KAJIAN POTENSI EFEK ANTIDEMENSIA EKSTRAK BROKOLI

(Brassica oleracea L. var. Italica Plenck) DAN PEGAGAN (Centella asiatica L. Urban)
PADA MENCIT YANG DIINDUKSI SKOPOLAMIN

Agni Nihaya, Min Rahminiwati2 dan Erni Rustiani3

1.
Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas Pakuan, Bogor.

ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk Menetapkan dosis efektif dari kombinasi ekstrak brokoli dan
pegagan sebagai antidemensia pada hewan coba mencit. Hewan uji yang digunakan 25 ekor mencit
jantan galur usia 4 bulan dengan berat badan ± 25 gram. Mencit dibagi dalam 5 kelompok masing-
masing 5 ekor. Kelompok perlakuan mencit terdiri atas dosis 1 (0,023 g) merupakan dosis awal,
dosis 2 (0,069 g) merupakan kenaikkan 3x dari dosis awal, dosis 3 (0,0076 g) yang merupakan
penurunan 3 x dari dosis awal dan dosis 2, kelompok kontrol positif yang diberikan prostigmin dan
kelompok negatif yang hanya diberikan makan pakan dan minum.
Berdasarkan hasil, dapat dinyatakan bahwa pemberian ekstrak herba penelitian selama 14
hari pada semua dosis efektif meningkatkan daya ingat. Dosis 2 (0,069 g/kg BB) mempunyai
efektivitas terbaik untuk mencegah penurunan daya ingat dan efeknya sebanding dengan kontrol
positif.

Kata Kunci: Antidemensia, Brokoli, Pegagan, Jeruk Nipis

ABSTRACT
This study aimed to determine the effect of a combination of extracts of long bean and
tomato on blood glucose levels male rats induced alloxan. Test animals were used 25 rats (Rattus
norvegicus) male Sprague Dawley strain age of 2 months with body weight ± 200 grams. White mice
were divided into 5 groups of 5 mice each. Hyperglycemic treatment conducted on mice with blood
glucose levels ≥ 200 mg / dL after induction. The treatment group consisted of mice doses of 1
(0,0202g long bean and tomato 0,006g) which is a decrease of 5 x of the initial dose, dose 2 (0,1008g
long bean and tomato 0,03g) which is an initial dose, 3 doses (0.504 g long bean and tomato 0,15g)
which represents an increase of 5 x of the initial dose, the positive control group were given
metformin and negative group were only given food to eat and drink.

Keyword: Antidementia, Brocoli, Pegagan, Citrus

PENDAHULUAN tersebut vitamin C dapat mencegah terjadinya

Istilah pikun dalam dunia medis dikenal
sebagai demensia. Menurut World Health
Organization dalam Jefferies dan Agrawal (2009),
demensia adalah sindroma klinis yang meliputi
hilangnya fungsi intelektual dan memori yang
sedemikian berat sehingga menyebabkan disfungsi
hidup sehari-hari. Sampson, et. al. (2004) juga
menambahkan bahwa makna inti dari demensia
pada usia muda (Young Onset Dementia) dan
demensia pada usia produktif (Working Onset
Dementia) adalah timbulnya gejala demensia
berupa penurunan kognitif dan memori pada orang
dengan usia dibawah 65 tahun.
Brokoli (Brassica olaracea L.var Italica)
merupakan salah satu famili dari Brassicaceae
yang mengandung senyawa kimia seperti
glukosinolat, senyawa fenolik, serat dan senyawa
antioksidan seperti vitamin C dan E serta mineral
(Ca, Mg, Se,dan K) (Moreno, 2006). Menurut hasil
penelitian Profesor Gabriele Nagel dan Profesor
Christine von Arnim dari Universitas Ulm,
penderita Alzheimer memiliki kadar vitamin C
yang rendah dalam plasma. Berdasarkan penelitian
demensia atau kepikunan (Riviere 1998).
Khasiat tanaman pegagan (Centella asiatica
(L)) telah dilaporkan diantaranya sebagai anti–
neoplastik, pelindung tukak lambung, menurunkan
tekanan dinding pembuluh darah, mempercepat
penyembuhan luka, analgesik, antiinflamasi,
peningkatan kecerdasan, antisporasis, antiagregasi
platelet dan anti trombosis (Badan POM, 2007).
Khasiat pegagan antara lain untuk meningkatkan
vitalitas dan daya ingat, mengatasi pikun,
mengatasi tulang keropos pada lansia,
meningkatkan kecerdasan pada anak-anak, obat
penyakit kulit, antikanker, untuk kosmetika,
epilepsi dan hepatitis akut. Pegagan dapat
meningkatkan short term memory dan kemampuan
belajar (Ramasamy, 2005).
METODE PENELITIAN
Pengumpulan Bahan
Bahan – bahan yang digunakan dalam
penelitian ini antara lain : brokoli, pegagan, jeruk
nipis, air suling, mencit jantan, pakan mencit,
skopolamin, prostigmin, Bouchardat LP, Mayer

1
LP, Dragendorff LP, etanol 95 %, serbuk
magnesium (Mg), asam klorida 2 N (HCl), asam
klorida pekat, larutan gelatin 10 %, natrium klorida
10 % (NaCl), asam asetat anhidrat.
Pembuatan Sari Kacang Panjang Dan Tomat
Sari brokoli dan sari pegagan dibuat dari
brokoli dan pegagan segar. Setelah kedua tanaman
tersebut dicuci bersih dengan air mengalir untuk
menghilangkan kotoran atau bahan organik asing
yang terdapat dalam tanaman seperti tanah, debu,
batu. Pembuatan sari dengan menggunakan juicer
dari 5 kg brokoli dan 5 kg pegagan diperoleh
1800 g sari yang telah ditambahkan 20 mL air
perasan jeruk nipis. Sari dikeringkan dengan
vacuum evaporator diperoleh ekstrak kering
sebanyak 15,7 g.
Analisis Fitokimia
Uji Alkaloid
Ekstrak kering 50 mg dilarutkan dengan 9 mL
air suling dan 1 mL HCl 2 N, kemudian dipanaskan
diatas penangas air selama 2 menit lalu
didinginkan, selanjutnya disaring dan filtrat
digunakan sebagai larutan percobaan yang akan
digunakan dalam pengujian berikut :
a. Sejumlah 1 mL filtrat pada kaca arloji,
ditambahkan 2 tetes Bouchardat LP. Hasil
positif ditujukan dengan adanya endapan
coklat hitam.
b. Sejumlah 1 mL filtrat pada kaca arloji,
ditambahkan 2 tetes Mayer LP. Hasil positif
ditujukan dengan adanya endapan putih atau
kuning yang larut dalam methanol P.
c. Sejumlah 1 mL filtrat pada kaca arloji,
ditambahkan 2 tetes Dragendorff LP. Hasil
positif ditujukan dengan adanya endapan
jingga coklat. (DepKes, 1995).
Uji Flavonoid
Ekstrak kering 50 mg dilarutkan dalam 5 mL
etanol 95 %, sebanyak 2 mL larutan ekstrak
ditambah 0,1 g serbuk magnesium dan 10 tetes
asam klorida pekat, dikocok perlahan. Warna
merah jingga hingga merah ungu yang terbentuk
menunjukan positif adanya flavonoid, jika terjadi
warna kuning jingga menunjukan adanya flavon,
kalkon dan auron (DepKes, 1995).
Uji Saponin
Ekstrak kering 50 mg yang dimasukan
kedalam tabung reaksi, ditambahkan 10 mL air
suling panas, didinginkan dan kemudian dikocok
kuat-kuat selama 10 detik. Hasil positif ditandai
dengan terbentuknya buih yang mantap selama
tidak kurang dari 10 menit, setinggi 1 cm sampai
10 cm. Pada penambahan 1 tetes asam klorida 2 N
buih tidak hilang (DepKes, 1995).
Uji Tanin
Ekstak kering ditimbang Sebanyak 1 g,
kemdian ditambahkan 100 mL air, dididihkan
selama 5 menit, disaring 10 mL filtrat ditambahkan
2
FeCl3 1 %, jika terbentuk warna hitam kehijauan
atau biru menunjukkan adanya tanin (Fransworth,
1966).
Uji Terpen
Ekstrak kering 50 mg dilarutkan dalam 2 mL
kloroform, kemudian tambahkan dengan hati-hati 3
mL asam sulfat pekat. Terbentuknya warna coklat
kemerahan pada permukaan dalam larutan,
menunjukkan adanya terpenoid (Edeoga dkk,
2005).
Pemeliharaan Hewan Coba
Hewan coba yang digunakan pada penelitian
ini adalah mencit putih berumur 3-4 bulan dengan
bobot sekitar 20-25 g. Sebanyak 25 ekor mencit
dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan, masing-
masing kelompok terdiri dari 5 ekor. Selama
penelitian semua kelompok mencit diberi pakan
pellet dan minum secara ad libitum.
Semua hewan coba tersebut diberi perlakuan
selama 2 minggu (14 hari). Pada hari ke-15, satu
jam sebelum uji short term memory dilakukan,
pemberian prostigmin i.p (kontrol +), dan ekstrak
p.o (dosis 1, 2 dan 3). Induksi skopolamin 30 menit
setelah pemberian pada perlakuan kontrol + dan
dosis 1, dosis 2, dosis 3. Pemberian skopolamin
diberikan pada semua perlakuan.
Pemberian Herba
Hewan coba dibagi menjadi 5 kelompok
perlakuan dengan masing-masing 5 ekor/kelompok
yaitu:
1. Kontrol (+) : Prostigmin (0,1 mg/kg BB
i.p),dilarutkan air garam 0,9 %
2. Kontrol (–) : pakan dan minum
3. Dosis 1 : Ekstrak kering (0,023 g/0,8 mL p.o),
dilarutkan dalam akuades
4. Dosis 2 : Ekstrak kering (0,069 g/0,8 mL p.o),
dilarutkan dalam akuades
5. Dosis 3 : Ekstrak kering (0,0076 g/0,8 mL
p.o), dilarutkan dalam akuades
Induksi skopolamin (2 mg/kg BB i.p),
dilarutkan dalam akuades dan diberikan pada
semua perlakuan.
Uji Y maze
Mencit awalnya ditempatkan dalam lengan A,
setiap perjalanan mencit di dalam Y maze direkam
selama 10 menit. Jumlah lengan yang masuk
dicatat dan dihitung. Rumus yang digunakan
sebagai berikut:
Total pergantian
% pergantian = × 100 %
Total lengan masuk - 2
Contoh total lngan masuk
ABCBCACBCBCACBABAACB dan total
pergantian yang dihitung 3 huruf seperti
ABC,BCA,CBA,ACB, Sedangkan untuk 3 huruf
seperti ABA,CAC,CBC,BCB tidak dihitung.
Jumlah lengan masuk berfungsi sebagai indikator
aktivitas lokomotor selama 10 menit didalam Y Tabel 2. Hasil Kadar Abu
maze. ulangan Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak
Analisis Data Brokoli Pegagan Jeruk Campuran
Data-data yang diperoleh dianalisa dengan Nipis
analisis sidik ragam untuk rancangan acak lengkap
1 6,61 % 6,72 % 6,33 % 5,99 %
(RAL) dengan menggunakan program SPSS.
2 6,86 % 6,71 % 7,43 % 6,13 %
HASIL DAN PEMBAHASAN Rata-rata 6,735 % 6,715 % 6,88 % 6,06 %
Hasil Pembuatan Sari Brokoli dan Pegagan
Brokoli, pegagan dan jeruk nipis telah di Hasil Analisis Fitokimia
determinasi bahan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Uji fitokimia merupakan salah satu langkah
Indonesia (LIPI) Pusat Konservasi Tumbuhan penting dalam upaya mengungkap potensi sumber
Kebun Raya Bogor. Hasil determinasi menyatakan daya tumbuhan obat. Terutama untuk mengetahui
tanaman tersebut brokoli yang termasuk ke dalam golongan senyawa yang terkandung dalam suatu
keluarga Brassicaceae, genus Brassica dan jenis tanaman. Hasil analisis fitokimia dapat
Brassica oleracea Var italica, pegagan termasuk ke memberikan petunjuk jenis golongan metabolit
dalam keluarga Apiaceae, genus Centella dan jenis sekunder, seperti alkaloid, flavonoid, saponin dan
Centella asiatica (L.) Urban dan jeruk nipis tanin.
termasuk kedalam keluarga Rutaceae, genus Citrus Tabel 2. Hasil Analisis Fitokimia
dan jenis Citrus aurantifolia. Hasil determinasi
Ekstrak Ekstrak
dapat dilihat pada Lampiran 4. Ekstrak kering yang Ekstrak Ekstrak
kering kering
dibuat dari 5 kg brokoli segar dan 5 kg pegagan kering kering
jeruk campuran
brokoli pegagan
segar didapatkan 1800 g sari dan rendemen 18 %. nipis
Sari yang yang diperoleh setelah di keringkan Flavonoid + + + +
dengan vacuum evaporator adalah sebanyak 15,7 g
dan rendemen 0,872 %. Alkaloid + + - +

Tanin - + - +
Hasil Uji Kadar air
Uji kadar air ini dilakukan untuk memberikan Terpenoid + + - +

batasan minimal atau rentang besarnya kandungan Saponin + + + +

air dalam suatu bahan (DepKes RI, 2000), karena
dengan adanya kandungan air yang banyak dapat Pada uji fitokimia ekstrak campuran
menjadi media pertumbuhan mikroba, kapang dan menunjukkan hasil positif terhadap uji flavonoid,
mikroorganisme sehingga dapat menyebabkan alkaloid, tanin, terpenoid dan saponin.
perubahan kimia pada senyawa aktif.
Tabel 1. Hasil Kadar Air Hasil Induksi Skopolamin Terhadap Hewan
Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak Coba
Brokoli Pegagan Jeruk Campuran Induksi penurunan daya ingat jangka pendek
Nipis dilakukan dengan skopolamin dosis 2 mg/kg BB ip
(intra peritoneal) yang diberikan pada hari ke-15.
1 3,72 % 3,79% 3,12 % 3.35 % Skopolamin meningkatkan asetilkolinesterase baik
2 3,69 % 3,75 % 2,94 % 3,57 % di saraf pusat maupun perifer. Asetilkolinesterase
Rata 3,71 % 3,77 % 3,03 % 3,46 %
adalah suatu enzim yang mempunyai peran penting
-rata dalam memecah neurotransmiter sisterm saraf
parasimpatis yaitu asetikolin. Beberapa peneliti
Hasil Uji Kadar Abu menunjukkan adanya ikatan antara kecukupan
Penentuan kadar abu digunakan untuk asetilkolin dengan short term memory.
memberikan batas nilai maksimal kandungan
mineral internal dan eksternal yang masih boleh Uji Efektivitas Sediaan Kombinasi Pada Mencit
terkandung dalam ekstrak kering. Komposisi dari Menggunakan Metode Y Maze
bahan pangan atau tanaman 96% adalah air dan Sebanyak 5 kelompok perlakuan yaitu dosis 1
bahan organik, sedangkan sisanya adalah unsur (0,023 g/kg BB), dosis 2 (0,069 g/kg BB), dosis 3
mineral. Unsur mineral dikenal sebagai zat (0,0076 g/kg BB), kontrol positif prostigmin (2
anorganik atau abu, dalam proses pembakaran mg/kg BB) dan kontrol negatif skopolamin (0,1
bahan-bahan organik terbakar tetapi bahan mg/kg BB) diberikan secara intra peritoneal.
anorganiknya tidak, sisa yang terbakar merupakan Pemberian prostigmin diberikan pada hari ke-15
abu (DepKes, 2000). sebelum pemberian skopolamin dan skopolamin
diberikan pada semua perlakuan dihari ke-15 pada
menit ke-30 setelah pemberian perlakuan kontrol +,
dosis 1, 2 dan 3.

3
Tabel 4. Hasil Persentase Daya Ingat Mencit Analisa statistika menggunakan analisa
Pada Hari Ke-15 dan Nilai SD statistik Levent test untuk mengevaluasi
kehomogan data, menunjukkan data yang diperoleh
Kelompok Perlakuan Hari Ke-15 homogen sehingga memenuhi syarat untuk
Kontrol Positif (c) 77,18±3,65 dilakukannya analisa statistik dengan analisa sidik
ragam (ANOVA). Hasil analisis uji dengan sidik
Kontrol negatif (a) 46, 28±4,65 ragam menunjukkan adanya perbedaan yang
Dosis 1 (b) 58,52±3,11 signifikan antara perlakuan. Uji Post hoc test
dengan Duncan menunjukkan ada perbedaan yang
Dosis 2 (c) 73,7±4,56 signifikan antara kontrol negatif dengan kontrol
Dosis 3 (b) 62,5±2,48 positif dan ke tiga perlakuan, serta antara kontrol
positif dengan kelompok yang diberikan sediaan
Rata-rata 63,64±3,70 dosis 1 dan dosis 3. Namun kontrol positif berbeda
Keterangan: huruf a, b dan c yang berbeda menunjukkan tidak signifikan dengan dosis 2. Perbedaan yang
adanya perbedaan yang signifikan
sangat signifikan antara kelompok perlakuan hanya
Kemampuan daya ingat mencit terlihat pada kontrol dosis 2 dengan dosis 1 dan
ditunjukkan oleh persentase Alternasi (pergantian) dosis 3. Perbedaan yang tidak signifikan terlihat
yaitu banyaknya lengan yang dikunjungi bergantian pada dosis 1 dengan dosis 3. Hal ini
dibagi dengan jumlah lengan secara keseluruhan mengindikasikan bahwa pemberiaan sediaan
yang dikunjungi mencit dikurangi 2 dikali 100%. selama 14 hari mampu menghambat kerja
Data yang diperoleh menunjukkan nilai skopolamin dalam menurunkan daya ingat. Daya
“pergantian” tertinggi terdapat pada kontrol positif hambat sediaan pada dosis tinggi sebanding dengan
(77,18±3,68) diikuti oleh kelompok perlakuan kontrol positif prostigmin.
dosis 2 (3,7±4,56) dosis 1 (58,52±3,11) dan dosis 3 Prostigmin (Neostigmin metilsulfat)
(62,5±2,48). Nilai alternasi pengamatan terkecil merupakan golongan antikolinesterase.
terdapat pada kelompok kontrol negatif (46,28 Antikolineserase bekerja dengan meningkatkan
±4.65). jumlah asetilkolin pada neuromuskuler junction
dan juga meningkatkan tonus otot. Asetilkolin
berperan dalam mentransmisikan sinyal atau
persentase daya ingat
rangsangan yang diterima untuk diteruskan di
100 antara sel-sel saraf yang berdekatan atau pada
77,18 %
90 73,7 % sambungan neuromuscular (Rittner dan Bailey.
2005).
80 62,5 %
58,52 %
Berdasarkan hasil penelitian, dapat dinyatakan
70 bahwa pemberian ekstrak herba pada semua dosis
46,28 %
60 efektif meningkatkan daya ingat selama
Rata-rata
pengobatan 14 hari. Sediaan dosis 2 (0,069 g/kg
50
SD BB) mempunyai efektivitas terbaik untuk
40 mencegah penurunan daya ingat.
30 .
20
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
10 Kombinasi dosis ekstrak kering brokoli dan
0 pegagan 0,069 g/kg BB efektif meningkatkan daya
kontrol + kontrol - D1:
dosis 1 g dosis
0,023 2 g dosis 3
D2: 0,069 ingat pada mencit jantan dan pretansnya sebanding
D3: 0,0076 g
dengan kontrol positif prostigmin.
Gambar. 4 Histogram rata-rata presentase peningkatan daya
ingat yang di induksi skopolamin pada mencit jantan
Saran
Senyawa yang berpengaruh dalam proses 1. Perlu dilakukan pengujian antioksidan ekstrak
meningkatkan daya ingat diduga ada kaitanya campuran brokoli (Brassica oleracea L. Var.
dengan flavonoid, polifenol dan terpenoid (Aruna Italica), pegagan (Centella asiatica L. Urban)
et al, 2012). Ketiga senyawa tersebut menurut dan jeruk nipis (Citrus aurantiifolia) untuk
Spencer (2009) dapat memberikan efek mengetahui aktivitas senyawa antioksidan
neuroprotektif dengan cara mencegah kerusakan dari sediaan.
pada sel-sel syaraf. Flavonoid berperan dalam 2. Perlu dilakukan penelitian dengan uji kontrol
mengendalikan penyimpanan memori dalam area normal sebagai pembanding sehingga dapat
hipokampus dan korteks limbik melalui interaksi menjadi bahan acuan untuk menentukan dosis
penghambatan sinyal atau sensitisasi pada sistem pemeliharaan.
saraf pusat. 3. Perlu dilakukan pembuatan sediaan untuk
pemakaian pada manusia.

4
DAFTAR PUSTAKA Spencer, J.P. 2009. „The Impact Of Flavonoids On
Memory: Physiological and Molecular
Aruna, B., Sachin, P., Kshirshagar, N., And Considerations‟. Chemical Society
Pratapwar, S. 2012. „Learning And Reviews, Vol. 14, No. 3, pp. 1152-1161.
Memory Enhancing Actvitiy Of Vigna
Radiata Linn Ekstrak In Mice Using World Alzheimer‟s Report 2009.
Scopolamine Induced Amnesia‟. London,Alzheimer‟s Disease
International Journal Of Drug Formulation International.
And Research. February. Vol. 3, no. 1, pp.
98-109.

Badan Pengawasan Obat dan Makanan. 2007.

Acuan label gizi produk pangan.
www.pom.go.id. Diakses september 2015.

DepKes, R.I. 1995. Materia Medika Indonesia. Jilid

VI. Cetakan Pertama. Jakarta : Direktorat
Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.

DepKes RI. 2000. Parameter Standar Umum

Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta. Hal: 1,
5, 9-11

Edeoga, H.O., Okwu, D.E, and Mbaebre, B.O.

2005. Phytochemical Constituent of Some
Nigerian Medicinal Plants. Afr Journal of
Biotechnology 4: 685-688.

Fransworth, N.R. 1966. Biological and

phytochemical screening of plants. Journal
of Pharmaceutical science. 55 (3).
http://www.researchgate.net/publication/2
27978906_Biological_and_phytochemical
_screening_of_plants. Diakses: Oktober
2015.

Moreno M.C., Lopez B., Gracia V. 2006. Chemical

and Biological Characteristisation of
Nutraceutical Compound Of Broccoli.
journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis; vol. 4.p.1508-22.

Ramasamy, Ilangovan. Memory Enhancer.

Available in URL:
http://www.agriinfotech.com. Diakses
September 2015.

Rittner, D., Bailey R, A. 2005. Encyclopedia of

Chemistry. Facts on File: AS.

Riviere, S. Birloquez-Aragon, I., Nourhashemi, F.,

& Vellas, B. 1998. Low Plasma Vitamin C
in Alzheimer Patients Despite an Adequate
Diet. International Journal Of Geriatric
Psychiatry 13, pp.749-754.

Sampson, E,L. Warren, J,D., and Rossor, M,N.

2004. Young Onset Dementia.
Postgraduate Medical Journal. 80, 125-
139.