Tema

Tema 12:
12: Principios
Principios básicos
básicos

Tema
Tema 13:
13: Cinética
Cinética enzimática
enzimática

Tema
Tema 14:
14: Catálisis
Catálisis enzimática
enzimática
 Dra. Carmen Piñuela

PRINCIPIOS BÁSICOS DE LA ENZIMOLOGÍA.

CATALIZADORES BIOLÓGICOS. PROPIEDADES.
CLASIFICACIÓN Y NOMENCLATURA DE LAS ENZIMAS.
ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO

-1. Estados de transición

-2. Catalizadores biológicos
-3. Sitio o centro activo
-4. Actuación de la enzimas.
-5. Cofactores
-6. Propiedades
-7. Clasificación

Bibliogrtafía: Lehninger
Mathews
 ☺En las células la energía y los
componentes necesarios proceden
de reacciones químicas que tienen
que transcurrir de

forma constante
velocidad adecuada
manera ordenada

Reacciones que ocurren a pH próximo a la neutralidad y

temperatura aproximada de 37ºC

Las enzimas son los CATALIZADORES específicos para

acelerar los procesos metabólicos haciéndolos útiles
para las necesidades metabólicas. Generalmente
naturaleza PROTEICA.
1. Elevada eficacia catalítica (pueden aumentar la V de
reacción millones de veces)

2. Recuperan el estado inicial

3. Específicas para el tipo de reacción y de sustratos

Todas las reacciones químicas tienen lugar porque los reactivos
poseen la suficiente energía como para alcanzar un estado activado
(ESTADO DE TRANSICIÓN O ACTIVADO). Esta barrera de E se llama
ENERGÍA DE ACTIVACIÓN. En este estado es muy elevada la
posibilidad que se rompan o se formen enlaces para formar los
productos

Estado
Energía de transición
inicial
Energía
de activación
Disminuye la energía de activación por lo que el
nº de moléculas que pueden alcanzar el estado de
transición aumenta. Aumenta la velocidad.
Energía libre, G

Coordenada de reacción
ACTIVIDAD CATALÍTICA DE UNA ENZIMA: 2 etapas

E+S ES
1 2
E+P

1. La enzima (E) se une al sustrato (S) para formar el

complejo enzima-sustrato (ES)=ESTADO DE TRANSICIÓN

2. El complejo ES se transforma dando lugar al

producto (P) y a la enzima que queda disponible para
volver a reaccionar

La región de la enzima que reacciona con el sustrato es el

SITIO O CENTRO ACTIVO
 Hendiduras o cavidades

COMPLEJO ES
Sustrato
Enzima (S)
(E) Centro Centro activo
activo ocupado

representación de la formación del complejo enzima-sustrato

 CENTRO ACTIVO

Sitio de Unión Sitio Catalítico

AA que entran AA responsables

en contacto con directos de la
el sustrato catálisis
1. MODELO DE FISCHER (CERRADURA-LLAVE)

El sustrato encaja en
el centro activo de la
enzima

2. MODELO DE KOSHLAND: AJUSTE INDUCIDO

Tanto la E como el S
sufren una distorsión al
unirse. La E fuerza al
sustrato a adoptar una
configuración adecuada
para su transformación.
Algunas enzimas se asocian con moléculas de carácter NO
PROTEÍCO que son necesarias para el funcionamiento de
la enzima, estas moléculas se denominan COFACTORES:

Centro activo
Holoenzima:
Apoenzima + Cofactor
Cofactor
EFICIENCIA CATALÍTICA
La mayoría de las reacciones catalizadas por enzimas son muy eficientes
y transcurren desde 106 hasta 1014 veces más rápido que la misma
reacción no catalizada. El número de estas moléculas transformadas a
producto por molécula de enzima en cada segundo, se conoce como el
NÚMERO DE RECAMBIO

Enzima Velocidad en ausencia de Velocidad de reacción

enzima catalizada
Anhidrasa carbónica 1.3 X 10 –1 1.0 X 106
Corismato mutasa 2.6 X 10 –5 50
Triosafosfato isomerasa 4.3 X 10 –6 4300
Carboxipeptidasa A 3.0 X 10 –9 578
AMP nucleosidasa 1.0 X 10 –11 60
Nucleasa estafilococal 1.7 X 10 -13 95

ESPECIFICIDAD
Las enzimas son muy específicas para el sustrato de la reacción
que catalizan. Interactúan con una o muy pocas moléculas y
catalizan únicamente un tipo de reacción.
ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO

UN SUSTRATO DETERMINADO (ESPECIFICIDAD CASI

ABSOLUTA)- estereoespecificidad

UNA CLASE DE MOLÉCULAS CON UN COMÚN

DENOMINADOR ESTRUCTURAL, AUNQUE LO HAGAN
A VELOCIDADES DIFERENTES
Fofatasa alcalina (hidroliza ésteres distintos
del ácido fosfórico)
Carboxipeptidasa (enlace peptídico C-terminal)

Un enlace susceptible de ser atacado

Característica estructural necesaria para

SUSTRATO unirse al centro activo de la E, para situar
al S en la adecuada relación geométrica
de modo que el enlace susceptible pueda
ser atacado
 1. OXIDORREDUCTAS (óxido-reducción)
2. TRANSFERASAS (transfieren grupos funcionales)
3. HIDROLASAS (reacciones de hidrólisis)
4. LIASAS (reacciones de adición a los dobles enlaces)
5. ISOMERASAS (isomerización)
6. LIGASAS (formación de enlaces con consumo de ATP)

Sustrato+asa
Comisión de E (EC): cada E 4 números: clase principal,
subclase, sub-sub-clase, nº de serie (Hexoquinasa
(transferasa): EC 2.7.1.2
 1: OXIDORREDUCTASAS Alcohol
Catalizan reacciones de oxidorreducción deshidrogenasa

Ared + Box Aox + Bred

A : es el reductor; en el curso de la reacción se oxida

B : se reduce en el curso de la reacción

1.1. Deshidrogenasas
1.2. Oxidasas
1.3. Peroxidasas
1.4. Oxigenasas
1.5. Hidroxilasas
1.6. Reductasas
2: TRANSFERASAS Hexoquinasa

Catalizan reacciones de transferencia de grupo:

A-X + B A + B-X
Dador + Aceptor - Grupo transferido

2.1.-.- Grupos monocarbonados

2.2.-.- Grupos aldehido o ceto
2.3.-.- Aciltransferasas
2.4.-.- Glicosiltransferasas
2.5.-.- Alquil- o Ariltransferasas
2.6.-.- Grupos nitrogenados
2.7.-.- Grupos fosfato
2.8.-.- Grupos sulfato
3: HIDROLASAS
Catalizan reacciones de hidrólisis: ruptura de enlaces

A-B + H2O A-OH + H-B

3.1. Esterasas
3.2. Glicosidasas
3.3. Éter hidrolasas
3.4. Péptido hidrolasas
(peptidasas)
amilasa
4: LIASAS
Catalizan reacciones de adición de un grupo a un doble enlace:

A=B + X AXB
Fumarasa
 5: ISOMERASAS

Catalizan reacciones de isomerización: reordenamientos intramoleculares

mutasa
- Racemasas
- Oxidorreductasas intramoleculares
- Mutasas o transferasas intramoleculares
6: LIGASAS

Catalizan reacciones en las que se unen 2 moléculas (en presencia de

ATP o ADP)

A + B + ATP A-B + ADP + Pi

Piruvato
carboxilasa