Anda di halaman 1dari 77

PENGARUH EKSTRAK DAUN TEH HIJAU (Camellia sinensis)

TERHADAP JUMLAH SPERMATOZOA MENCIT JANTAN (Mus


musculus L.) YANG DIBERI PAPARAN ASAP ROKOK

HALAMAN JUDUL
SKRIPSI

Diajukan Oleh :

DIYAH ARUM SETIASIH


J500140108

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2018
HALAMAN PENGESAHAN

ii
PERNYATAAN

iii
MOTTO

Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan, sesungguhnya


sesudah kesulitan itu ada kemudahan. (Q.S. Al-Insyirah ayat 5-6)

“Allah akan meninggikan orang-orang yang beriman di antaramu dan orang-


orang yang diberi ilmu pengetahuan beberapa derajat”. (Q.s. al-Mujadalah : 11)

Dan Kami tidak membebani seseorang melainkan menurut kemampuannya, dan


pada Kami ada suatu catatan yang menuturkan dengan sebenarnya, dan mereka
tidak dizalimi (dirugikan).” (QS.al-Mukminun:62)

iv
KATA PENGANTAR
BISMILLAHIRRAHMANIRRAHIM

Assalamu’alaikum Wr.Wb.
Puji syukur kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan
hidayah-Nya kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
Pengaruh Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis) Terhadap Jumlah
Spermatozoa Mencit Jantan (Mus musculus L.) Yang Diberi Paparan Asap Rokok.
Skripsi ini disusun guna melengkapi persyaratan untuk mendapat gelar
kesarjanaan pada Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Pada kesempatan yang bahagia ini, penulis hendak mengucapkan terimakasih
kepada:
1. dr. Retno Sintowati M.Sc selaku Dosen Pembimbing yang telah
memberikan pengarahan, saran serta dukungan yang berarti kepada penulis
selama penyusunan skripsi.
2. dr. Yuni Prastyo K., Sp.PA, MM(Kes) selaku penguji I, terima kasih atas
bimbingan dan arahan selama proses penyusunan skripsi.
3. dr. Listiana Masyita Dewi, M.Sc selaku penguji II, terima kasih atas
bimbingan dan arahan selama proses penyusunan skripsi.
4. dr. Erika Diana Risanti, M.Sc Selaku ketua biro skripsi Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Surakarta yang telah membantu dalam
perizinan dan bimbingan skripsi.
5. Terimakasih kepada para laboran yang membantu dalam penelitian ini.
6. Terimakasih kepada teman-teman bimbingan skripsi (Fairuz, Aldyan, Mas
Paridi) yang telah menemani dan mensuport penulis dari awal karya tulis ini
dibuat.
7. Terimakasih kepada Eko, Guntur, Puput, Vesty, Hesti, Lea, Megabe, Azmi,
Rifka yang telah membantu saat penelitian.

Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan ketulusan mereka


dengan melimpahkan rahmat dan karunia-Nya. Semoga skripsi ini dapat

v
memberikan sumbangan bagi kemajuan ilmu pengetahuan, bermanfaat bagi
pembaca, serta bernilai ibadah di hadapan Allah SWT. Aamiin Allahuma
Aamiin.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.

vi
DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii
PERNYATAAN..................................................................................................... iii
MOTTO ................................................................................................................. iv
KATA PENGANTAR ............................................................................................ v
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
ABSTRAK ........................................................................................................... xiii
ABSTRACT ......................................................................................................... xiv
BAB I ...................................................................................................................... 1
PENDAHULUAN .................................................................................................. 1
A. Latar Belakang ............................................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ....................................................................................... 3
C. Tujuan.......................................................................................................... 3
D. Manfaat ........................................................................................................ 3
BAB II ..................................................................................................................... 5
LANDASAN TEORI .............................................................................................. 5
A. Tinjauan Pustaka ......................................................................................... 5
1. Teh ............................................................................................................... 5
a. Definisi ..................................................................................................... 5
b. Taksonomi ................................................................................................ 5
c. Manfaat ..................................................................................................... 6
d. Komposisi Kimia ...................................................................................... 6
2. Teh hijau ...................................................................................................... 9
3. Infertilitas .................................................................................................... 9
a. Definisi ..................................................................................................... 9
b. Klasifikasi ............................................................................................... 10

vii
c. Faktor risiko ........................................................................................... 10
4. Spermatozoa .............................................................................................. 11
a. Definisi ................................................................................................... 11
b. Anatomi organ ........................................................................................ 11
c. Spermatogenesis ..................................................................................... 12
d. Analisis sperma ...................................................................................... 14
5. Rokok ........................................................................................................ 16
a. Definisi ................................................................................................... 16
b. Kandungan .............................................................................................. 16
c. Penyakit Yang Ditimbulkan ................................................................... 19
d. Hubungan Asap Rokok, Jumlah Spermatozoa dan Daun Teh Hijau..... 19
B. Kerangka Teori .......................................................................................... 21
C. Hipotesis .................................................................................................... 22
BAB III ................................................................................................................. 23
METODE PENELITIAN ...................................................................................... 23
A. Jenis Penelitian .......................................................................................... 23
B. Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................... 23
C. Subjek Penelitian ....................................................................................... 23
D. Teknik Sampling ....................................................................................... 23
E. Estimasi Besar Sampel .............................................................................. 24
F. Kriteria Restriksi ....................................................................................... 25
1. Kriteria Inklusi ....................................................................................... 25
2. Kriteria Eksklusi ..................................................................................... 25
G. Variabel Penelitian .................................................................................... 25
1. Variabel Bebas ....................................................................................... 25
2. Variabel Terikat ...................................................................................... 25
3. Variabel Luar .......................................................................................... 25
H. Definisi Operasional Variabel Penelitian .................................................. 26
I. Instrumen Penelitian .................................................................................. 27
J. Cara Kerja ................................................................................................. 28
K. Rancangan Penelitian ................................................................................ 31

viii
L. Pengukuran Hasil ...................................................................................... 32
M. Jadwal Kegiatan ........................................................................................ 33
BAB IV ................................................................................................................. 34
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .................................................... 34
A. Hasil Penelitian .............................................................................................. 34
1. Determinasi Tanaman ............................................................................... 34
2. Deskripsi Tanaman .................................................................................... 34
3. Randemen .................................................................................................. 35
4. Hasil Rerata Jumlah Spermatozoa............................................................. 36
B. Analisis Data .................................................................................................. 36
1. Uji Normalitas Data .................................................................................. 36
2. Uji Homogenitas Varian ............................................................................ 36
3. Uji One-way ANOVA ................................................................................ 37
4. Analisis post hoc LSD ............................................................................... 37
C. PEMBAHASAN ............................................................................................ 38
BAB V................................................................................................................... 42
KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................................. 42
A. KESIMPULAN .............................................................................................. 42
B. SARAN .......................................................................................................... 42
C. KETERBATASAN ........................................................................................ 42
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 43
Lampiran 1. Jumlah Spermatozoa ......................................................................... 48
Lampiran 2. Uji Normalitas Data .......................................................................... 49
Lampiran 3. Uji Homogenitas Varian ................................................................... 50
Lampiran 4. One-Way ANOVA ........................................................................... 51
Lampiran 5. Uji Post Hoc...................................................................................... 52
Lampiran 6. Surat Izin Penelitian.......................................................................... 53
Lampiran 7. Surat Determinasi Tanaman ............................................................. 55
Lampiran 8. Surat Selesai Melaksanakan Penelitian ............................................ 58
Lampiran 9. Ethical Clearance Letter ................................................................... 60
Lampiran 10. Dokumentasi ................................................................................... 61

ix
DAFTAR TABEL

Tabel 1. Nilai Normal Analisis Sperma Berdasarkan Kriteria WHO ................. 15


Tabel 2. Terminologi dan Definisi Analisa Sperma ............................................ 16
Tabel 3. Kelompok Perlakuan .............................................................................. 29
Tabel 4. Jadwal Kegiatan ..................................................................................... 33
Tabel 5. Rerata Jumlah Spermatozoa ................................................................... 36
Tabel 6. Hasil Analisis Uji Statistik LSD ............................................................. 37

x
DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Daun Teh ............................................................................................. 5


Gambar 2. Anatomi Reproduksi Pria .................................................................. 12
Gambar 3. Spermatogenesis ................................................................................ 14
Gambar 4. Kerangka Teori .................................................................................. 21
Gambar 5. Rancangan Penelitian......................................................................... 31

xi
DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Jumlah Spermatozoa ....................................................................... 48


Lampiran 2. Uji Normalitas Data ........................................................................ 49
Lampiran 3. Uji Homogenitas Varian ................................................................. 50
Lampiran 4. One-Way ANOVA ......................................................................... 51
Lampiran 5. Uji Post Hoc .................................................................................... 52
Lampiran 6. Surat Izin Penelitian ........................................................................ 53
Lampiran 7. Surat Determinasi Tanaman ........................................................... 55
Lampiran 8. Surat Selesai Melaksanakan Penelitian ............................................ 58
Lampiran 9. Ethical Clearance Letter ................................................................. 60
Lampiran 10. Dokumentasi ................................................................................. 61

xii
ABSTRAK

PENGARUH EKSTRAK DAUN TEH HIJAU (Camellia sinensis)


TERHADAP JUMLAH SPERMATOZOA MENCIT JANTAN (Mus
musculus L.) YANG DIBERI PAPARAN ASAP ROKOK

Diyah Arum Setiasih, Retno Sintowati


Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Latar Belakang: Teh hijau (Camellia sinensis) mengandung senyawa flavonoid


yang aktivitas antioksidannya beberapa puluh kali lebih besar dari senyawa
antioksidan lain yang dapat menghambat kerusakan spermatozoa karena ROS.

Tujuan Penelitian: Mengetahui pengaruh ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis)
terhadap jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan
asap rokok

Metode Penelitian: Penelitian bersifat eksperimental laboratorium metode post


test only controlled grup design. Subjek penelitian 35 ekor Mus musculus jantan
galur Swiss Webster berusia 2-3 bulan, berat badan ±20 gram. Subjek dibagi
menjadi 5 kelompok, yaitu: kelompok kontrol normal, kelompok kontrol negatif
(paparan rokok), kelompok perlakuan 1 (paparan rokok + 1,25% ekstrak),
kelompok perlakuan 2 (paparan rokok + 2,5% ekstrak), kelompok perlakuan 3
(paparan rokok + 5% ekstrak) yang dilakukan setiap hari selama 35 hari.
Penghitungan jumlah spermatozoa dilakukan pada hari ke-36, dengan cara
mengambil cauda epididymis. Data dianalisis menggunakan uji normalitas dan
homogenitas kemudian one-way ANOVA dan dilanjutkan uji post hoc LSD.

Hasil Penelitian: Berdasarkan uji statistic,didapatkan sampel normal dan


homogeny. Kemudian dilanjutkan one-way ANOVA, didapatkan nilai p=0,002
(p<0,05) terdapat perbedaan yang bermakna antara ekstrak daun teh hijau (Camellia
sinesis) terhadap jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi
paparan asap rokok. Hasil uji post hoc LSD kontrol negatif dengan perlakuan 1
p=0,008, kontrol negatif dengan perlakuan 2 p=0,000, kontrol negatif dengan
perlakuan 3 p=0,002. Hasil uji post hoc LSD menunjukkan bahwa seluruh dosis
memiliki perbedaan bermakna dibandingkan dengan kontrol negatif dengan nilai
p<0,05.

Kesimpulan : Ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis) dapat meningkatkan


jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan asap
rokok dengan dosis efektif berturut-turut adalah dosis II (2,5%), dosis III (5%) dan
dosis 1 (1,25%).

Kata kunci : Ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis), Jumlah spermatozoa,
Flavonoid, Rokok

xiii
ABSTRACT

THE EFFECT OF GREEN TEA LEAF EXTRACT (Camellia sinesis) ON THE


NUMBER OF SPERMATOZOA MALE MICE (Mus musculus L.) EXPOSED
CIGARETTE SMOKE.

Diyah Arum Setiasih, Retno Sintowati


Faculty of Medicine, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Background : Green tea (Camellia sinensis) contains flavonoid compounds which


antioxidant activity is several ten times larger than other antioxidant compounds
that can inhibit spermatozoa damage due to ROS.

Objective : To determine the effect of green tea leaf extract (Camellia sinesis) on
the number of spermatozoa male mice (Mus musculus L.) exposed cigarette smoke.

Methods : This research used laboratory experimental post test only control group
design. The subjects were 35 male mice Swiss Webster strain Mus musculus aged
2-3 months, weight ± 20 grams. The subjects were divided into 5 groups: normal
control group, negative control group (cigarette exposure), treatment group 1
(cigarette exposure + 1.25% extract), treatment group 2 (cigarette exposure +
2.5% extract), treatment group 3 (cigarette exposure + 5% extract) performed daily
for 35 days. Counting the number of spermatozoa performed on day 36, by taking
cauda epididymis. Data were analyzed using normality and homogeneity test then
one-way ANOVA and followed by LSD post hoc test.

Results : Based on statistic test, the sample were normal and homogene. Then
followed by one-way ANOVA, p = 0,002 (p <0,05) there was significant difference
between green tea leaf extract (Camellia sinesis) to the number of spermatozoa
male mice (Mus musculus L.) exposed to cigarette smoke. The Result of post hoc
LSD test between negative control with treatment 1 p=0,008, negative control with
treatment 2 p=0,000, negative control with treatment 3 p=0,002. The result of LSD
post hoc test showed that all dose had significant difference compared with negative
control with p value <0,05.

Conclusion : Green tea leaf extract (Camellia sinesis) can increase the number of
spermatozoa male mice (Mus musculus L.) exposed to cigarette smoke with effective
dose respectively are dose II (2.5%), dose III (5%) and dose 1 (1.25%).

Keyword : Green tea leaf extract (Camellia sinesis), Number of spermatozoa,


Flavonoid, Cigarette

xiv
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang

Prevalensi merokok di Indonesia sangat tinggi sekitar 29,3 % terutama pada


laki-laki (Rikesdas, 2013). Bahaya yang ditimbulkan oleh rokok dapat
menyerang siapa saja, baik perokok aktif maupun perokok pasif. Hal ini
menimbulkan banyak kekhawatiran mengingat banyaknya dampak buruk,
seperti terganggunya kesuburan pria atau infertilitas (Amarudin, 2012)
Merokok menimbulkan dua reaksi, yaitu reaksi pembakaran dan reaksi
pirolisa. Reaksi pembakaran dengan oksigen akan membentuk senyawa CO 2 ,
H2O2, NO, So, dan Co. Reaksi pirolisa menyebabkan pemecahan struktur
kimia rokok menjadi banyak senyawa kimia yang strukturnya sangat kompleks.
Kedua reaksi tersebut mengakibatkan peningkatan ROS (Reactiv Oxygen
Species), yaitu agen pengoksidasi yang sangat reaktif dari radikal bebas yang
dihasilkan oleh asap rokok. ROS menyebabkan kerusakan pada DNA
spermatozoa dan menyebabkan peningkatan apoptosis spermatozoa sehingga
akan terjadi penurunan spermatozoa (Sitohang, et al., 2015). Setiap satu batang
rokok yang dibakar, maka akan menghasilkan sekitar 4000 macam bahan kimia,
diantaranya ada 400 macam bahan kimia tersebut bersifat toksik seperti bahan
karsinogen, tar, nikotin, nitrosamin, karbonmonoksida, senyawa PAH
(Polynuclear Aromatic Hydrogen), fenol, karbonil, klorin dioksin dan furan
(Batubara, et al., 2013)
Infertilitas adalah ketidakmampuan untuk hamil, ketidakmampuan
mempertahankan kehamilan, ketidakmampuan untuk membawa kehamilan
kepada kelahiran hidup. Diperkirakan sekitar 50-80 juta pasangan (1 dari 7
pasangan) memiliki masalah infertilitas, dan setiap tahun muncul sekitar 2 juta
pasangan infertile (WHO, 2010). Sekitar 40% dari kasus tersebut disebabkan
oleh kelainan pada pria. Sebagian disebabkan oleh spermatogenesis abnormal
yang meliputi jumlah, motilitas dan morfologi (Saraswati, 2015).

1
2

Mekanisme rokok menurunkan infertilitas dengan cara penurunan kadar


testosteron. Hal ini akan mengganggu proses spermatogenesis karena
spermatogenesis berjalan di bawah pengaruh dari testosteron. Sehingga pada
tahap pematangan spermatid menjadi spermatozoa matur, dapat terjadi
gangguan yang dapat mempengaruhi morfologi normal (Apriora, et al., 2015)
Timbulnya radikal bebas dapat diimbangi dengan adanya mekanisme
pertahanan endogen dan mekanisme antioksidan dari dalam tubuh. Akan tetapi
jika jumlah radikal bebas melebihi kemampuan tubuh untuk mengimbanginya
maka diperlukan antioksidan dari luar. Antioksidan dapat di golongkan menjadi
2 jenis yaitu antioksidan endogen yang di produksi oleh tubuh sendiri dan
antioksidan eksogen yang merupakan antioksidan asupan dari luar tubuh.
Antioksidan merupakan suatu zat yang mampu menghambat atau mencegah
kerusakan sel akibat reaksi oksidasi. Sifat ini akan melindungi sel spermatozoa
dari kerusakan akibat serangan radikal bebas (Khaira, 2010).
Antioksidan banyak terkandung dalam senyawa flavonoid, asam
oksiaromatik, vitamin C dan E, karotenoid, dan senyawa lainnya. Flavonoid
telah terbukti memiliki khasiat antikarsinogenik, antisclerotic, antiallergenic
properties, dan aktivitas antioksidannya beberapa puluh kali lebih besar dari α-
tocopherol, vitamin C, dan β-carotene ataupun senyawa lainnya. Flavonoid
terdapat dalam madu, jahe, kemangi, teh, buah-buahan dan sayuran.
Keunggulan dari tanaman teh dibandingkan dengan bahan lainnya adalah
mudah didapat, lebih ekonomis, dan memiliki rasa yang enak (Khan, et al.,
2017).
Agarwal et al. (2017) dan Khan et al. (2017) menyebutkan bahwa
pemberian ekstrak daun teh dapat memperbaiki kualitas maupun kuantitas
spermatozoa. Berdasarkan cara pengolahannya dikenal beragam teh, di
antaranya ialah teh hitam dan teh hijau, teh oolong, dan teh putih (Towaha,
2013). Teh hijau merupakan minuman olahan dari daun teh yang diolah tanpa
melalui proses fermentasi. Salah satu penelitian mengatakan bahwa pemberian
ekstrak teh hijau dapat menetralisir ROS dan mencegah kerusakan DNA yang
disebabkan oleh ROS (Chandra, et al., 2011). Flavonoid pada tumbuhan
3

merupakan metabolit sekunder yang dimanfaatkan untuk kesehatan sebagai


antioksidan. Berdasarkan penelitian sebelumnya, teh hijau memiliki kandungan
antioksidan lebih tinggi dibandingkan dengan jenis lainnya seperti teh hitam,
teh oolong dan teh putih (Siburian, et al., 2015; Lu, et al., 2012; Wan, et al.,
2008).
Berdasarkan latar belakang di atas, maka dilakukan penelitian dengan
menggunakan hewan uji mencit jantan untuk melihat pengaruh pemberian
ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) terhadap jumlah spermatozoa yang
diberi paparan asap rokok.

B. Rumusan Masalah
Apakah terdapat pengaruh ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis)
terhadap jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi
paparan asap rokok.

C. Tujuan
Mengetahui pengaruh ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis) terhadap
spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan asap rokok

D. Manfaat
1. Manfaat Teoritis
Penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai pengaruh ekstrak daun
teh hijau terhadap jumlah spermatozoa yang diberi paparan asap rokok
2. Manfaat Aplikatif
a. Untuk masyarakat
Hasil penelitian dapat dijadikan sebagai salah satu obat yang
ekonomis
b. Untuk institusi
Dapat memberikan informasi pada institusi tentang ekstrak daun teh
hijau
4

c. Untuk Peneliti Lain


Dapat digunakan sebagai acuan dan informasi penelitian
selanjutnya.
BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Teh
a. Definisi
Camellia adalah genus besar keluarga Theaceae dengan banyak
spesies dengan nilai ekonomi dan ilmiah yang signifikan. Beberapa
spesies Camellia digunakan untuk menghasilkan teh hijau, minuman
yang populer. Diperkirakan lebih dari 3,6 juta ton daun teh diproduksi
setiap tahun di 40 negara (Lu, et al., 2012)
Berdasarkan cara pengolahannya dikenal beragam teh, di antaranya
ialah teh hitam dan teh hijau, teh oolong, dan teh putih (Towaha, 2013)

b. Taksonomi
Species : Camellia sinensis
Genus : Camellia
Family : Theaceae
Ordo : Theales
Subclass : Dilleniidae
Class : Magnoliopsida- Dicotyledons
Division : Magnoliophyta- Flowering plants
Superdivision : Spermatophyta- Seed plants
Kingdom : Plantae
(Mahmood, et al., 2010)

Gambar 1. Daun Teh (Tariq, et al., 2013)

5
6

c. Manfaat
Ekstrak daun teh (Camellia sinensis) memiliki banyak manfaat
diantaranya yaitu sebagai antikanker, antimikroba dan antibakteri,
menurunkan kolesterol dalam darah sehingga terhindar dari
aterosklerosis, meningkatkan kekebalan tubuh (Murase, et al., 2009)
Ekstrak daun teh (Camellia sinensis) terbukti dapat menurunkan
level oksidasi dan dapat menurunkan resiko terjadinya infertilitas. Pada
daun teh terdapat antioksidan sangat kuat yang dapat meningkatkan
kuantitas pada gamet laki-laki dikarenakan efek polifenol katekin yang
dapat menurunkan ROS (Agarwal, et al., 2017)

d. Komposisi Kimia
1) Fenol
a) Katekin
Senyawa katekin merupakan senyawa yang paling penting
yaitu sebagai antioksidan berkat gusus fenol yang dimilikinya.
Selain itu katekin juga berfungsi sebagai penentu warna, rasa
dan aroma dari teh yang diseduh. Katekin mudah mengalami
kerusakan yang disebabkan oleh pemaparan oksigen, panas, dan
cahaya yang kemudian akan mengalami epimerisasi menjadi
gallocatechin gallate (GCG), catechin gallate (CG),
gallocatechin (GC), dan catechin (C) dan epigallocatechin galat
(EGCG) (Towaha, 2013).
Kandungan epigallocatechin galat (EGCG) merupakan
katekin paling dominan dalam teh hijau yang dapat mencapai
hingga 50% dari berat katekin dan penyumbang tertinggi sebagai
fungsi antioksidan (Yashin, et al., 2011).
7

b) Flavanol
Berbeda dengan katekin, flavonol tidak dipengaruhi oleh
enzim polifenol oksidase. Flavanol memiliki aktivitas yang
dapat menguatkan dinding pembuluh darah kapiler dan
pengumpulan vitamin C (Towaha, 2013).

2) Non fenol :
Senyawa non fenol dalam teh menurut Towaha, J. (2013) adalah :
a) Karbohidrat
Kandungannya dalam teh berkisar 3-5% dari berat kering
daun teh. Karbohidrat dalam daun teh dapat bereaksi dengan
asam amino dan katekin, dan dapat membentuk senyawa aldehid
dengan suhu tinggi yang memiliki aroma seperti caramel.
b) Pectin
Kandungannya dalam teh berkisar 4,9-7,6% dari berat kering
daun. Pada proses pengolahan teh, pektin akan terurai menjadi
asam pekat dan metil alkohol, dan sebagian metil alkohol akan
menguap dengan udara, dan sebagian akan bereaksi dengan
asam-asam organik yang akan menjadi ester yang berperan
sebagai penyusun aroma.
c) Alkaloid
Kandungan alkaloid didalam teh berkisar 3-4% dari berat
kering daun dan dapat memberikan sifat menyegarkan pada
seduhan teh.
d) Protein dan asam-asam amino
Kandungan protein didalam daun teh sangan kuat
peranannya terhadap proses pembentukan aroma pada teh
terutama pada daun teh hitam. Kandungan asam amino bebas
dalam daun teh berkisar 50%, yang didominasi oleh asam amino
L-theanin, sisanya berupa glutamat, asam aspartate dan arginin.
8

e) Klorofil dan zat warna yang lain


Kandungan zat warna dalam teh berkisar 0,0019% dari berat
kering daun. Klorofil sangat berperan dalam warna hijau pada
teh karena salah satu ukuran penentu kualitas teh yaitu warna
dalam teh.
f) Asam organic
Kandungan asam organik didalam teh berkisar 0,5-2% dari
berat kering daun. Didalam daun teh terkandung asam organik
berupa asam malat, asam sitrat, asam suksinat dan asam oksalat.
g) Resin
Resin merupakan senyawa polimer rantai karbon, daun teh
mengandung resin berkisar 3% dari berat kering daun teh.
h) Vitamin-vitamin
Didalam daun teh terkandung beberapa jenis vitamin antara
lain: A, B1, B2, B3, B5, C, E dan K. Umumnya vitamin didalam
kandungan teh sangat peka terhadap proses oksidasi dan suhu
yang tinggi, sehingga kandungan vitamin tersebut pada daun teh
(tanpa oksidasi) lebih tinggi dibandingkan teh hitam.
i) Mineral
Kandungan mineral didalam daun teh berkisar 4-5% dari
berat kering daun. Jenis mineral yang terkandung meliputi K,
Na, Mg, Ca, F, Zn, Mn, Cu dan Se.
3) Senyawa aromatis
Senyawa aromatis pada teh secara alami jumlahnya hanya
sedikit dibandingkan setelah proses pengolahan. Senyawa tersebut
adalah linalool, geraniol, benzil alkohol, metil salisilat dan 638
senyawa lainnya yang bertanggungjawab terhadap aroma teh
(Towaha, 2013).
9

4) Enzim
Enzim- enzim yang terkandung dalam teh di antaranya amilase,
invertase, oksimetilase, protease, β-glukosidase, dan peroksidase
yang berperan sebagai biokatalisator setiap reaksi kimia dalam
tanaman (Towaha, 2013).

2. Teh hijau
Kandungan senyawa kimia pada tanaman teh banyak terkandung di
dalam daunnya. Teh hijau adalah teh yang dipetik dan mengalami proses
pemanasan (steaming) untuk mencegah terjadinya oksidasi enzimatis dari
enzim polifenol oksidase sehingga teh hijau memiliki kandungan katekin
lebih tinggi dibandingkan jenis teh lainnya (Lu, et al., 2012).
Polifenol pada teh, khususnya katekin dan flavin, dapat menjalankan
aktivitas antioksidan terutama melalui pengikatan radikal bebas , ion logam
transisi kelat , dan modulasi oksidan atau antioksidan enzim untuk gen
(Wan, et al., 2008)
Teh hijau memiliki kadar konsentrasi flavonol tertinggi (1.23-0.09
mmol L-1) yang dicapai setelah 1 jam, lebih tinggi jika dibandingkan
dengan daun teh hitam (Siburian, et al., 2015). Pemberian ekstrak daun teh
terbukti dapat menurunkan level oksidasi dan menurunkan resiko
infertilitas. Daun teh hijau memiliki antioksidan yang kuat dan dapat
meningkatkan kuantitas pada gamet laki-laki karena kemampuan polifenol
katekin yang dapat menurunkan ROS (Agarwal, et al., 2017).

3. Infertilitas
a. Definisi
Infertilitas adalah ketidakmampuan untuk hamil, ketidakmampuan
mempertahankan kehamilan, ketidakmampuan untuk membawa
kehamilan kepada kelahiran hidup (WHO, 2012)
10

b. Klasifikasi
Infertilitas dibagi menjadi primer dan sekunder.
Infertilitas primer, yaitu ketika keadaan istri belum pernah hamil sama
sekali setelah berhubungan seksual secara teratur tanpa kontrasepsi
selama 12 bulan. Sedangkan infertilitas sekunder terjadi pada istri yaitu
ketidakmampuan seseorang memiliki anak atau mempertahankan
kehamilannya (Easly, et al., 2013; Hiferi & Perfitri, 2013)

c. Faktor risiko
Diperkirakan sekitar 50-80 juta pasutri (1 dari 7 pasangan) memiliki
masalah infertilitas, dan setiap tahun muncul sekitar 2 juta pasangan
infertil (WHO, 2012). Sekitar 40% dari kasus tersebut disebabkan oleh
kelainan pada pria. Sebagian disebabkan oleh spermatogenesis
abnormal yang meliputi jumlah, motilitas dan morfologi (Saraswati,
2015). Faktor resiko terjadinya infertilitas diantaranya :
1) Usia
Usia juga mempengaruhi terutama pada tingkat kesuburan wanita
yang berhubungan dengan masa reproduksi. Pada pria kesuburan
juga akan menurun berdasarkan kualitas dan kuantitas sperma
yang dihasilkan (Saraswati, 2015).
2) Gaya hidup
a) Konsumsi alcohol.
b) Penggunaan marijuana berkepanjangan.
c) Merokok – secara signifikan menurunkan jumlah sperma dan
motilitas sperma.
d) Konsumsi kafein.
e) Berat badan berlebihan – menghasilkan hormon adrenalin
berlebihan menyebabkan defisiensi testosteron yang berujung
pada infertilitas.
11

f) Pakaian dalam ketat - meningkatkan suhu skrotum


g) Obat-obatan,. (Hiferi & Perfitri, 2013; Sugih, 2012).
3) Stress
4) Masalah reproduksi
Masalah di sistem reproduksi mengakibatkan infertilitas sekunder
seperti Infeksi vagina, disfungsi seksual, kelainan serviks,
sumbatan di tuba falopi, spermatogenesis abnormal, masalah
ejakulasi dll (Saraswati, 2015; Mascarenhas, et al., 2012).

4. Spermatozoa
a. Definisi
Spermatozoa merupakan sel yang tidak lagi mengalami
pembelahan atau pertumbuhan, berasal dari gonosit yang menjadi
spermatogonium, spermatosit primer dan sekunder dan selanjutnya
berubah menjadi spermatid dan akhirnya berubah menjadi
spermatozoa. Ketika produksi hormon gonadotropin sudah cukup
maksimal untuk merangsang pembentukan spermatozoa yaitu pada
masa pubertas yang di produksi di tubulus semeniferus (Ahmad, 2014)

b. Anatomi organ
Testis terdiri dari 900 lilitan tubulus seminiferous, yang
mempunyai panjang rata-rata lebih dari setengah meter, dan merupakan
tempat pembentukan sperma. Sperma kemudian dialirkan ke
epididymis, berupa lilitan lainnya yang bermuara ke dalam vas
deferens, yang membesar menjadi ampula vas deferens tepat sebelum
vas deferens memasuki korpus prostat.
Terdapar dua vesikula seminalis yang terletak disebelah prostat,
bermuara ke dalam ujung prostatampula dan isi ampula yang masuk ke
ductus ejakulatorius menuju korpus prostat dan bermuara di uretra pars
interna yang kemudian berlanjut ke uretra pars prostatika. (Guyton &
Hall, 2011).
12

Gambar 2. Anatomi Reproduksi Pria (Paulsen & Waschke, 2013)

c. Spermatogenesis
Proses spermatogenesis dari stem cell menjadi matur
membutuhkan waktu sekitar 74 hari, oleh karena itu pada bulan
selanjutnya dapat mempengaruhi kualitas semen. Optimal pada suhu
sedikit dibawah temperature darah,yang berlokasi di testis diluar
rongga panggul (Guyton & Hall, 2011).
Sperma mulai dibentuk pada saat pubertas, ketika produksi
hormon gonadotropin sudah maksimal untuk merangsang
pembentukan spermatozoa. Saat di kandungan, sel-sel germinal
primordial berada pada tingkat perkembangan awal di antara sel
endoderm di dinding kantung kuning telur di dekat allantois. Kemudian
pada minggu ke-3 masa janin, sel tersebut akan bermigrasi ke rigi
urogenital yang saat itu tumbuh di daerah lumbal. Mulai dari masa
kandungan sampai masa pubertas nanti, sel-sel germinal primordial ini
akan mengalami fase istirahat, sampai suatu saat ketika lumen tubulus
13

seminiferus telah sempurna dibentuk pada pubertas, mereka akan


berdiferensiasi menjadi spermatogonia (Guyton & Hall, 2011).
Spermatogonia terdiri atas 2 tipe yaitu spermatogonia tipe A, yaitu
spermatogonia saat awal dibentuk yang selanjutnya akan megalami
rangkaina pembelahan secara mitosis dan terbentuk lah spermatogonia
tipe B. Spermatogonia tipe B akan bergerak ke lumen, termodifikasi
dan membesar membentuk spermatosit primer. Spermatosit primer ini
akan bergerak semakin ke arah lumen sambil membelah secara miosis
menjadi spermatosit sekunder. Pada fase miosis pertama, proses yang
berlangsung cukup lama adalah pada tahap profase I, yakni sekitar 22
hari. Proses selanjutnya yakni metafase, anafase dan telofase yang
berlangsung dengan cepat. Setelah terbentuk spermatosit sekunder,
kemudian akan membelah kembali secara miosis (miosis II) menjadi
spermatid. Spermatid yang dihasilkan sekarang telah haploid, atau
memiliki setengah dari kromosom induknya (spermatosit primer).
Langkah selanjutnya adalah tahap dimana spermatid berdiferensiasi
menjadi spermatozoa. Hasil akhir dari spermatogenesis adalah
spermatozoa yang haploid (n), dimana satu spermatosit primer
menghasilkan empat spermatozoa (Ahmad, 2014).
14

Gambar 3. Spermatogenesis (Guyton & Hall, 2011)

d. Analisis sperma
Beberapa syarat yang harus diperhatikan untuk menjamin hasil analisis
sperma yang baik berdasarkan kriteria WHO (Sarwono, 2011) :
1. Abstinensia (pantang segama) selama 2-3 hari.
2. Sperma dikeluarkan dengan masturbasi dan hindari dengan cara
segama terputus.
3. Menghindari pengguanaan pelumas pada saat maturbasi.
15

4. Menghindari penggunaan kondom untuk menampung sperma.


5. Menggunakan tabung dengan mulut yang lebar sebagai tempat
penampung.
6. Sampel dikirim secepat mungkin.
7. Tabung dilengkapi nama jelas, tanggal dan waktu pengumpulan.
Metode pengeluarannya sama (masturbasi atau segama terputus).
8. Dihindari paparan temperature terlalu tinggi (>38℃) atau terlalu
rendah (<15℃).

Interpretasi hasil sperma normal


Tabel 1. Nilai normal analisis sperma berdasarkan kriteria WHO (Sarwono,
2011)
Kriteria Nilai rujukan normal
Volume 2 ml atau lebih
Waktu liquefikasi Dalam 60 menit
PH 7,2 atau lebih
Konsentrasi 20 juta per millimeter atau lebih
Jumlah sperma total 40 juta per ejakulat atau lebih
Lurus cepat gerakan yang progresif dalam
25% atau lebih
60 menit setelah ejakulasi (1)
Jumlah antara lurus lambat (2) dan lurus
50% atau lebih
cepat (1)
Morfologi normal 30% atau lebih
Vitalitas 75% atau lebih yang hidup
Leukosit Kurang dari 1 juta per mililiter

Keterangan :
Derajat 1 : gerak sperma cepat dengan arah yang lurus
Derajat 2 : gerak sperma lambat atau berputar-putar
16

Tabel 2. Terminologi dan Definisi Analisa Sperma Berdasarkan Kualitas Sperma


(Sarwono, 2011)

Terminologi Definisi

Normozoospermia Ejakulasi norma sesuai dengan nilai rujukan WHO


Konsentrasi sperma lebih rendah dari pada nilai rujukan
Oligozoospermia
WHO
Konsentrasi sel sperma dengan motilitas lebih rendah dari
Astenozoospermia
pada nilai rujukan WHO
Konsentrasi sel sperma dengan morfologi lebih rendah
Teratozoospermia
dari pada nilai rujukan WHO
Azoospermia Tidak didapatkan sel sperma didalam ejakulat

Aspermia Tidak terdapat ejakulat


Jumlah sperma sangat sedikit yang dijumpai setelah
Kristospermia
sentrifugasi

5. Rokok
a. Definisi
Rokok adalah bahan adiktif yang berisi tembakau yang dibakar
kemudian dihirup asapnya, termasuk rokok kretek, rokok putih, cerutu
atau bentuk lainnya yang dihasilkan dari tanaman nicotiana tabacum,
nicotiana rustica dan spesies lainnya atau sintetisnya yang mengandug
nikotin, tar, dengan atau tanpa bahan tambahan. Rokok biasanya
berbentuk silinder yang digulung oleh kertas berukuran panjang 70
hingga 120mm dengan diameter sekitar 10mm yang berisi daun
tembakau yang telah di cacah (Peraturan Pemerintah, 2012)
b. Kandungan
1) Nikotin
Nikotin adalah senyawa kimia yang secara alami terdapat
dalam asap rokok dan dalam tembakau yang tidak dibakar. Nikotin
merupakan racun yang diserap ke dalam sistem pembuluh darah
melalui paru-paru dan disirkulasikan ke otak, dalam waktu yang
sangat cepat serta dapat menyebabkan penurunan kadar hormon
testosteron. Nikotin memproduksi rasa senang, tenang dan rileks
17

yang membuat penggunanya ketagihan (Amarudin, 2012;


Batubara, et al., 2013)
Nikotin paling mudah diabsorpsi pada lingkungan basa
terutama melalui membran mukosa oral dan nasal karena epitel
daerah tersebut tipis dan kaya suplai darah serta mudah diserap
melalui kulit.
Pada seseorang yang merokok secara regular, kadar nikotin
dalam darah akan meningkat dalam 6-8 jam. Tiap batang rokok
akan menghasilkan konsentrasi nikotin dalam darah sekitar 5-30
ng/mL (Gayatri, et al., 2012)
2) Tar
Tar adalah kondensat asap yang merupakan total residu
dihasilkan saat rokok dibakar setelah dikurangi nikotin dan air,
yang bersifat karsinogenik dan menyebabkan berbagai penyakit
diantaranya kanker, penyakit jantung, bronchitis, serta termasuk
didalamnya terdapat nikel dan cadmium yang dapat gangguan
kehamilan, dan impotensi (Peraturan Pemerintah, 2012; Batubara,
et al., 2013).
3) Karbonmonoksida
Karbonmonoksida merupakan gas racun yang tidak berwarna
dan tidak berbau yang diabsorpsi melalui paru, masuk ke dalam
aliran darah kemudian akan berikatan dengan hemoglobin untuk
membentuk karboksi-hemoglobin (COHb) yang kadarnya dalam
darah dapat diukur sebagai marker absorpsi asap rokok.
Karbonmonoksida dapat menyebabkan berkurangnya pengiriman
dan pemanfaatan oksigen pada jaringan tubuh (Inayatillah, et al.,
2014).
18

4) Acetol
Acetol adalah hasil pemanasan aldehyde (sejenis zat yang
tidah bewarna yang bebas bergerak) dan mudah menguap dengan
alcohol (Amarudin, 2012).
5) Hydrogen Sulfide
Merupakan gas yang beracun dan mudah terbakar jika terpapar
bau yang keras (Amarudin, 2012).
6) Ammonia
Amoniak merupakan gas yang tidak berwarna yang terdiri dari
sangat merangsang. nitrogen dan hidrogen. Zat ini tajam baunya
(Amarudin, 2012).
7) Formic acid
Formic acid adalah sejenis cairan tidak bewarna yang bergerak
bebas dan dapat membuat lepuh. Baunya sangat tajam dan menusuk
(Amarudin, 2012).
8) Hydrogen cyanide
Hydrogen cyanideadalah sejenis gas yang tidak bewarna, tidak
berbau dan tidak berasa. Cyanide mengandung racun yang sangat
berbahaya, sedikit masuk ke dalam tubuh dapat mengakibatkan
kematian (Amarudin, 2012)
9) Formaldehyde
Formaldehyde adalah sejenis gas tidak bewarna dan berbau
tajam. Gas ini mengandung racun keras terhadap semua organisme
hidup, juga tegolong sebagai pembasmi hama dan pegawet
(Amarudin, 2012)
19

c. Penyakit Yang Ditimbulkan


Asap rokok dapat menimbulkan kelainan atau penyakit pada
hampir semua organ tubuh yaitu :

1) Otak : stroke, perubahan kimia otak


2) Mulut dan tenggorokan : kanker bibir, mulut, tenggorokan dan
laring
3) Jantung : kelemahan arteri, meningkatkan serangan jantung
4) Hati : kanker hati
5) Abdomen : kanker lambung, pankreas dan usus besar
6) Ginjal dan kandung kemih : kanker
7) Reproduksi : impotensi, kanker leher rahim, infertilitas
8) Kaki : gangrene
9) Saluran pernafasan : Penyakit paru obstruktif kronik, kanker
paru, Interstitial lung disease (ILD) (Haris, et al., 2012).

d. Hubungan Asap Rokok, Jumlah Spermatozoa dan Daun Teh


Hijau
Merokok dapat mengakibat timbulnya dua reaksi, yaitu reaksi
pembakaran dan reaksi pirolisa. Reaksi pembakaran dengan oksigen
akan membentuk senyawa CO2 , H2O2, NO, SO, dan CO. Reaksi
pirolisa menyebabkan pemecahan struktur kimia rokok menjadi banyak
senyawa kimia yang strukturnya sangat kompleks (Batubara, et al.,
2013). Saat merokok terjadi peningkatan ROS (Reactiv Oxygen
Species), yaitu agen pengoksidasi yang sangat reaktif milik kelas
radikal bebas yang dihasilkan oleh asap rokok serta dapat
mengakibatkan stress oksidatif. ROS menyebabkan kerusakan pada
DNA spermatozoa dan menyebabkan peningkatan apoptosis
spermatozoa sehingga akan terjadi penurunan jumlah spermatozoa
(Sitohang, et al., 2015) juga akan mempengaruhi hormon testosterone
yang bertanggung jawab atas spermatogenesis (Apriora, et al., 2015).
20

Pada penelitian Philip, et al (2015), 54 dari 72 orang perokok


mengalami penurunan jumlah spermatozoa. Penelitian terebut
menunjukkan bahwa antibodi antisperma meningkat pada perokok
yang menyebabkan berkurangnya jumlah spermatozoa.
Kandungan katekin yang terdapat dalam ekstrak daun teh hijau
berfungsi sebagai antioksidan dengan cara menghambat radikal bebas
setelah diberi paparan asap rokok (Agarwal, et al., 2017). Teh hijau
memiliki kadar konsentrasi flavonol tertinggi (1.23-0.09 mmol L-1)
yang dicapai setelah 1 jam, lebih tinggi jika dibandingkan dengan daun
teh hitam (Siburian, et al., 2015)
21

B. Kerangka Teori

Kandungan:

Nikotin , Tar,
Karbonmonoksida,
Acetol, Hydrogen
Sulfide, Pyridine, Methyl
Chloride, Methanol,
Ekstrak daun teh Rokok Ammonia, Formic acid,
hijau Hydrogen cyanide,
Formaldehyde, Phenol
Asap rokok
Katekin

Antioksidan ROS

Stress oksidatif

Kerusakan DNA ↓ Hormon


testosteron

Apoptosis sel Gangguan


spermatozoa spermatogenesis

↓ Jumlah
spermatozoa
Gaya hidup

Stress Infertilitas

Penyakit lain

Usia

Gambar 4. Kerangka Teori


22

Keterangan gambar :

: variabel bebas dan terikat yang diteliti


: yang tidak diteliti
: yang menghambat

C. Hipotesis
H0 : Pemberian ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) tidak
mempengaruhi jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang
diberi paparan asap rokok.
H1 : Pemberian ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) mempengaruhi
jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan asap
rokok.
BAB III
METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian
Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental laboratorium
dimana peneliti memberikan perlakuan terhadap sampel yang telah ditentukan
yaitu berupa hewan coba dilakukan di laboratorium dengan metode posttest
only controlled grup design (Taufiqqurohman, 2008).

B. Tempat dan Waktu Penelitian


Pengambilan tanaman di mulai pada bulan November 2017 dari kebun teh
Kemuning, Jawa Tengah. Sedangkan determinasi tanaman dilakukan di
Laboratorium Biologi FKIP Universitas Muhammadiyah Surakarta pada bulan
yang sama. Kemudian ekstraksi dan penghitungan jumlah spermatozoa
dilakukan di laboratorium Patologi Klinik dan laboratorium Farmakologi
Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta pada bulan
November-Desember 2017.

C. Subjek Penelitian
Subjek pada penelitian ini adalah mencit jantan (Mus musculus L.) galur
swiss webster yang diperoleh dari peternakan Abunawwas FK Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah
35 ekor mencit (Mus musculus L.) jantan yang diberi paparan asap rokok.

D. Teknik Sampling
Teknik pengambilan sampel yang dipakai adalah purposive sampling, di
mana pemilihan subjek sampel dipilih berdasarkan kriteria yang ditentukan
oleh peneliti. Sampel berasal dari 35 ekor mencit yang telah dikelompokan
menjadi 5 kelompok.

23
24

E. Estimasi Besar Sampel


Jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini dibagi menjadi 5
kelompok. Sampel diambil dari populasi tersebut dan besarnya ditentukan
berdasarkan rumus Federer sebagai berikut:

Rumus Federer :

(n-1) x (t-1) ≥ 15

Keterangan : n = Jumlah sampel tiap kelompok

: t = Jumlah Kelompok

Banyak Kelompok : 5 Kelompok (t = 5)

Sampel tiap Kelompok : (n-1) x (t-1) ≥ 15

(n-1) x (5-1) ≥ 15

(n-1) x 5≥ 15

4n – 4≥ 15

n ≥ 15 + 4 / 4

n ≥ 4,75

n ≥5

Setelah dilakukan penghitungan dengan menggunakan rumus federer


didapatkan jumlah mencit 5 ekor mencit untuk setiap kelompok perlakuan
sebanyak 5 kelompok. Selama penelitian kemungkinan mencit mengalami
kematian dan sakit cukup besar, maka jumlah sampel ditambah 20% sehingga
menjadi 6 ekor mencit. Akan tetapi, penulis menambahkan 1 ekor mencit lagi
perkelompok sehingga terdapat 7 ekor mencit pada setiap kelompok dan jumlah
total mencit yang diperlukan adalah 35 ekor mencit.
25

F. Kriteria Restriksi
1. Kriteria Inklusi
a. Mencit jantan (Mus musculus L.).
b. Sehat dan mempunyai aktifitas normal.
c. Berumur 2-3 bulan.
d. Berat badan ±20 gram.
2. Kriteria Eksklusi
a. Mencit (Mus musculus L.) sakit saat penelitian.
b. Mencit (Mus musculus L.) mati saat penelitian.
c. Terdapat abnormalitas anatomis terutama pada bagian genital.

G. Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas
Ekstrak daun teh hijau dengan berbagai dosis perlakuan.
Skala Variabel : Rasio
2. Variabel Terikat
Jumlah spermatozoa yang diberi paparan asap rokok.
Skala Variabel : Rasio
3. Variabel Luar
a. Variabel terkendali
Variasi genetik, jenis kelamin, umur, suhu udara, berat badan, makanan
dan minuman.
b. Variabel tidak terkendali
Reaksi hipersensitivitas, imunitas hewan percobaan, abnormalitas
spermatogenesis.
26

H. Definisi Operasional Variabel Penelitian


1. Variabel Bebas : Ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis)
Ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) adalah ekstrak yang dibuat
dari daun teh hijau (Camellia sinensis) dengan teknik maserasi etanol 70%.
Daun teh hijau (Camellia sinensis) diperoleh dari perkebunan teh
Kemuning, Jawa Tengah, dan diekstraksi di Laboratorium Farmakologi
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Dari penelitian sebelumnya,
pemberian ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) diberikan selama 35
hari secara per oral dengan sonde lambung dalam 3 dosis (1ml/100grBB)
(Chandra, et al., 2011).
Dosis I : ekstrak daun teh hijau 1,25% diberikan pada mencit P1.
Dosis II : ekstrak daun teh hijau 2,5% diberikan pada mencit P2.
Dosis III : ekstrak daun teh hijau 5% diberikan pada mencit P3
 Alat : timbangan
 Skala variabel : rasio

2. Variabel Terikat : jumlah spermatozoa mencit yang diberi paparan asap


rokok
Jumlah spermatozoa mencit adalah banyaknya spermatozoa yang
diperoleh dari kauda epididymis. Pada penelitian ini mencit (Mus musculus
L.) jantan galur swiss webster diberi paparan asap rokok setiap hari,
kemudian diberikan ekstrak daun teh hijau dalam berbagai dosis.
Penghitungan jumlah spermatozoa dilakukan pada hari ke-36 dengan cara
memisahkan cauda epididimis dengan memotong bagian proksimal corpus
epididimis dan bagian distal vas deferens. Selanjutnya dimasukkan ke
dalam cawan petri yang berisi 1 ml NaCl 0,9%, bagian proksimal cauda
dipotong, lalu ditekan perlahan hingga sekresi cairan epididimis keluar dan
tersuspensi dengan Nacl 0,9% (Claudia et al. 2013). Proses tersebut
dilakukan berulang hingga suspensi tercampur rata. Ambil 10 μl sampel
kemudian dengan tetes pada 5 kamar hitung improve neubaeur hitung di
bawah mikroskop dengan perbesaran 100 kali (Putra, 2014).
27

 Alat : mikroskop
 Skala Variabel : rasio

I. Instrumen Penelitian
1. Alat
Alat yang digunakan adalah sebagai berikut :
a. Kandang mencit 5 buah
b. Timbangan
c. Spidol, untuk pemberian tanda
d. Handscoon
e. Masker
f. Pengaduk
g. Kertas saring
h. Vakum evaporator
i. Pisau steril
j. Mikroskop
k. Bilik hitung neubauer
l. Pipet
m. Cawan petri
n. Wadah pembiusan
2. Bahan
Bahan yang akan digunakan adalah sebagai berikut :
a. Makanan dan minum hewan percobaan
b. Aquades
c. Daun teh hijau (Camellia sisnensis)
d. Rokok
e. Etanol
f. Etil klorida
28

J. Cara Kerja
1. Persiapan hewan percobaan
Mencit (Mus musculus L.) diperoleh dari peternakan Abunawwas FK
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Kemudian diadaptasikan selama 7
hari di laboratorium farmakologi. Setelah diadaptasikan, keesokan harinya
dilakukan penimbangan untuk menentukan dosis, penimbangan dan
dilakukan pembagian kelompok secara random menjadi 5 kelompok. Tiap
kelompok terdiri dari 7 ekor.
2. Pemaparan asap rokok
Untuk proses pemaparan asap rokok, hewan uji diletakkan di dalam
kandang kemudian ditutup dan diberi celah pada ujungnya untuk
pertukaran udara. rokok yang digunakan adalah rokok kretek. Rokok
dimasukan ke spuit 20cc untuk memompanya, kemudian dibakar dan
dimasukkan ke dalam kandang yang telah ditutup.
3. Cara Pembuatan Ekstrak
Ekstrak daun teh (Camellia sinensis) yang disiapkan dengan metode
maserasi dengan langkah sebagai berikut:
a. Daun teh (Camellia sinensis) dijemur dibawah sinar matahari secara
tidak langsung (ditutup kain hitam) sampai kering
b. Kemudian daun teh (Camellia sinensis) dihaluskan hingga berubah
bentuk menjadi serbuk.
c. Ekstraksi dilakukan pada suhu ruang. Setiap gram 200 g daun teh
(Camellia sinensis) yang telah dihaluskan direndam dalam 1500 ml
etanol 70%, diaduk menggunakan pengaduk kaca yang steril.
d. Ekstrak akhir disaring dengan kertas penyaring.
e. Filtrat yang didapatkan dipekatkan/disuling di dalam vakum evaporator
berputar pada suhu 40 0C dan disimpan pada suhu 4 0C untuk
penggunanan lebih lanjut.
f. Setelah mendapatkan ektrak, untuk membuat 1,25% ekstrak daun teh
hijau diperlukan 1,25 mg ekstrak daun teh dan aquades 100 ml.
29

g. Cara yang sama untuk membuat ekstrak daun teh hijau 2,5% dan 5%
adalah kelipatan dari dosis sebelumnya.
4. Pengelompokan Subjek
Subjek penelitian dibagi menjadi 5 kelompok secara random. Masing-
masing kelompok terdiri dari 7 ekor mencit. Adapun pengelompokannya
adalah sebagai berikut:
Tabel 3. Kelompok Perlakuan
No Kelompok Paparan asap rokok Ekstrak Teh Hijau
1 KNormal - -
2 K(-) + -
3 P1 + Dosis I
4 P2 + Dosis II
5 P3 + Dosis III
Sumber: Data Primer, 2017
Keterangan :
- KNormal : Kontrol Normal
- K(-) : Kontrol Negatif
- P1 : Perlakuan 1
- P2 : Perlakuan 2
- P3 : Perlakuan 3
5. Penghitungan Jumlah Spermatozoa
Penghitungan jumlah spermatozoa dilakukan pada hari ke 36 dengan cara:
1) Memisahkan cauda epididimis dengan memotong bagian proksimal
corpus epididimis dan bagian distal vas deferens.
2) Masukkan kedalam cawan petri yang berisi 1 ml NaCl 0,9%, bagian
proksimal cauda dipotong, lalu ditekan perlahan hingga sekresi cairan
epididimis keluar dan tersuspensi dengan Nacl 0,9%.
3) Ambil 10 μl sampel kemudian dengan tetes pada kamar hitung improve
neubaeur.
4) Hitung di bawah mikroskop dengan perbesaran 100 kali.
30

Gambar 4. Sistem Urogenetalia Mencit (Akbar, B., 2010)

6. Terminasi Hewan Uji


a. Hewan uji dimasukkan wadah transparan yang bertutup dan memiliki
satu lubang kecil di bagian tutup (seperti toples).
b. Kemudian etil klorida disemprotkan ke dalam wadah melalui lubang
kecil yang berada pada tutup, kemudian lubang kecil tersebut ditutup.
c. Tikus dibiarkan beberapa detik hingga tertidur (terbius).
d. Selanjutnya tangan kiri memegang bagian leher hingga kepala atas
tikus, tangan kanan memegang bagian pangkal ekor.
e. Lalu tarik bagian kepala dan pangkal ekor hingga terjadi dislokasi tulang
leher.
f. Hewan uji dipastikan telah mati yang kemudian dikubur menjadi satu
pada kedalaman 50 cm.
31

K. Rancangan Penelitian
Rancangan eksperimental posttest with control group design

Mencit jantan usia 2-3bulan, berat


badan ± 20 gram

Adaptasi pakan standar selama 1 minggu

randomisasi

Kontrol Kotrol Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3


Normal 7 Negatif 7 7 ekor 7 ekor 7 ekor
ekor ekor

1 batang 1 batang 1 batang


aquadest 1 batang rokok + rokok + rokok +
rokok + ektrak teh ektrak teh ektrak teh
aquadest hijau 1,25% hijau 2,5% hijau 5%

Perlakuan dilakukan
selama 35 hari

Hari ke 36 mencit
diterminasi

Hitung jumlah sperma

Analisis Data

Gambar 5. Rancangan Penelitian


32

L. Pengukuran Hasil
Data yang diperoleh akan dianalisis secara statistik dengan uji normalitas
dan uji homogenitas dilanjutkan dengan uji ANOVA bila syaratnya terpenuhi
dan uji Kruskal-Wallis jika syarat uji ANOVA tidak terpenuhi. Uji normalitas
digunakan untuk mengetahui apakah data yang di dapat mempunyai distribusi
normal. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini berjumlah 35 sehingga uji
normalitas yang digunakan adalah uji Shapiro-Wilk. Uji homogenitas
digunakan untuk mengetahui apakah varian populasi homogen atau tidak.
Levene Test untuk mengetahui homogenitas variasinya.
Jika hasil uji ANOVA menunjukkan nilai yang signifikan maka dilanjutkan
dengan uji Post-hoc Test LSD (Least Significance Different). Uji ANOVA
adalah uji untuk membandingkan mean lebih dari dua kelompok, sedangkan
Post-hoc Test LSD membandingkan antar kelompok. Syarat untuk uji ANOVA
adalah data dengan normalitas sama dan varians data sama.
33

M. Jadwal Kegiatan
Tabel 4. Jadwal Kegiatan
Tahun 2017 2018

Kegiatan Bulan Bulan

8 9 10 11 12 1

Penyusunan
Proposal

Ujian Proposal

Revisi Proposal

Penelitian

Analisis Data

Penyusunan Skripsi

Ujian Skripsi

Revisi Skripsi
34

BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian
1. Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman merupakan salah satu proses yang digunakan
untuk mengidentifikasi tanaman. Caranya adalah dengan melihat ciri-
ciri spesifik dan morfologi tanaman sehingga diharapkan dapat
menghindari terjadinya kesalahan dalam pemilihan tanaman yang akan
digunakan sebagai subyek penelitian. Determinasi tanaman teh
(Camellia sinensis) yang digunakan pada penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan (FKIP)
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Berikut merupakan kunci
determinasi tanaman teh (Camellia sinensis) :
1b, 2b, 3b. 4b, 6b, 7b, 9b, 10b, 11b, 12b, 13b, 14a, 15a, 109b, 119, 120b, 128b,
129a, 135b, 136b, 139b, 140b, 142b, 143b, 146b, 154b, 155, 156b, 162b, 163b,
167b, 169b, 171b, 177b, 179a, 180b, 182b, 183b,
184a, ….  Familia : Theaceae
la, 2b, ….  Genus : Camellia
lb, 2b, ….  Species : Camellia sinensis (L.) O.K.

2. Deskripsi Tanaman
- Akar : Tanaman pohon dengan tinggi 5-10 m yang memiliki sistem
perakaran tunggang. Sering dibudidayakan secara vegetatif yang
menyebabkan sistem perakaran menjadi serabut dan karena
pemangkasan kerap seperti perdu.
- Batang : Batang berkayu, dengan sistem percabangan monopodial,
bentuk silindris, permukaan kulit batang kasar, berwama hijau
sampai coklat gelap.
- Daun : Daun tunggal dengan duduk tersebar, helaian daun
berbentuk eliptis memanjang, dengan pangkal runcing, tepi daun
35

bergerigi, ujung daun runcing sampai meruncing. Ujung ranting


dan daun muda berambut halus. Daun muda yang masih kuncup
berwarna hijau keputihan dan daun berikutnya berwarna hijau
terang sampai gelap. Daun memiliki aroma yang khas dan kuat.
- Bunga : Bunga di ketiak berkelamin 2, beraroma harum, berwarna
putih cerah, berbilang 5. Benang sari banyak, putik dengan 3
percabangan kepala putik, bakal buah beruang 3 menumpang.
- Buah : Jenis buah kotak dengan bentuk membulat dengan 3
lekukan, kulit buah berkayu, bila masak dan kering pecah menurut
ruang.
- Biji : Biji bulat dengan dua sisi yang rata, berjumlah satu di tiap
ruangnya.
- Habitat : Tumbuh subur di dataran tinggi dan bersuhu dingin.
- Manfaat : Daun sering dimanfaatkan untuk membuat minuman
yang tinggi akan kandungan antioksidan dan flavonoid.

3. Randemen
Randemen ekstrak digunakan untuk membandingkan anatara
ekstrak dengan simplisia daun teh. Randemen dihitung dengan
membandingkan jumlah ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal
yang digunakan.
Perhitungan pada penelitian:
Berat kering simplisia : 1200 g
Berat hasil ekstrak : 150 g
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘
Randemen : x 100%
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑠𝑒𝑔𝑎𝑟
150
: x 100%
1200

: 0,125%

1 gram daun teh hijau = 0,125 gram ekstrak kental


36

4. Hasil Rerata Jumlah Spermatozoa


Penelitian menggunakan sampel mencit jantan (Mus musculus L.)
berjumlah 35 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok dengan 7 mencit
untuk masing-masing kelompok. Seluruh hewan uji penelitian
memenuhi kriteria inklusi yaitu mencit jantan (Mus musculus L.), sehat,
mempunyai aktifitas normal, umur ± 2 bulan, berat badan ±20-30 gram.
Hasil rata-rata jumlah spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.)
pada setiap kelompok setelah pemberian ekstrak daun teh hijau
(Camelia sinensis) selama 35 hari dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Rerata Jumlah Spermatozoa

No. Kelompok Rerata Jumlah Spermatozoa Tiap


Kelompok
1. Knormal 160,2 ± 28.59545
2. K(-) 90 ± 11.13553
3. P1 137,4 ± 17.24239
4. P2 156,2 ± 35.80084
5. P3 146 ± 25.71964
(Sumber: Data Primer, 2017)

B. Analisis Data
1. Uji Normalitas Data
Uji normalitas menggunakan metode uji Shapiro-Wilk. Hal ini
disebabkan oleh total data yang diuji kurang dari 50. (Sopiyudin, 2012).
Pada kelompok kontrol normal didapatkan hasil uji normalitas semua
kelompok p=0,899 sehingga dapat disimpulkan bahwa data berdistribusi
normal karena nilai p > 0,05.
2. Uji Homogenitas Varian
Uji homogenitas varian menggunakan Levene test dengan hasil
p=0,287. Varian data dikatakan homogen karena nilai p < 0,05 sehingga
uji Anova dapat digunakan untuk menguji hubungan antara daun teh
hijau dan jumlah spermatozoa.
37

3. Uji One-way ANOVA


Pada uji One-way ANOVA, syarat yang diperlukan yaitu distribusi
normal dan varian normal. Analisis One-way ANOVA didapatkan
p=0,002. Dengan demikian kesimpulan yang didapatkan adalah ada
perbedaan jumlah spermatozoa yang bermakna antara kelompok yang
diberikan ekstrak daun teh hijau (Camellia sinesis) dan kelompok
kontrol.
4. Analisis post hoc LSD
Karena hasil uji Anova menunjukan adanya perbedaan jumlah
spermatozoa yang bermakna antara kelompok yang diberikan ekstrak
daun teh hijau (Camellia sinesis) dan kelompok kontrol, maka uji
selanjutnya adalah melihat kelompok mana saja yang berbeda. Dari Test
of Homogenenity hasilnya adalah varian tersebut sama, maka dilakukan
uji lanjut Post Hoc Test LSD.
Analisis Post Hoc LSD untuk menunjukkan perbedaan jumlah
spermatozoa yang signfikan antar kelompok, untuk pengambilan
keputusan berdasarkan nilai probabilitas jika nilai p<0,05 maka terdapat
perbedaan jumlah spermatozoa yang bermakna, sedangkan jika nilai
p>0,05 maka terdapat perbedaan tidak bermakna yang dapat dilihat
pada Tabel 6.
Tabel 6. Hasil Analisis Uji Statistik LSD
Kelompok Perlakuan Nilai p Hasil Uji

KNormal-K(-) 0,000* Berbeda bermakna


KNormal-P1 0,168 Berbeda tidak bermakna
KNormal-P2 0,805 Berbeda tidak bermakna
KNormal-P3 0,384 Berbeda tidak bermakna
K(-)-P1 0,008* Berbeda bermakna
K(-)-P2 0,000* Berbeda bermakna
K(-)-P3 0,002* Berbeda bermakna
P1-P2 0,253 Berbeda tidak bermakna
P1-P3 0,596 Berbeda tidak bermakna
P2-P3 0,530 Berbeda tidak bermakna
*berbeda bermakna (p<0,05)
(Sumber: Data Primer, 2017)
38

Pada perlakuan pemberian ekstrak daun teh hijau (Camellia


sinensis) kelompok perlakuan 1, kelompok perlakuan 2, dan kelompok
perlakuan 3 mempunyai efek meningkatkan jumlah spermatozoa mencit
jantan (Mus musculus L.).

C. PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi Universitas
Muhammadiyah Surakarta yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh
ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) terhadap jumlah spermatozoa
mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan asap rokok.
Penelitian ini menggunakan 5 kelompok mencit dengan masing-masing
terdiri dari 7 ekor mencit. KNormal sebagai kelompok kontrol normal
yang tidak diberi perlakuan, KN sebagai kelompok kontrol negatif yang
diberikan paparan asap rokok, P1 sebagai kelompok perlakuan
diberikan ekstrak daun teh hijau dengan dosis 1,25%, P2 sebagai
kelompok perlakuan diberikan ekstrak daun teh hijau dengan dosis
2,5%, P3 sebagai kelompok perlakuan diberikan ekstrak daun teh hijau
5%. Perlakuan dilakukan setiap hari selama 35 hari dengan pemaparan
asap rokok terlebih dahulu.
Berdasarkan data di tabel 5, mencit jantan yang diberikan paparan
asap rokok (kontrol negatif) menunjukkan jumlah spermatozoa yang
lebih rendah dibandingkan dengan mencit yang tidak diberikan paparan
asap rokok (kontrol normal). Pada kelompok perlakuan yang diberi
ekstrak daun teh hijau (P1, P2, dan P3) jumlah spermatozoa mulai
meningkat. Hal ini menunjukkan penurunan jumlah spermatozoa pada
kelompok mencit yang diberikan paparan asap rokok dan mengalami
perbaikan jumlah spermatozoa pada kelompok mencit yang diberikan
ekstrak daun teh hijau dan paparan asap rokok.
Radikal bebas yang ditimbulkan asap rokok dapat menyebabkan
kerusakan deoxyribonucleic acid (DNA) dan apoptosis sel spermatozoa
(Karim, 2011). Merokok dapat meningkatkan level ROS seminal hingga
39

107% dan dapat menginduksi peroksidasi membran sperma karena


struktur sperma kaya akan polyunsaturated fatty acid (PUFA) yang
rentan untuk terjadi reaksi peroksidasi lipid sehingga akan terjadi
penurunan jumlah spermatozoa (Suciati, 2012). Selain itu, ROS juga
dapat mempengaruhi hormon testosteron yang bertanggung jawab atas
spermatogenesis (Apriora, et al., 2015).
Kandungan nikotin dan Polycyclic Aromatic Hydrocarbon (PAH)
dalam asap rokok dapat menghambat kerja GnRH sehingga rangsangan
terhadap testis berkurang dan menyebabkan testis atrofi serta
pembentukan Follicel Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing
Hormone (LH) terhambat. Terhambatnya pembentukan FSH dan LH
menyebabkan proses spermatogenesis berlangsung tidak normal
(Hargono, et al., 2013)
Hormon testosteron yang dihasilkan oleh sel leydig diperlukan
untuk memulai proses meiosis pada sel spermatosit. Menurunnya
hormon testosteron mengakibatkan kegagalan tahap spermiogenesis,
dimana spermatid gagal menjadi spermatozoa. Bila spermatosit
mengalami kerusakan maka akan mengalami degenerasi dan
difagositosis oleh sel sertoli sehingga jumlah spermatosit menjadi
berkurang dan jumlah spermatid juga ikut menurun. (Sukmaningsih,
2009).
Ekstrak daun teh hijau terbukti dapat memperbaiki spermatozoa
karena mengandung flavonoid yang merupakan metabolit sekunder
yang memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi yaitu 20 kali lebih
tinggi dari pada vitamin C (Siburian, et al., 2015). Flavonoid akan
menangkap radikal bebas dengan melepaskan atom hidrogen dari gugus
hidroksilnya dan memutus reaksi berantai dari radikal bebas (Almatsier,
2004). Katekin merupakan golongan flavonoid yang memiliki
kemampuan untuk menangkal radikal bebas dan logam transisi chelate,
yang membantu mengurangi tingkat stress oksidatif (Hijazi, et al.,
2015).
40

Pemberian katekin dapat menetralkan radiasi ion dan menekan


steroidogenesis testis, sehingga mempercepat perbaikan dan mencegah
kematian sel germinal akibat radiasi (Ding, et al., 2015). Teh hijau
secara signifikan mengurangi peroksidasi lipid, karbonilasi protein dan
kerusakan DNA dan mengembalikan aktivitas glutathione peroxidase
dan glutathione S transferase yang merupakan enzim penetralisir
hidrogen peroksida, selain meningkatkan konsentrasi sperma dalam
epididimis (Zanchi et al., 2015).
Berdasarkan hasil uji One-way ANOVA didapatkan hasil p=0,002
(p<0,05), sehingga dapat dikatakan bahwa terdapat pengaruh secara
signifkan antara ekstrak daun teh hijau dan jumlah spermatozoa mencit.
Oleh karena hasil signifikan, maka dilanjut uji post hoc LSD.
Berdasarkan hasil Uji post hoc LSD, hasil penelitian ini
menunjukkan adanya perbedaan jumlah spermatozoa yang bermakna
yang signifikan terhadap kelompok kontrol normal dan kontrol negatif
yaitu dengan nilai p=0,000 (p<0,05). Hasil penelitian ini juga
menunjukkan adanya perbedaan jumlah spermatozoa bermakna yang
signifikan antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok perlakuan
1, perlakuan 2, dan perlakuan 3 dengan masing-masing nilai p<0,05. Hal
ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun teh hijau (Camellia
sinensis) pada kelompok perlakuan 1 (dosis 1,25%), perlakuan 2 (dosis
2,5%), dan perlakuan 3 (dosis 5%) mampu memperbaiki jumlah
spermatozoa dan menunjukkan perbedaan yang signifikan dengan
kelompok kontrol negatif.
Penelitian ini didukung oleh penelitian Sha’bani et al (2015) yang
dilakukan pada tikus yang diberi teh hijau dan timbal acetat. Hasilnya
adalah teh hijau dapat memperbaiki jumlah spermatozoa dengan
perbedaan yang signifikan yaitu P < 0.05.
Penelitian lainnya dilakukan oleh Abshenas et al (2011) tentang
efek teh hijau terhadap kualitas sperma setelah tekanan panas scrotum,
yang diuji pada tikus jantan. Ekstrak teh hijau memiliki antioksidan
41

yang berkhasiat dalam pencegahan toksisitas spesifik organ lain yang


terkait dengan induksi stres oksidatif yang dapat memperbaiki kualitas
sperma
Penelitian ini masih banyak kekurangannya yaitu proses
pengambilan daun teh hijau yang seharusnya diambil pada pagi hari
akan tetapi diambil pada siang hari sehingga timbul kemungkinan
senyawa daun teh rusak karena panas matahari. Selain itu, pada proses
setelah maserasi tidak menggunakan evaporator namun menggunakan
wajan dan kompor listrik. Kelemahan penelitian ini adalah hanya
menghitung jumlah spermatozoa mencit saja dan tidak memeriksa organ
yang berkaitan dengan reproduksi, dan juga pada penelitian ini tidak
didampingi oleh ahli atau analis sehingga kemungkinan bias saat
menganalisa hasil spermatozoa.
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN
Kesimpulan pada penelitian ini sesuai hasil uji statistik dan pembahasan
adalah ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) dapat meningkatkan jumlah
spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.) yang diberi paparan asap rokok
dengan dosis efektif berturut-turut adalah dosis II (2,5%), dosis III (5%) dan
dosis 1 (1,25%).

B. SARAN
Saran pada penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut menggunakan dosis ekstrak daun teh
hijau (Camellia sinensis) yang lebih bervariasi dan sampel yang lebih
banyak sehingga dapat diketahui dosis yang paling efektif dalam
meningkatkan jumlah spermatozoa.
2. Perlu dilakukan pemeriksaan senyawa lebih lanjut yang terkandung dalam
ekstrak daun teh hijau (Camellia sinensis) sehingga dapat diketahui pasti
senyawa yang mempunyai efek terhadap peningkatan jumlah spermatozoa.

C. KETERBATASAN
1. Saran pada penelitian ini adalah belum dilakukan komparasi dengan obat
yang dapat menambah jumlah spermatozoa

42
DAFTAR PUSTAKA

Agarwal, A., Roychoudhury, S., Virk, G. & Cho, C. L., 2017. Potential Role Of
Green Tea Catechins In The Management Of Oxidative Stress-Associated
Infertility. RBM, Volume 34, pp. 487-98.

Abshenas, J., Zare, M. H., Babaei H., Allahbakhshi A., Sharififar, F., 2011. The
Effects Of Green Tea (Camellia Sinensis) Extract On Mouse Semen Quality
After Scrotal Heat Stress. Vet Res Forum (2). 242–7.

Ahmad, S., 2014. Evaluasi Kromatin Sperma Sebagai Indikator Kualitas Sperma.
JMJ, 2(1), pp. 87-97.

Akbar, B., 2010. Tumbuhan Dengan Kandungan Senyawa Aktif Yang Berpotensi
Sebagai Bahan Antiinfertilitas. Edisi 1. Jakarta : Adabia Press.

Almatsier, S., 2004. Penurunan Diet. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama, pp. 10-12.

Amarudin, 2012. Pengaruh Merokok Terhadap Kualitas Sperma Pada Pria


Dengan Masalah Infertilitas Studi Kasus Kontrol Di Jakarta Tahun 2011.
FKM UI. Tesis

Anjarsari, I.R.D., 2016. Katekin Teh Indonesia : Prospek dan Manfaatnya. Jurnal
Kultivasi Vol.15(2).

Apriora, V. D., Amir, A. & Khairsyaf, O., 2015. Gambaran Morfologi Pada
Perokok Sedang Di Lingkungan Pe Grup Yang Datang Ke Bagian Biologi
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas. Jurnal Kesehatan Andalas, 4(2),
p. 425–29.

Batubara, I. V. D., Wantouw, B. & Tendean, L., 2013. Pengaruh Paparan Asap
Rokok Kretek Terhadap Kualitas Spermatozoa Mencit Jantan (Mus
musculus). Jurnal e-Biomedik (eBM), pp. 330-7.

Chandra, A. K., Choudhury, S. R., D, N. & Sarkar, M., 2011. Effect Of Green Tea
(Camellia sinensis) Extract on Morphological and Fungtional Change in
Adult Male Gonad of Albino Rat. Indian Journal of Experimental Biology,
Volume 49, pp. 689-97.

Ding, J., Wang, H., Wu, Z.-B., Zhao, J., Zhang, S., Li, W., 2015. Protection Of
Murine Spermatogenesis Against Ionizing Radiation-Induced Testicular
Injury By A Green Tea Polyphenol. Biol. Reprod. 114

43
44

Easly, C. A., Simerly, C. R. & Schatten, G., 2013. Stem Cell Therapeutic
Possibilities: Future Therapeutic Optionsfor Male-Factor And Female-
Factor Infertility. Reproductive BioMedicine, Volume 27, pp. 75-80.

Gayatri, A., Susanto, A. D. & Setiawati, A., 2012. Nicotine Replacement Therapy.
CDK-189, 39(1).

Guyton, A. C. & Hall, J.E., 2011. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology.
Edisi 12. Jakarta: EGC

Hamilton, J., 2012. Pengaruh Pemberian Ekstrak Dimer Isoeugenol Secara Oral
Terhadap Kualitas Spermatozoa Mencit ( Mus Musculus L .) Jantan Galur
Ddy. Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
Indonesia. Skripsi

Haris, A., Ikhsan, M. & Rogayah, R., 2012. Asap Rokok Sebagai Bahan Pencemar
Dalam Ruangan. CDK-189, 39(1).

Hijazi, M. M., Khatoon, N., Azmi, M.A., Rajput, M. T., Zaidi, S. I., Azmi, M. P.,
Perveen, R., Naqvi S.N., Rashid, M. 2015. Report: Effects Of Camellia
Sinensis L. (Green Teal Extract On The Body And Testicular Weight
Changes In Adult Wistar Rate. J. Pharm. Sci. 28, 249-53

Hargono, F.R., Lintong, P.M., Kairupan, C.F., 2013. Gambaran Histopatologik


Testis Mencit Swiss (Mus Musculus) Yang Diberi Kedelai Dan Paparan
Dengan Asap Rokok. Jurnal e-Biomedik (eBM). Vol. 1(2). pp 824-9

Himpunan Endokrinologi Reproduksi Dan Fertilitas Indonesia (HIFERI) &


Perhimpunan Fertilisasi In Vitro Indonesia (PERFITRI), 2013. Konsensus
penanganan infertilitas. edisi revisi 9.1

Inayatillah, I. R., Syahrudin, E. & Susanto, A. D., 2014. Kadar Karbon Monoksida
Udara Ekspirasi pada Perokok. J Respir Indo, 34(4).

Riset Kesehatan Dasar (Rikesdas), 2013. Badan Penelitian Dan Pengembangan


Kesehatan Kementrian RI tahun 2013. Jakarta

Karim, D. 2011. Pengaruh Paparan Asap Rokok Elektrik Terhadap Motilitas,


Jumlah Sel Sperma Dan Kadar MDA Testis Mencit Jantan (Mus musculus,
L.). tesis. Universitas Sumatera Utara.

Khaira, K. 2., 2010. Menangkal Radikal Bebas Dengan Antioksidan. Jurnal saintek,
II(2), pp. 183-4.
45

Khan, H., Khan, M., Qureshi, M. S., Ahmad, S., Gohar, A., 2017. Effect of Green
Tea Extract (Camellia sinensis) on Fertility Indicators of Post-Thawed Bull
Spermatozoa. Pakistan Journal of Zoology, 49(4), pp. 1243-9.

Lu, H., Jiang, W., Ghiassi, M. & Mantri, N., 2012. Classification of Camellia
(Theaceae) Species Using Leaf Architecture Variations and Pattern
Recognition Techniques. PLoS ONE, 7(1).

Mahmood, T., Akhtar, N. & Khan, B. A., 2010. The Morphology, Characteristics,
And Medicinal Properties Of Camellia Sinensis. Journal of Medicinal Plants
Research , 4(19), pp. 2028-33.

Mascarenhas, M. N., Flaxman, S.R., Boerma,T., Vanderpoel, S., 2012. National,


Regional, and Global Trends in Infertility Prevalence Since 1990: A
Systematic Analysis of 277 Health Survey. PLOS Medicine, 9(14).

Murase, T., Misawa, K., Hase, T. & Haramizu, S., 2009. Catechin - Induced
Activation of The LKB1/AMP - Activated Protein Kinase Pathway. Journal
Biochem Parmachol, 78(1), pp. 78-84.

Paulsen, F. & Waschke, J., 2013. Sobotta Atlas Anatomi Manusia Jilid 2. Edisi 23.
Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC; 2010. p. 179.

Peraturan Pemerintah, N., 2012. Pengamanan Bahan Yang Mengandung Zat


Adiktif Berupa Produk Tembakau Bagi Kesehatan.

Philip, G. H., Nagalinga, D. & Pullanna, K., 2015. Effects Of Cigarette Smoking On
Semen Parameters Of Men. International Journal of Pharmaceutical Sciences
and Research, 6(10), pp. 4310-15.

Putra, Y., 2014. Pengaruh Rokok Terhadap Jumlah Sel Spermatozoa Mencit Jantan
(Mus Musculus, Strain Jepang). Jurnal Sainstek, Juni, 6(1), pp. 30-42.

Putri, A. P., 2015. Efek Vitamin C Terhadap Kualitas Spermatozoa Yang Diberi
Paparan Asap Rokok. J MAJORITY, p. Volume 4 Nomor 1.

Roychoudhury, S., Agarwal, A., Virk, G. & Cho, C.-L., 2017. Potential role of
greentea catechins in the management of oxidative stress-associated
infertility. ELSEVIER, pp. 487-498.

Saraswati, A., 2015. Infertility. J MAJORITY, Februari.4(5).

Sari, P. D., 2015. Pengaruh Vitamin E Terhadap Jumlah Spermatozoa Mencit


Jantan (Mus Musculus L) Yang Dipaparkan Asap Rokok. Fakultas
Kedokteran Universitas Lampung. Skripsi
46

Sarwono, 2011. Ilmu Kandungan Edisi Ketiga. PT. Bina Pustaka Sarwono
Prawirohardjo, pp. 424-35

Sha'bani, N., Miraj, S., Rafieian K.M., Namjoo, A.R., 2015. Survey Of The
Detoxification Effect Of Green Tea Extract On The Reproductive System In
Rats Exposed To Lead Acetate. Adv Biomed Res, 4(155)

Siburian, R. B., Jose, C. & Kartika, F. G., 2015. Total Fenolik, Flavonoid, Dan
Aktivitas Antioksidan Produk Teh Hijau Dan Teh Hitam Tanaman Bangun-
Bangun (Coleus Amboinicus) Dengan Perlakuan Ett Rempah Rempah. JOM
FMIPA, 2(1).

Sitohang, A. G., Wantouw, B. & Queljoe, E. D., 2015. Perbedaan Antara Efek
Pemberian Vitamin C dan Vitamin E Terhadap Kualitas Spermatozoa Tikus
Wistar (Rattus Noerveginus) Jantan Setelah Diberi Paparan Asap Rokok.
Jurnal e-Biomedik (eBm), 3(1).

Suciati, T. 2012. Pengaruh Likopen Terhadap Gambaran Tubulus Seminiferus Dan


Kualitas Sperma Mencit (Muc musculus L) Yang Terpapar Asap Rokok.
Universitas Sriwijaya

Sugih, F., 2012. Infertilitas Pria Akibat Kerja. CDK-195 vol. 39 no. 7.

Sukmaningsih A.A.S.A., 2009. Penurunan Jumlah Spermatosit Pakiten dan


Spermatid Tubulus Seminiferus Testis pada Mencit (Mus musculus) yang
Dipaparkan Asap Rokok. Jurnal Biologi XII(2):31-5.

Tariq, A. L., Nirjantha, D. & Reyaz, A. L., 2013. Antimicrobial Activity Of Camellia
Sinensis Leaves Against Gram Positive And Gram Negative Bacteria. World
Research Journal of Pharmaceutical Research, 1(1), pp. 1-4.

Taufiqqurohman, M. A., 2008. Metodologi Penelitian Kedokteran untuk Ilmu


Kesehatan. Surakarta: CSGF.

Towaha, J., 2013. Kandunan Senyawa Kimia Pada Daun Teh (Camellia sinensis).
Warta Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Industri, 19(3).

Wan, X., Li, D. & Zhang, Z., 2008. Antioxidant Properties and Mechanism of Tea
Polyphenols. Nutraceutical Science and Technology, Tea and Tea Products
: Chemistry and Health-Promoting Properties, 8(8), pp. 131-159.

WHO, 2010. WHO Laboratory Manual For The Examination And Processing Of
Human Semen. 5nd ed. Switzerland: WHO Press.
47

Yashin, A., Yashin, Y. & Nemzer, B., 2011. Determination of Antioxidant Activity
in Tea Extracts, and Their Total Antioxidant Content. American Journal of
Biomedical Sciences, 3(4), pp. 322-35.
48

Lampiran 1. Jumlah Spermatozoa


No. KNormal K(-) KP1 KP2 KP3

1 149 100 135 210 146

2 132 92 119 117 136

3 141 88 123 131 125

4 201 72 152 163 133

5 178 98 158 160 190


49

Lampiran 2. Uji Normalitas Data

Tests of Normality

perlakuan Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

jumlah spermatozoa semua perlakuan .083 25 .200* .981 25 .899

*. This is a lower bound of the true significance.


a. Lilliefors Significance Correction
50

Lampiran 3. Uji Homogenitas Varian


Test of Homogeneity of Variances

Levene
df1 df2 Sig.
Statistic
1.348 4 20 .287
51

Lampiran 4. One-Way ANOVA


jumlah sperma

Sum of Squares df Mean Square F Sig.


Between Groups 15962.160 4 3990.540 6.270 .002
Within Groups 12728.800 20 636.440
Total 28690.960 24
52

Lampiran 5. Uji Post Hoc


Multiple Comparisons
jumlah sperma
LSD
(I) (J) Mean Difference 95% Confidence Interval
perlakuan perlakuan (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
K(-) KNor -70.20000* 15.95544 .000 -103.4825 -36.9175
P1
dimension3
-47.40000* 15.95544 .008 -80.6825 -14.1175
*
P2 -66.20000 15.95544 .000 -99.4825 -32.9175
P3 -56.00000* 15.95544 .002 -89.2825 -22.7175
KNor K(-) 70.20000* 15.95544 .000 36.9175 103.4825
P1
dimension3
22.80000 15.95544 .168 -10.4825 56.0825
P2 4.00000 15.95544 .805 -29.2825 37.2825
P3 14.20000 15.95544 .384 -19.0825 47.4825
P1 K(-) 47.40000* 15.95544 .008 14.1175 80.6825
dimension2
KNor
dimension3
-22.80000 15.95544 .168 -56.0825 10.4825
P2 -18.80000 15.95544 .253 -52.0825 14.4825
P3 -8.60000 15.95544 .596 -41.8825 24.6825
P2 K(-) 66.20000* 15.95544 .000 32.9175 99.4825
KNor
dimension3
-4.00000 15.95544 .805 -37.2825 29.2825
P1 18.80000 15.95544 .253 -14.4825 52.0825
P3 10.20000 15.95544 .530 -23.0825 43.4825
P3 K(-) 56.00000* 15.95544 .002 22.7175 89.2825
KNor
dimension3
-14.20000 15.95544 .384 -47.4825 19.0825
P1 8.60000 15.95544 .596 -24.6825 41.8825
P2 -10.20000 15.95544 .530 -43.4825 23.0825
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
53

Lampiran 6. Surat Izin Penelitian

1. Laboratorium Farmakologi
54

2. Laboratorium Patologi Klinik


55

Lampiran 7. Surat Determinasi Tanaman


56
57
58

Lampiran 8. Surat Selesai Melaksanakan Penelitian

1. Laboratorium Farmakologi
59

2. Laboratorium Patologi Klinik


60

Lampiran 9. Ethical Clearance Letter


61

Lampiran 10. Dokumentasi


A. Pengambilan daun teh

Gambar 1. Kebun teh kemuning

B. Pembuatan Ekstrak

Gambar 2. Proses ekstraksi


62

C. Persiapan Alat dan Bahan

Gambar 4. Alat dan Bahan

D. Perlakuan

Gambar 5. Pemberian ekstrak dan pengambilan cauda epididimis


63

E. Analisa sperma

Gambar 5. Analisa sperma