 pengaruh pemberian ekstrak kulit buah
(U/L) jeruk mandarin (Citrus reticulata)
Sumber: Data diolah 2015 terhadap penurunan kadarmalon-
dialdehid (MDA) serum pada tikus
Berdasarkan tabel V.2 diatas, putih jantan strain wistar (Rattus
data pengukuran kadar malondialdehid norvegicus) yang dipapar asap rokok.
(MDA) serum mempunyai nilai p =
0,312. Hal ini berarti data pengukuran
kadar malondialdehid (MDA) serum
mempunyai distribusi normal (p >
0,05).

Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
3
 pan. Kemudian ekstrak yang didapat
Tabel 5 Uji Post-Hoc TurkeyKadar dilarutkan dalam Na-CMC 0,5%. Kulit
Malondialdehid (MDA) Serum buah jeruk mandarindiperoleh dari
Kelompok Kadar pasar darmo Surabaya, Indonesia.
Perlakuan Malondialdehid Ekstrak kulit buah jeruk mandarin
(MDA) Serum (U/L) dalam Na-CMC 0,5% ini diberikan
KJ 10,29 ± 1,23bcdef sekali dalam sehari, pada pagi hari jam
KCMC 11,73 ± 0,69acdef 08.00 WIB, setiap hari selama 4
KAR 13,18 ± 2,79abdef minggu pada hewan coba secara
P1 12,27 ± 0,83abcef peroral lewat sonde lambung dengan
P2 12,09 ± 0,69abcdf dosis 350 mg/kg BB/hari, 500 mg/kg
P2 10,47 ± 0,72abcde BB/hari, dan 650 mg/kg BB/hari.
Keterangan:
Superscript a,b,c,d,e,f dengan huruf Pengaruh Pemberian Ekstrak Kulit
yang sama pada kolom variabel Jeruk mandarin (Citrus reticulata)
penelitian (kadar MDA serum) berarti Terhadap Kadar Malondialdehid
tidak terdapat perbedaan yang (MDA)
bermakna (p > 0,05). Asap rokok yang dihirup seorang
perokok, mengandung komponen gas
Pada output tabel V.5 dan partikel. Komponen gas sangat
menunjukkan bahwa tidak terdapat berpotensi untuk menimbulkan radikal
perbedaan yang bermakna rata-rata bebas, yang diantaranya terdiri dari
kadar MDA serum antar kelompok karbon monoksida, karbondioksida,
perlakuan dengan kelompok kontrol oksida dari nitrogen dan senyawa
yang diberikan Na-CMC 0,5% dan hidrokarbon. Sedangkan komponen
kelompok yang diberikan Paparan partikel beberapa diantaranya terdiri
Asap rokok, terbukti dengan tingkat dari tar, nikotin, benzopiren, fenol, dan
signifikansi di atas 0,05 cadmium (Zavos et all., 1998).
Penelitian Aktivitas merokok da-
pat menghasilkan asap rokok yang be-
PEMBAHASAN rasal dari proses pembakaran yang ti-
dak sempurna. Diketahui bahwa asap
Ekstrak kulit jeruk mandarin (Citrus rokok mengandung 4800 macam se-
reticulata) nyawa kimia yang berbahaya (Valava-
Ekstrak kulit buah jeruk man- nidis, 2009), salah satunya yaitu radikal
darin adalah kulit buah jeruk mandarin bebas (Droge, 2002). Di dalam tubuh,
yang di potong kecil-kecil kemudian radikal bebas dapat menyebabkan pro-
dikeringakn disuhu ruangan dengan ses peroksidasi lipid (Yustika,
cara diangin-anginkan dan diekstraksi 2103).Peroksidasi lipid adalah
dengan pelarut etanol dengan metode perusakan oksidatif terhadap asam
maserasi selama 5 hari dengan suhu lemak tak jenuh berantai panjang
ruangan. Semua maserat yang dipero- (Polyunsa-turated Fatty Acid) yang
leh dikumpulkan, kemudian diuapkan menghasilkan senyawa malondialdehid
pelarutnya menggunakan rotary evapo- (MDA).
rator pada suhu 40°C.Ekstrak kental Dengan demikian, malondial-
yang diperoleh ditimbang dan disim- dehid (MDA) dapat digunakan sebagai

Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
4
indeks pengukuran aktivitas radikal
bebas dalam tubuh. Tingginya
kadarmalondialdehid (MDA) di dalam
tubuh dapat disebabkan oleh
menigkatnya aktivitas radikal bebas
(Yustika, 2013).
Hasil pengujian yang dilakukan
dengan uji Kruskal Wallis menun-
jukkan bahwa ada pengaruh pemberian
ekstrak kulit buah jeruk mandarin
(Citrus reticulata) terhadap penurunan
kadar malondialdehid (MDA) serum
pada tikus putih jantan strain wistar
(Rattus norvegicus) yang dipapar asap
rokok., terbukti dengan nilai signifi-
kansi p-value = 0,030 yaitu < α (0.05).
Hasil penelitian menunjukkan
bahwa setelah pemberian ekstrak kulit
jeruk mandarin (Citrus reticulata)
menunjukkan adanya penurunan kadar
malondialdehid (MDA) serum pada
tikus putih jantan strain wistar (Rattus
norvegicus) yang dipapar asap rokok,
nilai kadar malondialdehid (MDA)
serum terendah ada pada kelompok
KKJ yang diberikan ekstrak kulit buah
jeruk mandarin dalam Na-CMC 0,5%
dengan dosis 500 mg/kg BB/hari yaitu
sebesar 10,29.
Hasil ini menunjukkan bahwa
pemberian ekstrak kulit jeruk mandarin
(Citrus reticulata) mampu untuk
menurunkan kadarmalondialdehid
(MDA) serum pada tikus putih jantan
strain wistar (Rattus norvegicus) yang
dipapar asap rokok.
Adanya penurunan kadarmalon-
dialdehid (MDA) serum pada tikus
putih jantan Strain Wistar (Rattus
norvegicus) yang dipapar asap rokok
lebih disebabkan karena Kulit jeruk
mandarin mengandung beberapa
senyawa yang penting seperti senyawa
flavonoids, phenolic acids dan
adrenergic amines (Vesna et al, 2010).
Flavonoid merupakan senyawa yang
Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
memiliki aktivitas
antioksidan.Antioksidan adalah
senyawa pemberi elektron pada
senyawa yang memiliki elektron yang
tidak berpasangan (radikal bebas).
Antioksidan dapat meredam atau
mengurangi dampak negatif radikal
bebas dengan cara mengikatnya lalu
mengubahnya menja-di tidak
berbahaya bagi tubuh (wulandari,
2013). Berdasarkan data data tersebut
di dapatkan bahwa buah jeruk
mandarin (Citrus reticulata) memiliki
efek antioksidan yang dapat meredam
atau mengurangi dampak negatif
radikal bebas sehingga menurunkan
malondialdehid (MDA).
Senyawa flavonoids merupakan
senyawa bioaktif yang utama terkan-
dung dalam kulit jeruk mandarin dan
merupakan senyawa yang bersifat
antimutagenic, antiinflamatory, antiok-
sidan, antitumor, dan antiatheros-
clerosis.Pada penelitin sebelumnya,
senyawa flavonoids mempengaruhi pe-
ran penting dalam aktivitas antikan-ker
(Sun Y et al,2010). Penelitian menun-
jukan ekstrak kulit jeruk man-darin
dapat menghambat ekspresi onkogen
N-Ras melalui inhibisi CYP1A2
dengan dosis optimal 500 mg/kg/BB
(Adhi P et al, 2009).
Hasil penguji yang dilakukan
dengan uji Post Hoc Test dengan uji
Mann Whitney menunjukkan bahwa ti-
dak terdapat perbedaan yang bermakna
rata-rata kadar MDA serum antar
kelompok perlakuan dengan kelompok
kontrol yang diberikan Na-CMC 0,5%
dan kelompok yang diberikan Paparan
Asap rokok, terbukti dengan tingkat
signifikansi di atas 0,05.
Keadaan ini disebabkan oleh
karena ekstrak kulit jeruk mandarin pa-
da penelitian ini tidak memiliki daya
antioksidan yang kuat untuk menurun-
5
kan kadar MDA serum. Hal ini dapat
disebabkan oleh karena beberapa faktor
yaitu konsentrasi pelarut saat maserasi,
PH, suhu, cahaya dan oksigen.
Faktor lain yang juga
berpengaruh pada hasil percobaan ini
adalah adanya standar deviasi yang
besar, dimana hal ini dapat terjadi
karena adanya bias pada saat pemerik-
saan kadar MDA serum dengan metode
TBARS. Bias ini timbul karena adanya
lisis dari eritrosit tikus coba pada saat
pengambilan darah sehingga diperoleh
warna serum yang kemerahan yang
akan mempengaruhi hasil pembacaan
spektrofotometri (Nielsen,1997)
PENUTUP
Kesimpulan
Rata-rata nilai kadar malondial-
dehid (MDA) serum tertinggi ada pada
kelompok KAR (kelompok yang
dipapar asap rokok dan Na-CMC 0,5%)
yaitu sebesar 13,18 dan nilai kadar
malondialdehid (MDA) serum terendah
ada pada kelompok KKJ yang dibe-
rikan ekstrak kulit buah jeruk mandarin
dalam Na-CMC 0,5% dengan dosis
500 mg/kg BB/hari yaitu sebesar 10,29.
Hasil ini menunjukkan adanya pening-
katan kadar malondialdehid (MDA)
setelah terpapar Asap rokok.
Hasil penelitian menunjukkan
bahwa ada pengaruh pemberian ekstrak
kulit buah jeruk mandarin (Citrus
reticulata) terhadap penurunan kadar
malondialdehid (MDA) serum pada
tikus putih jantan strain wistar (Rattus
norvegicus) yang dipapar asap rokok,
terbukti dengan nilai signifikansi p-
value = 0,030 yaitu < α (0.05).
Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
Saran
1. Pengembangan penelitian serupa
dapat dilakukan dengan masa
perlakuan pemberian ekstrak kulit
jeruk mandarin (Citrus reticulata)
yang lebih lama, sehingga dapat
diperoleh gambaran tentang eks-
trak kulit jeruk mandarin (Citrus
reticulata) terhadap penurunan ka-
dar malondialdehid (MDA) serum
pada tikus putih jantan (Rattus
norvegicus) strain wistar yang
dipapar asap rokok.
2. Penelitian dengan memper-
timbangan “dose effect relation-
ship” pada ekstrak kulit jeruk
mandarin (Citrus reticulata), untuk
mendapatkan gambaran pengaruh
ekstrak kulit jeruk mandarin
(Citrus reticulata) pada berbagai
variasi dosis, sekaligus mengkaji
toksisitasnya.
3. Penelitian selanjutnya dengan
menggunakan kulit jeruk mandarin
(Citrus reticulata) dalam bentuk
ekstrak dapat dilakukan, sehingga
aplikasi klinik akan semakin
dimungkinkan, khususnya menuju
tahapan uji klinik
DAFTAR PUSTAKA
Adhi, P., Andita, D dan Diah, A. 2009.
Mekanisme Penekanan Ekspresi
N-RAS Ekstrak Kulit Jeruk
Keprok (Citrus reticulata)
Sebagai Agen
Kemopreventif.Cancer
Chemoprevention Researc
Center, Fakultas Farmasi
Universitas Gadjah Mada,
Yogyakarta.105-106.
6
Droge, W., 2002.Free radicals in the Vesna, T., Gordona S.,
physiological control of cell 2010.Antioxidant Activity of
function. Physiol. 82: 47-95. Mandarin ( Citrus reticulate)
Peel. Biblid: 1450-7188,p. 195-
Haris, A., Mukthar, I., Rita, R., 2012. 203. Slovenia
Asap Rokok sebagai Bahan
Pencemar dalam ruangan. Wulandari, M., Nora, I., Gusrizal.,
Departemen Pulmonologi dan 2013. AKTIVITAS
Ilmu Kedokteran Respirasi, ANTIOKSIDAN EKSTRAK n-
Fakultas Kedokteran Universitas HEKSANA, ETIL ASETAT DAN
Indonesia. Jakarta. 17-20 METANOL KULIT BUAH
JERUK SAMBAL (Citrus
Nielsen F, Mikkelsen BB, Nielsen JB, microcarpa Bunge). Program
Andersen HR, Grandjean P. Studi Kimia, Fakultas MIPA,
Plasmamalondialdehyde as Universitas Tanjungpura. 90-91.
biomarker oxidative stress
reference interval and effects of Yustika, A.R., and sasangka, P.,
life style factors. Clin Chem 2013.KADAR
1997; 43:1209-14 MALONDIALDEHID (MDA)
DAN GAMBARAN HISTOLOGI
Sun,Y., Jianhua, W. and Shubo, G., PADA GINJAL TIKUS PUTIH
2010. Simultaneous (Rattus norvegicus) PASCA
Determination of Flavonoids in INDUKSI Cylosporine-A.Jurusan
Different Parts of Citrus Kimia, Fakultas Matematika dan
reticulate “Chachi” Fruit by Ilmu Pengetahuan Alam,
High Performance Liquid Universitas Brawijaya
Chromatogrpahy-Photodiode
Array Detection.Open access Zavos, P.N.Z., J.R. Correa, P. Aslanis,
molecules ISSN 1420- S. Antypas and P.M.
3048.Journal Molecules. Zavos.,1998. Occurrence of
Osmotic Shock in Human
Valavanidis, A., 2009. Tobaka Smoke : Spermatozoa: Its Effects on The
Involvement of Reactive Oxygen Qualitative Measurements of
Species and Stabel Free Radicals Frozen-Thawed Spermatozoa.
in Mechanisms of Oxidative Middle East Fertility Society
Damage Carcinogenesis and Journal 3 (1).
Synergistic Effects with Other
Respirable Particle Internasional
Journal ofEnvironmental
Research and PublicHealth.
24(10): 160–165.

Christian Eric Kusuma. 2015. Program Studi Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran.
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya. Jl. Dukuh Kupang XXV/54 Surabaya.
7