Transcripción del DNA

María Martínez Agüero

Dogma central de la Biología molecular
 ¿Que se transcribe?
Un gen:
• Un RNA como primer producto génico.
• Un producto génico funcional.
• Conjunto de secuencias de DNA necesarias
para codificar un producto génico bien sea
este un RNA maduro, o un polipéptido o
proteína funcional.
 Codificantes No codificantes
• Llevan a Polipeptidos • No llevan a polipeptidos
• Transcrito primario • Productos finales
– Procariotas – rRNA
– Eucariotas: Pre-mRNA – tRNA
En el RNA hay una relación directa entre
secuencia, forma y función
 Trascripción - Concepto
 Proceso
 Síntesis de una molécula de RNA utilizando
como molde una molécula de DNA.
 Concretamente una de las 2 cadenas

DNA Cadena molde

Trascripción

RNA
 DNA

CODIFICADORA

5´ 3´

MOLDE
5´
3´

RNA

5´ 3´

La transcripción es asimétrica porque solo se

copia una de las cadenas
 DNA

5´ A T C G G G TAA T C C CAAA T C C G C GA 3´

3´ TAGCCCAT T AGGGT T T AGGCGCT 5´

5´ AU C G G G UAAU C C CAAAU C C G C GA 3´
RNA
EL GEN EUCARIOTA

• Genes de Clase I
ARN Polimerasa I

• Genes de Clase II
ARN Polimerasa II
• Genes de Clase III
ARN Polimerasa III
• Genes mitocondriales
• Genes del cloroplasto
 EL GEN EUCARIOTA
mRNA – Gen de clase II

¿MONOCISTRONICO O POLICISTRÓNICO?
 EL GEN EUCARIOTA
mRNA – Gen de clase II
 EL GEN EUCARIOTA
mRNA – Gen de clase II

Regiones de control proximal.

- 100 nucleótidos upstream del promotor principal.
- Estimula la transcripción de los genes al interactuar con TFs
- Variables en numero e identidad
- Varían de gen a gen
 Gen de clase II
Region Inr: YYCAYYYYY (Y = pirimidina).
Caja TATA: TATAAA
Necesaria para la unión del factor TPB que
recluta a la RNA polimerasa.

Promotor central
- Punto de inicio de la transcripción
- Se unen los TFs generales y la RNA polimerasa II.
- Tiene una secuencia iniciadora que rodea el punto de inicio +1
- También tiene la secuencia TATAAA o Caja TATA
 Gen de clase II

Unidad de transcripción
-5´UTR y 3´UTR: se transcriben y se incluyen en el mRNA
pero no hacen parte de la proteína.
- la region 3´UTR tiene la secuencia de reconocimiento
PoliA
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
0. Reconocimiento de la cadena molde
- Factores de transcripción
1. Iniciación
2. Elongación
3. Terminación
 INICIACIÓN
• Es el blanco mas importante en la regulación de la
expresión génica
• Evento principal: Reconocimiento de la región
promotora del gen.
• ¿Quiénes reconocen?:
- La polimerasa directamente
- Proteínas o Factores de transcripción
• Se forma el complejo de iniciación.
Ahora puede incorporarse la RNA
polimerasa
 INICIACIÓN
RNA polimerasa

• Necesitan como molde

DNA 3’→ 5’
• Requieren que el DNA El proceso
este desenrollado, pero se
conserva intacto. produce siempre
• Utilizan 4 DNTPs como un RNA 5’→ 3’
sustrato
• NO requieren un primer
de RNA
 INICIACIÓN
Depende de factores de transcripción (TFs)
• Factores reguladores de transcripción: sirven para
modular niveles de la transcripción
• Factores generales de transcripción: se unen entre si y
a las RNA polimerasas para producir un complejo
funcional
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Reconocimiento de la cadena molde
Se requieren 5 factores de transcripción para poner en
marcha la transcripción por la PolI.

1. Unión del TFIID al promotor:

2. El TFIID se compone de varias subunidades:

- Proteína de unión a TATA (TBP, TATA binding protein)
- Factores TAF (Asociados a TBP)
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
El TFIID se compone de varias subunidades:
- Proteína de unión a TATA (TBP, TATA binding protein)
- Factores TAF (Asociados a TBP)
- Se unen a otras secuencias cercanas al promotor
central
- (Inr) en upstream.
- DCE
- DPC
- MTE
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA

2. Reclutamiento de un dos
factores: TFIIA y TFIIB.

TFIIA: Necesario para la

estabilidad de TFIID.
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
2. Muy importante: TFIIB.

- Se une específicamente a la proteína TBP (TFIID) .

- TFIIB actúa como puente para la RNA polimerasa.
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
3. Se incorpora la RNA polimerasa II junto con TFIIF

-La polimerasa se une al complejo TBP – TFIIB junto con el

TFIIF.
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
4. Después de que la Polimerasa II se incorpora l promotor se
necesitan dos factores adicionales:

TFIIE y TFIIH

Queda listo el COMPLEJO

DE PREINICIACIÓN
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA

Queda listo el COMPLEJO

TFIIE y TFIIH DE PREINICIACIÓN
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Cola CTD de la polimerasa y TFIIH
TFIIH
- Tiene varias subunidades
- Dos subn Helicasas:
Desenrrollan el DNA
alrededor del sitio de
iniciación
- Una subund: Quinasa:
Fosforila dominio C-ter de
la polimerasa II (CTD)
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Cola CTD de la polimerasa y TFIIH
Cola CTD – Polimerasa II
- Repeticiones en tandem de siete aa
Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser
- Fosforila: Serina
- Induce la liberación de la polimerasa del complejo
- Comienza la transcripción (elongación)
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
En condiciones REALES es necesario el:
Complejo mediador:
- Estimula la transcripción
- Permite la correcta asociación de los Factores de
transcripción.
CTD
- Se asocia a otras proteínas que permiten la
modificación del RNAm recién sintetizado.

Siguiente Clase: Maduración del RNAm

TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Elongación: (similar a la replicación)

DNA girase: TRABAJA POR DELANTE.

- Inserta “bucles” de DNA
La topoisomerasa I TRABAJA DETRAS
- Remueve los “bucles”
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Elongación:
ELONGACIÓN
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
Terminación

• Requiere proteínas terminadoras Rho (HELICASA)

– Tipo I y III se une al DNA
– Tipo II se une al RNA
• Regiones ricas en T en cadena codificante
• Facilitan Terminación.
• Desensamblaje del complejo de transcripción
• Desfosforilacion de la RNA polimerasa
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA

El RNA debe
ser madurado
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA

El RNA debe
ser madurado
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
RNAr – RNApol I
Son procesados
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
RNAt, RNAr 5s
RNApol III
Son procesados
TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA
RNAt, RNAr 5s
RNApol III

Son procesados
¿PREGUNTAS?