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Determinación de los principales componentes de la biomasa ligonocelulósica;

celulosa, hemicelulosa y lignina de la paja de trigo para su posterior pretratamiento
biológico

Conference Paper · October 2014

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6 authors, including:

Gisela Montero Lydia Toscano

Autonomous University of Baja California Instituto Tecnológico de Mexicali (ITM)
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Torres Ramos Ricardo Mary Triny Beleno

Autonomous University of Baja California Autonomous University of Baja California
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Agricultura sustentable: Uso eficiente del agua, suelo y fertilizantes
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DETERMINACIÓN DE LOS PRINCIPALES COMPONENTES DE LA BIOMASA

LIGNOCELULOSICA; CELULOSA, HEMICELULOSA Y LIGNINA DE LA PAJA DE
TRIGO PARA SU POSTERIOR PRETRATAMIENTO BIOLÓGICO

Romero-Uscanga Erick1, Montero-Alpírez Gisela1, Toscano-Palomar Lydia2 Pérez-Pelayo Laura1

Torres-Ramos Ricardo1 Beleño-Cabarcas Mary Triny1
Instituto de Ingeniería, Universidad Autónoma de Baja California1 Email: iq.iker182@gmail.com
2Instituto Tecnológico de Mexicali

Resumen

En este trabajo se caracterizó la paja de trigo del valle de Mexicali, con el fin de conocer el porcentaje de
celulosa, hemicelulosa y lignina existente en este tipo de biomasa para futuros estudios como el uso de
pretratamientos biológicos con hongos celuloliticos para el mejoramiento de hidrólisis enzimática. En la
caracterización de la paja de trigo se realizaron determinaciones de propiedades físicas como pH, humedad y
cenizas; y la determinación de propiedades químicas como nitrógeno total y extracciones con solventes
orgánicos. La biomasa lignocelulosica está constituida por tres componentes principales que se encuentran
en mayor por celulosa, hemicelulosa y lignina. La biomasa también está compuesta por componentes
minoritarios como son aceites, resinas, taninos, azucares, gomas, colorantes y almidones. Para lograr acceder
a los tres principales componentes de la biomasa se realizaron extracciones al material lignocelulosico
basándose en los métodos TAPPI, esto con el fin de poder acceder posteriormente a los componentes de mayor
proporción. Los solventes utilizados en las extracciones fueron acetona y agua, logrando extraer todos los
componentes que se encuentran en menor proporción en la paja de trigo. Una vez libre de extraíbles, se realizó
el análisis de lignina, celulosa y hemicelulosa respectivamente, los porcentajes encontrados fueron, celulosa
57%, hemicelulosa 17% y Lignina 19%. Con los posteriores resultados, se podría comenzar con el
pretratamiento biológico con cepas de hongos celuloliticos para conocer la degradación de los principales
componentes de la paja de trigo.
Palabras clave: Caracterización, Biomasa lignocelulosica, Celulosa, Hemicelulosa, lignina.

Abstract

In this paper wheat straw from Mexicali Valley was characterized, in order to know the percentage of cellulose,
hemicellulose and lignin existing in this type of biomass this for future studies as the use of biological
pretreatment with cellulolytic fungi for improving hydrolysis enzyme. In the characterization of wheat straw
physical property determinations as pH, moisture and ash were carried out; and the determination of chemical
properties as total nitrogen and extraction with organic solvents. Lignocellulosic biomass is made up of three
main components that are most of cellulose, hemicellulose and lignin. Biomass is also composed of minor
components such as oils, resins, tannins, sugars, gums, colors and starches. To gain access to the three major
components of lignocellulosic biomass materials extractions were performed based on TAPPI methods, this
in order to subsequently access components larger proportion. The solvents used in the extractions were
acetone and water, managing to extract all the components found in smaller proportions in wheat straw. Once
free of extractables, analysis of lignin, cellulose and hemicellulose respectively performed, the percentages
found were, 57% cellulose, 17% hemicellulose and 19% lignin. With the subsequent results, it could start with
the biological pretreatment with strains of cellulolytic fungi for the degradation of the major components of
wheat straw.
Keywords: Characterization, lignocellulosic biomass, cellulose, hemicellulose, lignin.

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Introducción

La biomasa lignocelulósica es uno de los materiales orgánicos más abundantes de la tierra, se puede obtener
de diferentes residuos, por ejemplo: forestales, agropecuarios, residuos sólidos urbanos, entre otros. Estos
residuos representan una gran oportunidad para la producción de bioetanol debido a su gran abundancia y bajo
costo (Wyman, 1996). En 2012, Baja california fue el segundo estado productor de trigo a nivel nacional, con
una superficie cosechada de 72,206 ha, lo cual generó 527,103 t de paja. Para utilizar los residuos
lignocelulósicos como fuente en la producción de bioetanol, es necesario conocer sus principales componentes
químicos (porcentaje de celulosa, hemicelulosa y lignina), puesto que varían según: la especie de paja, las
condiciones climáticas del lugar y tipo de suelo. La celulosa representa el 40-60% del peso seco de biomasa
lignocelulósica (Chang et al. 1981; Fengel D. Wegener, 1984). La hemicelulosa también llamada poliosis es
un heterpolimero de polisacáridos, están disponibles en casi todos los materiales vegetales junto con la
celulosa. El polisacárido de hemicelulosa contiene diferentes polímeros de hexanos (Manano, glucosan,
galactan y rhamnan) y pentosanos (xilano andaraban). La Lignina es un polímero complejo que desempeña
un papel de cementación para conectar la celulosa y la hemicelulosa, aumentando las propiedades de
resistencia mecánica, además hace a la planta resistente contra enfermedades y biodegradación por
microorganismos. Otro componente químico de la biomasa, son las sustancias extractivas, dichas sustancias
se pueden ser extraídas en agua o solvente orgánico (Fan et al., 1982). Los componentes extractivos son
resinas (grasas, ácidos grasos, ácidos resínicos y fitoesteroles), terpenos (isopreno alcoholes y cetonas) y
fenoles (y productos de residuo de la biosíntesis de lignina) (Fan et al. 1982; Fengel D. Wegener, 1984).

El objetivo de esta investigación fue determinar los principales componentes de la paja de trigo generada en
el Valle de Mexicali, mediante una caracterización química. La lignina se determinó según la norma TAPPI
222, la holocelulosa se determinó de acuerdo a la norma ASTM D-1104. Este estudio servirá como base para
futuros estudios en los que es necesario conocer la cantidad de extractos, celulosa, hemicelulosa y lignina.
Materiales y Métodos

Preparación de la muestra: Se consiguió un fardo de paja de trigo del

valle de Mexicali (especie cachanilla F-2000) con la
que se procedió a preparar y caracterizar. Parte de la
paja recolectada para el análisis se lavó para retirar el
polvo existente y se colocó en un horno (Blue M
Electric) a 30 °C durante 24 horas (Figura 1). Una vez
seco se guardó en bolsas que fueron selladas (Figura Figura 1. Paja de trigo en Figura 2. Almacenamiento
2). Posteriormente se tomó una muestra del fardo de horno de la paja de trigo
trigo la cual se pasó por un molino manual para triturar
la muestra, esto con el fin de reducir el tamaño de partícula para tener mayor área
de contacto, y así facilitar los tratamientos de los análisis posteriores. Una vez
triturado se pasó por diferentes tamices: Tamiz no. 8 (0.0937 in) tamiz no. 12 (0.0661 in) y tamiz no. 25
(0.0278 in). Todos los análisis se realizaron por duplicado.

Determinación de Humedad de la paja de trigo: El agua es uno de los componentes en mayor proporción
existente en las plantas por eso es necesario determinar el contenido de humedad existente en la muestra. El
método utilizado fue la norma ASTM E871. Se colocó 1 gramo de muestra en un horno (Blue M Electric) a
una tempera y por diferencia de peso se determinó el porcentaje de humedad.

Determinación de pH: Se tomó una muestra de paja de trigo, que fue pasada en tamiz No. 60, una vez
tamizado se colocaron 2 gramos de muestra en un matraz de 125 ml a la cual se le agregaron 20 ml de agua
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destilada para tener una relación 1:10. Con el fin de estar en agitación constante se le coloco un agitador
magnético. Se puso en agitación por 4 horas. Una vez pasada el tiempo, se dejó reposar por 1 hora, una vez
asentada la muestra se procedió a filtrar. Se filtró y se midió el pH.

Determinación de Cenizas: La determinación de cenizas se basó en la norma UNE 57050. Es importante

conocer el porcentaje cenizas en la materia prima, ya que se ha demostrado que la paja de trigo cuenta con un
alto contenido de sílice. (Ruigang et. al., 2004). Los crisoles que se utilizaran para la prueba deben de estar a
peso constante. Se tomó 1 gramo de muestra y se llevó a mufla a una temperatura de 560 °C por 1 hora, una
vez pasado el tiempo se mete a un desecador por 2 horas hasta que se enfrié y se pesa en balanza analítica.

Determinación de contenido de Nitrógeno: Se preparó la muestra para su determinación, se realizó un

digestión en la que se usó 1 gramo de muestra (malla < 25). Se utilizó el digesdahl con ácido sulfúrico
concentrado para su digestión. Una vez terminada la digestión se pasó a leer en el espectrofotómetro (Hach
DR 5000). Se anotó como % Contenido de Nitrógeno.

Extracción en solvente orgánico: El método empleado se basa en la norma TAPPI 264.

Se tomó un cartucho de celulosa y papel filtro y se pesó en balanza analítica, se tomaron
10 gramos de muestra de los cuales se repartieron en 4 equipos de extracción Soxhlet
(Figura 3) se preparó un blanco. Una vez pesado el material, se pasó a colocar la muestra
en el filtro y enrollar para no tener pérdidas de paja de trigo y se introdujo al cartucho de
celulosa. Se colocaron dentro del extractor Soxhlet y se procedió a agregar la acetona
hasta que este sifone una vez, después se llena hasta la mitad, se deja por 3 horas tomando
tiempo a partir del primer sifonado. Transcurrido el tiempo se metió el cartucho de
celulosa con la lmente. Se Figura 3. Sistema de
metió a desecador y se pesó. extracción Soxhlet

Extracción en agua caliente: El método utilizado para extracción en agua caliente es TAPPI 207. Se tomó la
muestra que fue extraída por acetona, previamente secada y pesada. Se introdujo al matraz Erlenmeyer de 1L
y se le añadieron 600 ml de agua destilada se conecta el reflujo con el refrigerante (Figura 4) y se pone a
ebullición suave a 80 85 °C. En cuanto comenzó a ebullir se tomó tiempo y se dejó 3
horas. Se colocó papel filtro en un embudo büchner y se procedió a filtrar, mientras la
muestra se lavó con agua destilada, se metió a horno por 24 h, después a desecador y por
último se pesó.

Determinación de Lignina por el método Klason: El método usado corresponde con la Figura 4. Extracción
norma TAPPI 222. El método de Hidrolisis Acida Cuantitativa practica una hidrolisis de a Reflujo
dos etapas: la primera con ácido sulfúrico al 72% que hidroliza los polisacáridos en
oligosacáridos y una segunda al 4% que rompe los oligoméros en monosacáridos. Se
tomó la cantidad próxima a 1 gramo libre de extraíbles la muestra se colocó en un vaso de precipitado de 50
ml a la cual se agregaron 15 ml de H2SO4 al 72%, y se mantiene dos horas en agitación, al poco tiempo de
adherir el ácido sulfúrico se notara que la muestra se torna obscura, una vez pasado el tiempo, se vació a un
vaso de precipitado de 1L y se realizó una disolución al 4% de H2SO4 agregando agua destilada y se dejó en
ebullición suave por 4 horas. Se esperó hasta que la muestra se asentara para decantar y filtrar. Una vez filtrada
la muestra se llevó a estufa a 105 ±3°C durante 24 horas y se procedió a pesar.

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Determinación de Holocelulosa: Este método emplea ácido acético, que acidifica el

medio y se convierte en dióxido sódico que permite degradar la lignina solubilizándola y
clarificando la muestra. Esta se determinó siguiendo la norma ASTM D-1104. Se
tomaron 2 g aproximados de muestra tras extracciones la cual se agregaron a un matraz
Erlenmeyer cuello no esmerilado y se puso a baño María a una temperatura de 80 85
°C. Una vez alcanzada la temperatura se agregaron 1.5 gr. de clorito sódico y 10 gotas de
ácido acético glacial se tapona y se deja reposar 1 hora. (Figura 5). Pasado el tiempo se
agregó nuevamente 1.5 gramos de clorito sódico y 10 gotas de ácido acético glacial y se
dejó reposar 1 hora, el proceso se repite hasta que la muestra se observe blanca, por lo Figura 5.
menos 3 veces se repite. Se filtró, se lavó con agua destilada, se secó en horno y se pesó Determinación
en balanza analítica. holocelulosa

Determinación de Alfa, Beta y Gama Celulosa: Para la determinación de alfa, beta y gama celulosa se usó
el método TAPPI 203. Alfa-celulosa es la fracción de pulpa resistente a 17,5% de hidróxido de sodio en
condiciones de la prueba. Beta-celulosa es la fracción soluble que se volvió a precipitar en la acidificación de
la solución; y gamma-celulosa es que la fracción restante en la solución mayormente hemicelulosa.

Preparación de la muestra: Se vacío la muestra a un vaso de precipitado de 300 ml y se agregó 75 ml de

NaOH al 17.5% (se toma tiempo) la solución debe de estar a una temperatura de 25 ± 2°C. Se agito la muestra
hasta dispersar sin provocar que la muestra agarre aire durante la agitación. Se enjuago la muestra con 25 ml
de NaOH al 17.5% para tener un total de 100 ml de NaOH al 17.5% Después de haber agregado los primeros
75 ml de NaOH se tomó el tiempo y al cumplir los 30 minutos se agregaron 100 ml de agua destilada a 25°C
al vaso de precipitado y se agito con cuidado, se dejo la muestra en el vaso por 30 minutos más. Por lo que el
tiempo de extracción será de 60 minutos. (±5 min). Al final de la extracción. Se Transfirió para poder filtrar
se descartaron los primero 10 mililitros del filtrado para colectar un total de 100 ml.

Determinación de Alfa celulosa: Se usaron 5 ml de la muestra filtrada y se agregó

a un matraz de 300 ml con 20 ml de dicromato de potasio y 15 ml de ácido sulfúrico
concentrado. Se colocó a baño María para evitar que la temperatura subiera
demasiado y se dejó reposar por 15 minutos a temperatura ambiente. Una vez
pasado los 15 minutos se agregaron 10 ml de agua destilada (Figura 6) se dejó
enfriar para después proceder a la titulación con sulfato ferroso amoniacal a 0.1N.
Se utilizó como indicador ferroina la cual se agregaron de 2 a 4 gotas. Figura 6. Determinación de alfa
celulosa
Beta y gama celulosa: La muestra fue centrifugada previamente a 3200 rpm
durante 30 minutos, y después fue decantada. En un matraz Erlenmeyer se tomaron
10 ml de la muestra, 20 ml de dicromato de potasio y 18 ml de ácido sulfúrico concentrado y se tituló con
sulfato ferroso amoniacal 0.1N y ferroina hasta su vire.

Resultados y Discusión
En la caracterización química se realizaron diferentes análisis como la determinación de humedad, cenizas,
pH, nitrógeno, extractos totales (acetona y agua), lignina Klason y holocelulosa como se muestran en la
siguiente tabla 1 (Barroso C., M.). El porcentaje sobre paja seca (% S.P.S.) de los resultados obtenidos vs los
reportados difiere en que, el 5.35% de humedad obtenida es menor al 6.5% reportado debido al clima seco
existente en la región de estudio, a diferencia de la Madrid. Por otro lado, se puede observar que el % de
extractos, lignina klason y holocelulosa son mayores en la paja de trigo de Baja California, esto puede ser
debido al tipo de suelo, ya que cuenta con diferentes minerales, clima, humedad. En la tabla 2 se detalla los
componentes de holocelulosa, ya que está constituida por 57.09 % de celulosa y 16.814 % de hemicelulosa.

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Conclusiones
La importancia de la caracterización de la paja de trigo, servirá para futuros análisis en los cuales se necesite
conocer la cantidad de extractivos, celulosa, hemicelulosa y lignina presentes en el sustrato, ya que la unión
que existe entre estos tres principales componentes de la biomasa tienen una alta resistencia a ataques
microbiológicos, afectando directamente el proceso de hidrólisis enzimática y provocando que la cantidad de
bioetanol obtenido por este proceso no sea costeable. Es por eso, que sea ha vuelto necesario realizar
posteriormente un pretratamiento, para facilitar el proceso de hidrólisis y hacerlo mas eficaz.
Una vez conociendo el porcentaje de componentes existentes en la paja de trigo que se obtuvieron en la
caracterización, se pueden realizar diferentes estudios, como el mejoramientos de los pretratamientos ya sean
físicos, químicos o biológicos con los cuales observaremos si existe algún tipo de degradación o cambio
existente en los componentes de la paja de trigo.

Referencias
Barroso C., M.. 2010. Pretratamiento de la biomasa celulosica para la obtencion de bioetanol en el marco de una biorrefineria. Universidad Politecnica
de Madrid.

Billa E., Monties B. 1991. Occurrence of silicon associated with lignin-polysaccharide complexes isolated from gramineae (wheat straw) cell walls.
Food Hydrocolloids. 5:189 195.

Chang M., Chou T., Tsao G. 1981. Structure, pretreatment and hydrolysis of cellulose. Bioenergy. 15 42.

Fan L., Lee Y., Gharpuray M. 1982. The nature of lignocellulosics and their pretreatments for enzymatic
hydrolysis. Adv Biochem Eng Biotechnol. 23:158 183.

Fengel D., Wegener G. 1984. Wood: chemistry, ultrastructure reactions. Walter de Gruyter. Berlin.

Norman A. G. 1934. The biological decomposition of plant materials: part IX. The anaerobic decomposition of hemicelluloses. Ann Appl Biol. 21:454
475.

Pérez S., Samain D. 2010. Structure and engineering of celluloses. Advances in carbohydrate chemistry and biochemistry. Derek Horton Publications.
64: 25 116.

Wise L., E., Murphy M., DÁdieco A. 1946. Clorite holocellulose, its fractionation and beating on summative wood analysis and on studies on the
hemicelluloses. Paper Trade Journal. 122: 35-45.

Wyman C., E. 1996. Handbook on bioethanol: production and utilization. Taylor and Francis. Washington.

TAPPI T264 cm07. Preparation of Wood for chemical analysis.

TAPPI T207 cm99. Water solubility of Wood and pulp.

TAPPI T222 om02. Acid insoluble lignin in Wood and pulp.

TAPPI T203 cm99. Alpha, Beta and Gamma-Cellulose in pulp.

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