acornish@imm.cnrs.

fr en Science (2015) 4, 3 - 9

línea en www.sciencedirect.com

www.elsevier.com/locate/pisc Disponible en

REVISIÓN

Cien años de Michaelis - Menten cinética $

Athel Cornish-Bowden norte

Unité de Bioénergétique et Ingénierie des Proteínas, Instituto de Microbiología de la Méditerranée, Centro Nacional de la Investigación
Científica fi Que, de Aix-Marseille Université, 31 chemin Joseph-Aiguier, 13009 Marsella, Francia

Recibido el 27 de enero de 2014; Aceptado el 3 de de diciembre de 2014 Disponible en

Internet el 24 de diciembre de 2014

PALABRAS CLAVE Abstracto

Michaelis - cinética El año 2013 marcó el centenario del papel de Leonor Michaelis y Maud Menten ( Michaelis y Menten, 1913 ), Y el 110o
Menten; aniversario de la tesis doctoral de Victor Henri ( Henri, 1903 ). Estas publicaciones han tenido un enorme en Florida influencia en
enzima-catálisis; ecuación el progreso de la bioquímica, y más a menudo se citan en el siglo 21 que lo fueron en el 20. Henri sentado las bases para la
de tasa inicial; la cinética de
comprensión de los mecanismos enzimáticos, pero su diseño experimental fue abierto a la crítica. Se llegó a conclusiones
estado estable; Enrique - Michaelis
esencialmente correctas sobre la acción de la invertasa, pero él no tomó medidas para controlar la concentración de iones de
- Menten
hidrógeno, y no tuvo en cuenta la mutarrotación espontánea de la glucosa producida en la reacción. Michaelis y Menten
corrigen estas deficiencias, y además introdujeron el método de la tasa inicial de análisis, que ha demostrado ser mucho más
simple de aplicar que los métodos basados ​en cursos de tiempo que reemplazó. De esta manera, de fi Ned la metodología para
experimentos SteadyState que ha permanecido estándar para 100 años.

y 2015 El Autor. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY ( http://creativecommons.org/licenses
).

Contenido

Introducción. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 El contexto histórico: la catálisis enzimática antes de 1913. . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 de Michaelis Menten y la contribución de. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 Puntos de referencia en el
desarrollo de la cinética enzimática en estado estacionario. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5

La hipótesis de estado estacionario. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 reacciones de dos sustrato. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

...............................6

☆ Este artículo es parte de una edición especial titulada “ Actas del Simposio Beilstein ESCEC 2013 - La celebración de los 100 años de Michaelis - Menten Cinética ”. Copyright de Beilstein-Institut www.beilstein-institut.

.
norte Autor correspondiente.

Dirección de correo electrónico: Perspectivas

http://dx.doi.org/10.1016/j.pisc.2014.12.002 2.213 a 0.209 / Y 2015 El Autor. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC
BY ( http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ ).
4 A. Cornish-Bowden

especí fi ciudad. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 reacciones rápidas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 ecuaciones de velocidad integrados. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 Otros trabajos de los
principales participantes. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6

Victor Henri (1872 - 1940). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 Leonor Michaelis (1875 - 1949). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 Maud Leonora Menten (1879 - 1960). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7

Impacto de los primeros trabajos en la actualidad. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Con 7 Florida icto de intereses. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 Agradecimientos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 Referencias. . . . . . . .
...........................................................8

Introducción pero todavía tiene considerable importancia industrial ya que proporciona un método
simple y conveniente de producir chocolates con centros líquidos, utilizando el

Muchos hitos en la historia de la bioquímica han tenido aniversarios en 2013, hecho de que el azúcar invertido es más soluble en agua que la sacarosa: un sólido fi

comenzando con el nacimiento de Claude Bernard en 1813, continuando con la tesis relleno de sacarosa al que se añade un poco de la invertasa en el último momento

de Victor Henri en 1903 ( Henri, 1903 ) La teoría protónico de ácido - catálisis básica se convierte en líquido después de la cobertura de chocolate se ha endurecido. Esto

en 1923 ( Brönsted, 1923 ), la introducción de Florida OW métodos para investigar la no era, por supuesto, la razón por la que se estudió tanto a finales del siglo 19 y

cinética de reacción rápida en el mismo año ( Hartridge y Roughton 1923 ), La principios del 20. Su importancia fue entonces que cataliza una de las únicas

determinación de la estructura del ADN en 1953 ( Watson y Crick, 1953 ), El concepto reacciones que podrían ensayarse con mucha facilidad. Aunque colorímetros

de regulación alostérica ( Monod et al., 1963 ) Y la racionalización de Cleland de la primitivos habían estado disponibles desde 1827 ( Warner, 2006 ) Su funcionamiento

cinética de múltiples sustratos en 1963 ( Cleland, 1963 ), Y la introducción de análisis habría sido demasiado lento para las siguientes reacciones, incluso si las reacciones

de control metabólico en 1973 ( Kacser y Burns, 1973 ). Uno otro es de especial catalizadas por enzimas estudiadas por espectrofotometría ahora se habían

importancia para enzymologists, como hace 100 años Leonor Michaelis y Maud conocido, y nada parecido existía un pH-stat. La inversión de la sacarosa, sin

Menten colocan estudios cinéticos en una fi de base experimental y teórica rm ( Michaelis embargo, era fácil de seguir en un polarímetro, como la sacarosa es dextrógira,
y Menten, 1913 ). mientras que el azúcar invertido es levógiro.

Su papel es el tema del presente capítulo. Voy a discutir el contexto histórico en En su tesis ( Henri, 1903 ), Por lo tanto, el principal objetivo de Henri era

el que fue escrito, y también a mencionar las otras contribuciones realizadas no sólo en la comprensión de la cinética de la reacción catalizada por la invertasa, pero

por estos autores, sino también por su distinguido predecesor Victor Henri. Gran también considera las reacciones catalizadas por emulsin y amilasa, principalmente
para con fi rm que sus conclusiones con respecto a la invertasa tenían cierta
parte de la información que se ha dado se basa en otros trabajos recientes ( Cornish-Bowden,
2013 ; Deichmann et al., 2014 ; generalidad. Su principal objetivo era demostrar que las reacciones catalizadas por
enzimas siguen las leyes de la química física - algo que parece obvio hoy en día, pero

Cornish-Bowden et al., 2014 ).
El contexto histórico: la catálisis enzimática antes de 1913
Michaelis y Menten (1913) no lo hizo, por supuesto, fi nd cinética enzimática en
estado virgen, y se basan en la obra de Adolphe
Wurtz (1880) , O'Sullivan y Thompson (1890) , Adrian Brown (1902) Y, lo más
importante de todo, Victor Henri (1902 , 1903) . Wurtz introdujo la idea de una
enzima - complejo sustrato, Brown utilizó para explicar la saturación de la enzima, y
​Henri fue el
fi primero a escribir la ecuación de Michaelis comúnmente llamado el -
Menten 1 . Obviamente, esto plantea la cuestión de por qué Michaelis y Menten
tienden a ser los más conocido sobre todo. Su contribución fue realmente
importante, pero no hasta el punto en que se deben olvidar sus predecesores.
Gran parte del trabajo inicial se hizo con la invertasa, una enzima extracelular de la
levadura que cataliza la hidrólisis ( “ inversión “) de sacarosa para “ el azúcar invertido ”, una catalizada por enzimas. Henri deriva una ecuación equivalente a la Henri - Michaelis - Menten
mezcla de glucosa y fructosa. Desempeña pequeña parte en la investigación
académica moderna,
todavía era polémica a principios del siglo 20. Aunque los experimentos de Buchner
( Buchner, 1897 ) Se consideran ahora que ha sonado el toque de difuntos del
vitalismo ( Friedmann, 1997 ), Su efecto sobre el pensamiento bioquímico no fue
instantánea, y Henri estaba trabajando en un momento en que las ideas vitalistas
estaban lejos de estar muerto. Por otra parte, en ese momento, casi no se sabía
nada acerca de la naturaleza molecular de las enzimas. Este fue el apogeo de
coloides, y había dudas sobre si las enzimas podrían ser considerados como
moléculas en absoluto, y, aún después de la cristalización de la ureasa ( Sumner,
1926 ) Y pepsina ( Northrop, 1930 ), La naturaleza proteica de las enzimas sigue
siendo controvertido.
Al igual que todos sus predecesores, Henri trató de analizar la evolución en el
tiempo de la reacción. Este enfoque se sabe que funciona muy bien con simples
reacciones químicas, e incluso algunas reacciones catalizadas, tales como el efecto
de yoduro de hidrógeno en la reacción entre persulfato potásico y ácido fosforoso,
pero el tiempo aún no estaba maduro para que sea aplicado con éxito reacciones a

1 En este capítulo voy a llamarlo el Henri - Michaelis - Menten, por razones que serán evidentes.
tasa inicial ¼ K 3 un re 1 Þ
1 þ mamá
Michaelis - Menten cinética
en el cual un es la cantidad inicial de la sacarosa sustrato, K 3 es una constante
proporcional a la concentración de la enzima, y metro
es otra constante. Obtuvo esto como un caso especial en el momento cero de una
ecuación más general
dx K 3 hacha
re Þ
re 2 Þ
dt ¼ 1 þ máx re thth nx
en el cual x es la cantidad de producto en el momento t, y norte es una constante.
Henri señaló que la Ec. (1) predicho una dependencia hiperbólica de la tasa inicial de
la cantidad de sacarosa y añadió que eso era lo que observa experimentalmente,
pero no ilustran la curva 2 , y él no tomó lo que hoy parece el siguiente paso obvio de
analizar sus datos en términos de la ecuación de velocidad inicial. En su lugar,
prefiere utilizar la forma integrada de la ecuación. (2) .
contribución de Michaelis Menten y de
Como hemos visto, Henri deriva la ecuación para la velocidad inicial de una reacción
catalizada por enzimas, pero no usarlo, y Michaelis y Menten (1913) fueron la fi RST
para reconocer las ventajas que resultarían de análisis en términos de que:
1. Complicaciones debido al progreso de la reacción se desvanecen: inhibición por
productos acumulados, la pérdida de actividad catalítica, y, en el caso especial
de los métodos polarimétricas utilizados para el estudio de la invertasa,
mutarrotación espontánea de los productos.
2. La reacción inversa puede ser ignorado, ya que no puede ocurrir hasta que
algunos productos han tenido tiempo para acumular.
3. ecuaciones de tasa inicial son más fáciles de obtener y usar que las ecuaciones
integradas para el progreso de la reacción.
4. No hay deriva en el pH, la temperatura u otras condiciones en el tiempo cero.
La introducción de métodos de tasa inicial era por lo tanto la contribución más
importante de Michaelis Menten y de la teoría y la práctica de los métodos de
estudio de las reacciones catalizadas por enzimas, y la razón principal por la que
todavía se recuerdan en la actualidad. Sin embargo, no fue su única contribución, y
además tenía dos críticas de experimentos de Henri (aunque sin impugnar sus
conclusiones).
1. El α- RE- glucosa liberada en la reacción catalizada por
invertasa no es estable en solución acuosa: cambia espontáneamente en una
mezcla en equilibrio de α- RE- glucosa y β- RE- glucosa en la que éste predomina, y
aunque esto también es dextrógiro es mucho menos. El resultado es que la
rotación óptica de los productos cambia de forma espontánea, un proceso
conocido como mutarrotación. 3 Henri no tuvo en cuenta esto en sus
experimentos con invertasa 4 .
2 No tenía la menor fi cifras en su tesis.
3 Otros términos utilizados en la literatura más antigua son birotation ( Henri, 1903 ) Y
multirotation ( Michaelis y Menten, 1913 ).
4 Curiosamente, se tuvo en cuenta en sus experimentos sobre emulsin, que se hicieron más
tarde. Por lo que es posible que lo hizo para permitir que mutarrotación en sus experimentos
sobre la invertasa, pero no se menciona, o tal vez no llegó a ser conscientes del problema hasta
después de que se completaron los estudios de invertasa.
5
2. Henri no tomó medidas para controlar el pH de sus mezclas de reacción. Aunque
la escala de pH no se propuso hasta varios años después ( Sørensen, 1909 ), el
concepto de
“ acidez ” fue sin duda conocido a Henri, y ya se había utilizado en los
experimentos sobre la invertasa ( O'Sullivan y Thompson, 1890 ), Y el uso de
indicadores para la estimación de la concentración de iones de hidrógeno se
describió poco después de la tesis de Henri fue escrito ( Friedenthal, 1904 ).
Por estas diversas razones Michaelis y Menten pensaron que es esencial para
volver a examinar la reacción de la invertasa, y, al hacerlo, de fi Ned la metodología
para el estudio experimental de la catálisis de la enzima que se ha mantenido
estándar para 100 años. Contrariamente a lo que parece ser ampliamente cree, no
se estiman sus parámetros cinéticos de la hipérbola rectangular obtenido por el
trazado de la velocidad inicial en contra de la concentración de sustrato (es decir, la
curva descrita pero no ilustra por
Henri (1903) ), Pero en vez trazada la tasa contra el logaritmo de la concentración de
sustrato. Esto puede parecer un punto trivial, pero les ha permitido evitar la di fi cultades
inherentes en la localización de la asíntota de la curva cuando las observaciones no
se aproximan de cerca. Es probable que al menos en parte por esta razón que
cuando Johnson y Goody (2011) métodos modernos aplicados de análisis de datos
para los datos de Michaelis Menten y se dieron cuenta que podían reproducir las
conclusiones. Parece muy poco probable que este hubiera sido el caso si el análisis
original había sido hecha en términos de la hipérbola, ya que no fue hasta mucho
más tarde que los métodos satisfactorios para la directa fi tting de la hipérbola se
introdujeron ( Cleland, 1967 ; Johansen y Lumry de 1961 ; Wilkinson, 1961 ). 5
Aunque el gráfico de la velocidad inicial contra el logaritmo de la concentración de
sustrato no se ha conservado como un método de estimación de parámetros, sigue
siendo indispensable para un propósito, ya que proporciona la única manera
satisfactoria de la visualización de datos para enzimas con propiedades muy diferentes
cinéticas en un solo gráfico con una sola escala. Por ejemplo, los cuatro isoenzimas de
hexoquinasa se encuentran en el hígado de rata difieren en af fi nidad para la glucosa
en más de 300 veces, pero pueden fácilmente ser comparados con una trama
semi-logarítmica ( Cárdenas, 1995 ).
Puntos de referencia en el desarrollo de la cinética enzimática en estado
estacionario
Los principales avances en la cinética enzimática en estado estacionario, tanto
teóricos como experimentales, se presentan en muchos libros de texto, así que aquí
me limitaré a señalar algunos de los principales hitos.
5 Esto no es del todo justo, como Lineweaver y Burk buscó el consejo de la distinguida
estadístico Deming y describen un método válido mucho antes, en un papel con Deming ( Lineweaver
et al., 1934 ) Publicado en el mismo año que su papel más famoso ( Lineweaver y Burk, 1934 ) (Y
se hace referencia en ella), pero la de Florida influencia en el progreso de la bioquímica de este
documento anterior era esencialmente inexistente. Los muchos autores que se refieren a la
posterior (casi 12.000 citas que figuran en la Web of Science) y afirman que han utilizado el “ método
de Lineweaver y Burk ” muestran pocos signos de haber leído lo que realmente hicieron.
6 A. Cornish-Bowden
La hipótesis de estado estacionario
la formación de Michaelis Menten y, como Henri delante de ellos, considerado de la
enzima - complejo sustrato como un proceso de equilibrio, pero casi al mismo tiempo Van
Slyke y Cullen (1914) tratado como irreversible. Una década más tarde
Briggs y Haldane (1925) señalaron que ambas interpretaciones son casos
especiales de la hipótesis del estado estacionario, y esto ahora es considerado
como el punto de partida correcto para derivar la Henri - Michaelis - Menten.
reacciones de dos sustratos
Haldane dio una breve reseña de la cinética de las reacciones con dos sustratos en
su Florida libro influyente Las enzimas
( Haldane, 1930 ), Pero estos no se analizaron a fondo hasta la década de 1950 ( Alberty, de elección para el estudio de reacciones rápidas.
1958 ; Dalziel, 1957 ; Segal et al., 1952 ). Un importante DIF fi cultad, sin embargo, vino
del hecho evidente de que las ecuaciones relevantes son más complicadas, y por lo
tanto más dif fi culto para derivar y analizar, que los de las reacciones de un sustrato,
pero esto se vio facilitada en gran medida por el método gráfico de Rey y Altman
(1956) . Luego Cleland (1963) programas de ordenador organizadas y sistematizadas
todo este trabajo, y distribuido para facilitar el análisis estadístico ( Cleland, 1967 ),
Con una gran de Florida influencia en el desarrollo posterior del sujeto.
especí fi ciudad
El último gran avance en la cinética de estado estable comprensión fue hecha por Fersht
(1974) , Que se presentó para la fi tiempo de un primer significativa fi nición de especi fi ciudad.
Todo el mundo siempre había estado de acuerdo, por supuesto, que esto era una
propiedad muy importante de las enzimas, pero hay poco acuerdo de cuál de los
parámetros de la Henri - Michaelis -
Menten es la medida más apropiada de la misma. La ecuación se puede escribir con
símbolos modernos de la siguiente manera:
v ¼ k gato mi 0 un
K metro þ un
en el cual k gato es la constante catalítica, mi 0 es la concentración de enzima, un es la
concentración de sustrato y K metro es la constante de Michaelis. Los valores más altos
de k gato, valores más bajos de
K metro, y valores más altos de k gato/ K metro, todos fueron considerados en un momento u otro
como indicadores de una mayor especificidad fi ciudad. Para un sustrato A con los
parámetros k Un gato y K A.m la tasa v UN
medida en presencia de un sustrato competidor B con los parámetros k bcat y K bm es
como sigue:
k Un gato mi 0 una K A.m 1 þ b
v UN ¼
= K bm þ un
con una expresión análoga para la tasa v segundo de la reacción de competencia.
División de una expresión por la otra da
v UN un
¼ k UN cat = K A.m
v segundo k bcat = K bm segundo
Fersht señaló que k gato/ K metro, es por lo tanto el parámetro que mide la capacidad
de una enzima para discriminar entre sustratos que están disponibles
simultáneamente, y por lo que proporciona el único de fisiológica significativa fi nición
de
especí fi ciudad. De ahí que la Unión Internacional de Bioquímica y Biología
Molecular ha recomendado el nombre especí fi constante de la ciudad para esta
relación ( Unión Internacional de Bioquímica, 1982 ).
reacciones rápidas
Antes de 1923 ningún método era conocido para el estudio de las reacciones que se
produjeron en el rango de milisegundos o más rápido, pero esto se hizo posible
sorprendentemente pronto, con la introducción de la
continuo- Florida método ow ( Hartridge y Roughton 1923 ). En su forma original esto era
sólo es adecuado para las proteínas disponibles en cantidades muy grandes, tales como
la hemoglobina, pero se formó el punto de partida para el desarrollo de otra Florida métodos
OW, incluyendo el
detenido Florida método ow ( Gibson y Milnes, 1964 ), Que se ha convertido en el método
ecuaciones de velocidad integrados
Como ya se ha mencionado, Henri y sus predecesores trataron de analizar la
cinética de invertasa en términos de tasa de ecuaciones integrales que podría, al
menos en principio, describir todo el curso del tiempo de reacción. Este enfoque fue
descartado en gran parte después de Michaelis Menten y demostraron que era
mucho más simple para analizar la cinética enzimática en términos de tasas
iniciales. Algunos bioquímicos, tales como la enfermedad de Niemann ( Jennings y
Niemann, 1955 ), Y otros autores más recientemente ( Boeker, 1984 , 1985 ; Cornish-Bowden,
1975 ; Goudar et al., 1999 ;
Schiller et al., 1996 ), Han tratado de revivir el interés en ella, pero se ha mantenido
poco utilizado.
Otros trabajos de los principales participantes
Henri, Michaelis y Menten son todos conocidos principalmente para los bioquímicos
para el trabajo descrito anteriormente, el desarrollo de la Henri - Michaelis - Menten.
Sin embargo, los tres de ellos hizo otras contribuciones importantes. En esta sección
se brie Florida y describen sus vidas y otros trabajos, pero con más detalle se puede
encontrar en otro lugar ( Deichmann et al., 2014 ;
re 3 Þ
Cornish-Bowden et al., 2014 ).
Victor Henri (1872 - 1940)
Victor Henri nació en Marsella, pero su entorno familiar era totalmente rusa. 6 Sus
padres no estaban casados, y llegaron a Francia para asegurarse de que él iba a
nacer allí, y por lo tanto bene fi t desde los mucho mayores derechos de los niños
ilegítimos en Francia, en comparación con Rusia. Posteriormente, fue adoptado por
su padre y su esposa, la hermana de su madre natural, y después de varios años en
re 4 Þ Francia recibió la mayor parte de su educación en San Petersburgo. madres de
Henri vinieron del científico fi camente familia muy distinguida de Lyapunov, de los
cuales el más conocido era su primo, el matemático Alexander Lyapunov. Su
sobrina se casó con Peter Kapitsa, que descubrió súper Florida fluidez a baja
temperatura y la física desarrollada, trabajo por el que recibió el Premio Nobel de
Física en 1978.
re 5 Þ
6 Una cuenta engañosa que lo describió como ser huérfano cuando era muy joven se hizo
circular durante 130 años, con el objetivo de prevenir la verdad escandalosa de darse a conocer.
Michaelis - Menten cinética 7

Henri mismo persiguió una carrera muy variada. Antes de sus estudios de resto de su vida. En ese período estaba interesado principalmente en las reacciones
enzimas trabajó en la psicología experimental, y fue el fi colaborador del primer Alfred redox biológicas, y defendió la idea de que semiquinonas radicales fueron
Binet, el pionero de las pruebas de inteligencia. Recibió su segundo doctorado en intermedios en estas reacciones, una visión que es hoy en día bien aceptado, pero
1903 sobre la base de su tesis sobre diastasis ( Henri, 1903 ), Pero él parece haber fue muy controvertida cuando Michaelis propuso.
hecho ningún trabajo adicional en la invertasa. Fue profesor de Fisiología en París, y
posteriormente fue responsable de la organización de la industria química de Rusia
para la defensa. Después de la Primera Guerra Mundial pasó diez años en la Maud Leonora Menten (1879 - 1960)
Universidad de Zurich, después de lo cual él iba a ser encargadode de un gran
instituto prevista de la petroquímica en Berre l'Étang (cerca de Marsella). Sin
Maud Leonora Menten nació en Ontario, pero se crió en la Columbia Británica.
embargo, se trasladó a la Facultad de Ciencias de Lieja antes de que esto era fi acabada.
Estudió en la Universidad de Toronto, y fue una de las fi Las mujeres canadienses
Su trabajo más tarde fue principalmente en la química física, con un interés
primeros sean cali fi ed para ejercer la medicina. Ya había publicado trabajos sobre la
particular en el uso de espectros de absorción como una fuente de información
distribución de los iones de cloruro y potasio ( Macallum y Menten, 1906 ; Menten,
acerca de las estructuras moleculares. Murió en Burdeos en 1940.
1912 ) Y co-autor de un libro sobre tumores animales ( Flexner et al., 1910 ) Antes de
ir a Berlín para trabajar con Michaelis. Ella era probablemente motivado para hacer
que por el deseo de aprender a medir y controlar la concentración de iones de
hidrógeno, el conocimiento que se aplica poco después de su regreso a los EE.UU.
( Menten y Crile, 1915 ). A medida que el interés principal de Menten estaba en
Leonor Michaelis (1875 - 1949)
patología experimental, y su investigación en la Universidad de Pittsburgh fue
principalmente en esta zona, que se desvaneció en lugar de la vista de los
Leonor Michaelis nació en una familia judía de Berlín comercial. Comenzó su carrera
bioquímicos. Entre sus diversas contribuciones importantes que uno puede hablar
como asistente de Paul Ehrlich, y en cuya insistencia que Quali fi ed como médico.
de su desarrollo de un método de detección histoquímica de la fosfatasa alcalina en
Posteriormente emprendió su propia investigación, pero en condiciones muy
el riñón ( Menten et al., 1944 ) Que fue considerado por un gran clásico de la década
insatisfactorias: como profesor no remunerado en la Universidad de Berlín, que vivió
de 1950 ( Pearse, 1953 ) Que han revolucionado la fi campo, y el uso de la
en sus ganancias como médico en un hospital de la ciudad, y llevó a cabo su
sedimentación y la electroforesis para la detección de variantes de hemoglobina ( Andersch
investigación en un pequeño laboratorio en el hospital que él y su amigo Peter Rona
et al., 1944 ) Que anticipa mucho mejor conocida obra de Pauling ( Pauling et al.,
había construido ellos mismos. Sin embargo, fue muy productiva, y en el fi cinco años
1949 ) Sobre la enfermedad de células falciformes por varios años.
anteriores a la Primera Guerra Mundial que tenía cerca de 100 publicaciones,
algunas de ellas todavía citados hoy. Su principal motivación, como Henri de, era
poner los estudios de enzimas en una fi fundación rm de la química física, con un
interés particular en la concentración de iones de hidrógeno ( Michaelis y Davidsohn
de 1911 ). Él era el fi RST para distinguir entre diferentes tipos de inhibición, en el
contexto de los diferentes efectos de la glucosa y la fructosa en las reacciones
catalizadas por maltasa ( Michaelis y Rona, 1914 ) Y la invertasa ( Michaelis y
Pechstein, 1914 ). Su división de éstos en la inhibición competitiva, que se
Impacto de hoy los primeros trabajos
caracteriza por su efecto sobre la K metro, y la inhibición no competitiva, que se
caracteriza por su efecto sobre la k gato, Como puede verse a partir de Figura 1 los papeles en el origen de la cinética
enzimática en estado estacionario se han citado también desde alrededor de 1950,
pero lo que es especialmente llamativo es el gran aumento durante el siglo 21. Esto
es especialmente notable para Michaelis y Menten (1913) , Pero la misma tendencia

sigue siendo ampliamente utilizado. Eso es lamentable, sin embargo, ya que ahora se se observó para Henri (1902 , 1903) (Teniendo el papel 1902 y la tesis juntos): en

entiende que la inhibición competitiva se describe mejor como un efecto sobre la k gato/ K metro ambos casos el año con el mayor número de citas es 2013. La ocurrencia del
sin efecto sobre la k gato, y que el otro extremo es no competitivo (no no competitiva) la centenario de Michaelis y Menten (1913) en 2013 es, por supuesto, en parte
inhibición, con un efecto sobre k gato pero no en k gato/ K m ( Cornish-Bowden, 2012 ). responsable de esto, pero sólo en parte, ya que el fuerte aumento se inició a
Cuando ambos efectos se producen simultáneamente hemos mezclado inhibición, y la principios de siglo.
inhibición no competitiva clásico es el caso especial de inhibición mixta en la que los
dos efectos son iguales. 7
¿Comó podemos explicar esto? Varios temas en bioquímica han crecido

la falta de Michaelis de posibilidades de promoción a una posición académica sustancialmente desde el comienzo del siglo, tales como la biología de sistemas y

real en Alemania, junto con los problemas creados por un científico fi c disputa que estudios de moléculas individuales, y otros, tales como el desarrollo de fármacos - que

tuvo con Emil Abderhalden, uno de los principales fi cifras en la fisiología de la época en el siglo 20 fue aún más obsesionado con la estructura de lo que es hoy en día

( Deichmann et al., 2014 ), Le llevó a aceptar una invitación para ir a Japón como todavía - prestar mucha más atención a la cinética de lo que hizo. Sin embargo, aun

profesor de bioquímica en Nagoya. Pasó cuatro años allí, y tenía una teniendo todos ellos juntos no representan todo el crecimiento en las citas a los

especialización en Florida influencia en el desarrollo de la bioquímica en Japón ( Nagatsu, primeros trabajos, y por lo que parece ser un resurgimiento general de interés en las
2013 ). Posteriormente se trasladó a los EE.UU., fi RST para la Universidad Johns enzimas y sus propiedades.

Hopkins en Baltimore, y luego al Instituto Rockefeller de Nueva York, donde trabajó

para el
Por varias razones, de hecho, el Henri - Michaelis - Menten sigue siendo crucial
para la comprensión de la bioquímica:

7 Algunos autores siguen Cleland (1963) en el uso del término “ inhibición no competitiva ” para 1. Es el punto de partida para la enseñanza de cualquier aspecto de la enzimología.
cualquier variedad de inhibición mixta, sin requerir las dos constantes de inhibición para ser

iguales. 2. Proporciona la base para el estudio de reacciones rápidas.

8 A. Cornish-Bowden
Figura 1 Las citas a los Henri (1902 , 1903) y Michaelis y Menten (1913) . Los datos se obtuvieron de la Web de la Ciencia el 18 de diciembre de 2013, por lo que los valores para
2013 no están completos y, probablemente, es necesario incrementar en un 10%.
3. Es la base para el estudio de los mecanismos de catálisis enzimática.
4. Se proporciona un punto de referencia para la comprensión de la regulación de la
enzima, incluyendo la cinética no clásicos, como se ve en interacciones
alostéricas y de cooperación.
5. Es esencial para un progreso adecuado en el desarrollo de fármacos, que se
entiende cada vez más a ser algo más que una cuestión de estructura.
6. Es la base de la ingeniería de enzima, y ​los usos tecnológicos de enzimas en
general.
7. Es necesario para la comprensión de las propiedades de las moléculas individuales.
Por lo que se refiere a la cinética no clásicos, cabe preguntarse por qué se tardó
tanto tiempo para que las desviaciones de Henri -
Michaelis - Menten cinética para ser reconocidos, de unos 30 años a partir de la
introducción de la hipótesis del estado estacionario ( Briggs y Haldane, 1925 ) Para el
descubrimiento de la inhibición por retroalimentación en la treonina desaminasa ( Umbarger,
1956 ) Y la aspartato transcarbamilasa ( Yates y Pardee, 1956 ). El punto, sin
embargo, es que las desviaciones de comportamiento clásico no podían ser
reconocidas hasta el propio comportamiento clásico era así de fi Ned, y que el tiempo
requerido. A principios del siglo casi nada se sabe acerca de la naturaleza química
de las enzimas, muy pocas enzimas se han caracterizado, y muy poco se sabe
acerca de las rutas metabólicas. No es de extrañar, por tanto, que no fue hasta la
década de 1950 que las desviaciones de la cinética clásica llegaron a ser
reconocidos, y se asocia con la regulación metabólica ( Cárdenas, 2013 ).
Estafa Florida icto de interés
El autor declara que no hay aire Florida icto de intereses.
Expresiones de gratitud
Este trabajo fue apoyado por el Centro Nacional de la Investigación Científica fi What.
Doy gracias a María Luz Cárdenas útil para los comentarios sobre el texto.
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