Introducción a la espectroscopia infrarroja

Theophile Theophanides

Universidad Técnica Nacional de Atenas, Departamento de Ingeniería Química,

Química de radiación y Biospectroscopia, Zografou Campus, Zografou, Atenas

Grecia

1. Introducción

1.1 Breve historia de la técnica

La radiación infrarroja fue descubierta por Sir William Herschel en 1800 [1]. Herschel era

investigando los niveles de energía asociados con las longitudes de onda de la luz en el visible

espectro. La luz del sol se dirigió a través de un prisma y mostró el visible bien conocido

espectro de los colores del arco iris, es decir, el espectro visible de azul a rojo con el análogo

longitudes de onda o frecuencias [2, 3] (ver Fig.1).

Higo.

Fig. 1. El espectro electromagnético.

La espectroscopia es el estudio de la interacción de las ondas electromagnéticas (EM) con la materia. los
las longitudes de onda de los colores corresponden a los niveles de energía de los colores del arco iris.
Herschel por
moviendo lentamente el termómetro a través del espectro visible desde el color azul al rojo
y midiendo las temperaturas a través del espectro, notó que la temperatura
aumentó de azul a rojo parte del espectro. Herschel luego decidió medir el
temperatura justo debajo de la porción roja pensando que el aumento de la temperatura se detendría
fuera del espectro visible, pero para su sorpresa, descubrió que la temperatura era uniforme
mayor. Llamó a estos rayos, que estaban debajo de los rayos rojos "rayos no coloríficos" o invisibles
rayos, que se llamaron más tarde "rayos infrarrojos" o luz IR. Esta luz no es visible para humanos
ojo. Un ojo humano típico responderá a longitudes de onda de 390 a 750 nm. El espectro IR
comienza a 0.75 nm. Un nanómetro (nm) es 10-9 m El espectro infrarrojo está dividido en, cerca
Infrarrojo (NIRS), infrarrojo medio (MIRS) e infrarrojo lejano (FIRS) [4-6].
2 Espectroscopía infrarroja - Ciencia de los materiales, ingeniería y tecnología
1.2 Las tres regiones infrarrojas de interés en el espectro electromagnético
En términos de longitudes de onda, las tres regiones en micrómetros (μm) son las siguientes:
yo. NIRS, (0,7 μm a 2,5 μm)
ii. MIRS (2,5 μm a 25 μm)
iii. FIRS (25 μm a 300 μm).
En términos de números de onda, las tres regiones en cm-1 son:
1. (NIRS), 14000-4000 cm-1
2. (MIRS), 4000-400 cm-1
3. (FIRS), 400-10 cm-1
La primera región (NIRS) permite el estudio de armónicos y vibraciones armónicas o combinadas.
La región MIRS es para estudiar las vibraciones fundamentales y la estructura de rotación-vibración de
pequeñas moléculas, mientras que la región FIRS es para las bajas vibraciones de átomos pesados (metal-
ligando o
las vibraciones del enrejado). La luz infrarroja (IR) es radiación electromagnética (EM) con una longitud
de onda
más largo que el de la luz visible: ≤0.7μm. Un micrómetro (μm) es 10-6m.

Los experimentos continuaron con el uso de estos rayos infrarrojos en la espectroscopía llamada
Infrarrojo
La espectroscopía y el primer espectrómetro de infrarrojos se construyeron en 1835. Espectroscopía IR
ampliado rápidamente en el estudio de materiales y para la caracterización química de
materiales que están en nuestro planeta, así como más allá de los planetas y las estrellas. El renombrado
espectroscopistas, Hertzberg, Coblenz y Angstrom en los años siguientes habían avanzado
en gran medida la causa de la espectroscopia infrarroja. Para 1900 la espectroscopía IR se convirtió en
una importante
herramienta para la identificación y caracterización de compuestos y materiales químicos. por
ejemplo, los ácidos carboxílicos, R-COOH, muestran dos bandas características a 1700 cm-1 y
cerca de 3500 cm-1, que corresponden a las vibraciones de estiramiento C = O y O-H del carboxilo
grupo, -COOH. Las cetonas, R-CO-R absorben a 1730-40cm-1. Los ácidos carboxílicos saturados
absorben en
1710 cm-1, mientras que los ácidos carboxílicos saturados / aromáticos absorben a 1680-1690 cm-1 y
sales carboxílicas o carboxilatos de metal absorben a 1550-1610 cm-1. Para 1950 la espectroscopía IR era
aplicado a moléculas más complicadas como las proteínas de Elliot y Ambrose [2]. Estas
estudios posteriores mostraron que la espectroscopía IR también podría usarse para estudiar moléculas
biológicas,
como proteínas, ADN y membranas y podría ser utilizado en biociencias, en general [2 - 8].
Las técnicas fisicoquímicas, especialmente los métodos espectroscópicos infrarrojos, no son distractivos
y pueden ser los que pueden extraer información sobre la estructura molecular y
caracterización de muchos materiales en una variedad de niveles. Técnicas espectroscópicas aquellos
basado en la interacción de la luz con la materia se han utilizado durante mucho tiempo para estudiar
materiales tanto in vivo como ex vivo o in vitro. La espectroscopía infrarroja puede proporcionar
información sobre materiales aislados, biomateriales, como biopolímeros y biológicos
materiales, tejidos conjuntivos, células individuales y, en general, fluidos biológicos para dar solo unos
pocos
ejemplos. Tal información variada se puede obtener en un solo experimento desde muy pequeño
muestras. Claramente, la espectroscopía infrarroja proporciona información sobre los niveles de energía
de
las moléculas en los números de onda (cm-1) en la región del espectro electromagnético mediante el
estudio
las vibraciones de las moléculas, que también se dan en longitudes de onda (μm).
Por lo tanto, la espectroscopía infrarroja es el estudio de la interacción de la materia con la radiación de la
luz
cuando las ondas viajan a través del medio (materia). Las olas son de naturaleza electromagnética
e interactuar con la polaridad de los enlaces químicos de las moléculas [3]. Si no hay
Introducción a la espectroscopía infrarroja 3
Polaridad (momento dipolar) en la molécula, entonces la interacción infrarroja está inactiva y el
la molécula no produce ningún espectro IR.
1.3 Grados de libertad de vibraciones
Las fuerzas que mantienen los átomos en una molécula son los enlaces químicos. En una molécula
diatómica,
como el ácido clorhídrico (H-Cl), el enlace químico está entre el hidrógeno (H) y el cloro
(Cl). Las fuerzas químicas que mantienen unidos a estos dos átomos se consideran similares a
los ejercidos por manantiales sin masa. Cada masa requiere tres coordenadas, para definir el
posición de la molécula en el espacio, con ejes de coordenadas x, y, z en un sistema de coordenadas
cartesianas.
Por lo tanto, la molécula tiene tres grados independientes de libertad de movimiento. Si hay N
átomos en una molécula habrá un total de 3N grados de libertad de movimiento para todos los átomos
en la molécula Después de restar los grados de libertad translacionales y rotacionales del
3N grados de libertad, nos quedan 3N-6 movimientos internos para una molécula no lineal y
3N-5 para una molécula lineal, ya que la rotación en una molécula lineal, como H-Cl, el movimiento
alrededor del eje del enlace no cambia la energía de la molécula. Estos internos
las vibraciones se llaman modos normales de vibración. Por lo tanto, en el ejemplo de H-Cl tenemos uno
vibración, (3x2) -5 = 1, es decir, una sola vibración a lo largo del eje H-Cl oa lo largo del enlace químico
de
la molécula Para una molécula no lineal como H2O tenemos (3x3) -6 = 3 vibraciones, los dos
vibraciones a lo largo de los enlaces químicos O-H simétrico (vs) y antisimétrico (vas) O-H
enlaces y la vibración de flexión (δ) de cambiar el ángulo H-O-H de los dos enlaces [3,4]. En
De esta forma podemos interpretar los espectros IR de pequeños compuestos inorgánicos, como SO2,
CO2 y
NH3 bastante razonablemente. Para las moléculas orgánicas más complicadas, el espectro IR dará
más vibraciones calculadas a partir de las vibraciones 3N-6, ya que el número de átomos en el
la molécula aumenta, sin embargo, el espectro se interpreta sobre la base de bandas características.

Teoría
2.1 Interacción de ondas de luz con moléculas
La interacción de la luz y las moléculas forma la base de la espectroscopía IR. Aquí se le dará
una breve descripción de la radiación electromagnética, los niveles de energía de una molécula y la
forma en que la radiación electromagnética interactúa con las moléculas y su estructura [5, 6].
2.2 Radiación electromagnética
La radiación EM es una combinación de campos eléctricos periódicamente cambiantes u oscilantes (FE)
y campo magnético (MF) que oscila a la misma frecuencia, pero perpendicular a la eléctrica
campo [7] (ver Fig.2).
La longitud de onda está representada por λ [6], que es la longitud de onda, la distancia entre dos
posiciones en la misma fase y frecuencia (ν) es el número de oscilaciones por unidad de tiempo de
la onda EM por segundo o las vibraciones / unidad de tiempo. El número de onda es el número de ondas /
unidad
longitud [7]. Se puede ver fácilmente [3] que c está dada por la ecuación 1:
􀜿 = 􀜿􀜿 (1)
donde, c es la velocidad de la luz de las ondas electromagnéticas u ondas de luz, que es una constante
para un
medio en el que las ondas se propagan, c = 3x 108 m / s

Fig. 2. Una ilustración de la radiación electromagnética se puede imaginar como una autopropagación
onda oscilante transversal de campos eléctricos y magnéticos. Este diagrama muestra un plano
onda polarizada linealmente que se propaga de izquierda a derecha. El campo eléctrico está en un plano
vertical
(E) azul y el campo magnético en un plano horizontal (M) rojo
La longitud de onda (λ) es inversamente proporcional a la frecuencia, 1 / ν. La energía en el quantum
términos [8]: viene dada por la ecuación de Planck:
Ε = ℎ􀜿L
o cual fue deducido más tarde también por Einstein, donde, E es la energía del fotón de frecuencia
ν y h es la constante de Max Planck [8], h = 6.62606896x 10-34 Js o h = 4.13566733x 10-15 ev. Ola
número y frecuencia están relacionados por la ecuación
ν = cν᷈ (3)
El espectro EM se puede dividir como hemos visto en varias regiones que difieren en frecuencia
o longitud de onda La relación entre la frecuencia (ν) la longitud de onda (λ) y la velocidad
de luz (c) se da a continuación:
􀜿 =La frecuencia en números de onda viene dada por la ecuación:
 (cm-1) (5)
Donde, k = constante de resorte de enlace, μ = masa reducida, c = velocidad de la luz (cm / seg),
μ es la masa reducida del sistema de masas de AB y m = masa de los átomos, mA = masa
de A y mB = masa de B. El efecto de isótopo también se puede calcular utilizando la masa reducida
y sustituyendo la masa isotópica en la ecuación de la frecuencia en números de onda.
Ejemplo, la molécula de H-Cl
mH Cl
mH y mCl son las masas atómicas de los átomos H y Cl.

Energía de una molécula

El nombre átomo fue acuñado por Democritus [9] del griego, α-τέμνω, lo que significa que en
griego no se puede cortar más o es indivisible.

Esta es la primera vez que se postula que el átomo es la partícula más pequeña de la materia
con sus características y es el bloque de construcción de todos los materiales en el universo.
Las combinaciones de átomos forman moléculas.

La energía de una molécula es la suma de 4 tipos de energías [3]:

Eele: es la energía electrónica de todos los electrones de la molécula

Evbr: es la energía vibratoria de la molécula, es decir, la suma de las vibraciones de los átomos
en la molécula

Erot: es la energía de rotación de la molécula, que puede rotar a lo largo de los tres ejes, x, y, z

Etra: es la energía traslacional de la molécula, que se debe al movimiento de la

molécula como un todo a lo largo de los tres ejes cartesianos, x, y, z.

Enuc: es la energía nuclear

Transiciones ele
ctrónicas de nivel de energía (ver Figs 3A, 3B)
Fig. 3. A: Aumentando el nivel de energía de E0 a E1 con la energía de la onda hv, lo que da
como resultado

la transición fundamental, B: el aumento del nivel de energía de E0 a E2 conduce a la primera

transición o primera armónica.

3. Las técnicas de espectroscopía infrarroja

Tenemos dos tipos de espectrofotómetros IR: los espectrofotómetros de transformada clásica

y de Fourier con el interferómetro

3.1 Los espectrómetros IR clásicos [3, 4]

Los principales elementos de la instrumentación clásica IR estándar constan de 4 partes (ver

Fig.4)

1. Una fuente de luz de irradiación

2. Un elemento dispersante, una rejilla de difracción o un prisma

3. Un detector

4. Sistema óptico de espejos

Los esquemas de un espectrómetro de absorción de dos haces se muestran en la Fig. 4.

Fig. 4. Un diagrama esquemático del espectrofotómetro IR dispersivo clásico.

La radiación infrarroja de la fuente al reflejarse en un espejo plano pasa a través del

muestra y monocromador de referencia luego a través de la muestra. Los rayos se reflejan en

un espejo giratorio, que alterna el paso de la muestra y los haces de referencia a la dispersión

elemento y finalmente al detector para dar el espectro (ver Fig 4). A medida que los rayos se
alternan

el espejo gira lentamente y diferentes frecuencias de radiación infrarroja pasan al detector.

3.2 Espectrómetros IR de transformada de Fourier

Los espectrómetros modernos [7] vinieron con el desarrollo de Fourier de alto rendimiento

Transformación de espectroscopía infrarroja (FT-IR) con la aplicación de un interferómetro de

Michelson

[10]. Ambos espectrómetros IR clásicos y modernos dan la misma información que los
principales

La diferencia es el uso del interferómetro Michelson, que permite que todas las frecuencias
lleguen

el detector a la vez y no uno a la vez /

En la década de 1870 A.A. Michelson [11] estaba midiendo la luz y su velocidad con gran
precisión (3)

e informó que la velocidad de la luz con la mayor precisión es de 299,940 km / sy para esto

fue galardonado con el Premio Nobel en 1907. Sin embargo, a pesar de que los experimentos
en

interferometría por Michelson y Morley [12] se realizaron en 1887 los interferogramas

obtenidos con este espectrómetro fueron muy complejos y no pudieron ser analizados en ese
momento

porque las fórmulas matemáticas de la serie de Jean Baptiste Fourier en 1882 no podían ser

resuelto [13]. Tuvimos que esperar hasta la invención de lasers y el alto rendimiento de

computadoras electrónicas para resolver las fórmulas matemáticas de Fourier para

transformar una

número de puntos en ondas y finalmente en los espectros [14]

La adición de los láseres al interferómetro de Michelson proporcionó un método preciso

(ver Figuras 5A y 5B) para monitorear los desplazamientos de un espejo móvil en el

interferómetro

con una computadora de alto rendimiento, lo que permitió que el complejo interferograma

analizado y convertido a través de la transformada de Fourier para dar espectros

Fig. 5A. El espectrómetro FT-IR de Michelson tiene las siguientes partes principales:

1. Fuente de luz

2. Divisor de haz (medio espejo plateado)

3. Traducir espejo

4. Detector

5. Sistema óptico (espejo fijo)

Higo.

608/5000

Fig. 5B. Ilustración esquemática de un espectrofotómetro FTIR moderno.

La espectroscopia infrarroja experimentó tremendos avances después de la segunda guerra

mundial y después, 1950 con mejoras en instrumentación y electrónica, que colocaron la
técnica en el centro de la investigación química y más tarde en la década de los 80 en las
biociencias en general con nuevas técnicas de manejo de muestras, el total atenuado método
de reflexión (ATR) y, por supuesto, el interferómetro [13]. La espectrofotometría de Fourier
Transform.IR ahora se usa ampliamente tanto en investigación como en la industria como un
método de rutina y como una técnica confiable para el control de calidad, determinación de la
estructura molecular y cinética [14-16] en biociencias (ver Fig. 6). Aquí se da e interpreta el
espectro de una cuestión muy compleja, como una placa ateromatica.

En la práctica, hoy en día se usan técnicas modernas y estos son los métodos FT. Los métodos
que no son FT son las técnicas clásicas de IR de dispersión de luz con un prisma o una
graduación de difracción.

La técnica FT determina los espectros de absorción de forma más precisa. A Michelson

interferómetro se debe utilizar hoy para obtener los espectros IR [17]. La ventaja de FTmethod
es que detecta una amplia banda de radiación todo el tiempo (la ventaja de múltiplex o
Fellget) y la mayor proporción de la radiación fuente pasa a través del instrumento debido a la
apertura circular (ventaja de Jacquinot) en lugar de la estrecha rendija utilizada para prismas o
rejillas de difracción en el instrumento clásico.

Fig. 6. El espectro FT-IR de una placa ateromatosa coronaria se muestra con las bandas de
absorción características de proteínas, bandas de amida, O-P-O de ADN o fosfolípidos, grupos
disulfuro, etc.

3.3 Espectrómetros Micro-FT-IR

La adición de un microscopio reflector al espectrómetro IR permite obtener espectros IR de

moléculas pequeñas, cristales y células de tejidos, por lo que podemos aplicar la
espectroscopía IR a sistemas biológicos, como tejidos conjuntivos, muestras de sangre y
huesos, en patología en medicina [ 15, 26-27]. En la Fig. 7 se muestran las imágenes del
microscopio de los tejidos mamarios cancerosos y su espectro.

4. Aplicaciones

La espectroscopía infrarroja se usa en química e industria para identificación y

caracterización de moléculas. Dado que un espectro IR es la "huella dactilar" de cada molécula
IR

se usa para caracterizar sustancias [16, 17]. La espectroscopía infrarroja es un método no

destructivo

y como tal, es útil estudiar la estructura secundaria de sistemas más complicados tales

Fig. 7. Tejido de mama: se muestra un diagrama de 3 ejes y los componentes espectrales

medios [25].
como moléculas biológicas proteínas, ADN y membranas. En la última década infrarrojo

la espectroscopia comenzó a utilizarse para caracterizar tejidos humanos sanos y no sanos en

ciencias médicas.

La espectroscopia IR se utiliza tanto en investigación como en industria para medición y

control de calidad.

Los instrumentos ahora son pequeños y portátiles para ser transportados, incluso para su uso
en pruebas de campo.

Las muestras en solución también se pueden medir con precisión. Los espectros de sustancias
se pueden comparar con una tienda de miles de espectros de referencia [18]. Algunas
muestras de aplicaciones específicas de espectroscopía IR son las siguientes:

La espectroscopia IR ha sido muy exitosa en la medición del grado de polimerización en la

fabricación de polímeros [18]. La espectroscopía IR es útil para identificar y caracterizar
sustancias y confirmar su identidad ya que el espectro IR es la "huella dactilar" de una
sustancia. Por lo tanto, IR también tiene un propósito forense y la espectroscopía IR se utiliza
para analizar sustancias, como alcohol, drogas, fibras, sangre y pinturas [19-28]. En las diversas
secciones que se dan en el libro, el lector encontrará numerosos ejemplos de tales
aplicaciones.

5. References

[1] W. Herschel, Phil. Trans.R.Soc.London, 90, 284 (1800)

[2] Elliot and E. Ambrose, Nature, Structure of Synthetic Polypeptides 165, 921 (1950);

D.L.Woernley, Infrared Absorption Curves for Normal and Neoplastic Tissues and

Related Biological Substances, Current Research, Vol. 12, , 1950 , 516p

[3] T. Theophanides, In Greek, National Technical University of Athens, Chapter in

“Properties of Materials”, NTUA, Athens (1990); 67p

[4] J. Anastasopoulou and Th. Theophanides, Chemistry and Symmetry”, In Greek National

Technical University of Athens, NTUA, (1997), 94p

[5] G.Herzberg, Atomic spectra and atomic structure, Dover Books, New York,Academic

press, 1969, 472 p

[6] Maas, J.H. van der (1972) Basic Infrared Spectroscopy.2nd edition. London: Heyden & Son

Ltd. 105p

[7] Colthup, N.B., Daly, L.H., and Wiberley, S.E.(1990).Introduction to Infrared and Raman

Spectroscopy.Third Edition. London: Academic press Ltd, 547 p.