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• Zetasizer Nano
Modelos, tecnologías y rangos.
• Principios de Medida
Dynamic Light Scattering (Tamaño de nanopartículas).
Laser Doppler Electrophoresis (Potencial Z).
Static Light Scattering (Peso molecular promedio).
Difusion Barrier Method (Movilidad electroforética de proteínas).
Microrheology (Propiedades visco-elásticas).
• Zetasizer Nano
Células y accesorios.
• Medida experimental
Tamaño de nanopartículas de una muestra ejemplo.
Potencial Z de una muestra ejemplo.
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Zetasizer Nano - Tecnologías
Tamaño de nanopartícula
Dynamic Light Scattering
Non Invasive Back Scattering
(NIBS)
Potencial Z
Laser Doppler Electrophoresis
Mixed Mode Measurement
Phase Analysis Light Scattering
(M3-PALS)
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Zetasizer Nano - Tecnologías
Pesos moleculares promedio
Static Light Scattering
Movilidad electroforética
de proteínas
Diffusion Barrier Method
(DLS+PALS)
Propiedades Visco-elásticas
Microrheology
(DLS+PALS)
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Zetasizer Nano - Otros parámetros
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Zetasizer Nano - Tecnologías
Tamaño de Peso Molecular
Potencial Z
Nanopartícula Promedio
M3-PALS™
DLS-NIBS™ SLS
Tamaño de Peso Molecular
Potencial Z
Nanopartícula Promedio
M3-PALS™
DLS-NIBS™ SLS
Tamaño de Peso Molecular
-
Nanopartícula - Promedio
DLS-NIBS™ SLS
- Potencial Z -
- -
M3-PALS™
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Zetasizer Nano - Rangos
0,3-10.000 nm 3,8nm-100 µm 980-2·107 Da
DLS-NIBS™ M3-PALS™ SLS
0,3-10.000 nm - 980-2·107 Da
-
DLS-NIBS™ SLS
- 3,8nm-100 µm -
- -
M3-PALS™
0,3-5.000 nm - 9.800-2·107 Da
DLS a 90º - SLS
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Zetasizer Nano - Actualizaciones
1. Tamaño Nanopartícula
0,3-10.000 nm
DLS-NIBS™
2. Potencial Z
3,8-100 µm
M3-PALS™
3. Peso Molecular
Promedio
980-2·107 Da
SLS
1. Tamaño Nanopartícula
0,3-5.000 nm
DLS a 90º
2. Potencial Z
3,8-100 µm
M3-PALS™
3. Peso Molecular
Promedio
9.800-2·107 Da
SLS
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Zetasizer Nano - Actualizaciones
1. Tamaño Nanopartícula
0,3-10.000 nm
DLS-NIBS™
2. Potencial Z
3,8-100 µm
M3-PALS™
3. Peso Molecular
Promedio
980-2·107 Da
SLS
4. Movilidad
electroforética de
proteínas
Diffusion Barrier
Method
5. Prop.
Viscoelásticas
Microrreología
6. Conexión SEC
Opción Flow Mode
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Dynamic Light Scattering
Tamaño de nanopartícula
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Movimiento Browniano
• Temperatura.
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DLS mide las fluctuaciones de
intensidad a lo largo del tiempo,
para determinar el coeficiente
de difusión traslacional (D), y
posteriormente el diámetro
hidrodinámico (DH). Ecuación
de Stokes-Einstein.
kT
D=
3DH
k = Constante Boltzmann
T = Temperatura = Viscosidad
La fluctuación de intensidad es
dependiente del tamaño de
partícula.
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DLS mide las fluctuaciones de
intensidad a lo largo del tiempo,
para determinar el coeficiente
de difusión traslacional (D), y
posteriormente el diámetro
hidrodinámico (DH). Ecuación
de Stokes-Einstein.
kT
D=
3DH
k = Constante Boltzmann
T = Temperatura = Viscosidad
La fluctuación de intensidad es
dependiente del tamaño de
partícula.
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Función de correlación
El tiempo en el que la señal de la función de correlación empieza a decaer,
nos da la información sobre el diámetro medio de partícula.
La pendiente nos
da información
sobre la
polidispersidad
de la
distribución
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Intensidad, Volumen y Número
Distribución Distribución Distribución
en número en volumen en intensidad
~ 4/3 π r3 ~ d6
1.000.000
1 1 1000
1 1
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Configuración óptica - S90 y ZS90
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Configuración óptica - ZSP, ZS y S
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90º Vs. NIBS™
DLS 90º DLS-NIBS™
Alta
Detector
Concentración
Láser Detector Láser
Detector
Baja
Láser Detector Láser
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90º Vs. NIBS™
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Laser Doppler Electrophoresis
Potencial Z
• Potencial Z: Es una medida de la magnitud de la
repulsión o atracción entre las partículas, y por lo tanto
puede ser utilizado para predecir su estabilidad.
• Depende tanto de las condiciones químicas de la
superficie de la partícula como del dispersante. Pequeños
cambios de pH o concentración provocan cambios en el
potencial Z.
• Valores altos/bajos de potencial Z se traducen en fuerzas
de repulsión altas/bajas, y por lo tanto las partículas
tienden a repelerse/ataerse entre ellas.
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• Las partículas adquieren
una carga superficial
opuesta a la de la partícula
en sí.
• Esta carga modifica la
distribución de iones del
medio que le rodea.
• El Potencial Z es la carga de
la partícula en un medio
específico y a una cierta
distancia (doble capa).
• El conjunto de partículas
con su capa en movimiento
browniano proporcionan el
potencial Z global de la
dispersión.
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Configuración óptica - ZSP, ZS, ZS90 y Z
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• El Potencial Z se calcula a
través de la movilidad
electroforética que es el
movimiento de una
partícula cargada relativa al
líquido, cuando se le aplica
un campo eléctrico.
• La muestra es introducida
en una célula capilar donde
se aplica un campo eléctrico
v=0 f/Hz
alterno. Las partículas son
atraídas hacia el electrodo
de carga opuesta. v>0 f/Hz
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• El haz de rayo láser incide
sobre las partículas en
movimiento y provocan un
cambio de frecuencia (efecto
Doppler).
• La tecnología Laser Doppler
Electrophoresis es capaz de
medir esa diferencia de
frecuencia que es
directamente proporcional a
la movilidad electroforética,
y por lo tanto, proporcional v=0 f/Hz
al valor de Potencial Z a
través de la ecuación de
Henry. v>0 f/Hz
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Laser Doppler Electrophoresis
f1
f2
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Phase Analysis Light Scattering
f1
f2
A Interferencia A B Interferencia
constructiva destructiva
B
f1 - f2 = f
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Phase Analysis Light Scattering
• Laser Doppler Electrophoresis (LDE), tradicionalmente
la diferencia de frecuencia se calcula mediante
Transformada de Fourier (FT).
• Phase Analysis light Scattering (PALS), calcula la
diferencia de fase, en vez de la diferencia de frecuencia
(LDE). Proporciona una sensibilidad de hasta 100 veces
mayor que mediante tecnologías tradicionales (FT).
• Mixed Mode Measurement-Phase Analysis Light
Scattering (M3-PALS™). Permite la medida de muestras
con conductividades muy altas mediante dos modos de
medida (FFR y SFR), evitando el efecto Joule y el efecto
de la electroósmosis.
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M3-PALS™
• Modo FFR (Fast Field
Reversal). Elimina la
electroósmosis aplicando
un campo eléctrico
alterno a muy alta
frecuencia. Proporciona
el valor medio de
Potencial Z (Ep).
• Modo SFR (Slow Field
Reversal). Aplica un
campo eléctrico
invirtiéndolo
lentamente. Proporciona
la distribución de
Potencial Z (Eo+Ep).
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Static Light Scattering
Pesos moleculares promedio
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Static Light Scattering
I (MWt) (C)
Ecuación de KC 1
Rayleigh 2 A2C P
R MW
K = Optical constant C = Concentration
MW = Molecular weight R = Rayleigh Ratio of the sample
A2 = 2nd Virial coefficient P() = Shape factor
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Pesos moleculares y 2º Coef. Virial
• Para P=1, la ecuación de
Rayleigh queda
simplificada:
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Diffusion Barrier Method
Movilidad Electroforética de Proteínas
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Diffusion Barrier Method
Movilidad Electroforética de Proteínas
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Diffusion Barrier Method
Movilidad Electroforética de Proteínas
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Las medidas de movilidad
electroforética se realizan a través
de un SOP que combina medidas
de tamaño de partícula y
potencial Z para asegurar que no
se forman agregados durante la
medida que indiquen la
degradación de la muestra.
Realiza un ajuste automático del
voltaje aplicado para reducir la
degradación.
Las medidas se ejecutan en
grupos con pausas para evitar el
calentamiento y degradación de la
muestra.
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Diffusion Barrier Vs. Full cell
Distribución de tamaño antes y después de las medidas
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Diffusion Barrier Vs. Full cell
Movilidad Electroforética - HSA 10 mg/ml - 10mM NaCl
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Microrheology
Medida de las propiedades visco-elásticas
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Células de medida
• Célula de potencial Z en base
acuosa.
• Célula de potencial Z en base
solvente “Universal Dip Cell”.
• Célula de potencial Z de alta
concentración.
• Célula de potencial Z en
superficie.
• Célula de tamaño en base acuosa
(Volúmenes 1mL, 100µL, y
40µL).
• Célula de tamaño en base
solvente (Volúmenes 1mL, 12µL,
y 2µL).
• Célula de flujo.
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Autovalorador MPT-2
• Los factores que afectan
el Potencial Z son el pH,
la Conductividad y la
Concentración.
• El autovalorador MPT-2
permite realizar
barridos de pH,
concentración o
conductividad
automáticamente para la
búsqueda del punto
isoeléctrico.
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Autovalorador MPT-2
• Zona de estabilidad
2 < pH < 4
Pot.Z > 30mV
• Zona de inestabilidad
4 < pH < 7,5
-30mV < Pot.Z < 30mV
• Zona de estabilidad
7,5 < pH < 12
Pot.Z < -30mV
• Punto isoeléctrico
pH=5,5
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Vibro-Viscómetro SV-10
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Zetasizer APS y Zetasizer μV
• Proteínas y
biomoléculas.
• Tamaño molecular
0,15-1.000 nm (radio),
pesos moleculares
(342-2·107 Da), melting
point, etc...
• Zetasizer APS (Auto
Plate Sampler).
96 ó 386 muestras.
• Zetasizer μV.
Volumen de muestra
2μL y conexión a sistema
GPC/SEC.
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IESMAT, S.A.
SOLICITUD DE Parque Empresarial Miniparc II SOLICITUD DE
CERTIFICADO DE ASITENCIA Caléndula, 95 ESTA PRESENTACIÓN
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