Antibioticos en La Leche 2016

PREGUNTA 3 : DETERMINACION DE ANTIBIOTICOS EN LA LECHE
La leche es un producto universal de origen animal que por su alto valor nutritivo y alto grado de
digestividad es de suma importancia en la alimentación humana . Por esta razón el control-
higienico-sanitario debe ser realizado en forma estricta por los organismos competentes .
La incidencia de enfermedades en las vacas lecheras requiere de la utilización de antibióticos en su

tratamiento .
Son varios los antibióticos cuyo uso ampliamente difundidos en la ganadería lechera ,
constituyéndose en los principales contaminantes de la leche , a la vez que la hace inapto para el
consumo humano por contravenir el Reglamento Sanitario de Alimentos .
El uso indiscriminado de estos fármacos , especialmente cuando no es aplicado por el profesional

Medico Veterinario , determina su presencia en la leche , con consecuencia grave en la salud del
consumidor , como son :sensibilidad , resistencia , alergias ,cambios en la flora intestinal (Lewis ,
1967).
La leche de alta calidad debe poseer las siguientes características :1.Estar libre de todo organismo
patógeno .2.Estra libre de sedimentos y materias totales .3.Tener un ligero sabor dulce , un gusto y
aroma suave , estar libre de olores extraños .4.Cumplir con los requisitos estatales (Judkins , 1984).
Los habitos de consumo cotidiano va a estribar el riesgo constante de la poblacion de adquirir la

leche fresca o sus derivados contaminados con residuos de antibióticos .
Ello conlleva a la imperiosa necesidad de efectuar muestras continuas que faciliten su detección e
impedir la comercialización del producto , en vista de que estos fármacos no se metabolizan en su
totalidad , ni se inactiva con la industrialización (Benzunce , 1988) .
El nivel y la duración de la infusión de antibióticos en la leche depende de numerosos factores ,

siendo los mas importantes , el tipo de presentación de la preparación de antibióticos , utilizados
(solución acuosa , pomada , preparación de acción prolongada )y el tipo de administración ( via
intramamaria , intrauterina e intramuscular )(Techinical Management Communications 1991).
La finalidad del presente trabajo de investigación es dar a conocer el grado de contaminación con
residuos de antibióticos , de la leche fresca que consume la poblacion , los que permitira a su vez
la toma de decisiones orientada a la preservación de la Salaud Publica .
Materiales y Métodos
Muestras Biologicas
Para la ejecución del presente trabajo se recolecto un total de 216 muestras de leche ,
proveniente de 72 vendedores que expanden sus productos diariamente en los mercados , en
tiendas y algunos fundos , de la ciudad .Asi mismo se utilizo muestras de leche libre de antibióticos
.
Materiales de Laboratorio
Frascos de 100 , 10 y 5 mL limpios y esteriles , pipetas graduadas de 1mL , placas Petri , varillas
agitadoras , cajas porta placas , canastillas , cilindro porta pipetas , ampollas con Bacillus
[Escriba texto] Página 1

stearothermophilis , tabletas nutritivas , jeringas dosificadoras , pipetas descartables , pinzas
plásticas , fichas de trabajo.
Equipo
Autoclave , estufa , horno electrico , mechero , refrigerador , incubador seco , baño maria .
Reactivos y medios de cultivos
Dextrosa , triptona , estracto de levadura , agar para recuento en placas , cepas de

B.Stearothermophilus , discos de antibióticos , penicilina de 15,000U.I.
Metodologia
Se emplearan dos métodos de laboratorio para la determinación de residuos de antibióticos en

leche fresca .
Primer método : cultivando la Cepa de B. Stearothermophilus .
Segundo método : empleando la prueba de Difusion Estandar Delvotest.
Recoleccion
Se recolectaron muestras de leche empleando un cucharon metalico limpio . Cada muestra de 50

mL. fueron depositados en frascos limpios y esteriles . Luego fueron transportados en condiciones
ambientales al laboratorio para su procesamiento en forma inmediata .
La recolección y las pruebas se realizaron en 3 muestras con intervalo aproximadamente de 15

dias en el lapso que duro el trabajo .
Descripcion del método de cultivo de la Cepa B. stearothermophilus
a)Preparacion de caldo triptona
Triptona 5,0 g
Yeast extracto 1,0 g
Dextrosa 0,05 g
Agua destilada 100 mL
Este medio debe tener de un pH 8, luego se reparte 10 mL . en frascos pequeños , se esterilizarlo a

121°C durante 15 minutos y a 15 libras de presión .
Seguidamente los frascos con tiptona fueron inoculados con la cepa de B. Stearothermophilus e
incubados a 55 °C durante 8 h.
b)Preparacion del agar de recuento en placa
Agar de recuento en placa 2,35g
Agua destilada 100 mL
Ajustarse a un pH 8

Estos ingredientes fueron depositados en un matraz limpio y agitando hasta disolverlos , se
repartio 5 mL en cada frasco pequeño y se procedio a esterilizarlo a 121 °C durante 15 minutos a
15 libras de presión .Se dejo enfriar y finalmente se conservo en refrigeración hasta el momento
de trabajarlo .
c)Realizacion de la prueba
Los frascos con el agar de recuento fueron colocados en baño Maria a 45 °C , una vez disuelto este
se vertio en la cantidad de 3 mL , en una placa Petri esteril , se agrego 1 mL de caldo cultivado con
la cepa de B. SStearothermophilus y al final los 2 mL restantes del mediolicuado (agar de
recuento).
La placa con la siembra respectiva , es agitada en forma rotatoria por unos minutos , luego se dejo
enfriar .
La placa con el medio solidificado se invierte para ser divididos en 12 recuadros numerados del 1al
12 , de 1 cm2 cada uno utilizando el lápiz de cera .
d)Preparacion de la Solución de Penicilina
a)Matraz I . se coloca 150 mL de agua destilada esteril , se agrega una pastilla de penicilina en
15,000 U.I . agitando suavemente hasta disolverlo.
b)Matraz II. se coloca 99 mL de agua destilada esteril , se agrega 1mL , de la solución del matraz I
.
c)Matraz III. se coloca 49 mL , de leche resca libre de antibióticos luego se agrega 1 mL de la

solución de matraz II .
e) Preparacion de los discos
Los discos utilizados en la placa , son de celulosa de 4mm de diámetro .
De los discos anteriores se toma con una pinza esteril 3 de ellos , estos son embestidos en la
solución del matraz III.
Estos vienen a ser discos controles identificados con los números 2,3y 9 que corresponden a los
recuadros enumerados de la placa con el cultivo .
Nueve discos son embestidos en las muestras de leche problema , los que son colocados en el
recuadro numerados con los números 1,4,5,6,7,8,10.11 y 12 ), respectivamente de la placa con
cultivo .Esta operación se realiza usando una pinza esteril.
f)Lectura de resultados
La laca de cultivo que lleva los 12 discos es identificado , se encuba a 55°C por dos horas y media .
Despues del periodo de incubación los discos controles números 2,3 y 9 , presentaran un halo
transparente que significa inhibición del desarrollo del bacillus como consecuencia de la presencia
de penicilina en el disco .
Esta reacción observamos en los discos con la leche problema que contiene trozos de antibióticos.

Cuando no se presenta el halo transparente , indica que la leche no contiene antibióticos , y como
consiguiente el resultado es negativo .
La formación del halo transparente indica la presencia de antibióticos , cuando mayor es el halo ,
mayor es la contaminación .
Descripcion de la prueba de difusión Estandar Delvotest
a)Realizacion de la prueba
Abrir la tapa de aluminio de las ampollas ( que contiene el Bacillus ) para cada muestra de leche
problema .
Colocar con la pinza , una tableta nutritiva en las ampollas .
Con ayuda de una micropipeta en condiciones esteriles , coger 0,1 mL de muestra de leche y
depositar en la ampolla sobre el agar y la taleta .
Se colocan las ampollas en el calentador o baño maria a 64°C ,durante 21/2 horas
b)Condiciones de conservación
Las ampollas y los frascos que contienen las tabletas nutritivas deben mantenerse a una
temperatura de 6-15°C .
Antes de abrir los frascos de las tabletas nutritivas hay que dejarlos adaptarse a la temperatura
ambiente durante 20 minutos .
Una vez que el frasco ha sido abierto , se mantendrá a una temperatura de 15 -25°C , con el fin de
evitar la condensación en el frasco (El tapon de silicato se dejara puesto en el frasco).
c)Lectura de los resultados de la prueba
Amarillo : No contiene ningún residuo de antibióticos o sulfamidas .
Purpureo : Contiene residuos de antibiótico o de sulfamidas .
Amarillo / purpureo : Resultado dudoso.
d)Analisis de datos
Se utilizo la estadística descriptiva , promedio , porcentaje y representación grafica con diagrama

de barras .
4 resultados
En la tabla 1 se indican los resultados obtenidos en el presente trabajo .
Tabla 1 : Determinacion de la presencia de residuos de antibióticos en la leche fresca que consume

la poblacion de CAAJAMARCA .

Referencia
http://www.unapiquitos.edu.pe/pregrado/facultades/alimentarias/descargas/vol3/4.pdf
Tabla N2 : Muestras positivas y negativas por muestreo en la determinación de residuos de

antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion de Cajamarca
Referencia :

Tabla N3 : Comparacion de las 2 pruebas para determinación de residuos de antibióticos en la
leche fresca .
Referencia :
http://www.unapiquitos.edu.pe/pregrado/facultades/alimentarias/descargas/vol3/4.pd
Figura 1:Presencia de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion de Cajamarca

(mercados , tiendas y fundos )
Referencia :

Figura 2: Presencia y ausencia de residuos de antibióticos en la leche fresca que consume la
poblacion de Cajamarca
Referencia :
Discusiones :
Como se puede observar en la Tabla N2 , de las 216 muestras de leche analizadas , resultaron
positivas , un 20,83 %y 79,17% resultaron negativos .El estudio efectuado revela presencia de
residuos de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion de Cajamarca .
Deun trabajo similar efectuado en cinco rutas de la campiña de Cajamarca , Benzunce (1988),
encontró 11,5 % de positividad a la presencia de residuos de antibióticos en la leche fresca .Esta
diferencia podría deberse a las formas de interpretación de las pruebas de determinación de
residuos de antibióticos en la leche fresca . Nuestro resultado es mucho mas alto , en vista de que
en el presente trabajo se emplearon métodos cualitativos donde se consideran positivos la
formación del halo de inhibcion , y el cambio de color (Delvotest ).No obstante al analizar el
trabajo de Benzunce (1988) ruta por ruta , se da cuenta que la ruta 73 tiene de positividad un
25,75% la cual es muy superior a la nuestra .
Si se compara los porcentajes de positividad en mercados 20,67%, tiendas y fundos con 21,21%
tales resultados tienen similitud , lo que es indicativo de que el nivel de contaminación es
indiferente a los mencionados lugares , esto indica que la mayoría de expendedores son pequeños
ganaderos o revendedores , los mismos que no cuentan con asesoramiento técnico y administran
a los fármacos indiscriminadamente en forma empírica .
Nuestro resultado difiere de los obtenidos por Pozo (1987), quienes trabajaron en dos
pasyeurizadoras de la ciudad y una provincia de La Habana (Cuba) ; allí encontraron 49.43%y
36.11% de positividad a la presencia de residuos a antibióticos en la leche fresca , resultados muy
superiores a los nuestros .Esto posiblemente se debe a uso indiscriminado de antibióticos en la
ganadería lechera cubana .

Encontramos también diferencias con los resultados obtenidos por Pozo (1986), en Cuba en donde
12 vaquerias de la periferia de La Habana , el 17,5% de las muestras estudiadas resultaron
positivas .Esta cercana coincidencia , pensamos se deba a que en su estudio se efectuo la
determinación residuos de Estreptomicina , empleando para tal efecto un método cuantitativo .
El nivel de contaminación de leche fresca con residuos de antibióticos fue 20,83% obtenidos
eneste trabajo , resulta perjudicial para la salud humana , así lo corrobora Veisseire (1988), quien
afirma que la ingestión de leche con penicilina puede provocar una antibioresistencia con
infecciones ulteriores rebeldes en los lactantes que la ingieren .
De igual moo , se encuentran marcadas diferencias con los reportes de Technical Management
Communications (1991).En Grecia y Dinamarca donde 2,0 y 0,0035% de muestras de leche son
positivas a antibióticos .Estos resultados son inferiores a los nuestros debiéndose , entre otros
factores , al control estricto y alas condenas y/o castigos impuestos a la leche contaminada en
dichos países .Asi mismo los criterios de rechazo y/o condena de la leche con antibióticos en
países como Alemania es considerada no detectable , Belgica ,la penicilina menos a 0,004 mg/1mL
, España rechaza con 0,004mg/1mL,Francia desclasificación de la leche , se corrobora esta forma y
las condiciones de calidad requeridas , debido a los bajos niveles de contaminación .Conclusiones
Conclusiones
La determinación de residuos de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion

Cajamarquina , no lleva a las siguientes conclusiones :
De las 216 muestras de leche fresca analizadas, 4,5 resultaron positivas a la presencia de residuos
de antibióticos alcanzando un porcentaje 20,38%de positividad .
No hay diferencia en la presencia de residuos antibióticos en la leche fresca que se comercializa

en los diferentes lugares de expendio (20,67% en mercados y 21,21% en tiendas y fundos ).
La contaminación encontrada en la leche que consume diariamente la poblacion de Cajamarca ,

no responde a una de las condiciones del Reglamento Sanitario de Alimentos (1986) , en donde
dice que la leche cruda que se expende no deberá contener sustancias conservadoras (antisépticos
, antibióticos , plaguicidas u otros ).
No existe un control sanitario para determinar la presencia de antibióticos en leche fresca , por
parte de las autoridades pertinentes , pues ellas son las responsables de hacer cumplir lo
estipulado por el código Sanitario .
Con los resultados del presente trabajo , podemos decir que existe un uso indiscriminada de los
antibióticos en el tratamiento de las vacas lecheras por técnicos , ganaderos y no son controlados
especialmente cuando esta leche va a la comercialización .
La frecuencia de residuos antibióticos encontrados , en la leche fresca , se ha incrementado en un

9,33% con respecto al estudio realizado tres años atrás (Benzunce,1988).
Los métodos empleados para la determinacon de residuos de antibióticos en muestras de leche

fresca , ofrecen una alta sensibilidad , existe sin embargo diferencia únicamente en la rapidez de la
prueba de difusión Estandar Delvotest .

Bibiografia APA :
Benzunce L. Determinacion de antibióticos en la Campiña de Cajamarca . Universidad Nacional de

Cajamarca . Tesis 1988-Pag 48 ( 1988) .
Blood y Henderson Medicina Veterinaria .Nueva Editorial Interamericana .Quinra edición .Mexico
(1986).
Charles A .Ciencias de la leche . Editorial España , Segunda Edicion .España (1980 ).
Who .(2006). Evaluation of certain Food Contaminants 64th Report of the Joint FAO /Who Expert
Committee on Food Aditives .Who Technical Report Series .930 .Disponible en fpt ://fpt
.fao.org/docrep/fao/a0822e/a0822e00.pdf.Consultado : noviembre ,24 , 2008 .
Este info es de otra pagina: http://www.scielosp.org/pdf/rsap/v11n4/v11n4a09
De acuerdo con los organismos internacionales de refencia , la leche y sus derivados pertenecen al
grupo de alimentos de mayor riesgo en salud publica , no solo por tratarse de un alimento básico y
por lo tanto , de amplio consumo , sino por su susceptibilidad para transmitir enfermedades
debido a la presencia de microorganismos y contaminantes como medicamentos veterinarios ,
hormonas , plaguicidas y antibióticos.

Los residuos o inhibidores en leche han sido definidos como la sustancia química o biológica , que
al ser administrada o consumida por el animal , se elimina y/o permanece como metabolito en la
leche , en la carne o en los huevos , con efectos nocivos para el consumidor . Los medicamentos
veterinarios mas usados en la practica veterinaria incluyen a los promotores de crecimiento y para
controlar infecciones .
De otro lado , el princioal factor incidente en la aparición de cepas resistentes es el empleo

excesivo de antimicrobianos , sustancias administradas a los animales con tres propósitos basios :
profilaxis , tratamiento terapéuticos y promoción del crecimiento . Los antibióticos y otros
antimicrobianos se utilizan ampliamente en los tratamientos de la mastitis y otras enfermedades
infecciosas como neumonía , podofilitis , etc. Actualmente , son muy utilizados en el tratamiento
profiláctico de las vacas no lactantes y en este caso , pueden ser excretados elevados niveles de
residuos durante largos periodos después del parto . La presencia de antibióticos en leche , puede
provocar efectos adversos en los humanos tales como : alergia , disbacteriosis , sobrecrecimientos
, resistencias y algunos efectos toxicos . Además , los antibióticos presentes en la leche pueden
inducir alteración de la flora intestinal , desarrollo de microorganismos patógenos y reducción de
la síntesis de vitaminas .
De otra parte , las pautas del Codex Alimentarius , consideran que el estatus sanitario en términos
de inocuidad para los alimentos de origen pecuario (carne , leche y sus derivados ) es desconocido
en Colombia , debido a la falta de políticas que valoren los riesgos asociados a su presencia como
residuos de medicamentos veterinarios , plaguicidas , hormonas , toxinas , aditivos y metales
pesados .
El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de antibióticos en leches crudas del
municiio de Monteria .
Materiales y métodos
Tipo de estudio y ubicación del estudio .
Descriptivo longitudinal , el estudio se realizo en una empresa acopiadora de leches crudas

ubicada en la ciudad de Monteria , Colombia .
Procedimiento para la toma de las muestras y determinación preliminar de la acidez de las leches .
E n el momento de la recepción de la leche , de cada cantina de los proveedores , se le determino

la acidexz por medio de la prueba alcoholimetrica , previamente se agito la cantina con un
mezclador metalico y posteriormente se uso un dosificador tipo neurex que tomo una cantidad de
leche que se mexclo con una cantidad igual de alcohol etílico al 68 % .Si en la mezcla se observaron
la formación de grumos , la leche de la cantina fue considerada acida y se descarto en el estudio
.Esto debido a que las leches acidas pueden hacer virar el color del medio de la microplaca de
detección de antibióticos y presentar falsos positivos .Seguidamente se tomo una alícuota de 5 mL
de cada cantina , estas se mezclaron con leches del mismo proveedor .De la sumatoria de las
submuestras se tomaron 15 mL de leche , en un tubo esteril de tapa rosca , que se codifico y en
una hoja anexa se identifico el proveedor , ubicación del predio , volumen de leche entregado ,
temperatura de la leche , hora y fecha .

Las muestras de leche cruda se conservaron en refrigeración , hasta su procesamiento en el
laboratoro del Instituto de Investigacines Biologicas del Tropico ( HBT) de la Facultad de Medicina
Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de Cordova ; las cuales fueron analizadas en un tiempo
no mayor a 48 horas .De las leches procesadas que se venden para consumo humano se tomaron
6 muestras , las cuales fueron analizadas en el primer muestreo ; cada muestra correspondio a una
empresa .Todas las muestras de leches se mantuvieron en refrigeración hasta su procesamiento
en el laboratorio del Instituto de investigaciones Biologicas del Tropico (HBT) de la Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de Cordova , con el fin de determinar la
presencia o ausencia de antibióticos o inhibidores en leches .
Determinacion de antibióticos
A cada muestra se le determino la presencia de antibióticos mediante la prueba rápida Bio-X-Total

antibiotic Bio K 331 de BioX Diagnostic (Jemelle , Belgique), que detecta : penicilina , ampicilina ,
amoxicilina , oxacilina , cloxacilina , dicloxacilina , nafcilina , streptomycina , dhydrostreptomycina ,
erytromicina , tetramiclina , oxitetraciclina , clortetraciclina , rifampicina , rifamicina , espiramicina
, bacitracina , kanamycina , neomycina y cloranfenicol .La prueba se basa en la inhibición del
crecimiento del Bacillus stearothermophilus variedad calidolactis que esta inoculado en un agar y
con un indicador de pH .Las pruebas tienen como soporte una placa de ELISA de 96 pruebas .El
cambio de color de purpura a amarillo se considera una muestra negativa , debido al crecimiento
de microorganismo , y cuando el medio no cambia de color se debe a que hay sustancias
inhibitorias para el crecimiento del microorganismo .A cada muestra se le realizo una agitación
suave y se tomaron 50 L que se adicionaron en cada uno de los pozos ; los cuales fueron tapados
, asegurándose que quedaran bien sellados e identificándose .La microplaca se coloco en baño de
maria precalentado a 65°C , dejándola flotar sobre la superficie del agua e incubándose por 3
horas .
Controles negativos y positivos
Se prepararon controles negativos y positivos ; para los controles negativos se tomo leche de una
vaca del hato de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de Cordova , a
la cual durante los últimos seis meses no se le habría administrado por ningúna via algún tipo de
antimicrobiano . Para el control positivo se tomo esta misma leche y se le adiciono 2.5  10-6 mg /
mL de penicilina G de 1600 UI.
Dterminacion del limite de sensibilidad de los antibióticos
Para mayor confiabilidad de los resultados , se determino el limite de sensibilidad de la prueba ,

con controles positivos de penicilina 0.004 UI/ mL , oxitetraciclina 0,100 L /mL y cloranfenicol
5.000 g / mL .Estas se realizaron de la siguiente manera : para penicilina , se tomo 1mL de 0.04 UI
/ mL de penicilina G sódica de 1600 UI mas 9 mL de leche obteniendo una concentración de 0.004
UI/ ml que correspondio al limite minimo detectado de la prueba .A este control se le realizaron
una disoluciones de 0.002 UI/ Ml , 0,001 UI/ mL , 0,0005 UI/ mL , 2,5  10-4 UI/ mL y 1,25  10-4 UI/
Ml . Para los controles de cloranfenicol se utilizaron 5 ml de una concentración de cloranfenicol de
10  g/ mL y se mezclo con 5 ml de leche , obteniéndose una concentración de 5mg/ ml , de este
control se realizaron una disoluciones de 2.5 mg/ mL , 1.25 mg/ mL , 0.6 mg/ mL , 0.3 mg / mL y
0.15 mg / mL . Para los controles de oxitetraciclina se tomaron 100 l de una concentración de 10

ug y se completo con 9.9 mL de leche y así se obtuvo una concentración de 0.100 ug /mL , de este
control se realizaron diluciones de 0.05 g / mL , 0.025 g / mL , 0,0125 g / ml , 6.25  10-3  g /
ml Y 3.125  10 -3 g / mL y 3.125  10 -3 g / Ml .
Determinacion de peróxido
Se efectuo para descartar la presencia de H2O2 , el cual inhibe el crecimiento microbiano y el

cambio de color en el medio .Con esta prueba se aseguro que la conservación del color se debio a
la presencia de inhibidor diferente a la H2O2 . La determinación se llevo a cabo con 35 % KI y 1%
V2O5 EN H2SO4 diluido .La determinación se realizo con 10 mL de las muestras por duplicado , y se
le agrego a un tubo 500 l de KI AL 35 % y a la otra muestra 500 l de 1% V2O5 en H2SO4 diluido .
La apariciom de un color naranja 35% KI indicaba la presencia de peróxido en la muestra y de un

color amarillo con 1% V2O5 .
Resultados
No se detectaron antibióticos en leches pasteurizadas de las seis marcas de leches procedentes de

diferentes plantas ubicadas fuera de la ciudad , pero comercializadas en Monteria .La presencia o
ausencia de los antibióticos en las leches crudas en cada uno de los especímenes se observa en la
Tabla 1 .
Referencia : http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0124-
00642009000400009
Para los muestreos 1 y 2 se tomo la totalidad de los proveedores de leches crudas con un intervalo
de 2 meses y se encontró que este porcentaje de positividad vario entre el 21 y 28 %
respectivamente .
La Tabla 2 presenta la frecuencia de muestras positivas en los tres muestreos ; en donde se

hallaron nueve proveedores comunes en los muestreos 1 y 2 con un intervalo de dos meses .El
objetivo del tercer muestreo fue descartar la presencia de adulterantes en la leche como peróxido
, para lo cual se tomo el mayor numero de proveedores positivos en los muestreos anteriores y se
determino que el 25% de estos fueron positivos a la presencia de antibióticos y que la totalidad de
estos fueron negativos al peróxido y solo dos proveedores fueron positivos para la presencia de
antibióticos en los tres muestreos .

Referencia : http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0124-
00642009000400009
Limite de Sensibilidad de la prueba
Para determinar el limite minimo de sensibilidad de la prueba , se prepararon controles positivos

de penicilina 0.004 UI/mL , oxitetraciclina 0.100 g / mL y cloranfenicol 5000 g / mL , se encontró
un minimo detectable de 0.002 UI/ mL , para penicilina , 0.005 g / ml para oxitetraciclina y
cloranfenicol de 1.25  g/ ml .
Discusion
La presencia de antibióticos en leches crudas encontradas en este estuio , contradice las normas
establecidas en el decreto 616 del 28 de febrero de 2006 del ministerio de la protección social de
Colombia , donde se establece que la leche para consumo humano no debe presentar residuos de
antibióticos en niveles superiores a los permisibles determinados por la autoridad sanitaria
competente .
El porcentaje de antibiótico encontrado en este estudio , son superiores a los reportados en otros
estudios donde encontraron un 4,4 % en muestras de leches crudas comercializadas en los
estratos 1 y 2 de la ciudad de Monteria . También en 136 muestras de leches crudas de 2
municipios de Cordova se encontró un 7,4 % de antibióticos .En 136 muestras se hallo un 3,3 % de
antibióticos en leches crudas en municipios diferentes del departamento de Cordova .La diferencia
porcentual de antibióticos de estos estudios con el nuestro , se pudo deber a que nosotros
tomamos una muestra mayor (n=439) , o posiblemente a que nosotros analizamos el área de
mayor acopio de leches en Cordova que es el municipio de Monteria .No se descarta sin embargo
, que existan diferencias regionales en el uso de los antibióticos en el departamento de Cordova o
que de hecho se haya incrementado en poco tiempo el abuso de los antibióticos en el
departamento .

Discusiones :
Como se puede observar en la Tabla N2 , de las 216 muestras de leche analizadas , resultaron
positivas , un 20,83 %y 79,17% resultaron negativos .El estudio efectuado revela presencia de
residuos de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion de Cajamarca .
Deun trabajo similar efectuado en cinco rutas de la campiña de Cajamarca , Benzunce (1988),
encontró 11,5 % de positividad a la presencia de residuos de antibióticos en la leche fresca .Esta
diferencia podría deberse a las formas de interpretación de las pruebas de determinación de
residuos de antibióticos en la leche fresca . Nuestro resultado es mucho mas alto , en vista de que
en el presente trabajo se emplearon métodos cualitativos donde se consideran positivos la
formación del halo de inhibcion , y el cambio de color (Delvotest ).No obstante al analizar el
trabajo de Benzunce (1988) ruta por ruta , se da cuenta que la ruta 73 tiene de positividad un
25,75% la cual es muy superior a la nuestra .
Si se compara los porcentajes de positividad en mercados 20,67%, tiendas y fundos con 21,21%
tales resultados tienen similitud , lo que es indicativo de que el nivel de contaminación es
indiferente a los mencionados lugares , esto indica que la mayoría de expendedores son pequeños
ganaderos o revendedores , los mismos que no cuentan con asesoramiento técnico y administran
a los fármacos indiscriminadamente en forma empírica .
Nuestro resultado difiere de los obtenidos por Pozo (1987), quienes trabajaron en dos
pasyeurizadoras de la ciudad y una provincia de La Habana (Cuba) ; allí encontraron 49.43%y
36.11% de positividad a la presencia de residuos a antibióticos en la leche fresca , resultados muy
superiores a los nuestros .Esto posiblemente se debe a uso indiscriminado de antibióticos en la
ganadería lechera cubana .
Encontramos también diferencias con los resultados obtenidos por Pozo (1986), en Cuba en donde
12 vaquerias de la periferia de La Habana , el 17,5% de las muestras estudiadas resultaron

positivas .Esta cercana coincidencia , pensamos se deba a que en su estudio se efectuo la
determinación residuos de Estreptomicina , empleando para tal efecto un método cuantitativo .
El nivel de contaminación de leche fresca con residuos de antibióticos fue 20,83% obtenidos
eneste trabajo , resulta perjudicial para la salud humana , así lo corrobora Veisseire (1988), quien
afirma que la ingestión de leche con penicilina puede provocar una antibioresistencia con
infecciones ulteriores rebeldes en los lactantes que la ingieren .
De igual moo , se encuentran marcadas diferencias con los reportes de Technical Management
Communications (1991).En Grecia y Dinamarca donde 2,0 y 0,0035% de muestras de leche son
positivas a antibióticos .Estos resultados son inferiores a los nuestros debiéndose , entre otros
factores , al control estricto y alas condenas y/o castigos impuestos a la leche contaminada en
dichos países .Asi mismo los criterios de rechazo y/o condena de la leche con antibióticos en
países como Alemania es considerada no detectable , Belgica ,la penicilina menos a 0,004 mg/1mL
, España rechaza con 0,004mg/1mL,Francia desclasificación de la leche , se corrobora esta forma y
las condiciones de calidad requeridas , debido a los bajos niveles de contaminación .Conclusiones
8. BIBLIOGRAFÍA
Benzunce L. Determinación de antibióticos
en la Campiña de Cajamarca.
Universidad Nacional de Cajamarca. Tesis
1988 – Pag.48. (1988)
Blood y Herdenson Medicina Veterinaria.
Nueva Editorial Interamericana. Quinta
Edición. México. (1986)
Centro Regional de Ayuda Tésnica (AID)
México . (1967)
Comité Mixto FAO/OMS de Expertos de
Higiene de la Leche: Tercer Informe.
FAO: Estudios Agropecuarios Nº 83, Organización
Mundial de la Salud. Serie de
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Charles A. Ciencias de la leche. Editorial Esparza,
Segunda Edición. España. (1980)
Fernandez, A. Calidad higiénica de la leche

cruda. Tomo I, Centro Tecnológico de la
leche.
Instituto Nacional de Capacitación Profesional.
Valdivia – Chile, 1980, Pag. 197
(1980)
Fuentes V. Farmacología y terapéutica Veterinaria,
Editorial UTEA, Segunda Edi

Antibioticos en La Leche 2016

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Antibioticos en La Leche 2016

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PREGUNTA 3 : DETERMINACION DE ANTIBIOTICOS EN LA LECHE

La incidencia de enfermedades en las vacas lecheras requiere de la utilización de antibióticos en su

El uso indiscriminado de estos fármacos , especialmente cuando no es aplicado por el profesional

Los habitos de consumo cotidiano va a estribar el riesgo constante de la poblacion de adquirir la

El nivel y la duración de la infusión de antibióticos en la leche depende de numerosos factores ,

[Escriba texto] Página 1

Reactivos y medios de cultivos

Dextrosa , triptona , estracto de levadura , agar para recuento en placas , cepas de

Se emplearan dos métodos de laboratorio para la determinación de residuos de antibióticos en

Primer método : cultivando la Cepa de B. Stearothermophilus .

Segundo método : empleando la prueba de Difusion Estandar Delvotest.

Se recolectaron muestras de leche empleando un cucharon metalico limpio . Cada muestra de 50

La recolección y las pruebas se realizaron en 3 muestras con intervalo aproximadamente de 15

Descripcion del método de cultivo de la Cepa B. stearothermophilus

a)Preparacion de caldo triptona

Yeast extracto 1,0 g

Agua destilada 100 mL

Este medio debe tener de un pH 8, luego se reparte 10 mL . en frascos pequeños , se esterilizarlo a

b)Preparacion del agar de recuento en placa

Agar de recuento en placa 2,35g

Agua destilada 100 mL

[Escriba texto] Página 2

d)Preparacion de la Solución de Penicilina

c)Matraz III. se coloca 49 mL , de leche resca libre de antibióticos luego se agrega 1 mL de la

e) Preparacion de los discos

Los discos utilizados en la placa , son de celulosa de 4mm de diámetro .

[Escriba texto] Página 3

Descripcion de la prueba de difusión Estandar Delvotest

Colocar con la pinza , una tableta nutritiva en las ampollas .

c)Lectura de los resultados de la prueba

Amarillo : No contiene ningún residuo de antibióticos o sulfamidas .

Purpureo : Contiene residuos de antibiótico o de sulfamidas .

Amarillo / purpureo : Resultado dudoso.

Se utilizo la estadística descriptiva , promedio , porcentaje y representación grafica con diagrama

En la tabla 1 se indican los resultados obtenidos en el presente trabajo .

Tabla 1 : Determinacion de la presencia de residuos de antibióticos en la leche fresca que consume

[Escriba texto] Página 4

Tabla N2 : Muestras positivas y negativas por muestreo en la determinación de residuos de

[Escriba texto] Página 5

Figura 1:Presencia de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion de Cajamarca

[Escriba texto] Página 6

[Escriba texto] Página 7

La determinación de residuos de antibióticos en la leche fresca que consume la poblacion

No hay diferencia en la presencia de residuos antibióticos en la leche fresca que se comercializa

La contaminación encontrada en la leche que consume diariamente la poblacion de Cajamarca ,

La frecuencia de residuos antibióticos encontrados , en la leche fresca , se ha incrementado en un

Los métodos empleados para la determinacon de residuos de antibióticos en muestras de leche

[Escriba texto] Página 8

Benzunce L. Determinacion de antibióticos en la Campiña de Cajamarca . Universidad Nacional de

Charles A .Ciencias de la leche . Editorial España , Segunda Edicion .España (1980 ).

Este info es de otra pagina: http://www.scielosp.org/pdf/rsap/v11n4/v11n4a09

[Escriba texto] Página 9

De otro lado , el princioal factor incidente en la aparición de cepas resistentes es el empleo

Tipo de estudio y ubicación del estudio .

Descriptivo longitudinal , el estudio se realizo en una empresa acopiadora de leches crudas

E n el momento de la recepción de la leche , de cada cantina de los proveedores , se le determino

[Escriba texto] Página 10

A cada muestra se le determino la presencia de antibióticos mediante la prueba rápida Bio-X-Total

Controles negativos y positivos

Dterminacion del limite de sensibilidad de los antibióticos

Para mayor confiabilidad de los resultados , se determino el limite de sensibilidad de la prueba ,

[Escriba texto] Página 11

Se efectuo para descartar la presencia de H2O2 , el cual inhibe el crecimiento microbiano y el