4.

3 Citogenética en
medicina
GUERRERO JUÁREZ DANA SHAOLIN
JUÁREZ HERRERA JESSICA NOEMI
LÓPEZ SEVERINO JESÚS VALDEMAR
PEREZ PINEDA MA. GUADALUPE
PUENTE MENDEZ AGUEDA MONSERRAT
 4.3.1. Cromosomas:
Definición
Características
Clasificación

TEMAS 4.3.2. Cariotipo:

Definición
Características
4.3.3. Alteraciones cromosómicas:
Definición
Mecanismos
Importancia biomédica
cromosomas

Metafase
Son la versión condensada de la
cromatina nuclear

Es una molécula
compacta de DNA

Cromátida
Centrómero Telómero

Cromátida
 Centrómero Mantiene unidas las cromátidas hermanas
Cromatina centromérica

secuencia de DNA de 171 pd

repetidas 1700 y 29000.

Final físico
Secuencia TTAGGG 10,000 pb
Triple hélice
Prevenir la fusión de la punta de los
Telómero cromosomas “pegajosos”
Nucleasas
meta submeta acro telomerasa
clasificación 7 grupos en orden descendente de tamaño del A al G.

16, 17 y 18
1, 2, y 3 grupo E pequeños
grupo A mayor tamaño XX
grupo B 4y5 19 y 20
grupo F
pequeños

grupo C
gpo. más numeroso XY
6 al 12 grupo G 21 y 22
tamaño medio los más pequeños

grupo D tamaño mediano

13, 14 y 15

AUTOSOMAS
Acrocéntrico SEXOCROMOSOMAS
Metacéntrico

Submetacéntrico
 citogenética
Es el estudio que se realiza de los
cromosomas en el cuerpo humano y de todas
las enfermedades que se encuentran
relacionadas con ellos las cuales pueden ser
causadas por un daño en la estructura o
número de los mismos.

No se sabía si el número de
cromosomas era constante:
Desde mediados del siglo XIX 1. Mitosis el núcleo se
hasta finales del XX NO se desorganiza y se ven los
cromosomas
sabia el numero de 2. Interfase el núcleo bien
cromosomas. definido, no visible.
● 1956 los 1959, Lejeune ( Padre
de la Genética
investigadores Moderna) dijo que el
Levan y Tjio Síndrome de Down se
debe a la presencia
establecieron de un cromosoma
extra
que la especie
humana tiene 46
cromosomas
1960, Moorhead describió
que los linfocitos se
diferencian en la sangre
periférica pero que podrían
entrar en mitosis in vitro
cariotipo
● Dotación cromosómica
completa de un individuo
o una especie, que puede
observarse durante la
mitosis.

● Es el conjunto de
cromosomas de una célula
o individuo
determinados, ordenados
según su tamaño, forma y
características.
 características
1. 22 pares de
cromosomas
autosómicos.
2. 1 par sexuales o
heterosómicos. (XX o
XY)
3. Cuerpo o Corpúsculo
de Barr
Prueba Citogenética
Preparación del cultivo celular.

1. Toma de muestra.
2. Prepare una jeringa estéril de 5 ml
con una aguja de calibre 21
3. Inserta la aguja en la jeringa y
extrae una pequeña cantidad de
muestra.
4. Abra la botella de cromosoma
medio y coloque de cinco a diez
gotas de sangre en el medio.
Incubación:

1. Mezcle el medio y la sangre

inversión suave y colocar el
botella en una incubadora
precalentada en
37ºC.
2. Incubar durante 70 horas.
3. Mezcle suavemente por inversión
dos veces a
día durante la incubación. Detener la división celular en metafase:
1. Precalentamiento del Colcemid en
el incubador a 37 ° C.
2. Agregue 0.05 ml (50 1) de
precalentado del Colcemid al cultivo
anterior.
3. Agregue 0.05 ml (50 1) de
precalentado.
Tratamiento hipotónico de las
células rojas y blancas:

1. Retire la sangre y el Colcemid

de la incubadora y mezclar
suavemente.
2. Centrifugar durante seis
minutos a las
500-900 rpm
3. Después de seis minutos,
apague el centrifugador.
4. Retire el sobrenadante con la
pipeta Pasteur.
5. Agregue 5 ml de agua
templada de 37ºC solución
hipotónica al tubo.
6. Mezcle bien toda la solución
hipotónica con las células.
7. Coloque la solución mezclada
en la incubadora
Solución de fijación:

● tres partes refrigeradas de

Preparación de celdas:
metanol. 1. Agregue 5 ml de solución de fijador
● una parte de ácido acético glacial. al tubo de centrífuga
2. Con una pipeta pasteur, mezcle el
fijador y botón de células
1. Después de nueve minutos, centrifuge 3. Después de la refrigeración,
durante seis minutos a 500 a 900
centrifugue el tubo durante seis
rpm.
2. Retire el sobrenadante, dejando minutos a 500 a 900 rpm
1/4 o 1/2 ml de líquido en la parte superior 4. Agregue otros 5 ml de fijador frío
del botón de celdas. 5. Centrifugar el tubo por seis
minutos a 500 a 900 rpm
6. Repetición de los anteriores pasos.
7. Eliminar el abandono supernate
aproximadamente 1/2 ml de fluido
en la parte inferior del tubo.
1, Mantenga las diapositivas en agua destilada en el
refrigerador.
Hacer las diapositivas cromosómicas
2. Coloque cinco o seis diapositivas al lado de cada
otro en toallas de papel con alrededor de 1 cm de
separación entre
ellos.
3. Retirar todo el contenido del tubo de centrífuga en
un pasteur
pipeta.
4. Desde una altura de aproximadamente 18
pulgadas, soltar dos o tres gotas de líquido en cada
diapositiva
5. Permita que las diapositivas se sequen por
completo.
6. Mancha las diapositivas por inmersión en tinción
de giemsa fresca de 6 a 10 minutos.
7. Retire las diapositivas de la mancha y enjuague
con agua destilada hasta todo el exceso de manchas
se elimina.
8. Permita que las diapositivas se sequen
 Bandas gtg

La técnica de bandeo cromosómico consiste en

someter a los cromosomas a desnaturalizaciones,
digestión enzimática o ambos, seguido de una
tinción con colorante específico para ADN.

● Hacer correlación cariotipo-fenotipo y
delinear nuevos síndromes cromosómicos.
● Localización y mapeo de genes en
cromosomas y bandas específicas.
● Bandeo G es la técnica que en todo el mundo
se usa como referencia de la diferenciación
longitudinal de los cromosomas.
Procedimiento:
1. Primero de todo se necesitan células
en metafase
2. Se las somete a una digestión
(desnaturalización) controlada de
proteínas con tripsina
3. Al final, se tiñen durante unos
momentos con Giemsa.
Resultados:
● patrón de bandas
característico y repetible para
cada cromosoma y cada brazo
dentro de cada cromosoma.
● bandas positivas (las que se
tiñen y se observan oscuras)
se producen por la tinción de
proteínas ricas en puentes
disulfuro.
● Las bandas negativas (claras)
presentan por otra parte
proteínas ricas en grupos
sulfidrilos (-SH). NO GENES
CODIFICANTES
bandas cbg Bandas C, con hidróxido de bario
contrateñidas con Giemsa.
Rearreglos cromosómicos, polimorfismo
y cromosomas marcadores.

Desnaturalización y PROCEDIMIENTO:
renaturalización del DNA 1. Las laminillas sumergirlas en ácido
cromosómico clorhídrico durante 10 min.
2. Enjuagar en 3 Koplin con 50 mL de
● Solución de ácido agua destilada dur. 1 min.
clorhídrico 3. Introducir en 50 mL de hidróxido de
● Hidróxido de Bario Ba a 45°C.
● Soluciones salinas 4. Enjuagar en 3 Koplin con 50 mL de
citratadas a altas agua destilada dur. 1 min.
temperaturas 5. Pasar las laminillas a otro Koplin de
● Tinción de Giemsa solución de citratos a 65°C dur.
60-90 min.
Las bandas C: 6. Lavar en un Koplin con 50 mL de
Tiñen la heterocromatina agua destilada dur. 1 min.
constitutiva en cromosomas 7. Teñir con Giemsa.
1, 9, 16 y Y.
BANDAS nor PROCEDIMIENTO:
1. Sumergir las laminillas en acido
Tiñe regiones sulfurico x 7min.
NOR 2. Lavar en 50 mL de agua destilada
x 30 seg.
RNA ribosomal 3. dejar secar a TA.
4. Adicionar nitrato de plata en
formaldehido y colocar un
brazos cortos
cubreobjetos.
5. Colocar en un cámara húmeda a
Polimorfismos 60° C x 10 min.
6. Lavar con agua destilada y agregar
solución amortiguadora de
Sorensen.
bandas q
Primera técnica de bandeo para
cromosomas humanos.

PROCEDIMIENTO:
1. Introducir las laminillas
en solución mostaza
de quinacrina y agua
quinacrina; se une al DNA y
destilada x 20 min.
produce fluorescencia.
2. Enjuagar en agua
Excepto en crom. 1, 9 y 16.
destilada x 5min.a TA.
3. Dejar secar protegida
de la luz.
4. Pone solución de
Sorense.
replicación tardía del “x” y bandas R
Opuesto al bandeo “G” y
“Q”

PROCEDIMIENTO
1. Incubar x 47- 48 horas.
2. Agregar BrdU, regresar a la estufa de
cultivo hasta las 52 h.
3. Dejar madurar por 1 dia.
4. Meter en solución de trabajo de Hoechst
x10 min.
5. Lavar x 30 seg en solución Latt.
6. Introducir en solución salina citratos a
60°C x 1 hr.
7. Lavar en solución Latt x 30 seg.
8. Teñir en Giemsa.
alteraciones cromosómicas
● Son mutaciones de material genético que alteran el número
o la estructura de los cromosomas
● En la mayoría de los casos son visibles al microscopio
óptico
● Sus efectos son en general consecuencia del desequilibrio
producido y dan origen a malformaciones, deficiencia
mental e infertilidad
Alteraciones numéricas.
-En individuos con una variación en el número de cromosomas.
-Un cromosoma menos o un cromosoma de más.
Poliploidía 46 23

● También se conocen como euploidías.

● Variaciones en el número normal de
cromosomas (2n).
● Las variaciones son múltiplos del
número haploide; 3n, 4n, 5n.
-Triploidía. -Prod. Trip. por diginia pueden
sobrevirir más.
-Retraso en el crecimiento
intrauterino con macrocefalia
➔ Más frecuente y se identifica después de una pérdida gestacional. relativa, placenta muy pequeña y
➔ Cariotipo 69, XXX, 69, XXY o 69 XYY. oligohidramnios.

➔ Se lleva a cabo por dos mecanismos: diginia y diandria.

A. Fertilización normal.
B. Diginia: un espermatozoide haploide
normal fertiliza un óvulo con doble
contribución genética debido a que
incorpora su segundo cuerpo polar al
núcleo.
C. Diandria: un óvulo haploide es
fertilizado de forma simultánea por dos
espermatozoides o uno diploide (raro).
Haploidía.
➔ Organismo que posee una constitución cromosómica igual a la de los gametos de la especie.
➔ La mitad de los cromosomas.

Aneuploidía.
➔ Desbalance.
➔ Hay ganancia o pérdida de cromosomas individuales.
➔ Ocurren en 3 a 4% de los embarazos reconocidos.
➔ Las más comunes son la trisomía y la monosomía.

Aneuploidías con
Disómico. Un haploide
cromosomas completos
anormal que lleva dos copias
de un cromosoma.
Aneuploidías con cromosomas
incompletos.
Monosomías o trisomías
parciales, estas forman parte de
las aberraciones estructurales.

Si la no disyunción ocurre en meiosis I, se pueden

generar dos gametos disómicos y dos gametos
nulisómicos.
Gameto nulisómico dará
origen a un producto con
monosomía,
Gameto disómico a un
producto con trisomía.

Si la no disyunción ocurre en meiosis II se

pueden generar dos gametos normales
(monosómicos), un gameto disómico y un
gameto nulisómico.
 estructurales

Ocurre cuando el material de un cromosoma individual es interrumpido o reubicado de

algún modo. Como consecuencia, esto puede conducir al exceso o a la carencia de material
cromosómico.
DEleciones
Pérdida de material cromosómico.
Pérdida de un extremo de uno de los
brazos cromosómicos y la
subsecuente regeneración
Terminales telomérica.

Pérdida de un segmento dentro de

Intersticiales uno de los brazos de un cromosoma
(se genera por dos roturas en un
brazo) y reunión de extremos.
Duplicaciones
Representan ganancia de material cromosómico

Cuando la ganancia se encuentra contigua al

segmento de origen se le conoce como
duplicación en tándem

● Tándem directa: Si conserva la dirección

de la información original
● Tándem inversa: Si cambia el sentido de
la misma
Anillos
Son cromosomas circulares que se originan por
la pérdida de los extremos terminales de ambos
brazos y la subsecuente reunión de los
segmentos rotos.

Los anillos pueden formarse con la fusión de los

Céntrico cuando contiene centrómero y acéntrico telómeros sin pérdida de regiones subteloméricas
cuando carece de él. y por consiguiente sin anormalidades clínicas.
cromosoma marcador
Son pequeños cromosomas cuya identificación se
complica debido a su tamaño y morfología

Contienen una pequeña porción de material

alrededor del centrómero

Algunas ocasiones tienen genes funcionales y se

presentan de manera supernumeraria.
isocromosoma
Cromosoma que muestra una imagen en
espejo de dos brazos cromosómicos iguales a
ambos lados del centrómero.

Puede ser supernumerario provocando una

tetrasomía del brazo cromosómico involucrado
y monosomía del brazo faltante.

El mecanismo por el cual se originan estos

cromosomas es ruptura y fusión de las
cromátidas hermanas de un cromosoma
duplicado, involucrando el centrómero.
También se propone la división horizontal
del centrómero conocida como fisión centromérica

Esta alteración puede ser meiótico o poscigótico.

Un isocromosoma puede ser isodicéntrico, el cual

posee dos centrómeros.
inserción
Cuando un fragmento de un cromosoma se Inserción directa: El fragmento puede
integra en otro ser insertado con la misma orientación
con respecto al centrómero
Para que suceda:requiere de tres puntos de
ruptura los primeros dos crearán el fragmento Inserción invertida: posición invertida
que después se insertará en donde se realice el
tercer punto de rotura en el cromosoma
receptor.

Se puede llevar en diferentes cromosomas:

Intercromosómica: hay un cromosoma donador
y un cromosoma receptor.
Intracromosómica: una región diferente dentro
del mismo cromosoma
Inversiones
Rearreglos estructurales
intracromosómicos que
requieren de dos puntos de
rotura dentro del mismo
cromosoma para generar un
segmento que gira 180°.
translocaciones
Intercambio de dos
segmentos cromosómicos
entre dos o más
cromosomas.

Recíprocas
Se generan por roturas en
dos diferentes cromosomas,
seguidas por un intercambio
de material entre los dos
cromosomas involucrados,
por lo general no homólogos
Robertsonianas
Se forman por la rotura a nivel de
centrómeros y fusión de brazos largos
de dos cromosomas acrocéntricos
originando un cromosoma metacéntrico
o submetacéntrico, de tal manera que
los portadores balanceados de una
translocación robertsoniana tienen un
cariotipo con 45 cromosomas
tipos de segregaciones y cruz de paquiteno CRUZ DE
PAQUITENO*

Segregación 2.2 cuando se distribuyen dos cromosoma a cada una de las recombinacion
células.
Segregación 3.1 tre cromosomas a una celula y solo uno a la celula hermana.

Tipos de segregación 2:2. Segregación 3:1. se aparean *

1. Alterna. Cromosomas 1. Terciaria, segregación de los cuadrivalente
normales a una célula y cromosomas normales y un
cromosomas derivativos a derivativo a una célula; y el
otra. otro derivativo a la célula
2. Adyacente 1. Se distribuyen hermana. cromosomas
los cromosomas adyacentes 2. Intercambio, en una célula se involucrados
en la cruz con centrómeros no distribuyen los cromosomas aparean
homólogos a cada una de las derivativos y un normal; y en cromosomas
células. la célula hermana se homologo
3. Adyacente 2, segregación de segrega sólo el otro
cromosomas adyacentes en la cromosoma normal.
cruz de paquiteno con posible
centrómeros homólogos. continuar con
el proceso
meiotico
importancia biomédica
● Pueden condicionar
repercusión clínica muy
importante:
○ retraso mental y del
crecimiento
○ defectos congénitos
● En etapa prenatal son una
de las causas más
frecuentes de pérdidas
gestacionales
Bibliografía
Del Castillo Ruiz. Victoria.
Genética. Editorial Manual
Moderno. 2012. Edición 1ra.
Español. ISBN 9786074482515

Tema 37: El Cariotipo Humano.

http://mural.uv.es/monavi/disco/p
rimero/biologia/Tema35.pdf