Green Synthesis of Zinc Oxide Nanoparticles Using Fresh Peels Extract of

Punica granatum and its Antimicrobial Activities

BAB I
PENDAHULUAN
1.1.Latar belakang
Istilah nanomaterials disintesis dari novel ecofriendly dan berkelanjutan
biologi dan teknik process. Pada abad ke-21, nanoteknologi telah muncul
sebagai bidang interdisipliner dengan biosintesis partikel nano logam.
Nanoteknologi mendapatkan pentingnya di bidang perawatan kesehatan,
makanan, pakan, kosmetik kesehatan lingkungan ilmu biomedis industri kimia
obat, gen pengiriman, ilmu energi, elektronik mekanika, dan ruang industri.
Dalam tahun terakhir, rute sintetis yang berbeda telah diikuti untuk
mempersiapkan non materi seperti metode kimia microwave dan laser ablasi
method. Ilmuwan menunjukkan bunga tinggi untuk magnetik nanomaterials
karena aplikasi potensial; juga bahan massal dapat menunjukkan resistensi
super logam atau logam tinggi ketika disiapkan di nanoscale. Partikel nano
hadir diarea permukaan yang lebih tinggi untuk rasio volume dengan
penurunan ukuran, distribusi dan morfologi particles. Kebutuhan yang
semakin ramah lingkungan partikel nano, peneliti menggunakan metode hijau
sintesis berbagai logam partikel nano untuk aplikasi farmasi. Pendekatan
biologis menggunakan mikroorganisme dan tumbuhan atau tanaman ekstrak
untuk partikel nano logam telah diusulkan sebagai berharga alternatif untuk
metode-metode kimia. Beberapa biologis sistem termasuk bakteri, jamur, dan
jamur telah digunakan dalam sintesis nanoparticles. Sintesis partikel nano
yang menggunakan mikroorganisme melibatkan proses rumit
mempertahankan budaya sel, intraseluler sintesis, dan beberapa langkah
pemurnian. Dalam hal ini menggunakan metode hijau dalam sintesis partikel
nano seng oksida telah menjadi topik menarik sebagai metode kimia
konvensional mahal dan memerlukan penggunaan senyawa kimia / organik
pelarut mengurangi agents. Hijau metode yang menggunakan kulit larutan
ekstrak dari buah delima telah digunakan untuk pertama kalinya sebagai bahan
mengurangi serta permukaan menstabilkan agen sintesis bulat berbentuk
 partikel nano seng oksida. Struktur, fase dan morfologi disintesis produk
diselidiki oleh teknik karakterisasi standar.
1.2. Identitas masalah
1.2.1. Penggunaan ekstrak air kulit Deima sebagai bahan mengurangi serta
menstabilkan agen sintesis bulat berbentuk partikel nano seng oksida.
1.2.2. Efektifitas ekstrak air kulit Deima dalam menguji akivitas mikroba.
1.3. Kegunaan penelitian
1.3.1. Mengetahui ekstrak air kulit Deima dapat digunakan sebagai bahan
mengurangi serta menstabilkan agen sintesis bulat berbentuk partikel
nano seng oksida.
1.3.2. Dapat menetahui Efektifitas ekstrak air kulit Deima dalam menguji
akivitas mikroba.
1.4.Waktu dan penelitian
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Buah Delima
Delima ( Punica granatum L.) adalah tanaman buah buahan yang dapat
tumbuh hingga 5-8 m. Tanaman ini diperkirakan berasal dari Iran, namun
telah lama dikembangbiakan di daerah Mediterania. Bangsa Moor memberi
nama salah satu kota kuno di Spayol, Granada berdasarkan nama buah ini.
Tanaman ini juga banyak ditanam di daerah Cina Selatan dan Asia Tenggara.
(Rahmat, 2003)
2.1.1. Taxonomi
Berdasarkan taksonominya, delima diklasifikasikan sebagai
berikut:
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Superdivisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Subkelas : Rosidae
Ordo : Lythraceae
Famil : Punicaeae
Genus : Punica L.
Spesies : Punica granatum L.
2.1.2. Sinonim dan Nama Daerah
Di daerah Sumatera, delima biasanya dikenal dengan nama glima
(Aceh), dalimo (Batak), sedangkan di daerah Jawa dikenal dengan nama
gangsalan dan dhalima. (Rahmat, 2003)
2.1.3. Morfologi
Delima berasal dari Timur Tengah, tersebar dari daerah subtropik
sampai tropik, dari dataran rendah sampai di bawah 1.000 mdpl.
Tumbuhan ini menyukai tanah gembur yang tidak terendam air, dengan air
tanah yang tidak dalam. Delima sering di tanam di kebun-kebun sebagai
tanaman hias, bentuk pohon perdu atau pohon kecil dengan tinggi 2-5 m.
batang berkayu, ranting bersegi, percabangan banyak, lemah, berduri pada
ketiak daunnya, cokelat ketika masih muda, dan hijau kotor setelah tua.
Daun tunggal, bertangkai pendek, letaknya berkelompok. Helaian daun
bentuknya lonjong sampai lanset, pangkal lancip, ujung tumpul, tepi rata,
pertulangan menyirip, permukaan mengkilap, panjang 1-9 cm, lebar 0,5-
2,5 cm, warnanya hijau. Bunga tunggal bertangkai pendek, keluar di ujung
ranting atau di ketiak daun yang paling atas. Biasanya, terdapat satu
sampai lima bunga, warnanya merah, putih, atau ungu. Berbunga
sepanjang tahun. Buahnya buah buni, bentuknya bulat dengan diameter 5-
12 cm, warna kulitnya beragam, seperti hijau keunguan, putih, coklat
kemerahan, atau ungu kehitaman. Kadang terdapat bercak-bercak yang
agak menonjol berwarna lebih tua. Bijinya banyak, kecil-kecil, bentuknya
bulat panjang yang bersegi-segi agak pipih, keras, tersusun tidak beraturan,
warnanya merah, merah jambu, atau putih (Rahmat, 2003).
2.1.4. Kandungan senyawa kimia buah delima
Efek terapeutik Delima erat hubungannya dengan senyawa kimia
yang terkandung di dalamnya. Penelitian terkini mengungkapkan bahwa
bahan yang paling memiliki nilai terapeutik di dalam delima adalah
senyawa polifenol atau phenolic. Selain itu, senyawa kimia lain yang
berperan yaitu asam ellagic, tannin ellagic atau hydrolyzable (termasuk
punicalagin), asam lemak, katekin, quercetin, antosianidin, antosianin,
asam punicic, flavonoid, dan estyrogenic flavonols dan flavon dan alkaloid
pelletierine (Gunawan, 2007).
Phenolic adalah senyawa yang paling penting dalam aktifitas
terhadap bakteri, contohnya adalah asam gallic yang diidentifikasi sebagai
senyawa yang paling aktif untuk uji penghambatan bakteri. Efek
penghambatan senyawa phenolic dapat dijelaskan oleh adsorpsi ke
membran sel, interaksi dengan enzim substrat dan mengurangi komposisi
ion logam bakteri. (Gunawan,2007).
Flavonoid dilaporkan menunjukkan kemampuan aktifitas anti-
inflamasi, oestrogenic, enzim inhibition, antimikroba, antialergi,
antioksidan, dan aktifitas sitotoksis antitumor. Ekstrak flavonoid dari
tanaman ini telah banyak digunakan dalam penelitian efek terhadap
berbagai bakteri secara in vitro.
Flovanoid memiliki mekanisme antibakteri dengan berbagai.
aktifitas, diantaranya dengan menghambat sintesis dari asam nukleat
bakteri, menghambat fungsi membran sitoplasmik bakteri, dan
menghambat metabolisme energi bakteri (Gunawan, 2007).
Senyawa tanin seperti punicalagin merupakan agen antimikrobial.
Aktifitas tanin dalam melawan bakteri dan jamur dapat dilihat dari
hubungan struktur molekul dan toksisitasnya serta aktifitas stringennya.
Efek tanin sebagai antimikroba nampak dari kemampuan melewati dinding
sel bakteri yang terdiri dari polisakarida dan protein dan berikatan dengan
permukaanya. (Gunawan, 2007).
Senyawa senyawa tersebut diatas selain mempunyai aktivitas yang
tinggi terhadap bakteri juga mempunyai aktivitas antelmintik. (Gunawan,
2007).
Senyawa lain seperti asam ellagic, antosianin dan flavon juga
memiliki aktifitas biological yang tinggi. Asam ellagic dan flavon
memiliki kemampuan antikarsinogenik dan antioksidan yang tinggi.
Sedangkan, antosianin merupakan salah satu antioksidan tumbuhan yang
kuat yang mampu mencegah berbagai kerusakan sel, serta alkaloid
pelletierin yang mampu mengeluarkan cacing dari usus. (Gunawan, 2007).
 BAB III
TATA KERJA
3.1. Alat dan bahan yang digunakan
3.1.1. Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu, Kertas Whatman
No.1, stirrer heater, kompor, oven, cawan, Spektroftmerti Uv- Vis (Shmadu),
mikroskop ZESS V-50 ketas botting, caram, dan alat tes antikroba.
3.1.2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu, air suling, air suling
steril, serbuk kunyit, seng nitrat, Proteus vulgaris , Aspergillus niger, dan
agar Sabauroud Dextrose.
3.2. Metode Penelitian
3.2.1. Persiapan Bahan dan Pembuatan Ekstrak
Punica granatum digunakan untuk membuat ekstrak air. Serbuk kulit
Punica granatum sebanyak 5gram dicuci dengan air suling, dicampur 100ml
air suling steril dan disaring menggunakan kertas Whatman No.1 filter. Filtrat
digunakan ekstrak air sebagai reduktor.
3.2.2. Sintesis perak nanopartikel
Untuk sintesis nanopartikel 50ml dari Punica granatum kulit ekstrak
air diambil dan direbus 60-80˚C menggunakan stirrer heater. 5 gram seng
nitrat ditambahkan ke dalam larutan sebagai suhu mencapai 60oC. Campuran
ini kemudian direbus sampai menjadi pasta berwarna kuning kecoklatan yang
pekat. pasta ini dikumpulkan dalam cawan dan dipanaskan dalam oven pada
suhu 90oC selama 8 jam. Serbuk kunyit berwarna kuning
diperoleh dikumpulkan dan dikemas untuk tujuan karakterisasi. Bahan ini
ditumbuk dalam mortar dan alu sehingga mendapatkan karakteriasi yang
baik.
3.2.3. Analisis dengan Spektrofotometri Uv- Vis
Pengurangan ion seng murni dipantau dengan menggunakan
spektrofotometri UV-Vis dari media reaksi pada 2 jam setelah pengenceran aliquot
kecil sampel ke air suling. Analisis Spektrofotometri Uv- Vis telah selesai
dilakukan dengan menggunakan spektroskopi UV-Vis
(Shimadzu).
3.2.4. Analisi dengan menggunakan mikroskop electron
Scanning analisis mikroskop elektron dilakukan dengan menggunakan
ZESS EVO-50 SEM. film tipis dari sampel disusun dilapisi pita karbon dengan
menempatkan jumlah yang sangat kecil dari sampel di grid, sampel tambahan
diangkat dengan menggunakan kertas blotting dan kemudian film di grid SEM
dikeringkan dengan menempatkan di bawah lampu merkuri selama 5 menit.
Analisis SEM digunakan untuk menentukan struktur
produk reaksi yang terbentuk. Gambar SEM telah menunjukkan partikel seng
individu serta sejumlah agregat.
3.2.5. Tes Antimikroba
Alat tes antimikroba dilakukan pada budaya patogen manusia Proteus
vulgaris dan Aspergillus niger dengan metode difusi cakram standar. Secara
singkat kaldu nutrisi / kultur bakteri agar dan Agar Sabauroud Dextrose
digunakan untuk menumbuhkan budaya jamur. Budaya dilakukan selama
semalam dengan inokulum 100μl dari masing-masing budaya yang tersebar
pada nutrisi piring media agar. Cakram kertas steril dengn diameter 6mm
mengandung nanopartikel 50μg / ml seng oksida dengan masing-masing
bakteri dan jamur antibiotik standar.
 BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Tanaman yang mudah tersedia aman dan nontoxics dalam kebanyakan kasus
memiliki berbagai macam metabolit yang dapat membantu dalam pengurangan
ion logam, dan lebih cepat daripada mikroba dalam sintesis partikel adalah
keuntungan utama menggunakan ekstrak tanaman untuk sintesis nanopartikel.
Mekanisme utama dipertimbangkan untuk proses tanaman ini, dibantu
pengurangan karena fitokimia. Nanopartikel logam secara tradisional disintesis
dengan menggunakan bahan kimia, metode biologis energi tekanan tinggi, suhu
dan bahan kimia beracun dalam salam sintesis berdasarkan biomaterial partikel
dari bagian tanaman ekstrak, bakteri, buah pepaya, dan jamur telah ditemukan
untuk biaya efektif , cara termudah. sintesis yang cepat dan ramah pendekatan
lingkungan. Beberapa pendekatan telah digunakan untuk memperoleh sintesis
yang lebih baik dari nanopartikel seng oksida seperti kimia dan metode biologi.
Baru-baru ini, sintesis nanopartikel logam menggunakan ekstrak tanaman semakin
populer. Punica granatum ekstrak air dari kulit seng nitrat, warna media reaksi
berubah cepat dari berwarna ke kecoklatan pasta kuning rasio yang sama
(Gambar. 4.1). Hasil yang sama dilaporkan oleh pekerja sebelumnya bahwa warna
menunjukkan permukaan plasmon getaran khas nanopartikel seng oksida.
Meskipun tidak ada puncak absorbansi yang diamati dalam kontrol plasmon
permukaan penyerapan puncak karakteristik pada 364nm diamati 24 jam. Yang
mencapai intensitas maksimum setelah 48 jam dalam intensitas pada 364nm
diamati menunjukkan pengurangan lengkap seng ion juga menyatakan beberapa
temuan dari nanopartikel.
 Gambar 4.1. Absrbansi spektrum UV-Visible nanopartikel seng oksida
disintesis oleh paparan dari ekstrak kulit Punica granatum dengan seng
nitrat konsentrasi yang sama.

Tabel 4.1. Mikrograf electron scanning dari eksrak air kulit punica granatum
S. No Wavelengths Observation
1 364 nm 2.613
2 301 nm 4.000
3 346 nm 2.405

Mikrograf elektron scanning dari ekstrak air kulit Punica granatum diobati
dengan 5gram seng nitrat menunjukkan terlihat jelas pada pembesaran tinggi di
seng nitrat diperlakukan ekstrak kulit Punica granautm . Fenomena bola dan
persegi seperti struktur yang diamati dibentuk dengan diameter 50-100nm dan
serupa yang dilaporkan pada nanopartikel biologis disintesis stabil selama lebih
dari enam bulan dan menunjukkan sangat sedikit agresi. Selain itu, badan plasmon
yang diperluas selama penyerapan panjang gelombang menunjukkan ukuran,
bentuk, dan distribusi mereka dari partikel serupa di suspensi berair.
 Gambar 4.2. Pemindaian mikroskop elektron citra sintesis oksida seng
nanopartikel oleh paparan dari ekstrak air kulit Punica granatum.

Hasil aktivitas antimikroba sintesis nanopartikel seng oksida oleh rute

hijau ditemukan sangat beracun terhadap budaya patogen multidrug resistant
manusia bakteri dan jamur. nanopartikel seng oksida menunjukkan aktivitas
antimikroba terhadap Proteus vulgaris dan Aspergillus niger karena menunjukkan
zona hambat jelas pada konsentrasi 50μg / hasil ml. Hasil yang sama juga
dilaporkan pada konsentrasi yang sama dan antibiotik standar seperti efek
streptomisin sulfat. Antimicrobial seng oksida nanopartikel mematuhi mekanisme
aksi ganda aktivitas antimikroba yaitu, efek bakteri dan fungisida ion seng
membran efek dari subunit polimer mengganggu. Aktivitas mikroba partikel
tergantung pada stabilitas di media berbudaya juga. Oleh karena itu untuk
menggunakan seng di berbagai bidang terhadap mikroorganisme, itu perlu
disiapkan partikel seng dengan metode yang efektif biaya dan untuk mengetahui
mekanisme aktivitas antimikroba ada yang mengkhawatirkan dilaporkan infeksi
jamur oportunistik. Hasilnya menegaskan bahwa sel-sel mikroba yang
diperlakukan rusak menunjukkan kebocoran protein dan asam nukleat dalam
media nutrien agar. Partikel-partikel ini yang dapat disusun secara efektif
sederhana, cepat dan biaya yang cocok untuk perumusan jenis baru bahan
mikroba.
 A

C
C
C
C
C
C

Gambar 4.2. aktivitas antimikroba dari 50μg / ml (Bakteri dan Jamur) zinc oxide
nanopartikel (A) Proteus vulgaris (C) Aspergillus niger dan standar
antibiotik (B) Proteus vulgaris (D) Aspergillus niger komparatif
representasi dari zona hambatan.
Tabel 4.2. Zona inhibisi dengan metode difusi disk
Zinc oxide
Antibiotics
nanoparticles
S.No Culture name 50μg/ml
50μg/ml

Proteus vulgaris
1 15 mm 13 mm

Aspergillus niger
2 19 mm 16 mm

Infeksi yang disebabkan oleh jamur oportunistik termasuk di bawah

spektrum baru patogen jamur. Hasilnya menunjukkan nanopartikel oksida seng
mungkin diekskresikan aktivitas antijamur dengan mengganggu struktur membran
sel dan menghambat proses pemula normal karena kerusakan integritas membran.
Baru-baru ini nanopartikel terutama Fe3O4, ZrO2 dan MgO menunjukkan
aktivitas antimikroba terhadap patogen mata. Umumnya, nanopartikel mengikat
dengan thiol (-SH) kelompok protein yang merusak dinding sel. Tapi dalam kasus
bakteri resistensi, mekanisme kemungkinan aktivitas, nanopartikel MgO mungkin
menghambat produksi enzim β-laktamase yang terlibat dalam proses penonaktifan
obat atau partikel memblokir jalur pompa penghabisan yang melibatkan proses
eliminasi obat.
 BAB V
SIMPULAN DAN ALUR PENELITIAN SELANJUTNYA
Bio-pengurangan ion seng berair dengan ekstrak kulit tanaman Punic
granatuma telah dibuktikan. Pengurangan ion logam melalui kulit ekstrak yang
mengarah pada pembentukan nanopartikel seng oksida dari dimensi cukup
didefinisikan dengan baik. Tapi kemampuan bagian tanaman lain seperti
pengelupasan kulit sebagai capping dan reduktor tidak diuji dan tidak
didefinisikan dengan baik. Dalam penelitian ini kami menemukan bahwa kulit
bisa juga sumber yang baik untuk sintesis nanopartikel seng oksida. Pendekatan
kimia hijau menuju sintesis nanopartikel oksida seng memiliki banyak
keuntungan seperti, kemudahan dengan yang proses dapat bescaled up. kelayakan
ekonomi, dll penerapan nanopartikel ecofriendly seperti di bakterisida, luka
penyembuhan dan aplikasi medis dan elektronik lainnya membuat metode ini
berpotensi menarik untuk sintesis skala besar bahan anorganik lainnya. Studi
toksisitas nanopartikel oksida seng pada patogen manusia membuka pintu untuk
berbagai baru agen antimikroba. Uji aktivitas antimikroba diperiksa dengan
metode difusi cakram menunjukkan bahwa pada 50μg / konsentrasi ml,
nanopartikel seng oksida memiliki sifat antimikroba yang lebih baik. Namun,
pada konsentrasi tinggi aktivitas antimikroba dari nanopartikel oksida seng dan
seng nitrat relatif dekat satu sama lain.