PRÁCTICA N° 05

ESPECIES DEL GÉNERO Plasmodium

CAPACIDAD 2:
Diferencia las características morfológicas y estructurales, el ciclo biológico, patogenia y síntomas, los
métodos de diagnóstico parasitológico, la epidemiología, la prevención, control y tratamiento de las
enfermedades producidas por protozoos parásitos.

INDICADOR:
Identifica las especies de Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum, utilizando los métodos de
Diagnóstico: Frotis y gota gruesa de sangre.

MATERIALES:
De la Cátedra:
- Guía de observación Del estudiante:
- Microscopios binoculares. - Manual de prácticas
- Colorante Giemsa. - 4 lâminas porta-objetos
- Agua tamponada. - 4 lancetas estériles
- Algodón - Láminas con frotices y/o gota gruesa de
- Alcohol de 96° sangre fijadas y coloreadas con Plasmodium
- Aceite de inmersión. vivax y Plasmodium falciparum.
- Láminas con frotices y/o gota gruesa de - Un par de guantes descartables.
sangre fijadas y coloreadas con Giemsa, - Mascarilla y gorro
conteniendo los estadíos parasitarios de - Mandil limpio
Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum

PROCEDIMIENTO

Género Plasmodium
Agente etiológico de la malaria o paludismo. Se transmite en la naturaleza por dípteros del género
Anopheles.
En su ciclo de vida requieren dos hospederos importantes:
a) Definitivo: Mosquito hembra del género Anopheles, donde el parásito desarrolla el CICLO SEXUAL hasta
la formación de los ESPOROZOITOS.
b) Intermediario: Hombre, donde el parásito desarrolla su CICLO ASEXUAL o ESQUIZOGONIA, que se
realiza en dos etapas:
- Exo-eritrocítica: en el hígado.
- Eritrocítica: en los hematíes.

RELACIÓN HOSPEDERO – PARÁSITO:

Plasmodium es un parásito apicomplexo intracelular, agente causal de la malaria o paludismo que se
manifiesta con accesos periódicos de escalofrío, fiebre y sudoración repetidos a intervalos variables
según la especie de Plasmodium.
En P. falciparum, el ciclo exoeritrocítico se lleva a cabo en el hígado una sola vez; y en P. vivax este ciclo
puede repetirse más de una vez, apareciendo las llamadas “recaídas”.
En casos en que la enfermedad evoluciona hacia la cronicidad, el acceso palúdico se acompaña de
anemia y esplecnomegalia.

DIAGNÓSTICO:
El diagnóstico de certeza es el hallazgo del parásito en sangre mediante el método de la Gota Gruesa,
donde los parásitos se observan completamente libres y del Frotis Sanguíneo donde son observados
dentro de los hematíes; preparaciones que deben ser teñidas con colorante Giemsa.
Es recomendable realizar la toma de muestra cuando el paciente se encuentra en estado febril.
TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA PARA LA GOTA GRUESA Y FROTIS SANGUÍNEO: Según el nuevo
Procedimiento Operativo Estándar (POEs) de la OMS.
- Registre los datos del paciente.
- Etiquete dos láminas porta-objetos en un extremo de la lámina, utilizando lápiz grafito o pegando
una etiqueta pre-impresa, con el código, las iniciales del paciente y fecha de la toma de muestra.
- Sostenga la mano del paciente con la palma hacia abajo y seleccione de preferencia el dedo anular.
- Desinfecte el dedo con una torunda de algodón ligeramente humedecido en alcohol y rápidamente
limpiarlo con algodón seco.
- Abra la cubierta de la lanceta estéril y pinche la parte lateral de la yema del dedo con firmeza y
rapidez.

- Deseche la primera gota de sangre limpiando con una torunda de algodón seco.
- Ilústrese de la lámina patrón para la ubicación de la gota gruesa y frotis, que tiene dos círculos, uno
pequeño para el frotis y otro grande para la gota gruesa. La cantidad de sangre para la gota gruesa
es de 6 µl y para el frotis 2 µl (en una proporción de 3 a 1). Cualitativamente, el tamaño aproximado
de la cabeza de un palito de fósforo para la gota gruesa.

Lámina patrón para la gota gruesa y frotis de sangre

3 cm

15
mm cabeza cuerpo cola

Ubicación correcta y características de la gota gruesa y frotis sanguíneo en una lámina porta-objetos

GOTA GRUESA: use un ángulo externo de la
lámina auxiliar, difundirla en forma concéntrica
de adentro hacia afuera con 3 a 6 movimientos
rápidos, hasta formar una gota gruesa circular de
15 mm de diámetro, aproximadamente.
Deje secar a temperatura ambiente, el frotis y
gota gruesa de sangre preparadas.
FROSTIS: Coloque una lámina auxiliar en ángulo
de 45° frente a la gota de sangre pequeña, deslice
la lámina auxiliar hasta ponerse en contacto con
la gota y extiéndala hacia adelante con un
movimiento suave y continuo (evite movimientos
bruscos o vacilantes).
Deje secar la gota gruesa y el frotis.
COLORACIÓN CON GIEMSA:
− Fije sólo el frotis con metanol durante 3 segundos y déjelo secar.
− Diluya la solución Giemsa madre 1/10 (2 gotas en 1 ml de agua tamponada o destilada)
− Vierta la solución diluida sobre la muestra cubriendo toda la lámina y dejar por 10 minutos.
− Enjuagar la lámina.
− Deje secar a medio ambiente.
− Observe al microscopio con objetivo de inmersión.

Plasmodium vivax: Tiene preferencia por los hematíes jóvenes, donde se desarrolla como trofozoíto,
esquizonte y gametocito. El acceso febril aparece como resultado del ciclo eritrocítico, se manifiesta cada
48 horas, por lo que se le conoce también con el nombre de malaria terciana.

OBSEVACIÓN DE Plasmodium vivax. En láminas con frotices sanguíneos de pacientes con malária,
observe las características de:

a. Trofozoítos:
Jóvenes:
- Formas anulares, de tamaño relativamente grandes.
- Citoplasma delgado de color azul claro que encierra una vacuola que no
se colorea y que le da aspecto de anillo.
- Un núcleo pequeño de color rojo.

Medianos y Maduros:
- Formas irregulares debido a su movimiento amiboideo.
- Citoplasma de color azul claro con granulaciones negruzcas (Pigmento
Palúdico).
- Núcleo único de color rojo, de posición variable.
- Hematíe ligeramente agrandado con gránulos de Schüffner de color
rosado, observados en frotis sanguíneo.
b. Esquizontes
Jóvenes y medianos
- Citoplasma de forma irregular con pigmento palúdico.
- Núcleo de color rojo en proceso de división.
- Hematíe ligeramente agrandado, pálido y con gránulos de
Schüffner (con frotis sanguíneo).

Maduros:
- Citoplasma dividido de color azul claro, cada parte con su núcleo
de color rojo; constituyéndose de 12 a 24 merozoitos.
- Pigmento palúdico disperso entre los merozoitos.
- Hematíe agrandado, pálido y con gránulos de Schüffner (en frotis
sanguíneo).

c. Gametocitos
Macrogametocito:
- Forma generalmente redondeada.
- Citoplasma abundante y homogéneo de color azul con gran
cantidad de pigmento palúdico.
- Un núcleo grande y compacto de color rojo.
- Hematíe ligeramente agrandado, pálido y con gránulos de
Schüffner (en frotis sanguíneo).
 Microgametocito:
- Forma generalmente redondeada.
- Citoplasma abundante y homogéneo de color azul gris con
pigmento palúdico en menor cantidad.
- Un núcleo grande, laxo, de color rosado.
- Hematíe ligeramente agrandado, pálido y con gránulos de
Schüffner (en frotis sanguíneo).

OBSEVACIÓN DE Plasmodium vivax. En láminas con Gota Gruesa de pacientes enfermos, observe a
los Plasmodium libres en el campo microscópico

1 1 LEYENDA:
1. TrofozoÍtos jóvenes y
5 medianos
1 1
7 2. Esquizonte joven
3. Esquizonte maduro
4. Macrogametocito
5
3 5. Plaquetas
6. Neutrófilo
1 7. Eosinófilos
5

2 4

ESTADÍOS DE Plasmodium vivax EN GOTA GRUESA

Plasmodium falciparum: Invade hematíes de toda edad donde se desarrollan los trofozoítos,
esquizontes y gametocitos. Los estadios observables en sangre periférica son: trofozoítos jóvenes de forma
anular o de coma, presentes más de uno en un eritrocito y gametocitos con su característica forma de
banana o semilunar; el esquizonte se observa en sangre periférica sólo en casos muy severos. Es responsable
de la malaria maligna o fiebre perniciosa y el acceso febril se manifiesta cada 24 a 48 horas.

OBSEVACIÓN DE Plasmodium falciparum. En láminas con frotices sanguíneos de pacientes

enfermos, observe las características de:

a. Trofozoítos jóvenes:
- Pequeños, adoptan formas anulares, algunos en forma de coma.
- Citoplasma de color azul claro que encierra una vacuola que no se
colorea y que le da aspecto de anillo.
- 1 núcleo pequeño de color rojo.
 Los hematíes parasitados con P. falciparum pueden contener más
de un trofozoito, observándose por esta razón 2 o más núcleos.

b. Gametocitos: Forma de media luna o banana.

Macrogametocito:
- Forma de media luna con extremos puntiagudos.
- Citoplasma de color azul intenso.
- Núcleo grande y compacto, de color rojizo.
- Pigmento palúdico agrupado alrededor del núcleo.
 Microgametocito:
- Forma de banana con extremos romos.
- Citoplasma de color azul claro.
- Núcleo grande y laxo, de color rosado.
- Pigmento palúdico diseminado en el citoplasma del gametocito.

En hematíes que contienen trofozoítos antiguos y formas asexuales, se observan a veces manchas
de Maurer (gránulos de color rosado o azulado, a menudo en formas de comas).

OBSEVACIÓN DE Plasmodium falciparum. En láminas con Gota Gruesa de pacientes enfermos,

observe las siguientes características:

1
6 LEYENDA:
3
1. Trofozoítos anulares
1 7 2. Macrogametocito
2 3. Microgametocito
8 4. Gametocito inmaduro
5. Plaquetas
1
2 6. Neutrófilos
7. Eosinófilos
8. Residuos del colorante
1

TROFOZOITOS ANULARES Y GAMETOCITOS DE

P. falciparum EN GOTA GRUESA

EPIDEMIOLOGÍA:
La malaria no es un problema exclusivo de determinados países tropicales, sino es un problema que
afecta a más de 100 países en el mundo, en los que casi la mitad de la población vive bajo el riesgo de
contraer la enfermedad. El paludismo es endémico en África, una gran parte de Asia, América Central
y Sudamérica.
Esta enfermedad supone un importante problema de salud pública con una mortalidad asociada que
oscila entre 1 y 2 millones de personas al año.

CUESTIONARIO:
1. ¿Por qué se recomienda realizar la toma de muestra cuando el paciente se encuentra en estado
febril?
2. ¿Cómo reconoció a los Plasmodium en gota gruesa de sangre y diferenció a las dos especies
estudiadas?
3. Mencione las principales manifestaciones clínicas que caracterizan a la malaria.
4. Teniendo en cuenta los mecanismos de transmisión de la malaria, recomiende 3 medidas de
prevención más importantes.

SUGERENCIAS:

BIBLIOGRAFIA
1. ATIAS, A. Parasitología Médica. Quinta Reimpresión. Publicaciones Mediterráneo. Chile. 2007.
2. http://www.es.scribd.com/doc/4745852/ATLAS-A-COLOR-DE-PARASITOLOGIA