UNIVERSIDAD DE FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

CARRERA DE BIOTECNOLOGIA

PROTOCOLO PARA LA EXTRACCIÓN DE MUESTRAS DE SANGRE EN PAPEL FILTRO PARA

INMUNODIAGNÓSTICO

Papel filtro: de preferencia Whatman N.4

Conservación: En funda plástica bien cerrada con silicagel (para absorber la humedad).
Durante los periodos cortos se puede guardar las muestras a temperatura ambiente (durante
el traslado de la muestra) o guardar a 4°C o a -20°C si se conserva por largo tiempo.

Preparación

1. Cortar en trozos de dimensiones estandarizadas (pj: 6mm de diámetro) del papel filtro
impregnado de sangre utilizando una perforadora
2. Añadir los pedazos de papel filtro en un tampón fosfato (PBS: fosfato buffer salino,
10mM, pH 7.4) conteniendo 0.05% Tween 20, durante 2.5 a 5 horas a temperatura
ambiente o una noche a 4°C.
3. La cantidad de tampón utilizado va a determinar la dilución de la muestra de sangre.
Un papel filtro de 6mm de diámetro contiene aproximadamente 5µl de sangre. Si se
añade el papel en un volumen de 2 ml, se obtiene una dilución de la muestra de 1/400.