Biosíntesis de insulina

El gen de la insulina codifica un precursor de 110 aminoácidos llamado

“preproinsulina” polipéptido monocatenario (peso molecular de aproximadamente
12,000 Daltons). Al igual que con otras proteínas secretadas, la preproinsulina contiene
un péptido señal N-terminal hidrofóbico, que interactúa con partículas de
reconocimiento de señal de ribonucleoproteína citosólica (SRP). SRP facilita la
translocación dependiente de ATP de preproinsulina a través de la membrana del
retículo endoplásmico rugoso (RER) en la luz. Este proceso se produce a través del canal
de conducción de péptidos. Donde el péptido señal de la preproinsulina se escinde por
una señal peptidasa para producir proinsulina, descubierta en 1960, proteína
precursora (aproximadamente 9,000 D) contiene tanto la cadena A como la cadena B de
insulina en una cadena única continua unida a través de un segmento intermedio,
designado el dominio C. El dominio C varía en longitud entre especies de vertebrados
(típicamente 30-35 residuos) y está flanqueado en cada extremo por residuos dibásicos
(Arg-Arg y Lys-Arg), la proinsulina se escinde en esos enlaces dibásicos mediante una
enzima tipo tripsina para liberar la hormona madura y un péptido C libre (que carece
de los residuos dibásicos).
la conversión de proinsulina a insulina ocurre a través de la acción conjunta de dos tipos
de proteasas: una con actividad endoproteasa de tipo tripsina que hace que la
proinsulina se escinda después de los pares de residuos dibásicos en cada extremo del
dominio C, y otra con actividad exopeptidasa que se asemeja a la carboxipeptidasa B
con eliminar los residuos básicos que quedan después de la escisión de tipo tríptico.
Estudios previos también han demostrado que las mezclas de tripsina pancreática y
carboxipeptidasa B podrían convertir la proinsulina en insulina in vitro. Se encontraron
dos endoproteasas dentro de los gránulos secretores de insulinoma. Inicialmente
llamadas enzimas convertidoras Tipo I y Tipo II, cada una de estas endoproteasas ácidas
resultó ser dependiente de los iones Ca 2+. El tipo I fue activo en Ca2 + 1 mM y escindido
en Arg31-Arg32 en proinsulina (las dos primeras posiciones del dominio C) mientras que
el Tipo II requirió Ca2 + 0,1 mM y se escindió predominantemente en Lys64-Arg65 (las
dos últimas posiciones de el dominio C). También se encontró que cada uno tenía un pH
ácido óptimo cerca de 6.0..
Los estudios inmunocitoquímicos de las células β de islotes pancreáticos
proporcionaron evidencia de la presencia de proproteínas convertasas secretorias PC2
y PC1 / 3 en islotes pancreáticos de células β, y su capacidad para convertir proinsulina
en insulina
La exopeptidasa tipo carboxipeptidasa B, que elimina los residuos básicos del terminal
COOH después de la escisión por PC2 y PC3 / PC1, también se encontró y se conoce
como carboxipeptidasa E. Aunque estructuralmente homóloga a las carboxipeptidasas
pancreáticas A y B, la carboxipeptidasa E tiene varias características únicas que la
diferencian de otras carboxipeptidasas. En el gránulo secretor en maduración de la
célula B, PC2, PC1 / 3 y carboxipeptidasa E trabajan juntas para convertir la proinsulina
en insulina madura y péptido C. Los estudios han demostrado que PC1 / 3 primero
escinde proinsulina en la unión del péptido de la cadena B-C, generando un producto
intermedio que es escindido preferencialmente por PC2 para producir insulina
Los gránulos secretores en la célula β experimentan maduración en el citosol. Los
estudios con microscopía electrónica (EM) han demostrado que los gránulos maduros
tienen un núcleo denso de aspecto cristalino con un espaciamiento similar al de los
cristales de insulina 2-Zn. Es probable que la insulina recién sintetizada forme cristales
con iones de zinc que se transportan a los gránulos secretores que están madurando,
como se demostró por un knockout del transportador de zinc (ZnT8). Los cristales
residen en el núcleo denso de los gránulos \ beta mientras que el péptido C soluble
reside en la periferia menos densa o clara del gránulo. También se sabe que la
proinsulina cristaliza con insulina en pequeñas cantidades, probablemente como
hexámeros mixtos. Tanto la proinsulina como la insulina tienen la capacidad de unirse
al cinc y formar hexámeros coordinados con zinc (dos átomos axiales de Zn 2+ por
unidad hexamérica); la cadena lateral de histidina B10 coordina los iones Zn 2+ axiales.
El autoensamblaje y la microcristalización de los hexámeros de zinc-insulina pueden
estar regulados por el pH compartimental. Los gránulos secretores poseen una bomba
de protones intrínseca, que sirve para reducir el pH dentro del gránulo a pH 5.0-5.5:
esto es óptimo tanto para el procesamiento de prohormona como para la cristalización
in vitro. El pH dentro del RER es menos ácido, lo que promueve el intercambio de tiol-
disulfuro y, por lo tanto, el plegamiento de proinsulina con el emparejamiento de
disulfuro nativo.
Proinsulina se somete a plegamiento y formación de tres enlaces disulfuro, un proceso
que requiere una amplia gama de proteínas chaperona del retículo endoplásmico (ER),
como la proteína-tiol reductasa. Después de la maduración de la conformación
tridimensional, la proinsulina plegada se transporta desde el RE al aparato de Golgi
El proceso de conversión puede comenzar en la red trans Golgi pero continúa en las
vacuolas de condensación (gránulos secretores tempranos), y los productos se
almacenan en vesículas secretoras maduras y se secretan en cantidades equimolares
junto con pequeñas cantidades (aproximadamente 2-3%) de proinsulina y productos de
escisión intermedios donde la proinsulina entra en las vesículas inmaduras y se escinde
para producir insulina y péptido C por la acción de una enzima de tipo tripsina. La
insulina y el péptido C se almacenan en estos gránulos secretores junto con el
polipéptido amiloide de los islotes (IAPP o amilina) y otros productos menos abundantes
de secretarias de células β.
La estructura de la insulina contiene determinantes de la plegabilidad, el tráfico, el
autoensamblaje y la unión al receptor.

Aunque la biosíntesis de la insulina está controlada por múltiples factores, el

metabolismo de la glucosa es el evento fisiológico más importante que estimula la
transcripción del gen de insulina y la traducción del mRNA. En tres días, la inyección
de glucosa aumentó los niveles de ARNm de proinsulina entre tres y cuatro veces en 24
h y este efecto fue bloqueado por la inhibición farmacológica de la transcripción con
actinomicina D. Estos resultados sugieren que la glucosa juega un papel central en la
regulación de la biosíntesis de insulina que se controla al menos parcialmente a través
de alteraciones en la expresión de ARNm de proinsulina. Además, la glucosa es un
factor importante para mantener la estabilidad del ARNm de la insulina. Los
resultados de los estudios in vitro demostraron que la estabilidad del ARNm de la
insulina se redujo en concentraciones de glucosa más bajas y aumentó a
concentraciones más altas de glucosa. Curiosamente, la elevación de los niveles de
AMPc intracelular puede evitar esta reducción.

Conversión de proinsulina a insulina que demuestra las estructuras secundaria y

terciaria de la insulina; el dominio C flexible en proinsulina y proinsulinas divididas se
muestra en línea de puntos. Las flechas gruesas azules indicaban el camino
predominante.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK279029/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3934755/#R37