Evaluasi Antibakteri dan Penapisan Fitokimia Ekstrak Daun Datura terhadap Patogen Bakteri

ABSTRAK
Penyakit menular bisa menjadi ancaman bagi kesehatan masyarakat di dunia ini. Penggunaan tanaman
obat untuk pengobatan berbagai penyakit merupakan praktik lama di sebagian besar negara dan masih
menawarkan sumber potensi agen antiinfektif yang sangat potensial. Penelitian ini dilakukan untuk
mengevaluasi potensi antibakteri ekstrak pelarut etanol dan etil asetat daun matang Datura terhadap
sembilan isolat bakteri patogen, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Escherichia coli,
Salmonella typhi, Shigella flexneri, Klebsiella Pneumoniae, Vibrio cholerae dan Pseudomonas
aeruginosa. Kekeruhan inokulum bakteri dibandingkan dengan 0,5 standar Mc Farland dan potensi
antibakteri ekstrak etanol Datura metel diuji dengan metode difusi Agar baik. Ekstrak etanol Datura
metel (100 mg / ml) menunjukkan zona penghambatan maksimum (26 mm) terhadap Pseudomonas
aeruginosa, Escherichia coli dan Bacillus subtilis. Staphylococcus aureus menunjukkan zona hambatan
yang kurang (8 mm). Ekstrak etil asetat metana Datura (100 mg / ml) menunjukkan zona penghambatan
maksimum (19 mm) terhadap Escherichia coli. Tidak ada zona penghambatan terhadap Pseudomonas
aeruginosa. Uji fitokimia dilakukan dan menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri daun tanaman Datura
metel disebabkan oleh adanya senyawa fitokimia seperti alkaloid, tripenoid, steroid, flavonoid,
triterpen, senyawa fenolik dan tanin.

1. PERKENALAN
Sebagian besar penduduk dunia, terutama di negara berkembang bergantung pada sistem
pengobatan tradisional untuk berbagai penyakit. Beberapa ratus genera digunakan secara medis
dan tanaman merupakan sumber vital untuk obat ampuh dan ampuh [1]. Tanaman kaya akan
berbagai metabolit sekunder seperti tanin, alkaloid dan flavonoid, dari unsur fitokimia yang
ditemukan secara in vitro memiliki sifat antimikroba [2]. Banyak rempah-rempah dan ramuan
yang digunakan saat ini telah dinilai untuk efek antimikroba dan kekuatan obat mereka selain
juga aroma dan aroma mereka [3-5].

Di India, 500 spesies tanaman obat digunakan untuk bakteri patogen. Tanaman telah digunakan
sebagai obat tradisional sejak dahulu kala untuk mengendalikan bakteri [6], penyakit virus dan
jamur. Baru-baru ini, penelitian telah dimulai untuk mengevaluasi kelayakan penggunaan obat-
obatan herbal dalam manajemen penyakit [7]. Selain itu, infeksi bakteri dianggap sebagai
penyebab utama kematian di akuakultur [8]. Karena bakteri yang sedang tumbuh

Resistensi terhadap standar komersial dan antibiotik cadangan, pencarian zat aktif baru dengan
aktivitas antibakteri melawan bakteri patogen semakin meningkat [9, 10]. Baru-baru ini
beberapa laporan telah dilakukan dengan aktivitas antimikroba melawan bakteri dan jamur.
Oleh karena itu penelitian ini dilakukan untuk mengetahui potensi efek tanaman obat pesisir
terhadap bakteri ikan hias dan patogen jamur yang diisolasi [11].
Tanaman telah menjadi bagian penting masyarakat manusia sejak awal peradaban. Sekitar 250
obat telah diidentifikasi dari tanaman selama deskripsi Rig Veda dan Atharvana Veda pada
periode Veda. Populasi pedesaan di berbagai belahan dunia lebih cenderung menggunakan cara
pengobatan tradisional karena ketersediaan yang sangat mudah dan biaya lebih murah.
Diperkirakan 80% populasi kulit hitam berkonsultasi dengan dukun tradisional [12]. Dalam
beberapa tahun terakhir, resistensi obat terhadap bakteri patogen manusia telah umum dan
dilaporkan secara luas dalam literatur [13] Karena efek samping dan resistensi mikroorganisme
patogen yang dibangun melawan antibiotik, banyak ilmuwan baru-baru ini memperhatikan
ekstrak dan senyawa aktif secara biologis yang diisolasi dari spesies tanaman yang digunakan
dalam obat-obatan herbal [14]. Sifat antimikroba dari

Tanaman obat semakin dilaporkan dari berbagai belahan dunia [15,16].

Datura metel Linn (Thorn-apple, Devil Trumpet, Solanaceae) adalah tanaman obat Nigeria yang
banyak digunakan dalam phytomedicine untuk menyembuhkan penyakit seperti asma, batuk,
kejang dan kegilaan [17]. Daun dan biji banyak digunakan dalam pengobatan herbal sebagai
anestesi, antispasmodik, antitusif, bronkodilator dan sebagai halusinogen [18]. Seluruh tanaman
terutama daun dan biji digunakan sebagai anestesi, anodyne, anti-asthmatic, antispasmodic,
anti-tussive, bronchodilator, dan halusinogen [19]. Pabrik menemukan aplikasi di Indonesia

Pengobatan penyakit catarrh, diare dan kulit [20]. Hal ini digunakan dalam pengobatan penyakit
catarrh, diare,

Epilepsi, kegilaan, histeria, sakit rematik, wasir, sakit haid, sakit maag dan luka. Hal ini juga
digunakan dalam pengobatan luka bakar. Hal ini digunakan untuk menenangkan batuk dan
mengobati radang tenggorokan dan treachitis.

Beberapa penelitian [21, 22] telah mendokumentasikan dasar ilmiah untuk khasiat tanaman
obat phyto. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kegunaan metana Datura dalam
pengobatan kondisi menular yang disebabkan oleh bakteri patogenik umum. Penelitian ini telah
direncanakan untuk mengevaluasi aktivitas antibakteri dan senyawa fitokimia metat Datura
terhadap beberapa bakteri patogen untuk kemungkinan pengembangan obat baru untuk
pencegahan dan pengobatan penyakit menular yang disebabkan oleh bakteri patogen.

2. BAHAN DAN METODE

2.1 Pengumpulan dan pengeringan bahan tanaman Daun Dadara metel dewasa dikumpulkan

Dari Kebun Obat, Fakultas Pertanian,

Tabel 1. Mc Farland Nephelometer standar.

Universitas Annamalai, Chidambaram, Tamil Nadu. Daun mete Datura dicuci bersih tiga kali
dengan air dan sekali dengan air suling. Bahan tanaman itu diberi warna kering dan bubuk.
Sampel bubuk disegel secara diam-diam dalam kantong polietilena terpisah.
2.2 Pembuatan ekstrak tumbuhan

40 g daun bubuk mete Datura diekstraksi berturut-turut dengan 200 ml etanol pada 56-60 ° C
dan etil asetat pada 40-50 ° C pada ekstraktor Soxhelet sampai ekstraknya jelas. Ekstraknya
diuapkan sampai kering dan menghasilkan pasty

Ekstrak bentuk disimpan di lemari es pada suhu 4 ° C untuk penggunaan masa depan [23].
2.3 Uji mikroorganisme
Sembilan bakteri patogen, yaitu Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Salmonella typhi, Shigella flexneri, Klebsiella pneumoniae, Vibrio cholerae dan
Pseudomonas aeruginosa yang digunakan selama penelitian ini dan diperoleh dari Rajah
Mutthaiya Medical College Hospital, Chidambaram . Kultur sub kultur dan dipertahankan pada
kemiri agar - agar dan disimpan di

Kulkas pada suhu 4 ° C.

2.4. Penentuan aktivitas antibakteri
2.4.1 Persiapan standar Mc Farland Nephelometer

10 tabung uji dengan ukuran yang sama dan kualitas yang baik telah dibersihkan dan diatur
secara menyeluruh di dalam tabung reaksi. 1% asam sulfat murni secara kimia dan larutan berair
Barium klorida 1.175% telah disiapkan. Perlahan dan dengan agitasi konstan, jumlah dua larutan
yang ditunjuk ditambahkan ke tabung seperti ditunjukkan pada (Tabel 1) untuk membuat
volume total 10 ml per tabung. Tabung itu disegel. Endapan Barium klorida yang ditangguhkan
sesuai kira-kira dengan kepadatan sel homogen per ml sepanjang kisaran standar seperti
ditunjukkan pada tabel. Simpan tabung standar Mc Farland dalam gelap pada suhu kamar.
Mereka harus stabil selama 6 bulan.
2.4.2. Persiapan inokulum

Inokulum bakteri disiapkan dengan menginokulasi perulangan organisme uji dalam 5 ml kaldu
nutrisi

Dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 3-5 jam sampai a

Kekeruhan sedang dikembangkan. Kekeruhan itu cocok dengan standar 0,5 Mc Farland.
2.4.3 Penentuan aktivitas antibakteri (Metode Difusi Agar Baik)

1131
© 2010, IJPBA. Seluruh hak cipta.

P.Saranraj dkk. / Evaluasi Antibakteri dan Penapisan Fitokimia Dadia metel Daun Ekstrak
Terhadap Patogen Bakteri

IJPBA, Juli - Agustus 2011, Vol. 2, Terbitan, 4

Aktivitas antibakteri ekstrak daun mete Datura ditentukan dengan metode difusi Agar. Pelat
agar Muller Hinton (MHA) disiapkan dan diinokulasi dengan organisme uji dengan menyebarkan
inokulum bakteri ke permukaan media. Sumur (berdiameter 6 mm) dipukul di piring agar Muller
Hinton. Ekstrak daun etanol dan etil asetat metana Datura dengan konsentrasi berbeda (25 mg /
ml, 50mg / ml, 75mg / ml dan 100 mg / ml) dicampur dengan 1 ml Dimetil sulfoksida (DMSO)
dan ditambahkan ke dalam sumur. Nah yang mengandung DMSO saja bertindak sebagai kontrol
negatif. Piring itu

Diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam. Aktivitas antibakteri dinilai dengan mengukur
diameter zona penghambatan (dalam mm).
2.5 Analisis fitokimia
Uji fitokimia dilakukan untuk menemukan adanya unsur kimia aktif yang ada dalam bubuk daun
mete Datura seperti alkaloid, glikosida, terpenoid, steroid, flavonoid, gula pereduksi, triterpen,
senyawa fenolik dan tanin dengan prosedur berikut.
2.5.1 Uji Alkaloid (Uji Meyer)

Ekstrak metil Datura diuapkan sampai kering dan residunya dipanaskan pada bak air mendidih
dengan 2% asam klorida. Setelah pendinginan, campuran disaring dan diobati dengan beberapa
tetes reagen Meyer (Siddiq dan Ali, 1997). Sampel kemudian diamati untuk mengetahui
kekeruhan atau presipitasi kuning [24].
2.5.2 Uji Glikosida
Untuk larutan ekstrak dalam asam asetat glasial, beberapa tetes klorida Ferric dan asam sulfat
Konsentrat ditambahkan, dan diamati untuk pewarnaan coklat kemerahan di
Persimpangan dua lapisan dan warna hijau kebiruan di lapisan atas [25].

2.5.3 Uji Tripenoid dan Steroid

4 mg ekstrak diolah dengan 0,5 ml anhidrida asetat dan 0,5 ml kloroform. Kemudian larutan
konsentrat asam sulfat ditambahkan perlahan dan warna violet merah diamati untuk warna
hijau terpenoid dan hijau kebiruan untuk steroid [25].

2.5.4 Uji Flavonoid

4 mg larutan ekstrak diobati dengan 1,5 ml larutan metanol 50%. Solusinya dihangatkan dan
magnesium logam ditambahkan. Untuk larutan ini, 5-6 tetes asam klorida pekat ditambahkan
dan warna merah diamati untuk flavonoid dan warna oranye untuk flavon [25].

2.5.5 Uji untuk Mengurangi gula

Untuk 0,5 ml larutan ekstrak, 1 ml air dan 5-8 tetes larutan Fehling ditambahkan pada suhu
panas dan diamati untuk endapan merah bata.
2.5.6 Uji Triterpen
300 mg ekstrak dicampur dengan 5 ml

Kloroform dan hangatkan pada suhu 80 ° C selama 30 menit. Beberapa tetes asam sulfat pekat
ditambahkan dan dicampur dengan baik dan diamati untuk pembentukan warna merah.

2.5.7 Uji Senyawa Phenolic (uji Ferric chloride)

300 mg ekstrak diencerkan dalam 5 ml air suling dan disaring. Untuk filtrat, ditambahkan Ferric
chloride 5% dan diamati untuk formasi warna hijau tua.
2.5.8 Uji untuk Tanin
Untuk 0,5 ml larutan ekstrak, 1 ml air dan 1-2 tetes larutan klorida besi ditambahkan. Warna
biru diamati untuk tanin berlemak dan hijau hitam untuk tanin katekin [26].

3. HASIL DAN PEMBAHASAN

Efek obat yang menguntungkan dari bahan tanaman biasanya dihasilkan dari produk sekunder
yang ada di pabrik meskipun, biasanya tidak dikaitkan dengan senyawa tunggal namun
merupakan kombinasi dari metabolitnya. Tindakan pengobatan tanaman unik untuk spesies
atau kelompok tanaman tertentu, sesuai dengan konsep bahwa kombinasi produk sekunder
pada tanaman tertentu berbeda secara kedaerahan (27). Skrining tanaman biasanya melibatkan
beberapa pendekatan; Pendekatan etno botanical adalah salah satu metode umum yang
digunakan dalam memilih tanaman untuk studi farmakologis.

India memiliki warisan pengetahuan yang kaya akan obat-obatan berbasis tanaman baik untuk
pengobatan preventif dan kuratif. Sebuah negara seperti India sangat cocok untuk
pengembangan obat-obatan dari tanaman obat. Karena vas dan variasi yang luas di tanah dan
iklim, sub-benua India cocok untuk penanaman sejumlah besar tanaman obat dan aromatik
yang dapat digunakan sebagai bahan baku industri farmasi, wangi wewangian, kosmetik, rasa
dan makanan dan agrokimia. Sejumlah besar tanaman ini tumbuh liar dan dieksploitasi
terutama untuk digunakan di rumah farmasi asli. Beberapa tanaman ini menghasilkan obat
berharga yang memiliki ekspor tinggi Potensi [28] .Di dunia modern beberapa resistensi obat
telah berkembang melawan banyak infeksi mikroba karena penggunaan komersial tanpa
pandang bulu.
Obat antimikroba biasa digunakan dalam pengobatan penyakit menular. Selain masalah ini,
antibiotik kadang-kadang dikaitkan dengan efek buruk pada host termasuk hipersensitivitas,
penekanan kekebalan dan reaksi alergi. Situasi ini memaksa para ilmuwan untuk mencari zat
antimikroba baru. Mengingat kejadian resistansi antibiotik yang mengkhawatirkan pada bakteri
kepentingan medis, ada kebutuhan konstan akan agen terapeutik baru dan efektif. Oleh karena
itu, ada kebutuhan untuk mengembangkan obat antimikroba alternatif untuk pengobatan
penyakit menular dari tanaman obat [29].

Dalam penelitian ini, aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan etil asetat Acalypha indica diuji
terhadap berbagai bakteri patogen dan hasilnya ditunjukkan pada (Tabel 2 & 3). Zona
penghambatan ekstrak etanol Datura 100mg melawan bakteri adalah, Staphylococcus aureus (8
mm), Bacillus cereus (11 mm), Bacillus subtilis (26 mm), Salmonella typhi (21 mm), Shigella
flexneri (21 mm) Escherichia coli (26 mm), Klebsiella pneumoniae (16 mm), Vibrio cholerae (16
mm) dan Pseudomonas aeruginosa (26 mm). Zona penghambatan ekstrak etil asetat 100mg
metil Datura terhadap bakteri adalah, Staphylococcus aureus (13 mm), Bacillus cereus (9 mm),
Bacillus subtilis (9 mm), Salmonella typhi (14 mm), Shigella flexneri (11 mm) , Escherichia coli (19
mm), Klebsiella pneumoniae (16 mm), Vibrio cholerae (9 mm) dan Pseudomonas aeruginosa
tidak menunjukkan zona penghambatan. Sebagai perbandingan, zona penghambatan ekstrak
etanol Datura metel terhadap bakteri lebih banyak bila dibandingkan dengan ekstrak etil asetat
kecuali pada Bacillus cereus.

Saranraj dkk., (2010) [30] baru-baru ini menyelidiki potensi antibakteri ekstrak etanol dan etil
asetat daun Acalypha indica terhadap bakteri patogen manusia dan menyimpulkan bahwa dan
ekstrak etanol tersebut menunjukkan aktivitas penghambatan yang lebih baik terhadap bakteri
patogen manusia jika dibandingkan dengan Ekstrak etil asetat.

Temuan penelitian ini bertepatan dengan hasil Saranraj dkk., (2010) [30]. Didalam

Studi, etanol merupakan solusi terbaik untuk ekstraksi

Zat antimikroba efektif dari tanaman obat Datura metel dibanding etil asetat. Ekstrak etanol
Datura metel menunjukkan hasil yang efektif terhadap semua organisme uji namun ekstrak etil
asetat metana Datura rendah efektif. Hal ini dapat dikaitkan dengan adanya metabolit bioaktif
yang ada pada metoda Datura yang tidak larut dalam etil asetat namun dapat larut dalam
etanol.

Sundaram Ravikumar dkk., (2010) [31] melakukan pemutaran aktivitas antibakteri dan antijamur
in vitro ekstrak kloroform dari tujuh belas tanaman obat pantai yang berbeda terhadap berbagai
bakteri patogen gram positif dan gram negatif dan jamur. Dari tanaman terpilih, Datura metel
menunjukkan berbagai aktivitas antimikroba terhadap banyak patogen ikan. Dia menyimpulkan
bahwa metoda Datura telah digunakan sebagai obat antimikroba putatif dalam pemeliharaan
akuakultur.

Beberapa penelitian mengenai keefektifan metode ekstraksi menyoroti bahwa ekstrak metanol
menghasilkan aktivitas antibakteri yang lebih tinggi daripada n-heksana dan etil asetat [32].
Sedangkan laporan lain bahwa kloroform lebih baik dari pada metanol dan benzena [33]. Jelas
bahwa menggunakan pelarut organik memberikan efisiensi yang lebih tinggi dalam
mengekstraksi senyawa

Aktivitas antimikroba dibandingkan dengan metode berbasis air [34].

John De Britto dan Herin Sheeba Gracelin, (2011) [35] menyelidiki fitokimia yang ada pada daun,
batang, bunga dan buah mete Datura yang memiliki beberapa aplikasi obat. Analisis fitokimia
memberikan hasil positif untuk steroid, triterpinoid, mengurangi gula, gula, alkaloid, senyawa
fenolik, flavonoid dan tanin. Ekstrak batang dan buah tidak menunjukkan aktivitas antibakteri
yang ditandai. Senyawa fitokimia ekstrak meta Datura dianalisis dalam penelitian ini dan
hasilnya ditunjukkan pada (Tabel 4). Ini menunjukkan adanya alkaloid, tripenoid, steroid,
flavonoid, triterpen, senyawa fenolik dan tanin. Aktivitas antibakteri metana Datura disebabkan
adanya senyawa fitokimia.
4. KESIMPULAN
Studi tentang aktivitas antibakteri tanaman herba
Ekstrak metana Datura menunjukkan bahwa etanol
Ekstrak menunjukkan aktivitas antibakteri yang menjanjikan
Melawan patogen bakteri manusia saat
Dibandingkan ekstrak etil asetat. Fitokimia
Analisis menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri
Datura metel adalah karena adanya
Senyawa fitokimia seperti alkaloid,
Tripenoid, steroid, flavonoid, triterpen, fenolik
Senyawa dan tanin. Hasilnya juga diindikasikan
Bahwa penelitian ilmiah dilakukan pada obat
Tanaman memiliki klaim efektivitas tradisional
Mungkin menjamin hasil yang bermanfaat Tanaman ini bisa
Berfungsi sebagai sumber antimikroba baru yang bermanfaat
Agen.