“Año del Diálogo y la Reconciliación Nacional”

TRABAJO GRUPAL
Práctica N° : Recuento en placa de
microorganismos viables de una muestra de suelo.

Docente: Martha Sirena Quijano Anacleto

Carrera profesional: Ingeniería Agronómica

Aula: 2-04 Sección: A

Pabellón: G Ciclo: V
Integrantes:
 CCARHUANI QUISPE ABDIAS

 CUBAS ARRASCUE LIZBETH KATERINE

 PETSA TSEJEM ADLER

 QUIROZ WIPIO DAVID GENARO

 SHUPINGAHUA SHUPINGAHUA JHANINA

 SORIA VASQUEZ RICHAR

Bagua Grande – Utcubamba

Amazonas
 I. INTRODUCCIÓN
Los microorganismos se desarrollan cuando encuentran en el hábitat los
nutrientes y las condiciones esenciales para su crecimiento. En ambientes
naturales, se los encuentra en comunidades microbianas, interactuando entre
ellos y con diferentes especies microbianas. Esto representa un problema si se
desea investigar la biología de una sola especie bacteriana. Por ello necesitan
ser aislados del medio natural y cultivados en forma pura in vitro en el laboratorio.
Con este fin se utilizan medios de cultivo, que se seleccionan en base a la
especie que se desea cultivar. El conocimiento del metabolismo celular en
esencial para entender la bioquímica del crecimiento y su desarrollo microbiano
de manera de manejar el crecimiento de microorganismos indeseables.
En el suelo se desarrolla una intensa actividad microbiológica y diversas causas
pueden alterar su equilibrio: erosión hídrica, erosión eólica, reducción de
nutrientes, acidificación, contaminación, etc.
Para evaluar estos procesos degradativos actualmente se emplean los
“indicadores de calidad del suelo” que pueden ser propiedades físicas, químicas
y biológicas, o procesos que ocurren en él.
Ejemplos de indicadores microbiológicas de calidad del suelo: Recuento de
microbiota total, grupos funcionales: celulolíticos, Amonificadores, Nitritadores,
Nitratadores y fijadores simbióticos y determinación de la actividad respiratoria
del suelo.
Para medir el número de bacterias viables en placa se determina mediante la
siembra un alícuota en un medio sólido.
Este método se utiliza cuando las muestras en estudio contienen gran cantidad
de microorganismos, o bien cuando se quiere realizar un análisis cuantitativo,
partiendo de cantidades de material conocidas.
Después de incubar, cada unidad viable (Unidad Formadora de Colonias – UFC)
forma una colonia.

II. OBJETIVOS:
 Determinar la concentración de microorganismos viables en una muestra
de suelo.
 Desarrollar habilidades en las técnicas relacionadas a microbiología del
suelo.

III. MATERIAL Y MÉTODOS:

A. Material:
Bilógico: muestra de suelo
De vidrio: Tubos de ensayo
Matraces
Pipetas
Placas Petri
 Reactivos: Agua destilada estéril
Agar Müller Hinton
Alcohol 96°
Otros: Papel kraf
Algodón

B. Técnica empleada: Método de las diluciones y recuento en placa

de colonias.

PROCEDIMIENTO:
1. Se realiza diluciones decimales de la muestra de suelo.
a. Colocar 10 g de suelo tamizado en un matraz con 90 ml de agua destilada
estéril (dilución 1/10). Homogenizar.
b. Tomar 1 ml de la primera dilución, y mezclar con 9 ml de agua destilada y
estéril (1/100). Homogenizar.
c. Repetir el procedimiento 4 veces mas (hasta alcanzar una dilución
1/1000000).
2. De cada una de las últimas 3 diluciones tomar una alícuota de 0,1 ml y
verterla sobre una placa de Petri conteniendo un medio de cultivo sólido
adecuado.
Dispersar sobre la superficie del medio utilizando.
3. Incubar en una estufa a 30°C, por 3-7 días.
4. Contar las unidades formadoras de colonias (UFC) en aquellas placas que
tienen entre 30 y 300 UFC.
5. Calcular la concentración de microorganismos viables presentes en la
muestra.
Se aplica la siguiente fórmula, obteniéndose el número de células
presentes en la suspensión original.

UFC/ml o g de muestra = N° colonias X 1/dilución X 1/alícuota (ml)

Los resultados se expresan en UFC por gramo o mililitro de muestra.

IV. RESULTADOS
V. CONCLUSIONES
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS