FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO PLAN CURRICULAR

CONTENIDO DEL INFORME DE LABORATORIO

Asignatura: Bioquímica I NOTA

Número de práctica: 04
Fecha de realización: 08 de Mayo del 2018 Fecha de entrega: 14 de Mayo del 2018
Integrantes / Grupo Wendy Cartagena
N°: Doris Yépez
1. Título: Identificación de Carbohidratos
2. Objetivo:
Determinar el tipo de carbohidrato presente en la muestra problema dada por el
laboratorio, por medio de una marcha analítica de identificación.

3. Fundamento teórico:
Los carbohidratos, también llamados glúcidos, carbohidratos, hidratos de carbono o
sacáridos, son aldehídos o cetonas polihidroxilados. Esto significa que en su
estructura tienen: un grupo formilo o un grupo oxo y varios grupos hidroxilo., que se
encuentran principalmente en azúcares, almidones y fibra.
Se pueden clasificar según su número de carbonos, siendo este variable, triosas,
tetrosas, pentosas y hexosas. Mientras que la unión de varios, se denomina
polímeros. (Riesgo, 2010)
Los carbohidratos se clasifican en función del número de unidades de sacárido (la
forma más simple de carbohidrato); los monosacáridos son aquellos que no se
pueden dividir en una forma más simple y se clasifican en aldosas y cetosas, los
disacáridos pueden hacerlo en dos moléculas de monosacáridos Los disacáridos no
se utilizan como tales en el organismo, sino que éste los convierte a glucosa. En
este proceso participa una enzima específica para cada disacárido, lo rompen y se
producen los monosacáridos que los forman., los oligosacáridos producen de 3 a 10
unidades y los polisacáridos desde 10 a más de 10000 unidades de monosacáridos.
Los carbohidratos provienen de diferentes fuentes, un ejemplo de ello es la glucosa,
fructosa y galactosa, los monosacáridos más importantes, distintas hexosas que
provienen de frutas, frutos secos, verduras, etc. En el caso de las pentosas estas no
se encuentran libres en los alimentos. En disacáridos se encuentran la sacarosa,
lactosa, y maltosa. Y en el caso de los polisacáridos, se dividen en digeribles,
parcialmente digeribles y no digeribles (fibra). (ONUAA, 1999)
Durante la práctica en el laboratorio, existen diferentes caminos para realizar una
marcha analítica de identificación de carbohidratos. Partiendo primero por el hecho
de identificar si existe un carbohidrato, una prueba muy conocida para esta situación
es la prueba de Molisch que es una prueba cualitativa para la presencia de
carbohidratos en una muestra de composición desconocida, en la que se formará
furfural. Para determinar la cantidad y naturaleza específica de los carbohidratos se
requieren otras pruebas
Existen pruebas que ayudan al experimentador a determinar si el azúcar utilizado es
reductor, los azúcares reductores son quienes poseen su grupo carbonilo intacto. En
el caso de los disacáridos, solo la sacarosa no es un azúcar reductor. Para la
identificación de estos carbohidratos un método muy conocido es el de reactivo de
Fehling. El catión cúprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glúcidos
reductores pasando a óxido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo.
Esta es una reacción que resulta positiva sólo si el glúcido es reductor. Los glúcidos
reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese medio tiende a
precipitar espontáneamente como óxido cúprico (que en esa forma no reacciona), de
manera que es necesaria la presencia de tartrato doble de sodio y potasio en el
reactivo para "secuestrar" al catión Cu++, a fin de evitar la formación del óxido
cúprico, y permitir que reaccione con los glúcidos reductores. (Oliver, 2003)
Otra prueba muy utilizada es la reacción de Benedict, Se basa en la reducción de
Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción de Fehling, el
medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que este test
sea más sensible y estable. Se lo considera específico de pentosas. (Quesada,
2010)
En el caso de disacáridos pueden ser reconocidos por medio de las reacciones de
hidrólisis. Al igual que en el caso de polisacáridos, en especial para la identificación
de almidón por medio de su hidrólisis enzimática.

4. Procedimiento:
Materiales Equipos Reactivos
Tubos de Ensayo Cocineta Muestra
Pinza para tubos de Ensayo Alfa-naftol
Pipeta Ácido sulfúrico
Goteros Fehling A
Gradilla Fehling B
Selivanov
Lugol
Cristales de floroglucina
Ácido Clorhídrico
Hidróxido de Sodio

2ml de Muestra + 4 a 6 gotas de naftol/timol+ H2SO4(por

Prueba de Molisch
las paredes)
Reacción de Licor de 1 ml de Muestra + 1 ml de Fehling A + 1 ml de Fehling B
Fehling + agitación y calentamiento
Reacción de Nylander 2 ml de Muestra + 1 ml de Nylander + calentamiento
Reacción de Selivanov 1ml de Muestra + 2 ml de Selivanov + Baño maría
(cetosas)
Reacción de 2ml de Muestra + Gotas de H2SO4 + cristales de
Fluoroglucina(pentosa) fluoroglucina + Baño María
Hidrólisis ácida de 2ml de muestra + 3 gotas de HCl+ 5’ baño maría+ 1ml de
Sacarosa NaOH+ enfríar+ Fehling
Reacciones Muestra + Lugol + 1ml de NaOH + reposo
coloreadas de Almidón Muestra + lugol + 2ml de EtOH+ reposo
5. Resultados:

Prueba Resultado/Observación

Se observa la formación de un anillo de color morado,

Prueba de Molisch es positivo, para alfa-naftol, e igual se forma un anillo
rojo con timol.
Reacción de Licor de La solución cambia de color de azul a una coloración
Fehling roja, es positiva.
La solución cambia de color, primero se vuelve
Reacción de Nylander ligeramente amarilla y termina en un color negro; es
positiva.
Reacción de Selivanov Se forma una solución de color naranja una vez
(cetosas) expuesta al calor, pero nunca se vuelve roja, es
negativo.
Reacción de La muestra cambia de coloración, se vuelve roja, es
Fluoroglucina(pentosas) positiva.
Hidrólisis ácida de La muestra toma un color celeste que nunca cambia, es
Sacarosa negativa.
Reacciones coloreadas No se obtiene ninguna reacción con lugol, es negativo
de Almidón

6. Discusión de Resultados:
La primera reacción que resultó positiva, fue la de identificación de la presencia de
carbohidratos, con la formación de un anillo morado. “Molisch que es una prueba
cualitativa para la presencia de carbohidratos en una muestra de composición
desconocida, en la que se formará furfural” (Oliver, 2003)
“Selivanov, es una prueba específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan
más rápidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el
resorcinol produciendo un complejo coloreado rojizo.” (Trelo, 2009) En este caso no
se obtuvo la coloración deseada, que es rojo, por lo que no es cetosa. Al contrario
de la reacción de fluorogluciona, que reacciona con la muestra.
Durante la prueba de reacción de almidón, no se obtienen reacciones, por lo tanto, la
muestra obtenida no es almidón. “El Lugol tiñe el almidón, solamente la amilosa
(forma helicoidal del almidón), debido a la atracción física que tiene el yodo a
penetrar en las curvas de la hélice.” (Quesada, 2010) Es decir, no se obtuvo cambio
alguno.
7. Conclusiones:
Se determinó que la muestra problema dada por el laboratorio, contenía un
carbohidrato ya que daba positivo en la prueba de Molisch, durante las pruebas de
identificación de carbohidratos reductores Fehling y Nylander las soluciones tomaron
los colores esperados, rojo y negro bimétalico, respectivamente, dando un resultado
positivo. Selivanov fue negativa, por lo que la muestra no es una cetosa. Pero
durante la reacción de Fluoroglucina la muestra tomó la coloración indicada: rojo
carmín; demostrando de este modo que se tiene un carbohidrato que resultó ser una
pentosa.

8. Bibliografía:

Bibliografía
Oliver, J. (2003). Bioquímica: Técnicas y Métodos. Madrid: Hélice.
ONUAA. (1999). Los carbohidratos en la nutrición humana. Roma: FAO.
Quesada, S. (2010). Manual de Experimentos de Bioquímica. Costa Rica: Universidad
Estatal a Distancia.
Riesgo, L. (2010). Estructura y función de Biomoléculas. Bogota: Universidad del
Rosario.
Trelo, M. (07 de Junio de 2009). UNIVERSIDAD DE ALACANT. Obtenido de
UNIVERSIDAD DE ALACANT: https://ciencias.ua.es/es/extension-
universitaria/documentos/extension-universitaria/ven-a-hacer-
practicas/2017/bioquimica-identificacion-de-azucares.pdf

9. Anexos: