The Unfolded Protein Response

Dinâmica Molecular da Célula

A via de secreção
Apenas as proteínas com conformação adequada são
transportadas do ER para o Golgi.

O que garante o controlo de qualidade?

O que garante a homeostasia do RE em situações de

stress?
Tais como: depleção de Ca2+, stress oxidativo, hypoxia, privação
energética, alterações metabólicas, alteração dos níveis de glicosilação,
inflamação, sobrecarga da síntese proteica, aumento do misfolding
proteico e formação de agregados.
a síntese/biogénese de ~70% das moléculas de apo-B100 é abortada

A translocação é acompanhada e seguida de modificações/interacções com várias

proteínas do RE (BiP; PDI- protein disulfide isomerase; calretículina; calnexina;
HSP90) cujo papel é garantir o correcto “folding” da proteína nascente

Um exemplo: a montagem da Hemaglutinina (HAo)

As chaperones do RE
 A calreticulina e a calnexina ligam
ao oligossacarídeos de cadeia
nascente ajudando no folding
ERAD correcto, ou de proteínas com folding
incorrecto tentando corrigir o erro. São
(em conjunto com BiP) dos primeiros
intervenientes no controlo de
qualidade. Se os processos de
aquisição da estrutura
terciária/quaternária falharem, a
proteína é enviada para o citoplasma
onde é degradada pelo proteassoma.
Designa-se este mecanismo de ERAD
(“ER-associated degradation”)

Golgi
Modifications of N-linked oligosaccharides are used to monitor folding and
quality control.

ERAD

EDEM- ER degradation-enhancing 1,2-mannosidase like-protein

CNX/CRT- calnexin/calreticulin
The calnexin/calreticulin cycle

M- mannose
G- glucose

(UPS)
(Golgi)
 Em situações particulares (stress físico-químico; mutações; agregações proteico) em
que o ER está em stress, é induzido o UPR (“unfolded protein response”)

O UPR consiste na atenuação da tradução (para diminuir a quantidade de proteína uma vez que o
sistema está saturado com proteína irreversivelmente unfolded), no aumento da produção de
chaperone (para tentar recuperar as proteínas), indução do ERAD (para se livrar das proteínas
unfolded) e em último caso apoptose
Qual a importância dos mecanismos de UPR?
Doenças ligadas ao ER stress

Current Biology 2012 Vol 22 No 16

 Doenças ligadas ao ER stress

J. Cell Biol. 2012 Vol. 197 No. 7

 The unfolded-protein response – ER stress em detalhe

3 ER transmembrane protein sensors

PERK –
“Pancreatic eIF2-
alpha kinase”

Ire1- “Inositol-
requiring protein
1”

ATF6- “Activating
transcription

J Pharmacol Biomed Anal. 2014

factor 6”

XBP1-” X-box-
binding protein
1”/ Hac1 (in
yeast) Survival Death
The unfolded-protein response – ER stress em detalhe

Apoptosis

Current Biology 2012 Vol 22 No 16

Transcription of
chaperones

Hac1-yeast
Xbp1-mammals

BiP (=Grp78)
ER stress-mediated apoptotic pathways

Biofactors. 2014
Agentes que induzem o stress do RE
Nat. Prod. Rep 2014

Porque é que a Tunicamicina é um forte indutor do stress do RE?

PROBLEMA DE EXAME !!!!!!

MMC - Mitomycin C
Inter-relação entre o UPR e vias de sinalização importante para a homeoestasia da célula,
tais como processos patofisiológicos (inflamação, cancro, etc) e metabólicos (obesidade,
diabetes tipo2, ateroesclerose, doenças coronárias e hepáticas).

Lee J , and Ozcan U J. Biol. Chem. 2014;289:1203-1211

ER stress and metabolic disorders.

Lee J , and Ozcan U J. Biol. Chem. 2014;289:1203-1211

ER stress and metabolic disorders. Various stimuli such as increased loads of cholesterol or free fatty acids or chronic
activation of mTORC1 activity, hyperhomocysteinemia, and decreased XBP1s activity were shown to cause ER stress under
obesity conditions. ER stress leads to the development of obesity through hypothalamic leptin and insulin resistance and
contributes to type 2 diabetes via inducing peripheral insulin resistance and increasing hepatic gluconeogenesis. Furthermore,
ER stress has been suggested to be involved in various pathologies of metabolic liver diseases (NAFLD, ALD, and cholestasis)
and cardiovascular diseases (atherosclerosis and ischemia).
What about clinical treatment …
Induction of proteotoxicity through the accumulation of misfolded proteins has
evolved as a new treatment modality in the fight against cancer.
Drugs that act as ER stress inducer or proteasome/autophagy inhibitors.

Frontiers in oncology 2015, 5

Clinically approved drugs that inhibit cell survival mechanisms

Frontiers in oncology 2015, 5

For example, the combination of bortezomib with eeyarestatin massively increased the accumulation of
polyubiquitinated proteins in cancer cells, induced macroautophagy, and activated the pro-apoptotic
ATF4/CHOP/NOXA-mediated pathway of the ER-stress response