Determinación de proteínas

Método de Bradford

Para la determinación de proteínas se usará el método de Bradford, que se fundamenta en la

formación de un complejo entre el reactivo azul de coomasie y las proteínas en solución,
causando un cambio en máximo de absorción a 595 nm.

Para su preparación se disolverá 100 mg del reactivo azul de coomasie en 50 mL de alcohol al

95% y se añadirá 100 mL de ácido ortofosfórico al 85% y se completará con agua bidestilada
c.s.p. 1 L. Se dejará en reposo por 24 horas en un frasco ambar para su posterior filtración.

Para la realización de la curva estándar se utilizó como patrón soluciones de albúmina bovina a
diferentes concentraciones: 2,5, 10, 12.5, 20 y 25 ug/mL; se tomará 10 uL de cada una y se
mezclaron con 1 mL del reactivo de Bradford, se dejará en reposo por 2 min y se leerá por
espectrofotometría a 595 nm