PRACTICA Nº 11

Identificación microbiológica de uropatógenos Grampositivos: Streptococcus faecalis,

Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, S. saprophyticus y S. epidermidis.

El diagnóstico microbiológico de cocos grampositivos causantes de infecciones urinarias,

comprende procedimientos de observaciones microscópicas con tinciones y aislamiento en
medios de cultivo, con posterior identificación bioquímica y serológica.

Staphylococcus saprophyticus produce cistitis y más raramente pielonefritis en mujeres jóvenes

(15-25 años) durante el verano. Tiene un período de multiplicación en la orina algo superior al de
las enterobacterias, por lo que habitualmente se encuentra en recuentos bajos. Enterococcus
spp. se aisla especialmente en ancianos con hipertrofia prostática, en postoperados y en
pacientes que llevan sonda vesical permanente o han recibido profilaxis o tratamiento con una
cefalosporina o aztreonam. La pielonefritis por estreptococo del grupo B se observa en la mujer
gestante, en el paciente anciano, en el diabético y en el recién nacido. Las bacterias anaerobias
y los virus rara vez producen IVU.

Tinción de Gram de una muestra de orina sin centrifugar se considera una prueba indicada en
situaciones especiales en los pacientes con IVU. El interés principal es determinar si la flora
implicada es 3, grampositiva, puesto que en tal caso el tratamiento debe incluir un antibiótico
activo frente a Enterococcus.

Urocultivo. Es una prueba imprescindible para establecer el diagnóstico de certeza de IVU,

identificar su agente causal y su sensibilidad a los antibióticos, así como para confirmar la
curación bacteriológica. Se realiza con una muestra de orina de la primera hora de la mañana o,
en su defecto, con una muestra de orina que haya permanecido en la vejiga al menos 4 horas.
Debe recogerse de la mitad de la micción habiéndose lavado previamente los genitales sin
emplear antisépticos. Si no es posible obtener la orina por micción espontánea puede realizarse
un sondaje (excepto si se sospecha prostatitis aguda, en cuyo caso se podría practicar una
punción suprapúbica).

1. MATERIAL:

- Esputo fresco recién emitido - Láminas portaobjeto

- Medios de cultivo - Set de coloración Gram
 - Asa bacteriológica
- Mechero - Mascarilla
- Guantes

2. PROCEDIMIENTO:

1. Realizar cultivos en agar sangre de oveja 5%, agar Manitol salado. Incubar todas a 35 - 37
ºC, podría usarse agar Chapman.
2. Realizar la lectura de las placas a las 24 horas.
3. Paralelamente realizar cultivo en agar CLED o PCA. Incubar a 35 - 37ªC.
4. Hacer el recuento de colonias a las 20-24 horas.