ÁREA DE CIENCIAS BÁSICA - ESTUDIOS GENERALES - BIOLOGÍA

PRACTICA N° 6

CÉLULA EUCARIÓTICA
RECONOCIMIENTO DE ORGANISMO UNICELULARES Y PLURICELARES Y SUS
COMPONENTES CELULARES EN PROTOZOARIOS, CÉLULA ANIMAL Y VEGETAL

I. INTRODUCCIÓN

Todos los organismos vivos están formadas por células estas cumplen funciones diversas,
pueden estar constituidos por una sola célula (unicelulares) como los protozoarios o por
muchas células (organismos pluricelulares) como las plantas superiores y los animales
caracterizándose por la presencia de endomembranas como el retículo endoplasmático,
aparato de Golgi, y la envoltura nuclear o carioteca.

En el citosol contienen diversas organelas de forma y tamaño variado, estas cumplen

diversas funciones en el metabolismo celular; como las mitocondrias (respiración), los
lisosomas (digestión).

Los protozoarios o protozoos como la son organismos eucariontes microscópicos,

unicelulares protoctista; heterótrofos, fagótrofos, depredadores o detritívoros, a veces
mixótrofos; que viven en ambientes húmedos junto con los protófitos o algas simples,
generalmente acuáticas, dentro del reino protista. Los protozoarios habitan en medios
líquidos o acuáticos de agua dulce o salada. El desplazamiento los realizan por seudópodos
(Amoeba); cilios (Paramecium, Vorticella, Volvox) o flagelos (Euglena).

Estos organismos son considerados como material biológico apropiado para reconocer los
lisosomas, organelas que contienen más de 50 enzimas digestivas las que hidrolizan
sustratos intracelulares específicos.

Los colorantes vitales usados a muy bajas concentraciones de tal manera que no les altera
el metabolismo porque son inocuos, como por ejemplo el rojo neutro a (1:20000), permiten
observar los lisosomas al microscopio; a estas concentraciones se tiñen estructuras
directamente en las células vivas.
Este colorante es también empleado como indicador de pH.

Los animales; como organismos eucarióticos, multicelulares, sus células forman tejidos,
órganos y sistemas. Un órgano apropiado para observar la célula eucariótica es la boca
cuyo tejido de la mucosa oral es el tejido epitelial; el cual es un tejido pavimentoso de
células de fácil exfoliación, del que se puede aislar células, teñirlas con azul de metileno(1:
20,000) y/o Verde Janus(1/10000) y observar sus partes y diferenciar las mitocondrias con
este último.

En las plantas se puede apreciar estas células en la epidermis de las hojas de plantas
superiores. Por ejemplo en el tallo modificado (bulbo) de la “cebolla” (Allium cepa), podemos
apreciar la pared celular que rodea al a célula, dentro del citoplasma el núcleo con sus

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nucléolos, en las células de sus envolturas o catáfilos que son membranas finas muy
delgada y translúcida que fácilmente se pueden desprender y que está adosada en su cara
interna.

La delgadez de las paredes celulares permite observar el parénquima clorofiliano con los
cloroplastos cuya función es la fotosíntesis (Elodea).

El citosol por ser de consistencia coloidal que presenta cambios tixotrópicos causado por el
citoesqueleto (microfilamentos induce al arrastre o aparente desplazamiento de los
cloroplastos (ciclosis) como ocurre en Elodea (fanerógama), o en las algas Chara y Nitella.
así como el movimiento de todos los componentes celulares vegetales. Este movimiento
facilita el intercambio de sustancias intracelularmente o entre la célula y el exterior.
El parénquima se encuentra por debajo del parénquima clorofiliano, es el parénquima de
reserva, el cual en algunos casos, los leucoplastos almacena almidón(amiloplastos) estos se
observa en tallos tipo tubérculos como papa, olluco, oca, en semillas como en maíz, trigo,
arroz y los pigmentos carotenoides como xantofila (ají), caroteno (zanahoria) y licopeno
(tomate).

II. COMPETENCIAS

- Reconoce organismo unicelulares y pluricelulares

- Describe características de protozoarios
- Reconoce lisosomas en protozoarios
- Diferencia las partes de la célula animal y vegetal
- Reconoce organelas las mitocondrias en epitelio bucal.
- Reconoce plastidios: cloroplastos en células vegetales.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

MATERIALES

Material biológico:
- Epitelio bucal
- Catáfilo de Alium cepa “cebolla”
- Hojas de Elodea
- Protozoarios (cultivos)

Otros Materiales:
- Hoja de bisturí o de afeitar
- Láminas y laminillas, goteros
- Estiletes, pinza delgada
- Papel lente, Franela
- Guía/manual de prácticas,
- Alcohol gel
- Guantes

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COLORANTES Y EQUIPOS

Colorantes:

- Verde Janus (1/10000),

- Lugol.
- Agua
- Rojo neutro (1/20000)
- Suero fisiológico (0,9%)
Equipos:
- Microscopio compuesto

III. DESARROLLO DE LA PARTE EXPERIMENTAL:

A. ORGANISMOS UNICELULARES

A.1. OBSERVACION EN PROTOZOARIOS LAS PARTE DE LA CÉLULA Y

RECONOCER LOS LISOSOMAS

Fundamento:
Como el rojo neutro se acumula en las vacuolas y cambia de color según el pH, pueden
seguirse los procesos digestivos de los protozoos mediante los cambios de color de sus
vacuolas, ubicando a los lisosomas por el contenido coloreado. Las vorticellas se tiñen bien
de esta manera y dan imágenes de mucho colorido. Si a las muestras se les añade agua sin
colorante dentro de un recipiente, los paramecios siguen vivos y tardan 48 horas en volver
a decolorarse

PROCEDIMIENTO

El rojo neutro se usa a concentración del (1:20000). Preparación previa:

De una solución acuosa al 0,1%.
Colocar en una placa Petri 5ml de un cultivo de protozoarios (paramecios u otro).
Añadir 1 gota de la anterior solución. Dejar reposar.
1. Colocar en el portaobjetos una gota de la muestras diluida.
2. Luego coloque la laminilla sobre la muestra
3. Observe al microscopio con objetivo de 10 X y/o 40X.
4. Describa e identifique los lisosomas.
5. Nomine las partes.
Gráfique un PROTOZOARIO CON LISOSOMAS

Aumento: ……..
Señalice las partes del protozoario

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Identifique LOS LISOSOMAS

B. ORGANISMOS PLURICELULARES
B.1. CÉLULA ANIMAL: FROTIS DE EPITELIO BUCAL.

Las células animales al ser observadas con el microscopio compuesto; la membrana se

presenta como una línea birrefringente que delimita al protoplasma o citosol,
conteniendo diversos orgánulos y el núcleo que generalmente es de posición central.

B.1.1 OBSERVACION DE LAS PARTES DE LA CELULA ANIMAL Y MITOCONDRIAS

Fundamento: Las mitocondrias poseen en la membrana interna o crestas mitocondriales un
conjunto de enzimas respiratorias que realizan reacción de óxido-reducción en el transporte
de electrones. Para observarlas se utiliza verde Janus (colorante básico) a concentración
vital (0,01%); este colorante en su estado oxidado por es azul al ser reducido por acción de
las enzimas citocromo oxidasas se torna de color verde refringente; siendo específico para
identificar a las mitocondria. Coloreándose de azul-verdosas refringentes.

PROCEDIMIENTO

1.- Con un extremo de la lámina portaobjeto, hacer un raspado del epitelio bucal.
2.- En otra lámina portaobjeto realice un frotis en una sola dirección.
3.- Dejar secar por 5 minutos al medio ambiente.
4.- Colocar unas gotas de Verde de Janus sobre toda la muestra.
5.- Dejar actuar al colorante por 5 minutos.
6.- Eliminar el exceso de colorante de la lámina, lavando con suero fisiológico (0,9%) a
chorro fino.
7.- Cubrir la preparación con una laminilla.
8.- Secar por los bordes de la laminilla con papel absorbente.
9.- Examinar el preparado con objetivo de 10 X y/o 40X.en una célula aislada y reconoce
las estructuras.

- Esquematice una célula del epitelio bucal.

Señale las partes en el gráfico Identifique LAS MITOCONDRIAS en su preparado

Aumento ………

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B.2. CÉLULA VEGETAL: CATÁFILO DE CEBOLLA Allium cepa

B.2.1. OBSERVACION DE LAS PARTES DE LA CELULA
PROCEDIMIENTO

1.- Corte un trozo de cebolla y aproximadamente 0.5cm x 0.5cm y desprenda la fina

membrana translúcida de la parte cóncava del catáfilo con una pinza.
2.- Coloca un trozo de ésta membrana sobre un portaobjetos sin formar pliegues.
3.- Luego unas gotas de agua y sobre ella coloca el cubre objeto.
4.- Observe al microscopio a 40x.
5.- Por los bordes de la laminilla agregue una gotita de lugol, limpie el exceso y observe
nuevamente al microscopio el preparado con objetivo de 10 X y/o 40X.

Esquematice una célula del Catáfilo de cebolla Allium cepa.

Señale LAS PARTES en un esquema

Aumento ………

B.2.2. PLASTIDIOS: ORGANELAS: OBSERVACIÓN DE CLOROPLASTOS Elodea

B.2.2.1 OBSERVACIÓN DE CLOROPLASTOS EN HOJAS DE Elodea

PROCEDIMIENTO

1. Coloque en un portaobjeto una hoja de Elodea.

2. Luego una gota de agua, y Cubra con una laminilla.
Observe forma, número, y el aparente movimiento de los cloroplastos y coloración.
3. Esquematice una célula de Elodea y observe los CLOROPLASTOS.

Señale estructuras visibles en el esquema

Aumento: …………………………..

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CUESTIONARIO:
1. Enuncie una ley física asociada al funcionamiento del lisosoma
2. Cómo podría explicar la función que cumple la mitocondria desde el punto de vista
matemático, físico y biológico.
3. Indique la función que cumple cada estructura señalada
4. ¿Qué es ciclosis y a que se debe?

FIGURAS REFERENCIALES

Paramecium coloreado con rojo neutro

URL: https://www.google.com.pe/search?q=paramecio+coloreado+con+rojo+neutro&rlz=1C1GGGE_esPE592PE592&tbm=
isch&source=iu&ictx=1&fir=mwqXmKe1OmeQQM%253A%252CCuYpWpv8l10uHM%252C_&usg=__cBS3VYj6brQ0KpxTh0CSA
ec_xJo%3D&sa=X&ved=0ahUKEwiVs-e9vOXZAhWCoFMKHTrGD7IQ9QEILDAA#imgrc=mwqXmKe1OmeQQM:

Células de tejido epitelial coloreado con Verde Janus

URL:https://www.google.com.pe/search?q=coloracion+con+verde+de+janus+las+celulas+epiteliales&tbm=isch&tbs=rimg:CS3HTx
NJLCLGIjixHnkjOzl8w-qzVJcWJHxf6zJJEL2wuGdd8Rw5BB0bhNCq_1GO5mmOOMT-
N9K26l6iRXgccI45VSoSCbEeeSM7OXzDEWLxnZiJapIDKhIJ6erNUlxYkfERhcbw1TAyCSkqEgl
_1rMkkQvbC4RHmXm4Fs4PTnCoSCZ13xHDkEHRuEcbmcwEzpuWxKhIJE0Kr8Y7maY4RGiz45DG0AgoqEgk4xP430rbqXhHtrpHJi
KZj9SoSCaJFeBxwjjlVEfdDKwClFjSZ&tbo=u&sa=X&ved=0ahUKEwjot9mR3uXZAhWHoFMKHfvzDakQ9C8IHA&biw=1269&bih=609
&dpr=1#imgrc=12VOlgKhUhrISM:

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Catafilo de cebolla
https://www.google.com.pe/search?q=paramecio+coloreado+con+rojo+neutro&rlz=1C1GGGE_esPE592PE592&tbm=isc
&source=iu&ictx=1&fir=3gPwFAtsptGCqM%253A%252CMjvmZQkEqIaIM%252C_&usg=__JL5SR4B5oNpEyRR9HWIv4OZ1lQ%3D&
sa=X&ved=0ahUKEwiVs-e9vOXZAhWCoFMKHTrGD7IQ9QEINDAE#imgdii=zm2InECc-2v8BM:&imgrc=IfvXB2tswdxdT M:

PLASTIDIOS: CROMOPLASTOS ORGANELA: CLOROPLASTO

Cloroplastos de Elodea

URL: https://www.google.com.pe/search?q=Cloroplastos+de+Elodea&rlz=1C1GGGE_es
PE592PE592&tbm=isch&source=iu&ictx=1&fir=ikY2Xw2JvyoPuM%253A%252CtK21geapcdCXVM%252C_&usg=__CwEXDzh_amJ7emRr8uWuuFyoL
kU%3D&sa=X&ved=0ahUKEwicwY_04OXZAhWM7FMKHYK-Df0Q9QEIKTAA#imgrc=ikY2Xw2JvyoPuM . Revisado:12-03.18

LEUCOPLASTOS: Amiloplasto de” papa”

URL: https://www.google.com.pe/search?q=LEUCOPLASTOS:+Amiloplasto+de+papa&rlz=1C1GGGE_es
PE592PE592&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwjm1Mbt5OXZAhUQ7FMKHVP_AXYQ_AUICigB&biw=1269&bih=609#imgrc=-
Cg1YQQtWt6SuM:

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IV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Boveris A, Chance B. The mitochondrial generation of hydrogen peroxide. General

properties and effect of hyperbaric oxygen. Biochem J 1973; 134: 707-16. Mencionado en
Scielo. Medicina (Buenos Aires) versión On-line ISSN 1669-9106 Medicina (B. Aires) v.65
n.1 Buenos Aires ene./mar. 2005 Las mitocondrias y el verde Jano.

Mitocondrias. URL:https://es.slideshare.net/Biologiaintermedio1c/04mitocondria
2007
https://es.slideshare.net/renattacontreras/transformaciones-de-la-materia-55006748

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