PRODUKSI PIGMEN WARNA MERAH DARI JAMUR

PENICILLIUM PURPUROGENUM YANG DIISOLASI DARI

TANAH TERCEMAR LIMBAH SUSU KAMBING DENGAN
METODE SUBMERGED FERMENTATION

ARTIKEL

Oleh:

I DEWA GEDE AGUS SUDARMA

1113031011

JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS PENDIDIKAN GANESHA

2015
 PRODUKSI PIGMEN WARNA MERAH DARI JAMUR
PENICILLIUM PURPUROGENUM YANG DIISOLASI DARI
TANAH TERCEMAR LIMBAH SUSU KAMBING DENGAN
METODE SUBMERGED FERMENTATION

I Dewa Gede Agus Sudarma, I Dewa Ketut Sastrawidana, Siti Maryam

Jurusan Pendidikan Kimia

Universitas Pendidikan Ganesha
Singaraja, Indonesia

Email: {agus.sudarma11@gmail.com, idewasastra@yahoo.com,

titik_maryam@yahoo.co.id}@undiksha.ac.id

ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan kondisi optimum produksi pigmen warna merah dari
jamur Penicillium purpurogenum yang diisolasi dari tanah tercemar limbah susu kambing.
Produksi pigmen menggunakan metode submerged fermentation pada media PD Broth dengan
variasi solid support (ampas kelapa dan rumput laut), suhu (30oC, 35oC, 40oC, dan 45oC), pH
(4-10), waktu inkubasi (1-12 hari), sumber karbon (glukosa, sukrosa, dan pati) dan sumber
nitrogen (ekstrak ragi, pepton, dan NaNO3). Pigmen merah yang dihasilkan diekstrak dengan
menggunakan akuades dan diukur nilai absorbansinya menggunakan spektronik 20+ pada
panjang gelombang 490 nm. Jumlah pigmen yang dihasilkan, direpresentasikan oleh nilai
absorbansi pigmen pada setiap kondisi yang terukur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa
pigmen warna merah dari jamur Penicillium purpurogenum optimum dengan solid support
ampas kelapa, suhu 30oC, pH 5, waktu inkubasi 11 hari, sumber karbon sukrosa 2%, dan
sumber nitrogen ektrak ragi 2%.

Kata-kata kunci: kondisi optimum, produksi pigmen, Penicillium purpurogenum.

ABSTRACT
The purpose of this study is to determine optimum condition of red pigmen production by
Penicillium puurpurogenum that is isolated from from soil contaminated by waste of goat’s milk.
The method is submerged fermentation with PD broth as media. Environmental conditions in the
production of the red pigment are solid support (coconut pulp and seaweed), temperature
o o o o
(30 C, 35 C, 40 C and 45 C), pH (4-10), the incubation time (1-12 days), carbon source
(glucose, sucrose, and starch) and nitrogen source (yeast extract, peptone, and NaNO3). Red
pigment is extracted using distilled water and absorbance value is measured using spektronik
20+ at wavelength of 490 nm. The amount of pigment is represented by pigment’s absorbance
value. The results showed that the red pigment of the fungus Penicillium purpurogenum
optimum with coconut pulp as solid support, 30°C, pH 5, 11-day incubation period, 2% sucrose
as carbon source, and 2% yeast extract as nitrogen source.

Key words: Pigment production, Penicillium purpurogenum, optimum conditions.

1. Pendahuluan sintetik lebih sering digunakan dibandingkan

Pewarna merupakan sesuatu yang
sangat penting dalam industri baik pangan
maupun non-pangan. Pewarna berfungsi
untuk memperindah produk sehingga
menjadi lebih menarik bagi konsumen.
Selain itu, pewarna juga dapat menambah
nilai jual suatu produk. Saat ini, pewarna
dengan pewarna alami baik dalam bidang
pangan maupun non-pangan. Pewarna
sintetik memiliki keunggulan dari pada
pewarna alami yang menyebabkan
penggunaan pewarna ini lebih dominan.
Pewarna sintetik lebih praktis, tahan lama,
banyak pilihan warna, dan mudah diperoleh
karena ketersediaannya melimpah sehingga
mampu memenuhi kebutuhan industri
berskala besar.
Dibalik keunggulan pewarna sintetik
tersebut, terdapat bahaya yang dapat
merugikan lingkungan dan makhluk hidup
sekitarnya. Al-Sabti (2000) melaporkan
bahwa pewarna sintetik Reactive Azo Red
120 mengakibatkan aktivitas mutagenik
terhadap ikan mas. Sastrawidana dan
Sukarta (2011) melaporkan bahwa limbah
industri pencelupan tekstil di Bali sudah
termasuk kategori toksik. Dampak negatif
pewarna sintetik terjadi karena zat warna
sintetik umumnya bersifat toksik,
karsinogenik, serta sulit terombak di
lingkungan (Pandey et al., 2007).
Menyikapi dampak negatif pewarna
sintetik, banyak penelitian telah dilakukan
untuk memperoleh alternatif pewarna lain
untuk menggantikan pewarna sintetik.
Sumber pewarna alternatif berasal dari
tumbuhan dan mikroorganisme. Pewarna
alami dari tumbuhan dapat diperoleh dari
akar, daun, batang, bunga, dan buah dari
bagian tumbuhan. Adrian Nur et al. (2005)
melaporkan bahwa ektrak hati nanas
menghasilkan pigmen warna kuning yang
cocok digunakan sebagai pewarna
makanan. Sutara (2009) melaporkan bahwa
beberapa perusahaan tenun di daerah
Gianyar, Bali menggunakan berbagai jenis
tumbuhan sebagai pewarna alami seperti
daun gambir (kuning kecoklatan), kulit kayu
jambal (merah kecoklatan), daun jambu
klutuk (hijau), daun jati (coklat), kulit buah
juwet (hitam), kulit akar mengkudu (coklat
muda), daun tarum (biru), dan masih banyak
lagi. Selain itu, masyarakat secara umum
sering menggunakan pewarna alami seperti
kunyit, daun suji, dan kesumba sebagai
pewarna makanan.
Meskipun beberapa tumbuhan
menunjukkan potensi sebagai pengganti
pewarna sintetik, akan tetapi terdapat
beberapa kelemahan pewarna dari
tumbuhan seperti tidak memiliki pilihan
warna yang beragam dan warna yang
dihasilkan kurang menarik. Hal ini akan
membatasi kreasi dalam membuat produk
dan dapat menurunkan nilai jual produk
yang dibuat. Kelemahan lainnya adalah
ketersediaan bahan yang tidak mencukupi
kebutuhan pasar. Produksi pewarna alami
dari tumbuhan yang dilakukan secara masal
akan membutuhkan jumlah tumbuhan yang
sangat banyak (Wijaya, 2009).
Selain tumbuhan, pewarna alami juga
dapat diproduksi oleh mikroorganisme
seperti bakteri dan jamur. Bakteri dapat
menghasilkan senyawa bioaktif seperti
turunan indol, alkaloid, poliena, makrolid,
peptida, dan terpenoid untuk melindungi diri
dari kondisi ekstrem (Fenical, 1993). Shatila
(2013) melaporkan bahwa bakteri
Exiguobacterium aurantiacum FH yang
ditumbuhkan pada Luria Bertani broth
menghasilkan pigmen warna jingga yang
diidentifikasi sebagai senyawa karatenoid.
Maskey et al. (2003) melaporkan bakteri
Pseudonocardia sp. menghasilkan pigmen
warna kuning yang tergolong sebagai
senyawa penazin.
Beberapa jenis jamur telah diteliti
berpotensi sebagai penghasil warna karena
jamur dapat menghasilkan metabolit
sekunder berupa pigmen selama masa
pertumbuhannya. Dhale (2009) melaporkan
Penicillium sp NIOM-02 yang diisolasi dari
sedimen laut dapat menghasilkan pigmen
merah. Sastrawidana dan Siti Maryam
(2013), melakukan ekplorasi jamur potensial
penghasil pigmen warna dan menemukan
tiga jenis jamur penghasil pigmen yaitu
jamur Penicillium sp. penghasil pigmen
warna merah, Neurospora sitophila
penghasil pigmen kuning dan Trichoderma
sp. penghasil pigmen hijau kebiruan.
Chintapenta et al. (2014) melakukan analisis
terhadap Penicillium sp. dan melaporkan
bahwa jamur Penicillium sp. dapat
menghasilkan pigmen warna merah.
Kuantitas pigmen warna yang
dihasilkan oleh jamur tidak serta merta
banyak dan melimpah. Pigmen yang
dihasilkan jamur dipengaruhi oleh kondisi
lingkungan hidup jamur seperti ketersediaan
nutrien, pH, suhu, dan waktu inkubasi.
Pradeep et al. (2013) melaporkan bahwa
produksi pigmen merah oleh Fusarium
moniliforme optimum pada pH 5,5, suhu
28±1oC, penambahan ekstrak ragi 2%
sebagai sumber nitrogen, dan glukosa 2%
sebagai sumber karbon. Produksi pigmen
oleh Chaetomium cupreum optimum pada
pH 6, suhu 35oC, waktu inkubasi 6 hari,
penambahan dekstrosa 2%, dan campuran
pepton dengan ekstrak ragi (0,4%) (Soumya
et al., 2013). Hernández et al. (2013)
melaporkan kondisi pH dan suhu optimum
produksi pigmen dari Penicillium
purpurogenum GH2 dengan metode
submerged fermentation menggunakan
media PDA adalah pH 10 dan suhu 24 oC.
Januariawan (2015) berhasil
mengisolasi jamur Penicillium
purpurogenum dari tanah tercemar limbah
susu kambing yang mampu memproduksi
pigmen warna merah menggunakan media
PDA. Penelitian ini bertujuan untuk dapat
mengoptimalkan produksi pewarna alami
ramah lingkungan yang berasal dari jamur
Penicillium purpurogenum yang diisolasi dari
tanah tercemar susu kambing. Pada
penelitian ini difokuskan untuk menganalisis
kondisi optimum produksi pigmen merah
oleh jamur Penicillium purpurogenum
dengan 6 jenis variasi yaitu solid support
(ampas kelapa dan rumput laut), pH (4-10),
waktu inkubasi (1-12 hari), suhu (30oC,
35oC, 40oC, dan 45oC), sumber karbon
(glukosa, sukrosa, dan pati), dan sumber
nitrogen (ektrak ragi, pepton, dan NaNO 3).
2. Metode
2.1 Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah tabung reaksi,
spektronik 20+, shaker, , oven, pipet
volumetri, pipet ukur, hot plate, autoclave,
sentrifuge, bunsen, neraca, kaca arloji,
corong, spatula, pipet tetes, batang
pengaduk, gelas kimia 100 mL, 250 mL,
cawan petri, inkubator, labu ukur 50 mL,
Erlenmeyer 100 mL, 250 mL, dan botol
penyimpanan bahan. Bahan-bahan yang
digunakan antara lain rumput laut, ampas
kelapa (usam), aquades, alkohol 70%,
dekstrosa, sukrosa, pati , glukosa, pepton,
ekstrak ragi, natrium nitrat, kloramfenicol,
kentang, bacto agar, indikator pH universal,
kapas, NaOH, HCl, kantong plastik bening,
plasticwrap dan aluminium foil.
2.2 Kulturisasi Jamur
Kulturisasi jamur dilakukan dengan
metode submerged fermentation
menggunakan media PDB yang telah steril.
Sebanyak 5 mL suspensi jamur ditransfer
secara aseptik ke dalam labu erlenmeyer
yang berisi 30 mL media PDB, kemudian
diinkubasi pada suhu 30 oC selama 7 hari.
Setelah 7 hari inkubasi, kultur jamur yang
diperoleh ditempatkan pada lemari
pendingin.
2.3 Produksi Pigmen
2.3.1 Variasi Solid Support
Produksi pigmen dilakukan
menggunakan metode submerged
fermentation pada kondisi pH 9, suhu 30 oC,
penambahan larutan pati 2% (w/v) dan
ekstrak ragi 2% (w/v). Sebanyak 10 mL
media PDB dimasukkan ke dalam dua labu
Erlenmeyer yang masing-masing
ditambahkan dengan solid support ampas
kelapa dan rumput laut kemudian
disterilisasi menggunakan autoklaf.
Selanjutnya 5 mL kultur jamur dimasukkan
ke masing-masing labu Erlenmeyer dan
diinkubasi selama 12 hari. Pigmen yang
berada pada media cair disaring dengan
kertas saring Whatman no 1 dan pigmen
yang berada pada solid support diekstraksi
menggunakan aquades selanjutnya dikocok
pada 200 rpm selama 30 menit dan
kemudian disaring dengan kertas saring
Whatman no 1. Pigmen hasil penyaringan
pertama dan kedua dijadikan satu kemudian
serapan pigmen diuji menggunakan
spektronik 20+ pada panjang gelombang
490 nm.
2.3.2 Variasi Suhu
Produksi pigmen dari jamur Penicillium
purpurogenum dilakukan menggunakan
metode submerged fermentation dengan
kondisi pH 9, penambahan larutan pati 2%
(w/v) dan ekstrak ragi 2% (w/v) pada variasi
suhu inkubasi. Sebanyak 10 mL media PDB
dan 0,2 gram solid support yang
memberikan hasil produksi pigmen merah
paling baik pada uji variasi solid support
dimasukkan ke dalam 4 labu Erlenmeyer
kemudian disterilisasi menggunakan
autoklaf. Sebanyak 5 mL kultur jamur
dimasukkan ke setiap labu Erlenmeyer
kemudian diinkubasi dengan suhu berbeda-
beda yaitu 30oC, 35oC, 40oC, 45oC, selama
12 hari. Pigmen yang berada pada media
cair disaring dengan kertas saring Whatman
no 1 dan pigmen yang berada pada solid
support diekstraksi menggunakan aquades
selanjutnya dikocok pada 200 rpm selama
30 menit dan kemudian disaring dengan
kertas saring Whatman no 1. Pigmen hasil
penyaringan pertama dan kedua dijadikan
satu kemudian serapan pigmen diuji
menggunakan spektronik 20+ pada panjang
gelombang 490 nm.
2.3.3 Variasi pH
Produksi pigmen dari jamur Penicillium
purpurogenum dilakukan menggunakan
metode submerged fermentation dengan
penambahan larutan pati 2% (w/v) dan
ekstrak ragi 2% (w/v) pada variasi pH.
Sebanyak 10 mL media PDB dan 0,2 gram
solid support yang memberikan hasil
produksi pigmen merah paling baik pada uji
variasi solid support dimasukkan ke dalam 7
labu Erlenmeyer. Kondisi pH pada masing-
masing labu diatur dengan pH
4,5,6,7,8,9,dan 10 kemudian disterilisasi
menggunakan autoklaf. Sebanyak 5 mL
kultur jamur dimasukkan ke setiap labu
Erlenmeyer kemudian diinkubasi dengan
suhu yang memberikan hasil produksi
pigmen merah paling baik pada uji variasi
suhu inkubasi, selama 12 hari. Pigmen yang
berada pada media cair disaring dengan
kertas saring Whatman no 1 dan pigmen
yang berada pada solid support diekstraksi
menggunakan aquades selanjutnya dikocok
pada 200 rpm selama 30 menit dan
kemudian disaring dengan kertas saring
Whatman no 1. Pigmen hasil penyaringan
pertama dan kedua dijadikan satu kemudian
serapan pigmen diuji menggunakan
spektronik 20+ pada panjang gelombang
490 nm.
2.3.4 Variasi Waktu Inkubasi
Produksi pigmen dari jamur Penicillium
purpurogenum dilakukan menggunakan
metode submerged fermentation dengan
penambahan larutan pati 2% (w/v) dan
ekstrak ragi 2% (w/v) pada variasi waktu
inkubasi. Sebanyak 10 mL media PDB dan
0,2 gram solid support yang memberikan
hasil produksi pigmen merah paling baik
pada uji variasi solid support dimasukkan ke
dalam 12 labu Erlenmeyer. Kondisi pH diatur
sesuai dengan pH yang memberikan hasil
produksi pigmen merah paling baik pada uji
variasi pH, kemudian labu Erlenmeyer
disterilisasi menggunakan autoklaf.
Sebanyak 5 mL kultur jamur dimasukkan ke
setiap labu Erlenmeyer kemudian diinkubasi
dengan suhu yang memberikan hasil
produksi pigmen merah paling baik pada uji
variasi suhu inkubasi, selama 1 sampai 12
hari. Pigmen yang berada pada media cair
disaring dengan kertas saring Whatman no
1 dan pigmen yang berada pada solid
support diekstraksi menggunakan aquades
selanjutnya dikocok pada 200 rpm selama
30 menit dan kemudian disaring dengan
kertas saring Whatman no 1. Pigmen hasil
penyaringan pertama dan kedua dijadikan
satu kemudian serapan pigmen diuji
menggunakan spektronik 20+ pada panjang
gelombang 490 nm. Ektraksi pigmen dan
pengujian absorbansi dilakukan dari hari ke-
1 hingga hari ke-12 terhadap pigmen pada
masing-masing labu Erlenmeyer.
2.3.5 Variasi Sumber Karbon
Produksi pigmen dari jamur Penicillium
purpurogenum dilakukan menggunakan
metode submerged fermentation dengan
penambahan ekstrak ragi 2% (w/v) pada
variasi sumber karbon. Sebanyak 10 mL
media PDB dan 0,2 gram solid support yang
memberikan hasil produksi pigmen merah
paling baik pada uji variasi solid support
dimasukkan ke dalam 3 labu Erlenmeyer.
Masing-masing labu ditambahkan dengan
sumber karbon yang berbeda yaitu glukosa,
sukrosa, dan pati dengan konsentrasi 2%
(w/v). Kondisi pH diatur sesuai dengan pH
yang memberikan hasil produksi pigmen
merah paling baik pada uji variasi pH,
kemudian labu Erlenmeyer disterilisasi
menggunakan autoklaf. Sebanyak 5 mL
kultur jamur dimasukkan ke setiap labu
Erlenmeyer kemudian diinkubasi dengan
suhu dan waktu inkubasi yang memberikan
hasil produksi pigmen merah paling baik
pada uji variasi suhu dan waktu inkubasi.
Pigmen yang berada pada media cair
disaring dengan kertas saring Whatman no
1 dan pigmen yang berada pada solid
support diekstraksi menggunakan aquades
selanjutnya dikocok pada 200 rpm selama
30 menit dan kemudian disaring dengan
kertas saring Whatman no 1. Pigmen hasil
penyaringan pertama dan kedua dijadikan
satu kemudian serapan pigmen diuji
menggunakan spektronik 20+ pada panjang
gelombang 490 nm.
2.3.6 Variasi Sumber Nitrogen

Absorbansi
Produksi pigmen dari jamur Penicillium 0.30
0.20 Pengulangan 1
purpurogenum dilakukan menggunakan 0.10
Pengulangan 2
0.00
metode submerged fermentation dengan Ampas Kelapa Rumput Laut Pengulangan 3
Solid Support
penambahan 2% (w/v) sumber karbon yang
memberikan hasil produksi paing baik pada
Gambar 1. Kurva hubungan solid support
uji variasi sumber karbon pada variasi
dengan nilai absorbansi pigmen warna merah
sumber nitrogen. Sebanyak 10 mL media yang diukur pada panjang gelombang 490 nm.
PDB dan 0,2 gram solid support yang
memberikan hasil produksi pigmen merah Berdasarkan hasil uji absorbansi
paling baik pada uji variasi solid support sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 1,
dimasukkan ke dalam 3 labu Erlenmeyer. pigmen yang dihasilkan oleh jamur
Masing-masing labu ditambahkan dengan Penicillium purpurogenum yang
sumber nitrogen yang berbeda yaitu ekstrak ditumbuhkan pada media yang
ragi, pepton, dan NaNO3 dengan disuplementasi ampas kelapa memiliki nilai
konsentrasi 2%. Kondisi pH diatur sesuai absorbansi (0,22; 0,23; 0,22) yang lebih
dengan pH yang memberikan hasil produksi besar dari pada pigmen yang dihasilkan
pigmen merah paling baik pada uji variasi dengan menggunakan media yang
pH, kemudian labu Erlenmeyer disterilisasi disuplementasi dengan rumput laut (0,06;
menggunakan autoklaf. Sebanyak 5 mL 0,05; 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa
kultur jamur dimasukkan ke setiap labu suplementasi media pertumbuhan jamur
Erlenmeyer kemudian diinkubasi dengan Penicillium purpurogenum dengan ampas
suhu dan waktu inkubasi yang memberikan kelapa lebih baik dari pada rumput untuk
hasil produksi pigmen merah paling baik produksi pigmen warna merah.
pada uji variasi suhu dan waktu inkubasi. Jamur Penicillium purpurogenum
Pigmen yang berada pada media cair dalam penelitian ini diisolasi dari tanah yang
disaring dengan kertas saring Whatman no tercemar limbah susu kambing
1 dan pigmen yang berada pada solid (Januariawan, 2015). Susu kambing
support diekstraksi menggunakan aquades merupakan sumber protein dan lemak yang
selanjutnya dikocok pada 200 rpm selama cukup tinggi (Zain, 2013). Ampas kelapa
30 menit dan kemudian disaring dengan mengandung protein 11,35% dan lemak
kertas saring Whatman no 1. Pigmen hasil sebesar 23,36% (Miskiyah et al., 2006),
penyaringan pertama dan kedua dijadikan sedangkan kadar protein dan kadar lemak
satu kemudian serapan pigmen diuji rumput laut Sargassum crassifolum J.
menggunakan spektronik 20+ pada panjang Agardh adalah 5,19% dan 1,36%
gelombang 490nm. (Handayani et al., 2004). Kemiripan kondisi
solid support ampas kelapa dengan kondisi
3. Hasil dan Pembahasan
lingkungan awal jamur Penicillium
3.1 Produksi Pigmen
pupurogenum dapat meningkatkan produksi
3.1.1 Variasi Solid Support
metabolit sekunder jamur tersebut.
Produksi pigmen warna merah dari
Sebagaimana dilaporkan oleh Bigelis et al.
jamur Penicillium purpurogenum pada
(2006) efektifitas penambahan solid support
variasi solid support menggunakan metode
disesuaikan dengan sifat alami pertumbuhan
SmF dengan media PDB. Produksi pigmen
jamur yang diisolasi.
dilakukan selama 12 hari pada suhu 30 oC
dengan kondisi pH 9, penambahan larutan
3.1.2 Variasi Suhu
pati 2% dan ekstrak ragi 2%. Hasil uji
Produksi pigmen merah dari jamur
absorbansi pigmen warna menggunakan
Penicillium purpurogenum dengan variasi
spektronik 20+ pada panjang gelombang
suhu dilakukan dengan metode SmF
490 nm disajikan pada Gambar 1.
menggunakan media PDB yang
disuplementasi dengan solid support ampas
kelapa. Media PDB yang diatur memiliki pH
9 ditambahkan dengan ekstrak ragi 2% (w/v)
dan larutan pati 2% (w/v). Hasil uji
absorbansi pigmen warna pada variasi suhu
inkubasi sebagai representasi jumlah
pigmen merah disajikan pada Gambar 2.
Absorbansi
1.00
0.50
0.00
30 35 40
Suhu ( oC)
45
Gambar 2. Kurva hubungan suhu dengan nilai
absorbansi pigmen warna merah yang diukur
pada panjang gelombang 490 nm.
Berdasarkan uji absorbansi terhadap
pigmen merah sebagaimana disajikan pada
Gambar 2, pigmen yang dihasilkan dengan
suhu inkubasi 30oC memiliki absorbansi
paling tinggi dibandingkan dengan suhu
inkubasi lain yang diujikan. Hasil ini
menunjukkan bahwa jumlah pigmen merah
yang dihasilkan oleh jamur Penicillium
purpurogenum yang ditumbuhkan dengan
metode submerged fermentation
menggunakan media PDB dan
disuplementasi dengan ampas kelapa paling
banyak pada suhu inkubasi 30oC.
Hasil penelitian ini sejalan dengan
hasil dari Ebinuma et al. (2013) yang
melaporkan bahwa produksi pigmen merah
dari jamur Penicillium purpurogenum
menggunakan metode submerged
fermentation optimum pada suhu 30oC.
Selain itu, Dhake et al. (2005) menyatakan
bahwa proses metabolisme Penicillium
purpurogenum maksimal pada suhu
inkubasi 30oC. Hasil penelitian lain
meyebutkan bahwa produksi pigmen dari
jamur Fusarium verticillioides optimum pada
suhu 30oC (Boonyapranai et al., 2008),
jamur Chaetomium cupreum optimum pada
35oC (Soumya et al., 2013), dan jamur
Fusarium moniliforme optimum pada 28oC
(Pradeep et al., 2013). Hasil berbeda
diungkapakan oleh Hernandez (2013)
bahwa suhu optimum Penicillium
purpurogenum GH2 untuk menghasilkan
pigmen adalah 24oC. Perbedaan ini dapat
disebabkan karena penggunaan metode dan
media serta kondisi lingkungan lainnya yang
berbeda. Hernandez (2013) menggunakan
metode SSF dengan media berupa PDA dan
pH 10, sedangkan dalam penelitian ini
menggunakan metode SmF dengan media
PDB yang disuplementasi oleh ampas
kelapa, pH 9, dan penambahan ekstak ragi
dan pati sebesar 2%.
3.1.3 Variasi pH
Pengulangan 1 Produksi pigmen merah dari jamur
Pengulangan 2 Penicillium purpurogenum pada variasai pH
Pengulangan 3 dilakukan dengan metode SmF
menggunakan media PD Broth yang
disuplementasi dengan ampas kelapa dan
penambahan ekstrak ragi 2% (w/v) dan
larutan pati 2% (w/v), diinkubasi selama 12
hari pada suhu 30oC. Hasil uji absorbansi
ekstrak pigmen merah pada setiap kondisi
pH disajikan pada Gambar 3.
1.00
0.80
Absorbansi
0.60 Pengulangan 1
0.40
0.20 Pengulangan 2
0.00
4 5 6 7 8 9 10
Pengulangan 3
pH
Gambar 3. Kurva hubungan pH inkubasi dengan
nilai absorbansi pigmen warna merah yang
diukur pada panjang gelombang 490 nm.
Berdasarkan hasil uji absorbansi
terhadap ekstrak pigmen dari jamur
Penicillium purpurogenum sebagaimana
disajikan pada Gambar 3, pigmen yang
diproduksi pada kondisi pH 5 memiliki nilai
absorbansi terbesar dibandingkan dengan
produksi pada kondisi pH yang lain. Hasil ini
menunjukkan bahwa jumlah pigmen merah
yang diproduksi oleh jamur Penicillium
purpurogenum dengan metode submerged
fermentation menggunakan media PDB
yang disuplementasi dengan ampas paling
banyak dihasilkan pada pH 5.
Hasil ini sejalan dengan penelitian
yang dilakukan oleh Mendez et al. (2011)
yang melaporkan bawha jamur Penicillium
purpurogenum GH2 menghasilkan pigmen
secara optimum pada pH 5 menggunakan
Czapek-Dox modified broth. Gunasakaran &
Poorniammal (2008) melaporkan produksi
pigmen merah dari jamur Penicillium sp.
menggunakan metode submerged
fermentation optimum pada pH 9. Produksi
pigmen merah oleh jamur Monascus
sanguineus optimum pada pH 6,5 (Rashmi
& Padmavathi, 2013) dan oleh jamur
lignicolous optimum pada pH 6 (Tudor,
2013). Kondisi pH lingkungan pertumbuhan hari ke-6 dengan metode SmF
akan mempengaruhi tugas fisiologis dan menggunakan media malt extract yang
biokimia suatu mikroorganisme (Hernandez, diinkubasi pada suhu 24 oC. Perbedaan ini
2013). Penicillium purpurogenum dapat disebabkan karena perbedaan media
menghasilkan metabolit sekunder berupa dan kondisi lingkungan yang digunakan
pigmen warna sebagai mekanisme dalam proses produksi pigmen.
pertahanan diri terhadap kondisi lingkungan Berdasarkan data absorbansi pigmen,
salah satunya kondisi pH (Hernández pada hari ke-12 terjadi penurunan
Rivera, 2006). absoebansi pigmen. Hal ini dapat
disebabkan karena terjadi degradasi pigmen
3.1.4 Variasi Waktu Inkubasi seperti yang dilaporkan oleh Pastrana et al.
Produksi pigmen warna merah dari (1995) bahwa pigmen dari Monascus sp
jamur Penicillium purpurogenum yang berada pada suatu larutan
menggunakan metode SmF, media berupa terdegradasi dalam beberapa hari.
PD Broth yang disuplementasi dengan Degradasi dapat disebebkan karena pigmen
menggunakan ampas kelapa, penambahan sensitif terhadap panas, cahaya, dan
ekstrak ragi 2% (w/v), larutan pati 2% (w/v), oksigen (Mapari et al., 2009).
dan pH 5, diinkubasi dengan suhu 30 oC.
Hasil uji absorbansi ektrak pigmen merah 3.1.5 Variasi Sumber Karbon
yang menunjukkan jumlah pigmen yang Produksi pigmen warna merah dari
dihasilkan setiap harinya disajikan pada jamur Penicillium purpurogenum
Gambar 4. menggunakan metode SmF, media berupa
PD Broth yang disuplementasi dengan
1.00 menggunakan ampas kelapa, penambahan
0.80
ekstrak ragi 2% (w/v), dan pH 5, diinkubasi
Absorbansi

0.60
0.40
Pengulangan 1
selama 11 hari dengan suhu 30 oC. Hasil uji
Pengulangan 2
0.20
0.00
absorbansi terhadap pigmen warna merah
Pengulangan 3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 disajikan pada Gambar 5.
Waktu Inkubasi (Hari)

Gambar 4. Kurva hubungan waktu inkubasi 0.80

Absorbansi

dengan nilai absorbansi pigmen warna merah 0.60

0.40
Pengulangan 1

yang diukur pada panjang gelombang 490 nm. 0.20 Pengulangan 2

0.00
Glukosa Suksosa Pati Pengulangan 3

Berdasarkan uji absorbansi terhadap Sumber Karbon

pigmen merah sebagaimana disajikan pada

Gambar 4.8, jumlah pigmen yang dihasilkan
semakin banyak seiring dengan
bertambahnya waktu inkubasi. Pada hari ke-
11, absorbansi pigmen warna merah paling
besar (0,85; 0,82; 0,89) kemudian
mengalami penurunan pada hari ke-12
(0,82; 0,74; 0,72). Hasil ini menunjukkan
bahwa jumlah produksi pigmen warna
merah dari jamur Penicillium purpurogenum
paling banyak pada hari inkubasi ke-11.
Hasil ini sedikit berbeda dengan hasil
Ebinuma (2013) yang menyakatan produksi
pigmen merah dari jamur Penicillium
purpurogenum dengan menggunakan media
CYA dan suhu inkubasi 25oC optimum pada
hari ke 12. Sedangkan menurut Hernandez
(2013) Penicillium purpurogenum
menghasilkan pigmen merah optimum pada
Gambar 5. Kurva hubungan sumber karbon
dengan nilai absorbansi pigmen warna merah
yang diukur pada panjang gelombang 490 nm.
Berdasarkan hasil uji absorbansi
(Gambar 5), penambahan sukrosa sebagai
sumber karbon pada produksi pigmen
merah oleh jamur Penicillium purpurogenum
menghasilkan nilai absorbansi paling besar
dibandingkan dengan penambahan glukosa
maupun pati. Hasil ini merepresentasikan
bahwa jumlah pigmen merah dari jamur
Penicillium purpurogenum yang terbentuk
dengan penambahan sukrosa lebih banyak
dari pada sumber karbon glukosa dan pati.
Hasil ini sejalan dengan penelitian
yang dilakukan oleh Ebinuma (2013) yang
melaporkan bahwa sukrosa adalah sumber
karbon yang paling baik untuk produksi
pigmen warna merah jamur Penicillium menunjukkan bahwa jumlah pigmen warna
purpurogenum. Sumber karbon berupa merah yang diproduksi oleh jamur
glukosa memberikan hasil produksi optimum Penicillium purpurogenum dengan metode
pigmen dari jamur Fusarium verticillioides submerged fermentation lebih banyak pada
(Boonyapranai et al., 2008) dan Fusarium penambahan ektrak ragi sebagai sumber
moniliforme (Pradeep et al., 2013). nitrogen. Penambahan NaNO3 tidak
Gunasakaran & Poorniammal (2008) menghasilkan pigmen warna merah akan
melaporkan produksi pigmen merah dari tetapi menghasilkan pigmen warna biru.
jamur Penicillium sp. optimum dengan Hasil ini sejalan denga hasil dari
penambahan pati sebagai sumber karbon. Ebinuma (2013) yang melaporkan sumber
Jamur memerlukan sumber karbon yang nitrogen terbaik untuk menghasilkan pigmen
berasal dari lingkungan luar. Beberapa adalah ekstrak ragi. Ebinuma (2013)
jamur menggunakan senyawa kompleks menyatakan bahwa ekstrak ragi merupakan
yang mengandung karbon, akan tetapi sumber asam amino dan vitamin terbaik
kebanyakan jamur lebih selektif untuk dalam proses metabolisme dibandingkan
memilih sumber karbon yang sesuai dengan dengan sumber nitrogen lain. Ekstrak ragi
keperluan metabolismenya (Ebinuma, juga dapat mengoptimumkan produksi
2103). Dalam hal ini, produksi pigmen dari pigmen warna dari jamur Fusarium
jamur Penicillium purpurogenum lebih verticillioides (Boonyapranai et al., 2008).
optimum jika ditambahkan dengan sukrosa Sedangkan dalam penelitian lain, pepton
dibandingkan dengan glukosa dan pati. mampu mengoptimumkan produksi pirgen
warna dari jamur Penicillium sp.
3.1.6 Variasi Sumber Nitrogen (Gunasakaran & Poorniammal, 2008) dan
Produksi pigmen merah oleh jamur jamur Fusarium moniliforme (Pradeep et al.,
Penicillium purpurogenum pada variasi 2013). Natium nitrat (NaNO3) yang
sumber nitrogen menggunakan metode SmF merupakan sumber nitrogen utama
dengan media PDB yang disuplementasi memberikan dampak yang buruk dalam
ampas kelapa, penambahan sumber karbon produksi pigmen warna merah oleh jamur
sukrosa 2% (w/v), pH 5, diinkubasi selama Penicillium purpurogenum. Kehadiran
11 hari pada suhu 30oC. Hasil uji absorbansi sumber nitrogen secara langsung dapat
sebagai representasi jumlah pigmen merah mengakibatkan terbentuknya senyawa
yang dihasilkan disajikan pada Gambar 6. toksik yang akan menghambat proses
pertumbuhan dan metabolisme organisme
(Ebinuma, 2013).
0.70
0.60
0.50 4. Penutup
Absorbansi

pengulangan 1
0.40
0.30 Pengulangan 2
4.1 Simpulan
0.20
Pengulangan 3
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan
0.10
0.00 bawha produksi pigmen merah dari jamur
pepton ekstrak ragi
Sumber Nitrogen
Penicillium purpurogenum optimum dengan
menggunakan solid support ampas kelapa,
Gambar 6. Kurva hubungan sumber nitrogen suhu 30oC, pH 5, inkubasi 11 hari, sumber
dengan nilai absorbansi pigmen warna merah karbon sukrosa dan sumber nitrogen ekstrak
yang diukur pada panjang gelombang 490 nm. ragi.

4.2 Saran
Berdasarkan hasil uji absorbansi Berkaitan dengan hasil penelitian ini
pigmen warna merah sebagaimana perlu dilakuakn uji toksisitas terhadap
ditunjukkan oleh Gambar 6, pigmen yang pigmen yang dihasilkan, perlu dilakukan uji
dihasilkan oleh jamur Penicillium penggunaan pigmen dalan sektor pangan
purpurogenum akibat penambahan ekstrak maupun non-pangan, dan perlu dilakukan uji
ragi memiliki absorbansi paling besar tentang produksi pigmen dalam skala yang
dibandingkan pigmen yang dihasilkan lebih besar.
dengan penambahan pepton. Hasil ini
5. Daftar Pustaka
Adrian Nur, Arif Jumari, Endang Kwartiningsih.
2005. Ekstraksi Limbah Hati Nanas
Sebagai Bahan Pewarna Makanan Alami
Dalam Tangki Berpengaduk. Ekuilibrium.
4: 92-99
Al-Sabti, K. 2000. Chlorotriazine Reactive Azo
Red 120 Textile Dye Induces Micronuclei
in Fish. Ecotoxicology and Environmental
Safety, 47: 149-155.
Bigelis, Ramunas, Haiyin He, Hui Y. Yang, Li-
Ping Chang, Michael Greenstein. 2006.
Production of Fungal Antibiotics Using
Polimeric Solid Support in Solid-State and
Liquid Fermentation. J Ind Microbiol
Biotechnol. 33: 815-826.
Boonyapranai, Kongsak, Rudeewan Tungpradit,
Sorasak Lhieochaiphant, and Suree
Phutrakul. 2008. Optimization of
Submerged Culture for the Production of
Naphthoquinones Pigment by Fusarium
verticillioides. Chiang Mai J. Sci. 35(3):
457-466.
Chintapenta, Lathadevi Karuna, Chandi Charan
Rath, Bapuji Maringinti, Gulnihal Ozbay.
2014. Pigment Production from a
Mangrove Penicillium. African Jaournal of
Biotechnology. 13(26):2668-2774.
Dhake, A.B. and M.B. Patil. 2005. Production of
ß-Glucosidase by Penicillium
purpurogenum. Brazilian Journal of
Microbiology. 36:170-176.
Dhale, Mohan A. and Vijay-Raj A. S. 2009.
Pigment and amylase production in
Penicillium sp NIOM-02 and its radical
scavenging activity. Int. J. Food Sci.
Technol. 44(12): 2424-2430.
Ebinuma, Santos, Valeria Carcalho, Maria
Francisca Simas Teixeira, and Adalberto
Pessoa Jr. 2013. Submerged Culture
Conditions for the Production of Alternative
Natural Colorants by a New Isolated
Penicillium purpurogenum DPUA 1275.
Journal of Microbiology and
Biotechnology. 23(6):802-810.
Fenical, W. 1993. Chemical studies of marine
bacteria: Developing a new resource.
Chem. Rev. 93 (5):1673-1683.
Gunasekaran, S., Poorniammal, R. 2008.
Optimization of Fermentation Conditions
for Red Pigment Production from
Penicillium sp. Under Submerged
Cultivation. African Jaournal of
Biotechnology. 7(12):1894-1898.
Hernández, Rivera JS.2006. Efecto de la fuente
de carbón y nitrógeno sobre la producción
de pigmentos por Penicillium
purpurogenum GH-2. BSc Thesis.
Universidad Autónoma de Coahuila,
México.
Hernandez, Tanya Cecilia Espinoza, Raúl
Rodríguez-Herrera, Cristóbal Noé Aguilar-
González, Faustino Lara-Victoriano,
Manuel Humberto Reyes-Valdés, and
Francisco Castillo-Reyes. 2013.
Characterization of three novel pigment-
producing Penicillium strains isolated from
the Mexican semi desert. African Journal
of Biotechnology. 12(22): 3405-3413.
Januariawan, I Wayan. 2015. Isolasi dan
Identifikasi Jamur dari Tanah Tercemar
Limbah Susu Serta Karakterisasi Pigmen
yang Dihasilkannya [Skripsi]. Universitas
Pendidikan Ganesha.
Mapari, S. A. S., A. S. Meyer, U. Thrane, and J.
C. Frisvad. 2009. Identification of
potentially safe promising fungal cell
factories for the production of polyketide
natural food colorants using
chematoxonomic rationale. Microb. Cell
Fact. 8: 1-15.
Maskey, R. P., I. Kock, E. Helmke, and H.
Laatsch. 2003. Isolation and structure
determination of phenazostatin D, a new
phenazine from a marine actinomycete
isolate Pseudonocardia sp. B6273.
Zeitschrift für Naturforschung. 58b (7):692-
694.
Mendez, Alejandro, Catalina Pérez, Julio Cesar
Montañéz,Gabriela Martínez, Cristóbal
Noé Aguilar. 2011. Red pigment
production by Penicillium purpurogenum
GH2 is influenced by pH and temperature.
Journal of Zhejiang University-SCIENCE B
(Biomedicine & Biotechnology). 12(12):
961-968.
Miskyah, Ira Mulyawati, and Winda Haliza. 2006.
Pemanfaatan Ampas Kelapa Limbah
Pengolahan Minyak Kelapa Murni Menjadi
Pakan. Seminar Nasional Teknologi
Peternakan dan Veteriner. 880-884.
Pandey, A., Singh, P Iyengar L. 2007. Bacterial
decolorization and degradation of azo
dyes. [review] International
Biodeterioration & Biodegradation. 59: 73-
84.
Pastrana, L., P. J. Blanc, A. L. Santerre, M.
Loret, and G. Goma. 1995. Production of
red pigments by Monascus ruber in
synthetic media with a strictly controlled
nitrogen source. Process Biochem. 30:
333-341.
Pradeep, F. Stanly, M. Shakila Begam, M. Soumya, K. Narasimha Murthy K, Sreelatha G L,
Palaniswamy and B.V. Pradeep. 2013. Srinivas C and Sharmila T. 2013. Influence
Influence of Culture Media on Growth and of growth factors on pigmentation of
Pigment Production by Fusarium Chaetomium cupreum SS – 02 and the
moniliforme KUMBF1201 Isolated from antibacterial efficacy of the pigment
Paddy Field Soil. World Applied Sciences against Ralstonia solanacearum.
Journal. 22 (1): 70-77. International Journal of Advanced
Rashmi, Dikshit and Tallapragada Padmavathi. Research. 1(10): 212-219.
2013. Exploring Monascus sanguineus as Tudor, Daniela, Sara C. Robinson, Paul A.
a Potential Natural Source for Pigment Cooper. 2013. The influence of pH on
Production. International Research Journal pigment formation by lignicolous fungi.
of Biological Sciences. 2(5): 59-67. International Biodeterioration &
Sastrawidana, Siti Maryam, dan Sukarta. 2012. Biodegradation. 80: 22-28.
Perombakan air limbah tekstil Wijaya, L. A., Marcel P.S., Fenny S. 2009.
menggunakan jamur pendegradasi kayu Mikroenkapsulasi Antosianin Sebagai
jenis Polyporus sp. teramobil pada serbuk Pewarna Makanan Alami Sumber
gergaji kayu. Jurnal Bumi Lestari. Antioksidan Berbasis Limbah Kulit
12(2):382-389 Manggis (Garcinia mangostana L). Bogor:
Sastrawidana dan Sukarta. 2011. Uji Toksisitas Institut Pertanian Bogor.
air limbah tekstil hasil pengolahan pada Zain, W. N. H. 2013. Kualitas Susu Kambing
reaktor biofilm konsorsium bakteri Segar di Peternakan Umban Sari dan
anaerob-aerob menggunakan ikan nila. Alam Raya Kota Pekanbaru. Jurnal
Jurnal Penelitian dan pengembangan Peternakan. 10:24-30.
Sains dan Humaniora. 5(3):271-278.