Anda di halaman 1dari 2

3.

1 Prosedur Penelitian
3.6.1 Pembuatan Tepung Kulit Pisang
1. 300 gram kulit pisang dicuci sampai bersih
2. Kulit pisang dipotong menjadi bagian-bagian kecil
3. Kulit pisang dikeringkan dibawah matahari selama 5 jam
4. Setelah kering, kulit pisang dihaluskan dengan blender sampai membentuk
tepung
3.6.2 Pembuatan Larutan Nutrisi
1. Melarutkan CO(NH2)2 (3 g/L), MgSO4.7H2O (0,5 g/L), CaCl2.H2O (0,5 g/L)
dengan aquades
2. Mengatur pH hingga 5.
3.6.3 Pensuspensian Jamur Aspergillus niger
1. Jamur Aspergillus niger dimasukan ke tabung erlemeyer berisi peptone water
200ml sebanyak 1/2 sendok teh untuk pembuatan larutan nutrisi
2. Larutan divorteks agar jamur tersuspensi kedalam larutan dan diinkubasi
selama 24 jam
3.6.4 Pembentukan Media Kultur Aspergillus niger
1. Sebanyak 5 gram tepung kulit pisang dimasukan ke erlemeyer dan
ditambahkan 25 ml larutan nutrisi lalu ditutup dengan aluminium foil
2. Campuran media disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121oC selama 20
menit lalu didinginkan ke suhu ruang
3. 200ml campuran suspensi Aspergillus niger diinkubasi pada media sesuai
variabel (24 jam; 36 jam 48 jam)
3.6.4 Ekstraksi Enzim
1. 100ml larutan 0.1% tween 80 dituangkan ke dalam larutan enzim dan diaduk
pada 150rpm selama 60 menit pada suhu ruang
2. Larutan dimasukan ke cuvet lalu disentrifugasi pada 3000rpm selama 10 menit
3. Supernatan yang diperoleh merupakan ekstrak enzim kasar dan dipisahkan
dari endapannya dengan pipet tetes
3.6.5 Hidrolisis Pektin secara Enzimatis
1. Kedalam labu leher tiga dimasukan (5gr; 10gr; 15gr) tepung kulit pisang sesuai
variabel
2. Masukan 10 ml supernatan kedalam labu leher tiga dan tambahkan aquadest
hingga volume 150 ml
3. Aduk larutan dengan kecepatan 160rpm selama 15 menit lalu atur sampai pH=
5 dengan HCl 0,1N atau NaOH 0,1N
4. Dihidrolisis pada suhu sesuai variabel (45oC; 55oC; 65oC) selama waktu sesuai
variabel (60 menit; 90 menit; 120menit)
3.6.6 Filtrasi Pektin
1. Larutan hasil hidrolisis disaring dengan kertas saring
2. Filtrat pektin ditambah etanol 96% sebanyak tiga kali volume filtrat lalu
diaduk sampai homogen
3. Filtrat didiamkan selama 12 jam (semalam) agar pektin mengendap
4. Endapan pektin disaring denga kertas saring
3.6.7 Pengeringan
1. Pektin basah dikeringkan dengan oven pada suhu 50oC selama 6 jam sampai
2. Timbang pektin kering yang dihasilkan