Universidad Técnica Particular de Loja

La Universidad Católica de Loja

Fabián Betancourt, Lorena Cárdenas, Javier Castillo, Mikaela Celi, Ashli Jiménez.
Bioquímica y Farmacia
Química Analítica

1. Tema: Determinación de hierro en fármacos mediante Espectrofotometría de

Absorción Atómica (EAA).
2. Objetivos:
- Observar el Espectrofotómetro de Absorción Atómica (EAA) marca Perkin Elmer
AAnalyst 400 y describir la instrumentación básica del equipo.
- Explicar la incidencia y significancia de los metales en estudio en las muestras de
análisis.
- Aplicar los principios fundamentales de la Absorción Atómica en la
determinación de minerales en muestras de fármacos.
3. Introducción
4. Materiales y métodos
4.1. Materiales:
- Micropipeta de 100 a 1000 µL
- Piseta
- Un balón de aforo de 250 ml con tapa.
- Siete balones de aforo de 25 ml con tapa.
- Tres balones de aforo de 50 ml con tapa.
- Tres vasos de precipitación de 250 ml.
- Tres lunas de reloj.
- Una pipeta de 5 ml.
- Una pipeta de 10ml.
- Una pera.
- Embudo.
- Papel filtro.
4.2. Equipos:
- Espectrofotómetro de Absorción Atómica.
- Lámpara de cátodo huevo de hierro.
- Plancha de calentamiento.
4.3. Reactivos:
- Estándar de hierro de 1000 ppm.
- Preparar soluciones de estándares de: 0,5; 1; 2; 4 y 6 ppm.
- Acetileno puro (grado 5 de pureza) en el equipo.
- Ácido nítrico.
- Agua destilada.
4.4. Métodos:
 5. Resultados y discusión
5.1. Resultados
 Preparación de 250 ml de HNO3 5%:
HNO3 al 69%
𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2
𝐶2𝑉2
𝑉1 =
𝐶1
5% ∗ 250 𝑚𝑙 0,05 ∗ 250
𝑉1 = = = 18,12 𝑚𝑙 𝐻𝑁𝑂3
69% 0,69
18,12 ml de HNO3 en 250 ml de agua destilada.

 Preparación de solución intermedia:

𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2
𝐶2𝑉2
𝑉1 =
𝐶1
𝑚𝑔
50 𝐿 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑉1 = = 2,5 𝑚𝑙 = 2500 µ𝐿 𝑑𝑒 𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟 𝑑𝑒 𝐹𝑒
1000 𝑚𝑔/𝐿
 Preparación de estándares:
𝐶1𝑉1 = 𝐶2𝑉2
𝐶2𝑉2
𝑉1 =
𝐶1
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 ∗ 25 𝑚𝑙
𝑉1 =
50 𝑚𝑔/𝐿
𝑚𝑔
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛∗25 𝑚𝑙 0,5 ∗25 𝑚𝑙
𝐿
1) 𝑉1 = = = 0,25 𝑚𝑙
50 𝑚𝑔/𝐿 50 𝑚𝑔/𝐿
𝑚𝑔
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛∗25 𝑚𝑙 1 ∗25 𝑚𝑙
𝐿
2) 𝑉1 = = = 0,5 𝑚𝑙
50 𝑚𝑔/𝐿 50 𝑚𝑔/𝐿
𝑚𝑔
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛∗25 𝑚𝑙 2 ∗25 𝑚𝑙
𝐿
3) 𝑉1 = = = 1 𝑚𝑙
50 𝑚𝑔/𝐿 50 𝑚𝑔/𝐿
𝑚𝑔
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛∗25 𝑚𝑙 4 ∗25 𝑚𝑙
𝐿
4) 𝑉1 = 𝑚𝑔 = 𝑚𝑔 = 2 𝑚𝑙
50 50
𝐿 𝐿
𝑚𝑔
𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛∗25 𝑚𝑙 6 ∗25 𝑚𝑙
𝐿
5) 𝑉1 = = = 3 𝑚𝑙
50 𝑚𝑔/𝐿 50 𝑚𝑔/𝐿

Concentración (ppm) ml solución intermedia µL solución intermedia

0,5 0,25 250
1 0,5 500
2 1 1000
4 2 2000
6 3 3000
  Factor de dilución
𝐴𝑓𝑜𝑟𝑜
𝐹𝐷 =
𝐴𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎
50 𝑚𝑙
200 =
𝐴𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎
Alícuota = 0,25 ml = 250 µL

 Cuantificar la concentración de mineral en diferentes tipos de fármacos

mediante el EAA
Concentración de estándares (ppm) Absorbancia
Blanco 0,00
0,5 0,016
1 0,030
2 0,059
4 0,116
6 0,1777

Absorbancia Concentración Concentración

de la muestra de la muestra
(ppm) en el (ppm) en la curva
equipo de calibración
Muestra 0,399 12,0 13,73

X Y XY X2 Y2
(Concentración) (Absorbancia)
0,5 0,016 0,008 0,25 2,560E-04
1 0,03 0,030 1 9,000E-04
2 0,059 0,118 4 3,481E-03
4 0,116 0,464 16 1,346E-02
6 0,1777 1,066 36 3,158E-02
Σ 13,5 0,3987 1,686 57,25 4,967E-02

𝑛Σ(xiyi) − ΣxiΣyi
𝑚=
𝑛Σ(𝑥𝑖 2 ) − Σ(𝑥𝑖)2
5 ∗ (1,686) − (13,5 ∗ 0,3987)
𝑚= = 0,029
5 ∗ (57,25) − (13,5)2
Σ(𝑥𝑖 2 )Σyi − Σ(xiyi)Σxi
𝑏=
𝑛Σ(𝑥𝑖 2 ) − Σ(𝑥𝑖)2
(57,25 ∗ 0,3987) − (1,686 ∗ 13,5)
𝑏= = 6,20 ∗ 10−4
5 ∗ (57,25) − (13,5)2
𝑦 = 𝑚𝑥 + 𝑏
𝑦 = 0,029𝑥 + (6,20 ∗ 10−4 )
 0,399 = 0,029𝑥 + (6,20 ∗ 10−4 )
0,399 − (6,20 ∗ 10−4 )
𝑥= = 13,73
0,029

CURVA DE CALIBRACIÓN
0.2
0.18
0.16
0.14
ABSORBANCIA

y = 0.0293x + 0.0006
0.12
R² = 0.9997
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0 1 2 3 4 5 6 7
CONCENTRACIÓN (PPM)

NΣxiyi − ΣxiΣyi
𝑅=
√𝑁Σ𝑥𝑖 2 − (Σxi)2 ∗ √𝑁Σ𝑦𝑖 2 − (Σyi)2
(5 ∗ 1,686) − (13,5 ∗ 0,3987) 3,04755
𝑅= =
√(5 ∗ 57,25) − (13,5)2 ∗ √(5 ∗ 4,967 ∗ 10−2 ) − (0,3987)2 2√26 ∗ 0,298
= 1,0028

5.2. Discusión de resultados

6. Bibliografía