El efecto de la Preparación de la cavidad en la sustancia P Expresión Humana Dental la pulpa

Inflamación de la pulpa dental es un proceso complejo que implica una amplia variedad de reacciones nerviosas y
vasculares, que son componentes clave del fenómeno neurogénica que conduce a necrosis de la pulpa (1). Los
neuropéptidos desempeñan un papel activo durante la inflamación neurogénica de la pulpa, el control de su flujo de
sangre y la regulación de las etapas posteriores del proceso de inflamación y reparación 2, 3). Estos neuropéptidos
incluyen la sustancia P (SP), la calcitonina péptido relacionado con el gen (CGRP), neuroquinina A (NKA), péptido
vasoactivo intestinal (VIP), y neuropéptido Y.

SP se produce en los cuerpos celulares del trigémino y se transporta flujo viaaxonal a las terminales nerviosas en la
pulpa donde se almacena con otros neuropéptidos (5). Estos terminales nerviosas son principalmente fibras de tipo C
que están estrechamente relacionados con la microcirculación de la pulpa, los neuropéptidos se liberan cuando se
estimulan los terminales 6). Se ha demostrado que la SP interactúa con los mastocitos, la inducción de la liberación de
histamina y provocando de este modo la permeabilidad vascular elevada y aumento de la presión sanguínea en el tejido.
También interactúa con otras células inflamatorias tales como macrófagos y linfocitos, alterando sus funciones y la
inducción de la expresión de la ciclooxigenasa-2 y la interleucina-10 mRNAs, que tiene un efecto directo sobre el tejido
de la pulpa (7-10) y granulomas periapicales (11).

Un cuerpo de evidencia experimental apoya el hecho de que la expresión de SP aumenta significativamente en la pulpa
cuando pulpitis irreversible aguda o la exposición mecánica de pulpa se produce (1, 6, 12-14). Sin embargo, poco se
sabe acerca de la cantidad de SP se libera cuando un diente se lastima por preparación de la cavidad sin exposición
pulpar. Este conocimiento podría ser útil para correlacionar el comportamiento de este neuropéptido cuando los
procedimientos de restauración de rutina se llevan a cabo. El propósito de este estudio fue por lo tanto utilizar un
radioinmunoensayo para la determinación del efecto de la preparación de la cavidad en la expresión de SP en la pulpa
dental humana saludable.

Materiales y métodos
Un estudio comparativo descriptivo se realizó de acuerdo a las recomendaciones del Ministerio de Salud de Colombia en
relación con las cuestiones éticas en la investigación sobre el tejido humano. Escrito el consentimiento informado se
obtuvo de cada paciente que participa en el estudio. Muestras de pulpa se obtuvieron de cinco donantes humanos
diferentes (14 -23 años de edad) en los que la extracción de premolares sanos habían sido indicadas con fines de
ortodoncia. Pulpas de dos premolares superiores se utilizaron para cada paciente; uno fue asignado al grupo de control,
donde se midieron los valores normales de SP y el diente contralateral fue asignado al grupo experimental, donde se
midieron los valores de SP después de realizar la preparación de cavidades. Todos los dientes utilizados en este estudio
fueron de caries y restauración libre con el desarrollo radicular completo determinó visualmente y radiográficamente.

Radiografías periapicales digitales (Dental Systems Digital) se tomaron para cada diente en el grupo experimental,
utilizando una técnica paralela estandarizado para permitir calibrar las mediciones tomadas y establecer la distancia entre
el canino bucal y cuerno pulpar bucal dentro de? 0,2 mm. La mitad de un milímetro se restó de esta distancia y se
registra como siendo máxima profundidad de la cavidad.

Los dientes fueron anestesiados por 1,8 ml de 4% inyección infiltración prilocaína. Las caries se prepararon 5 minutos
más tarde en cada diente del grupo experimental con un nuevo diamante cilíndrica fresa No. 515.7C (dos diamantes
Striper, Premier, EE.UU.) en una pieza de mano de alta velocidad (GENTLEforce 7000 C, KaVo, Alemania) en el aire de
20 psi presión con abundante riego. La fresa se utilizó con un movimiento intermitente hasta que el cepillado.

alcanzado la máxima profundidad de la cavidad. La extracción se lleva a cabo 10 min después por métodos
convencionales. Los dientes se lavaron con 5,25% de hipoclorito de sodio después de la extracción para eliminar restos
de ligamento periodontal que podrían haber contaminado la muestra de pulpa. Los dientes fueron a continuación
seccionados usando una fresa de Zekrya (Dentsply Maillefer) en una pieza de mano de alta velocidad irrigada con
solución salina. Tejido de la pulpa se obtuvo mediante el uso de una excavadora de endodoncia estéril, se fijaron en
paraformaldehído al 4% y luego se mantiene congelado a 70 ° C hasta su uso.
Radioinmunoanálisis (RIA)
Muestras de pulpa se desglosaron por ultrasonidos (procesador ultrasónico S-2028-130, ISC BioExpress, Kaysville, UT)
para su homogeneización; Se añadió 250? L de ácido acético y doble a ebullición durante 10 min. Desglosados tejido se
centrifugó a 3500 rpm durante 45 min (GS-6KR Centrifugar, Beckman, Fullerton, CA) y los sobrenadantes se transfirieron
a otro tubo.

Cien microlitros de sobrenadante de cada muestra se sometieron a ensayos de unión de competencia con 50 l de 125I-
SP (Amersham Ref IM57, Piscataway NJ.), 50 l 1:??. 100 solución anti-SP (Ref S-1542, Sigma, St . Louis, MO), 50? l de
diferentes concentraciones de SP no marcada (Sigma S-6883) y 500? l de polietilenglicol (Sigma P-2139).

Después de 2 h de incubación, las suspensiones se centrifugaron a 5000 rpm durante 1 h (Beckman) para precipitar las
fracciones unidas. Los sobrenadantes se decantaron y pellet radiactividad se leyó en un contador gamma (Gamma
Ensayo LS 5500 Beckman). Análisis de Scatchard de los datos de unión se evaluó la cantidad de SP presente en cada
muestra.

Análisis estadístico
Los valores se presentan como la cantidad SP en pg por ml de suspensión de pasta dental. La media y valores máximos
/ mínimos se presentan para cada grupo. Prueba de la U de Mann-Whitney se llevó a cabo para establecer diferencias
estadísticamente significativas (p 0,05) entre los grupos.

resultados
SP se encontró que se expresa en todas las muestras de pulpa (Tabla 1). La expresión grupo experimental fue de entre
576,18 pg / ml y 5.065,91 pg / ml suspensión de pasta dental. Expresión de grupo de control fue de entre 201,11 pg / ml y
1.246,21 pg / ml. Medios fueron 2.803,05 pg / ml y 664,13 pg / ml, respectivamente. Prueba de la U de Mann-Whitney
reveló estadísticamente significativa expresión más alta en las pastas de dientes, donde se había realizado la
preparación de cavidades en comparación con los valores de control (p? 0,014.

discusión
Respuesta pulpar a la odontología restauradora depende de varios factores, incluyendo la irritación mecánica y térmica,
el daño a los procesos odontoblásticos, el grosor de la dentina y materiales biocompatibilidad dental (15, 16) restante.
Efectos de la preparación de la cavidad en el tejido de la pulpa dependen también de otros factores tales como el
desgaste y el diseño de la fresa utilizada, la velocidad de rotación y el par motor, la cantidad de fuerza aplicada a la
rebaba, reduciendo el tiempo, la técnica quirúrgica, y la eficiencia de refrigeración del irrigante (17, 18). Sin embargo, una
pulpa sana es capaz de defenderse a sí mismo y la mayoría de los efectos de los procedimientos de restauración de la
pulpa son menores y pasajeros (19).

La evidencia limitada se ha presentado hasta la fecha en relación con el comportamiento de liberación de neuropéptidos
durante los procedimientos de restauración comunes. Se ha demostrado que la perforación de alta velocidad en los
dientes de rata es un estímulo eficaz para la liberación de neuropéptidos en la pulpa dental (20). También se sabe que la
exposición mecánica de pulpa altera los niveles de neuropéptidos en las pulpas inflamadas (12, 13). Los resultados de
este estudio ampliar el conocimiento con respecto a la fisiología SP durante la preparación de la cavidad, que muestra
una expresión significativamente mayor en las pastas poco después de la preparación de la cavidad en comparación con
los niveles normales de neuropéptidos.

Es interesante notar que los valores de SP de control mostraron una gran variación entre los pacientes. Esta podría ser la
razón por qué algunas personas son más susceptibles al dolor y la inflamación después de un procedimiento y por lo
tanto tienden a requerir un tratamiento de conducto más que otros. Sin embargo, se necesitan investigaciones futuras
para determinar esto. SP liberación fue inducida por una preparación profunda cavidad sin exposición pulpar. Este
procedimiento experimental se realizó siguiendo todos los parámetros actualmente aceptadas para el corte de la dentina.
Una nueva fresa de diamante cilíndrica se utilizó para cada preparación para asegurar un corte eficaz evitando de ejercer
excesiva presión sobre el diente (21, 22); la eficacia de enfriamiento de agua de pulverización se aseguró con una pieza
de mano de irrigación de cuatro agujeros (23, 24); presión de aire se estableció en 20 psi para lograr una velocidad de
rotación de la fresa en contacto con el diente de 220.000 a 260.000 rpm según lo declarado por el fabricante (KaVo,
Alemania) y movimiento de cepillado intermitente se utilizó para reducir el calor de fricción (25). El anestésico local
utilizado en este estudio fue del 4% prilocaína sin vasoconstrictor para evitar la expresión de neuropéptidos quedar
atenuada por los agonistas alfa-adrenérgicos (por ejemplo vasoconstrictores) según lo declarado por otros autores (26,
27). Hubo un retraso de 10 minutos después de la preparación de la cavidad antes de proceder con la extracción del
diente. Se ha demostrado que este período de tiempo parece ser suficiente para permitir que el neuropéptido para ser
liberado de fibras de terminales.

Los métodos utilizados en este estudio podrían ser útiles en el establecimiento de la expresión de otros neuropéptidos
después de la preparación de cavidades, especiallyCGRP que se ha demostrado que es altamente activo en la
inflamación de la pulpa y pueden modular la respuesta inflamatoria (28). Cabe señalar que este estudio se llevó a cabo
en los dientes de caries y restauración libre; por lo que es importante ser consciente de las limitaciones de estos
hallazgos. Se ha demostrado que la caries dientes afectados mostraron un aumento significativo en SP, CGRP, VIP, y la
expresión de NPY con progresión de la caries (29). Sin embargo, la evidencia actual podría tener importancia biológica y
clínica en relación con la investigación futura en relación con la nocicepción, la inflamación, y el proceso de curación
después de los procedimientos de restauración.