RESVERATROL REDUCE LA INFLAMACIÓN CRÓNICA Y MEJORA LA

ACCIÓN DE LA INSULINA EN EL MIOCARDIO DE RATAS CON

OBESIDAD, INDUCIDAS POR UNA DIETA ALTA EN GRASAS

Thais Luciano Fernandes, Schérolin De Oliveira Marques, Bruno Luiz Da

Silva Pieri, Daniela De Souza, Fabio Santos De Lira, Claudio Teodoro De
Souza

OBJETIVO:

Evaluar los efectos del resveratrol en la señalización de la insulina y la vía de

inflamación en el miocardio con alto contenido de grasa, inducido por la dieta en
ratas obesas.

MÉTODOS:

Treinta ratas Wistar se dividieron en un grupo control (n = 10, con dieta estándar),
grupo de obesos (n = 10, la dieta rica en grasas), y el grupo de resveratrol
complementado con la obesidad (n = 10, 20 mg / kg / día), por un periodo de ocho
semanas. Una prueba de tolerancia a la insulina se realizó al final del período de
estudio en "0" (sin insulina), 5, 10, 15, 20, 25, y 30 minutos después de una
inyección intraperitoneal de insulina (2 U / kg). El tejido adiposo del epidídimo y el
cuerpo se pesaron. Fragmentos de miocardio fueron extraídos para realizar un
análisis mediante Western blot, de la vía de insulina y moléculas pro inflamatorias.

RESULTADOS:

El resveratrol incrementó la tasa de desaparición de glucosa, la fosforilación del

receptor de insulina, el sustrato del receptor de insulina 1, y la proteína quinasa
B; y redujo la expresión del factor de necrosis tumoral alfa y de las moléculas
implicadas en la transducción de señales pro inflamatorias, llamadas Ikappa B
quinasa y factor nuclear complejo kappa B. Los resultados también sugieren que la
mayor sensibilidad a la insulina y los niveles más bajos de moléculas pro
inflamatorias observados, ocurrieron independientemente del peso y pérdida del
tejido adiposo del epidídimo

CONCLUSIÓN:

El resveratrol aumenta la acción de la insulina y reduce las moléculas inflamatorias

en el miocarido.

Palabras clave: Obesidad, resveratrol, resistencia a la insulina, inflamación.

INTRODUCCIÓN

El rápido aumento de la prevalencia de la obesidad muestra que los cambios

ambientales, tales como patrones de alimentación inadecuados y la escasa
actividad física, son factores determinantes del incremento de la epidemia mundial
de obesidad. La obesidad es un factor de riesgo decisivo para enfermedades tales
como la diabetes mellitus tipo 2, hipertensión arterial y enfermedades
cardiovasculares. Pacientes con obesidad mórbida tienen un mayor riesgo de
muerte súbita y problemas cardíacos. Un cambio en la sensibilidad a la insulina es
un importante vínculo entre estas enfermedades.
Se observó que se produce resistencia a la insulina en el corazón de ratas obesas,
lo que lleva a una reducción en la cantidad y la translocación de la proteína
transportadora de glucosa 4 (GLUT4) al sarcolema. Aunque los mecanismos
que lideran la resistencia a la insulina se han ampliamente estudiado en el músculo
esquelético, más estudios sobre el tejido cardíaco son necesarios, junto con
posibles terapias farmacológicas o no farmacológicas.

La insulina es una hormona anabólica secretada por el páncreas en respuesta a un

aumento de la glucosa en sangre. La acción de la insulina comienza cuando esta se
une a un receptor de membrana específico, llamado receptor de insulina (IR). La
activación del IR promueve la fosforilación de la tirosina en diversos sustratos,
incluyendo el receptor de insulina 1 (IRS-1) y 2 (IRS-2). La fosforilación de las
proteínas IRS expone sitios de unión para otra proteína citosólica llamada
fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3-K), activándola. La activación de la fosfatidilinositol
3-quinasa aumenta la fosforilación de la serina de la proteína quinasa B (Akt). La
proteína Akt es una proteína quinasa serina / treonina específica expresada en el
tejido muscular. A través de la fosforilación de la proteína Akt, es capaz de activar
muchos efectos metabólicos, tales como la captación de glucosa, así como de
glucógeno y la síntesis de proteínas.

Muchas moléculas o vías moleculares de transducción de señales intracelulares

pueden interferir con la vía de transducción de la insulina, conduciendo
posiblemente a la resistencia a la insulina. De estos, la literatura menciona la
importancia de las citocinas pro inflamatorias para el desarrollo de resistencia a la
insulina, especialmente IKappa B quinasa (IKK) / Factor Nuclear kappa B (NF-kB),
factor de transcripción y factor de necrosis tumoral alfa (TNFa).

Algunos nutrientes incrementan la acción de la insulina significativamente, como el

resveratrol (3, 5,4-trihidroxiestilbeno), una fitoalexina encontrada en plantas y
algunos alimentos, como los cacahuetes, moras y uvas. Resveratrol proporciona
protección cardiovascular, inhibe la agregación plaquetaria, reduce factores
inflamatorios y mejora la homeostasis de la glucosa. Los efectos de los suplementos
de resveratrol fueron investigados en ratas obesas, insulino-resistentes,
inducidas por la dieta hiperlipídica y se descubrió que el resveratrol mejora la
homeostasis de la glucosa y la sensibilidad a la insulina de todo el cuerpo. Sin
embargo, ni la vía proinflamatoria ni el miocardio fueron evaluados. Por lo tanto, el
presente estudio evaluó como el suplemento de resveratrol reduce la inflamación y
mejora la señal de transducción de la insulina en el miocardio de ratas obesas.

MÉTODOS

Caracterización de los animales y la dieta

Se obtuvieron ratas macho Wistar, de treinta y cuatro semanas de edad con un

peso de 115 g aproximadamente, de la Universidad del Extremo Sur Catarinense
(Unesc), en las instalaciones del laboratorio animal. Se les mantuvo en un ciclo de
12/12-horas de luz / oscuridad y a una temperatura de 20 ° C a 22 ° C. Después
de una semana de adaptación al nuevo entorno, los animales fueron divididos,
primero en dos grupos: el grupo magro alimentado con comida estándar para
roedores (Nuvital Nutrientes SA, Colombo, PR, Brasil) (hidratos de carbono: 70,0%;
proteínas: 20,0%; grasas 10,0%, por un total de 3,8 kcal / g) (n = 10) llamado
grupo de control; y un grupo alimentado con una dieta alta en grasas (hidratos de
carbono: 38,5%; proteínas: 15,0%; grasas 46,5%, por un total de 5,4 kcal / g) (n
= 20) durante ocho semanas. A ambos grupos se les dio agua al día. Una vez que
los animales se volvieron obesos, fueron sometidos a la Prueba de Tolerancia a
Insulina Intraperitoneal (ITT) para verificar su resistencia a la insulina. Los
animales obesos se subdividieron al azar en dos grupos: ratas obesas inducidas
por una dieta con alto contenido de grasa (obesas, n = 10) y ratas obesas que
recibieron suplementación con resveratrol (obesas + resv, n = 10).

Todos los experimentos cumplieron con los principios y procedimientos establecidos

por el Colegio Brasileño de Experimentación Animal (COBEA, Colegio Brasileño de
Experimentación Animal) y aprobados por el Comité de Ética de la Investigación de
Unesc con el número de protocolo 20/2011.

Resveratrol Protocolo de Suplementación

Los animales suplementados recibieron 20 mg / kg de resveratrol por sonda, una

vez al día, durante ocho semanas. El Resveratrol 100% puro se adquirió de la
empresa Pharma Nostra Ltda (Río de Janeiro, Brasil).

Prueba de tolerancia a la insulina intraperitoneal

La prueba se realizó al final del período experimental. Los alimentos fue retirados
seis horas antes de la prueba y la primera extracción de sangre correspondió a
tiempo "0". Después, la insulina (2 U / kg de peso corporal) se inyectó por vía
intraperitoneal y se tomaron muestras de sangre de la incisión de la cola después
de 5, 10, 15, 20, 25, y 30 minutos para medir la glucosa en sangre. La constante
de desaparición de la glucosa durante la prueba de tolerancia a la insulina (k) está
dada por la fórmula 0,693 / T 1/2. El t 1/2 de la glucosa fue dado por los valores
mínimos del cuadro de análisis del nivel de glucosa en la sangre, durante la fase de
desaparición de la glucosa lineal.

Peso de la grasa del epidídimo

Los animales fueron sacrificados y se retiró el tejido adiposo del epidídimo, para
luego pesarlo en una balanza analítica (Bel Engineering Ltd., Piracicaba, SP) con
una precisión de 0,001 g para comparar los grupos. El peso de la grasa corporal se
expresó como un porcentaje del peso corporal.

La extracción de tejidos y Western Blot

Veinticuatro horas después de la última administración de suplementos, las ratas

fueron anestesiadas con ketamina (50 mg / kg, Syntec, Cotia, SP) y xilazina (20
mg / kg, Syntec, Cotia, SP). A continuación, se abrió la cavidad abdominal y se
inyectó, o bien solución salina (grupo sin insulina (-), 0,1 ml) o insulina regular
(grupo con insulina (+), 0,1 ml) en la vena cava inferior. Después de la inyección
de insulina (Humulin R, Eli Lilly, Sao Paulo, SP), se recogieron los fragmentos de
miocardio y se los colocó inmediatamente en un tampón de extracción específico
(1% Triton X-100, 100 mM Tris, pH 7,4 que contiene 100 mM de sodio pirofosfato,
100 mM de fluoruro de sodio, 10 mM de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), 10
mM de vanadato de sodio, 2 mM de fenilmetanosulfofluoruro (PMSF), y 0,1 mg de
aprotinina / ml) y se homogeneizaron por un Polytron (Polytron MR 2100,
Cinemática, Suiza). Al final de la extracción, los animales fueron sacrificados por
decapitación con guillotina. Triton X-100 fue agregado en todas las muestras, que
luego fueron mantenidas en hielo durante 40 minutos. Las muestras
homogeneizadas se centrifugaron a 11.000 rpm, durante 30 minutos, en la
centrífuga Eppendorf 5804R (Eppendorf AG, Hamburgo, Alemania). El método fue
la determinación de la concentración de proteína en el sobrenadante. Las proteínas
fueron desnaturalizadas por ebullición a 100 ° C en el sistema de tampón Laemmli
que contiene 100 mM de ditiotreitol (DDT).
Una vez que se determinó la concentración de proteínas, las muestras se cargaron
en Dodecil sulfato de sodio - gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) y se separaron por
electroforesis. Las proteínas separadas por SDS-PAGE se transfirieron a una
membrana de nitrocelulosa en el dispositivo Mini Trans-Blot de transferencia
electroforética de células (BIO-RAD, Hércules, Estados Unidos) e inmediatamente
se los bloqueó por un tampón de bloqueo (5% de albúmina, 10 mmol / l de Tris,
150 mmol / l de NaCl; 02% de Tween 20) durante dos horas para minimizar la
unión entre los anticuerpos y proteínas no específicas. La membrana se incubó
durante 12 horas con los anticuerpos primarios anti-pIR Tir1162 / 1.163 y anti-
pIRS1 Tir971 adquiridos de tienda de señalización (Beverly, MA, Estados Unidos) y
anti-pAkt Ser473, anti-TNF, anti-pIKKα contra -nf-kB y β-actina adquirido del Instituto de
Biotecnología Santa Cruz de (Santa Cruz, CA, Estados Unidos). Después de la
incubación del anticuerpo primario, las membranas se enjuagaron de nuevo con la
solución basal durante tres sesiones de 5 minutos y se incubaron con el anticuerpo
secundario conjugado con peroxidasa de quimioluminiscencia (Thermo Scientific,
Rockford, IL, Estados Unidos). La intensidad de la banda y el área se determinaron
mediante la lectura de las autorradiografías desarrolladas por densitometría usando
un escáner (HP (R) G2710) y el software de la imagen de Scion (Corporación Scion).

El análisis estadístico

Los resultados fueron expresados como medios ± de la media de error estándar

(SEM) y analizados, por un solo sentido, el análisis de varianza (ANOVA), seguido
por el test post hoc de Bonferroni. El nivel de significación se fijó en 5% (p
<0,05). El paquete estadístico para el software de Ciencias Sociales (SPSS) versión
17.0 para Microsoft Windows realizó los análisis estadísticos.

RESULTADOS

Se pesaron los tejidos corporales y el tejido adiposo del epidídimo de los animales
obesos con y sin suplementación de resveratrol y los resultados fueron
similares (Figuras 1A y 1B), pero significativamente mayores que los de los
animales control. La prueba de tolerancia a la insulina mostró que el grupo de
obesos tenía más baja sensibilidad a la insulina, que el grupo control (p
<0,05). Sin embargo, los suplementos de resveratrol incrementaron la tolerancia a
la insulina, del grupo de obesos con suplemento en comparación con el grupo de
obesos no suplementados (Figura 1C).
Figura 1 Análisis de peso corporal y la grasa del epidídimo, y la tasa de
desaparición de glucosa (KITT) en el miocardio de ratas delgadas, ratas obesas sin
suplemento, y el resveratrol como complemento de ratas obesas. * p <0,05 de
resveratrol como suplemento para las ratas obesas contra ratas obesas. El peso
corporal (A), peso del tejido adiposo del epidídimo (g / 100 g de peso corporal) (B)
y KITT (C). Los resultados fueron expresados en unidades arbitrarias. Las barras
representan las medias ± error estándar de la media (SEM) de n = 10 por grupo.

Fuente: Universidad del Extremo Sur Catarinense (Unesc). Laboratorio de Fisiología

y Bioquímica. Criciuma (SC), Brasil, en 2013.
El receptor de la insulina (Figura 2A), IRS1 (Figura 2B) y Akt (Figura 2C) del grupo
de control que recibió la insulina, fueron significativamente más fosforilados que los
del grupo control que recibieron solución salina. IR IRS1 y la fosforilación de Akt en
el grupo de obesos fue menor que en el grupo control (p <0,05). Sin embargo, la
fosforilación de estas moléculas fue significativamente mayor en ratas obesas
suplementadas con resveratrol que en ratas obesas sin suplementación (p>0,05).

Figura 2 La vía de señalización de la insulina en el miocardio de ratas delgadas,

ratas obesas no suplementadas, y ratas obesas suplementadas con resveratrol.
Los niveles de proteína TNF alfa y NFkB (subunidad p65) y la fosforilación IKK se
analizaron. Los animales obesos presentan un aumento significativo de
TNFa (Figura 3A), fosforilación de IKK alfa (Figura 3B) y NFkB (Figura 3C) en
comparación con los animales de control, pero las ratas obesas suplementadas
presentan valores inferiores a los de las ratas obesas no suplementadas (p <0,05).

Figura 3 Las proteínas y la fosforilación de niveles de enzimas implicadas en la

transducción de señales pro inflamatorias en el miocardio de ratas delgadas, ratas
obesas no suplementadas, y ratas obesas suplementadas con resveratrol.
DISCUSIÓN

La obesidad es un factor importante en el desarrollo de enfermedades

cardiovasculares y la resistencia a la insulina, y un riesgo decisivo para la diabetes
mellitus tipo 2. La vía inflamatoria IKK / NF-kB y TNF alfa tienen un papel crítico en
el desarrollo de la resistencia a la insulina en condiciones fisiopatológicas como la
obesidad. Roedores obesos inducidos por una dieta rica en grasas presentaron un
aumento significativo de la resistencia a la insulina y la expresión de citoquinas
inflamatorias, como la IL-1β, IL-6, TNF alfa, NF-kB. En estados como resistencia a
la insulina, tanto las citosinas como el TNF alfa activan a IKKa e IKKβ por vías de
señalización intermedias. Esta activación promueve la fosforilación de serina del IR
y IRS1, reduciendo las señales de transducción de la insulina. Sin embargo, los
cambios en los niveles de inflamación y la vía de señalización de la insulina en el
miocardio requieren una mayor investigación. Además, los nutrientes como el
resveratrol mejora la sensibilidad a la insulina y reducen la inflamación y la
incidencia de enfermedades coronarias. Por lo tanto, la hipótesis de estudio fue que
la administración de suplementos de resveratrol podría beneficiar a la vía de
señalización de la insulina en el miocardio de ratas obesas. Como era de esperar,
las ratas obesas desarrollaron resistencia a la insulina y los niveles más altos de
moléculas pro inflamatorias presentadas en el miocardio, y los suplementos de
resveratrol fueron capaces de revertir estos resultados independientemente del
peso corporal y la pérdida de grasa. Se encontraron resultados similares en los
seres humanos, donde la administración de suplementos de 1 g / día de resveratrol
durante 45 días mejoró la sensibilidad a la insulina, la glucosa en ayunas, y un
modelo homeostático resistencia a la insulina (HOMA-IR), independientemente del
peso corporal.

El resveratrol ha demostrado también beneficios en la vía de señalización de la

insulina. Aumento de la suplementación con resveratrol, incrementa la fosforilación
de IRS1 y Akt, en el hígado y en el músculo sóleo de ratas resistentes a la insulina
y reduce la glucosa en sangre y la insulina. El presente estudio encontró resultados
similares, es decir, la suplementación con resveratrol aumento de la fosforilación de
IR, IRS1, y Akt en el miocardio y, por consiguiente, la sensibilidad a la insulina,
mostradas por la velocidad de desaparición de la glucosa. Concordantemente, la
administración de suplementos de resveratrol reduce la hiperglucemia en un
modelo de obesidad animal.

La regulación de la vía de insulina por el resveratrol se puede atribuir a su

capacidad para activar la proteína SIRT1 mediante la inhibición de la
fosfodiesterasa 4, con la consiguiente proteína activada Monofosfato de Adenosina
quinasa (AMPK). La activación de SIRT1 ayuda a controlar la homeostasis de la
glucosa por diversos mecanismos, tales como la regulación de la secreción de
insulina, la protección de las células ß pancreáticas, la secreción del modulador IR
(que provee resistencia a las insulina), la reducción de la inflamación, la
movilización de lípidos, y la secreción de adiponectina. Los efectos de 150 mg / día
de resveratrol, tomados oralmente, por hombres obesos por 30 días fueron
similares a los producidos con una restricción calórica, una mejor sensibilidad a la
insulina y los niveles de triglicéridos, y la activación de la vía / SIRT1 AMPK en el
músculo esquelético.

El mecanismo bioquímico y molecular por el cual el resveratrol reduce la

inflamación no era el foco de este estudio y merece ser mejor aclarado. Sin
embargo, este estudio muestra claramente los efectos del resveratrol en los niveles
de proteínas proinflamatorias. Por otra parte, González y Orlando encontraron que
el resveratrol actúa en el NF-kB mediante la inhibición de IKK de los adipocitos, que
impide la translocación de NF-kB al núcleo y, en consecuencia, reduce la
transcripción de los genes inflamatorios. Otros estudios encontraron resveratrol
reduce la fosforilación de IKK en el hígado de las ratas y la expresión de NF-kB y
las citocinas IL-1β e IL-6 en fibroblastos. Además de su efecto sobre la vía de la
insulina, SIRT1 puede desacetilar y, en consecuencia, inhibir NF-kB, reduciendo así
la transcripción de genes proinflamatorios. La activación de SIRT1 por el resveratrol
también redujo los niveles de moléculas proinflamatorias, tales como JNK, IKK, NF-
kB.

Otra explicación de la capacidad del resveratrol para reducir la inflamación puede

estar en su naturaleza antioxidante. Especies reactivas del oxígeno activan las
moléculas que regula la vía de la inflamación, incluyendo NF-kB, y promueven la
secreción de mediadores inflamatorios. Además, los individuos obesos tienen altos
niveles de especies reactivas del oxígeno y el sistema de defensa antioxidante
alterado. Sin embargo, 20 mg / kg / día de resveratrol fueron capaces de revertir el
estrés oxidativo en el miocardio y la aorta de ratas obesas. Finalmente, los
resultados son interesantes porque los efectos de la insulina sobre el miocardio
tienen un fuerte impacto en la supervivencia del corazón. Estos datos evidencian
que el resveratrol puede ser un tratamiento no farmacológico eficaz para reducir la
inflamación y, en consecuencia, aumentar en todo el cuerpo sensibilidad a la
insulina.

El tratamiento con Resveratrol incrementa la sensibilidad a la insulina de todo el

cuerpo y la señalización intracelular de esta hormona en el miocardio de ratas
obesas, que aparentemente reduce los niveles de citoquinas pro inflamatorias.

REFERENCIAS

1. De Ferranti S, Mozaffarian D. The perfect storm: Obesity, adipocyte dysfunction,

and metabolic consequences. Clin Chem. 2008; 54(6):945-55. doi:
10.1373/clinchem.2007.100156 [ Links ]

2. Wing RR, Matthews KA, Kuller LH, Meilahn EN, Plantinga P. Waist to hip ratio in
middle-aged women: Associations with behavioral and psychosocial factors and
with changes in cardiovascular risk factors. Arterioscler Thromb. 1991; 11(5):1250-
7. doi: 10.1161/01.ATV.11.5.1250 [ Links ]

3. Wellman NS, Friedberg B. Causes and consequences of adult obesity: Health,

social and economic impacts in the United States. Asia Pac J Clin Nutr. 2002;
11(Suppl 8):S705-9. doi: 10.1046/j.1440-6047.11.s8.6.x [ Links ]

4. Duflou J, Virmani R, Rabin I, Burke A, Farb A, Smialek J. Sudden death as a

result of heart disease in morbid obesity. Am Heart J. 1995; 130(2):306-13. doi:
10.1016/0002-8703(95)90445-X [ Links ]

5. Utriainen T, Takala T, Luotolahti M, Rönnemaa T, Laine H, Ruotsalainen U, et al.

Insulin resistance characterizes glucose uptake in skeletal muscle but not in the
heart in NIDDM. Diabetologia. 1998; 41(5):555-9. doi: 10.1007/s001250050946
[ Links ]

6. De Souza CT, Frederico MJ, da Luz G, Cintra DE, Ropelle ER, Pauli JR, et al.
Acute exercise reduces hepatic glucose production through inhibition of the
Foxo1/HNF-4a pathway in insulin resistant mice. J Physiol. 2010; 588(pt12):2239-
53. doi: 10.1113/jphysiol.2009.183996 [ Links ]
7. Saltiel AR, Kahn CR. Insulin signalling and the regulation of glucose and lipid
metabolism. Nature. 2001; 414(6865):799-806. doi: 10.1038/414799a [ Links ]

8. White MF. The IRS-signaling system: A network of docking proteins the mediate
insulin action. Mol Cell Biochem. 1998; 182(1-2):3-11. doi:
10.1023/A:1006806722619 [ Links ]

9. Saad MJ, Folli F, Kahn JA, Kahn CR. Modulation of insulin receptor, insulin
receptor substrate-1, and phosphatidylinositol 3-kinase in liver and muscle of
dexamethasone-treated rats. J Clin Invest. 1993; 92(4):2065-72. doi:
10.1172/JCI116803 [ Links ]

10. Shepherd PR, Navé BT, Siddle K. Insulin activates glycogen synthase by a novel
PI3-kinase/p70s6k dependent pathway in 3T3-L1 adipocytes. Biochem Soc Trans.
1995; 23(2):202. doi: 10.1042/bst023202s [ Links ]

11. Datta SR, Brunet A, Greenberg ME. Cellular survival: A play in three Akts.
Genes Dev. 1999; 13(22): 2905-27. [ Links ]

12. De Souza CT, Araujo EP, Bordin S, Ashimine R, Zollner RL, Boschero AC, et al.
Consumption of a fat-rich diet activates a proinflammatory response and induces
insulin resistance in the hypothalamus. Endocrinol. 2005; 146(10):4192-9. doi:
10.1210/en.2004-1520 [ Links ]

13. Gonzales AM, Orlando RA. Curcumin and resveratrol inhibit nuclear factor-
kappaB-mediated cytokine expression in adipocytes. Nutr Metab. 2008; 5:17. doi:
10.1186/1743-7075-5-17 [ Links ]

14. Luz G, Silva S, Marques S, Luciano TF, De Souza CT. Suplementação de ácidos
graxos poli-insaturados ômega-3 e melhora da ação da insulina e da inflamação em
fígado de camundongos. Rev Nutr. 2012; 25(5):621-30. doi: 10.1590/S1415-
52732012000500007 [ Links ]

15. Soleas GJ, Diamandis EP, Goldberg DM. The world of resveratrol. Adv Exp Med
Biol. 2001; 492(1): 159-82. doi:10.1007/978-1-4615-1283-7_13 [ Links ]

16. Robich MP, Osipov RM, Nezafat R, Feng J, Clements RT, Bianchi C, et al.
Resveratrol improves myocardial perfusion in a swine model of
hypercholesterolemia and chronic myocardial ischemia. Circulation. 2010;
122(Suppl 11):S142-9. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.109.920132 [ Links ]

17. Olas B, Wachowicz B. Resveratrol, a phenolic antioxidant with effects on blood

platelet functions. Platelets. 2005; 16(5):251-60. doi:
10.1080/09537100400020591 [ Links ]

18. Kang W, Hong HJ, Guan J, Kim DG, Yang EJ, Koh G, et al. Resveratrol improves
insulin signaling in a tissue-specific manner under insulin-resistant conditions only:
In vitro and in vivo experiments in rodents. Metabolism. 2012; 61(3):424-33. doi:
10.1016/j.metabol.2011.08.003 [ Links ]

19. Baur JA, Pearson KJ, Price NL, Jamieson HA, Lerin C, Kalra A, et al. Resveratrol
improves health and survival of mice on a high-calorie diet. Nature. 2006;
444(7117):337-42. doi: 10.1038/nature05354 [ Links ]
20. Chen S, Li J, Zhang Z, Li W, Sun Y, Zhang Q, et al. Effects of resveratrol on the
amelioration of insulin resistance in KKAy mice. Can J Physiol Pharmacol. 2012;
90(2):237-42. doi: 10.1139/y11-123 [ Links ]

21. Rocha KK, Souza GA, Ebaid GX, Seiva FR, Cataneo AC, Novelli EL. Resveratrol
toxicity: Effects on risk factors for atherosclerosis and hepatic oxidative stress in
standard and high-fat diets. Food Chem Toxicol. 2009; 47(6):1362-7. doi:
10.1016/j.fct.2009.03.010 [ Links ]

22. Després JP, Lemieux I. Abdominal obesity and metabolic syndrome. Nature.
2006; 444(7121): 881-7. doi: 10.1038/nature05488 [ Links ]

23. Deng J, Hsieh P, Huang J, Lu L, Hung L. Activation of estrogen receptor is

crucial for resveratrol-stimulating muscular glucose uptake via both insulin-
dependent and -independent pathways. Diabetes. 2008; 57(7):1814-23. doi:
10.2337/db07-1750 [ Links ]

24. Movahed A, Nabipour I, Lieben Louis X, Thandapilly SJ, Yu L, Kalantarhormozi

M, et al. Antihyperglycemic effects of short term resveratrol supplementation in
type 2 diabetic patients. Evid Based Complement Alternat Med. 2013;
2013:851267. doi: 10.1155/2013/851267 [ Links ]

25. Louis XL, Thandapilly SJ, MohanKumar SK, Yu L, Taylor CG, Zahradka P, et al.
Treatment with low-dose resveratrol reverses cardiac impairment in obese prone
but not in obese resistant rats. J Nutr Biochem. 2012; 23(9):1163-9. doi:
10.1016/j.jnutbio.2011.06.010 [ Links ]

26. Goh KP, Lee HY, Lau DP, Supaat W, Chan YH, Koh A FY. Effects of resveratrol in
patients with type 2 diabetes Mellitus on skeletal muscle SIRT1 expression and
energy expenditure. Int J Sport Nutr Exerc Metab. 2013; &#91;Epub ahead of
print&#93;. [ Links ]

27. Park SJ, Ahmad F, Philp A, Baar K, Williams T, Luo H, et al. Resveratrol
ameliorates aging-related metabolic phenotypes by inhibiting cAMP
phosphodiesterases. Cell. 2012; 148(3):421-33. doi: 10.1016/j.cell.2012.01.017
[ Links ]

28. Bordone L, Motta MC, Picard F, Robinson A, Jhala US, Apfeld J, et al. Sirt1
regulates insulin secretion by repressing UCP2 in pancreatic beta cells. PLoS Biol.
2006; 4(2):31. doi: 10.1371/journal.pbio.0040031 [ Links ]

29. Lee JH, Song MY, Song EK, Kim EK, Moon WS, Han MK, et al. Overexpression of
SIRT1 protects pancreatic beta-cells against cytokine toxicity by suppressing the
nuclear factor-kappaB signaling pathway. Diabetes. 2009; 58(2):344-51. doi:
10.2337/db07-1795 [ Links ]

30. Picard F, Kurtev M, Chung N, Topark-Ngarm A, Senawong T, et al. Sirt1

promotes fat mobilization in white adipocytes by repressing PPAR-gamma. Nature.
2004; 429(6993):771-6. doi: 10.1038/nature02583 [ Links ]

31. Timmers S, Konings E, Bilet L, Houtkooper RH, van de Weijer T, Goossens GH,
et al. Calorie restriction-like effects of 30 days of resveratrol supplementation on
energy metabolism and metabolic profile in obese humans. Cell Metab. 2011;
14(5):612-22. doi: 10.1016/j.cmet.2011.10.002 [ Links ]
32. Do GM, Jung UJ, Park HJ, Kwon EY, Jeon SM, McGregor RA, et al. Resveratrol
ameliorates diabetes-related metabolic changes via activation of AMP-activated
protein kinase and its downstream targets in db/db mice. Mol Nutr Food Res. 2012;
56(8):1282-91. doi: 10.1002/mnfr.201200067 [ Links ]

33. Csiszar A. Anti-inflammatory effects of resveratrol: possible role in prevention

of age-related cardiovascular disease. NY Acad Sci. 2011; 1215: 117-22. doi:
10.1111/j.1749-6632.2010.05848.x [ Links ]

34. Zhu X, Liu Q, Wang M, Liang M, Yang X, Xu X, et al. Activation of SIRT1 by

resveratrol inhibits TNF-á induced inflammation in fibroblasts. PLoS One. 2011;
6(11):e27081. doi: 10.1371/journal.pone.0027081 [ Links ]

35. Yoshizaki T, Schenk S, Imamura T, Babendure JL, Sonoda N, Bae EJ, et al.
SIRT1 inhibits inflammatory pathways in macrophages and modulates insulin
sensitivity. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2010; 298(3):19-28. doi:
10.1152/ajpendo.00417.2009 [ Links ]

36. Ungvari ZI, Orosz Z, Labinskyy N, Rivera A, Xiangmin Z, Smith KE, et al.
Increased mitochondrial H2O2 production promotes endothelial NF-êB activation in
aged rat arteries. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2007; 293(1):H37-47. doi:
10.1152/ajpheart.01346.2006 [ Links ]

37. Mohora M, Vîrgolici B, Paveliu F, Lixandru D, Muscurel C, Greabu M. Free radical

activity in obese patients with type 2 diabetes Mellitus. Rom J Intern Med. 2006;
44(1):69-78. [ Links ]

38. Avila PR, Marques SO, Luciano TF, Vitto MF, Engelmann J, Souza DR, et al.
Resveratrol and fish oil reduce catecholamine-induced mortality in obese rats: Role
of oxidative stress in the myocardium and aorta. Br J Nutr. 2013; 110(9):1580-90.
doi: 10.1017/S000711451300092 [ Links ]

39. Gao F, Gao E, Yue TL, Ohlstein EH, Lopez BL, Christopher TA, et al. Nitric oxide
mediates the antiapoptotic effect of insulin in myocardial ischemia-reperfusion: The
roles of PI3-kinase, Akt, and endothelial nitric oxide synthase phosphorylation.
Circulation. 2002; 105(12):1497-502. doi: 10.11 61/01.CIR.0000012529.00367.0F
[ Links ]