Byron Reyes

Carlos Felipe Rozo Bacca

Jean Carlos Salas Bartels

“Incidencia del uso de extractos botánicos de las especies Chenopodium

ambrosioides y lavandula officinalis en hongos del género Pochonia sp. para
su uso en agricultura ecológica”

Instituto Nacional de aprendizaje - INA

Centro Nacional Especializado en Agricultura Orgánica - CNEAO

Profesores:
Rommel Gerardo Vega Obando
Carla Ruiz Hidalgo

Módulo:
Fitoprotección con el uso de
microorganismos benéficos

Cartago,
Costa Rica
Índice

1. Introducción---------------------------------------------------------------------------------------
2. Marco teórico-------------------------------------------------------------------------------------
3. Objetivos--------------------------------------------------------------------------------------
4. Metodología ----------------------------------------------------------------------------------
5. Desarollo ----------------------------------------------------------------------
6. Resultados ----------------------------------------------------------------------------
7. Conclusiónes -----------------------------------------------------------------------------
8. Bibliografía ---------------------------------------------------------------------------

Introducción:

En Agricultura Orgánica están bien estudiados los efectos de microorganismos

benéficos y de los extractos de diversidad de plantas para la protección biológica
ante plagas y enfermedades sin utilización de pesticidas químicos. Una de la
cuestiones de la que se menos se ha estudiado, es la de ¿cómo y de qué manera
influye la mezcla y la aplicación, de estos microorganismo benéficos con los
distintos extractos botánicos utilizados en Agricultura Ecológica

Marco Teórico:

● Pochonia chamydosporia

Uno de los problemas fitosanitarios en el mundo y en Cuba, es la alta incidencia de

nematodos formadores de agallas, especialmente Meloidogyne incognita (Kofoid y
White) Chitwood, que provoca serias afectaciones en los rendimientos y la calidad
de la cosecha de cultivos de importancia económica

Este hongo es un Deuteromycete, parásito facultativo de huevos de nemátodos de

quistes y agallas, ampliamente distribuido en el mundo. La ubicación taxonómica de
este Género de Hongos ha sido tema de amplio debate debido a que ha sido
imposible de reconocer adecuadamente la diversidad genética dentro del grupo

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(Montes et. al., 2005). Se utiliza en agricultura para controlar enfermedades por
efecto de Nemátodos formadores de quistes y agalladores tales como Globodera
spp., Heterodera spp, y Meloidogyne spp., y una de sus características más
importantes es que no depende únicamente del nematodo para sobrevivir. El hongo
coloniza la rizósfera como saprófito, luego infecta los huevos del nemátodo y forma
redes de hifas con órganos especializados que penetran la capa vitelina mediante
lisis enzimática (Kerry, 1997)en (Flores et. al., 2008).

Un factor considerable para la aplicación de Pochonia es que el hongo incrementa

su población en el suelo después de seis meses de aplicado. En un experimento en
la Habana, Cuba, luego de seis meses de aplicado en un cultivo de Tomate
infectado por nemátodos “se mantuvo una concentración efectiva a nivel de la
rizosfera que garantizó la colonización de alrededor del 90% de las masas de
huevos (ootecas), expuestas en la rizosfera y parasitó más del 60% de los huevos
dentro de ellas”(Hernandez, e Hidalgo, 2008). Esta característica del hongo nos
ayuda a entender que es un método que se debe utilizar preferiblemente de manera
preventiva cuando la infección por nemátodos no está tan avanzada.

“no se pueden esperar resultados espectaculares similares a los

obtenidos con los productos químicos, cuando se emplean productos
basados en agentes de control microbiano, ya que su efectividad es más
lenta y se ve potenciada cuando se utilizan dentro de programas de manejos
integrados de plagas” (Hernandez e Hidalgo, 2008)

● Lavanda: Lavandula officinalis

Es una planta medicinal y aromatica familia de las Lamiaceas. Sus nombres más
comunes son Lavanda, Cantueso, Alucema y Espliego. Es originaria de Europa
Meridional y Occidental, y el Norte de África, en la actualidad se encuentra
distribuida por todo el mundo. Requiere de mucho sol y poca agua y es una planta
muy resistente de fácil crecimiento.

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La Lavanda tiene propiedades medicinales, bactericidas, fungicidas y repelentes lo
que la hace una planta excelente para el uso agrícola mediante extractos botánicos.

Taxonomía:

Nombre científico Lavandula officinalis

División Magnoliophyta

Orden Lamiales

Familia Lamiaceae

Género Lavandula

Composición y principios activos de la Lavanda

Taninos Ácido Cumarico

Saponinas Ácido Isobutirico

Cumarinas Ácido Rosmarínico

Acido Caproico Ácido Ursólico

Ácido Burírico

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 Aceite esencial rico en:

Alcanfor Geraniol D-borneol

Linalol Borneol Farneseno

Citronelol Eucaliptol Sabineno

D-limonene Nerol Alfa-pineno

Cineol (flores) Beta-pineno Beta-felandreno

Taninos: sustancia amarga que abunda en algunas plantas con propiedades

astringentes, obtenidas en la Lavanda, principalmente en las flores; utilizada para
curtir pieles o elaborar tintes.
Saponinas: son glucósidos de esteroides o de triterpenoides, llamadas así por sus
propiedades semejantes a las del jabón; cada molécula está constituida por un
elemento soluble en lípidos y uno soluble en agua formando una espuma cuando se
agita en agua.
Cumarinas: es un complejo heterocíclico con dos anillos hexagonales formado por
la fusión de pirona y el benceno. Propiedad aromática.
Ácido Caproico: ácido hexanaico; es un ácido incoloro, viscoso y con un olor
característico. Tiene un alto riesgo de incendio o explosión en contacto con agentes
oxidantes.
Acido Butirico: ácido butanoico; es un ácido líquido e incoloro soluble en agua,
etanol y éter. Tiene un olor desagradable y sabor acre. Contiene un isómero
estructural llamado acido isobutirico.

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Acido Cumarico: es un compuesto organico con propiedades antioxidantes,
constituyente de ligninas. Es ligeramente soluble en agua, pero, muy soluble en
etanol y dietil eter.
Acido Isobutirico:es un isomero del acido butirico; contiene la misma formula
quimica, pero una estructura diferente.
Ácido Rosmarínico: es un éster de ácido cafeico que tiene propiedades
antioxidantes y medicinales.
Ácido Ursólico: ácido natural de poca toxicidad con propiedades antivirales,
antiinflamatorias y anti fúngicas.
Experimentación:
Para el experimento de combinación del extracto de Lavanda con el hongo
Pochonia Chlamydosporia, se utilizaron muestras del extracto y del hongo disueltas
en agua destilada y esterilizada. Se utilizan pedacitos de papel filtro para absorber
las muestras y colocarlas en el plato petri con el medio de cultivo. Se hace un medio
de cultivo para el control con el extracto, también se hace un medio solo con
Pochonia para verificar su efectividad y cinco muestras del extracto de Lavanda
combinado con Pochonia chlamydosporia para mostrar y comprobar la
compatibilidad.
Los resultados un dia siguiente no son tan notorios.
Al cuarto dia la muestra de control muestra colonias de color rojizo mientras que las
5 muestras están totalmente colonizadas por el hongo y no muestran ningún tipo de
problema. Los resultados nos dicen que de momento el Pochonia se está
comportando normal frente al extracto de Lavanda.
Al quinto día las muestras de Pochoni con extracto de Lavanda se encuentra en
excelentes condiciones dando resultados positivos en la combinación.
Se concluye que el extracto botánico de Lavanda y el hongo Pochonia
chlamydosporia en combinación pueden trabajar sin ningun problema, ninguno de
ve afectado por la presencia del otro.

● Apazote: Chenopodium Ambrosioides

La planta es originaria de centro y suramérica. se ha utilizado desde hace siglos

como condimento o contra parásitos. Es una planta perenne que crece desde 1.5

5
metros a 5 metros dependiendo de la altura y algunos de los nombres comunes que
se le dan son: Ambrosia , Chà do México Epacina, Epazote y otros. En Costa Rica
se puede encontrar en estado natural y en los jardines de algunas casas, no existen
plantaciones extensivas de la planta.

Ha despertado interés para su investigación e implementación en agricultura debido

a sus propiedades tóxicas contra los ácaros, hongos, insectos, malezas, moluscos,
nematodos, protozoarios y virus. Su uso va desde el cultivo alrededor de huertos
para repeler hormigas, hasta el macerado del follaje, que es el más común. Se
utiliza principalmente contra mariposita blanca de la col, pulgones, plagas de
hortalizas y varias especies de insectos, y para combatir al virus del chile y tomate.

Los principios plaguicidas del Apazote son :

● ácido equinocistico
● ácido glucopiranósido
● ácido oleanólico
● ácido Salicílico
● ascaridol
● caenferol,
● careno
● limoneno y otros
Estos compuestos ayudan a reducir la eclosión de huevos, y disminuyen la
población de plagas.

Experimentación:

Los resultados un dia siguiente no son tan notorios.

Al cuarto dia la muestra de control muestra colonias de color rojizo mientras que las
5 muestras están totalmente colonizadas por el hongo y no muestran ningún tipo de
problema. Los resultados nos dicen que de momento el Pochonia se está
comportando normal frente al extracto de Apazote.
Al quinto día las muestras de Pochoni con extracto de apazote se encuentra en
excelentes condiciones dando resultados positivos en la combinación.

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Se concluye que el extracto botánico de apazote y el hongo Pochonia
chlamydosporia en combinación pueden trabajar sin ningún problema, ninguno de
ve afectado por la presencia del otro.
La prueba de control de apazote se le realiza un análisis para saber de que estaba
contaminada, encontrando que estaba contaminada con penicillium y levaduras.

Objetivos de Investigación:

1. Determinar la compatibilidad de Pochonia chamydosporia y el extracto de

Lavanda (Lavandula officinalis) para un posible uso en agricultura.

2. Determinar la compatibilidad de Pochonia chamydosporia y el extracto de

Apazote (Chenopodium Ambrosioides) para un posible uso en agricultura.

Metodología:

● Herramientas y Materiales:

○ Platos Petri
○ Bisturí
○ Circulos pequeños de papel filtro (2mm)
○ Colador
○ Agua destilada
○ Beaker
○ Tubos de ensayo
○ Asa Micológica
○ Espátula Digraslky
○ Pipetas y pipeteador

● Procedimiento:

Se definieron los registros para los medios de cultivo de la siguiente manera:

● Control (Pochonia)

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 ● Extracto A = Lavanda + Pochonia (5 pruebas / R1, R2, R3, R4 yR5 )
● Extracto B = Apazote + Pochonia (5 pruebas / R1, R2, R3, R4 yR5 )
● Controles individuales extractos A y B (para determinar si están
contaminados con otros microorganismos)

En una placa petri se colocan varios pedacitos circulares de papel de filtro de 2

milímetros de diámetro aproximadamente, (estos papelitos se pueden cortar con un
abre para hojas de papel) los papelitos se colocan en agua destilada y se dejan
reposar.

Se elaboraron 13 placas petri con medio de cultivo PDA acidificado, (3 controles / 5

extracto A + Pochonia / 5 extracto B + Pochonia) mezcla, y se elabora la disolución
de Pochonia para las placas. Esta disolución se elabora tomando una muestra otra
placa con un cultivo establecido de Pochonia y disolviendolo en un tubo de ensayo
con agua destilada. Luego, en un beaker se mezcla 0.5ml de la mezcla anterior, con
50ml de agua destilada; de esta disolución se toman 0.5 ml para cada una de los
medios de cultivo de ensayo (excepto los controles de Lavanda y Apazote).

Después, se disuelve 1ml de Extracto A en 50ml de agua destilada, se sumergen los

papelitos en esta disolución, y se colocan 5 de estos papeles en las placas
correspondiente en forma de cruz (se repite el proceso para el extracto B). Se sellan
las placas y van a incubación a temperatura de 28C.

Se debe realizar un seguimiento diario de las placas por una semana, haciendo
anotaciones pertinentes, y observando si el crecimiento del hongo se ve afectado
por la presencia del extracto en el medio de cultivo.

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Cultivo madre de Pochonia: Procedimiento:

Placas de ensayo y extractos: Posición papeles filtro (cruz):

Desarrollo:

Pasado el primer día de incubación se revisan los cultivos de los platos petri y no se
nota mayor crecimiento tanto de los extractos de Lavanda y Apazote como del
hongo Pochonia .
Al cuarto dia la muestra de control del extracto de Lavanda y la del hongo Pochonia
han crecido de forma normal y abundante, mientras que la muestra de control del
Apazote también ha crecido de forma abundante, pero con un color rojizo lo que nos
indica que el extracto puede estar contaminado.
se nota un crecimiento normal y sin afectación en los demás platos petri donde se
convino pochonia y con el extracto de Lavanda.
se nota un crecimiento normal también y sin afectación en los demás platos petri
donde se cultivó pochonia y el extracto de Apazote.
Al quinto día las muestras de control de Pochoni, lavanda y apazote se encuentra
en excelentes condiciones.

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En Cuanto a las muestras donde se realizó la combinación del hongo con el extracto
de Lavanda se nota un crecimiento normal y sin afectación de ambos cultivos.
En la muestra donde se realizó la combinación de hongo con el extracto de Apazote
el crecimiento fue normal y sin afectación de uno hacia el otro.
Se concluye que el extracto botánico de apazote y el hongo Pochonia
chlamydosporia en combinación pueden trabajar sin ningún problema, ninguno de
ve afectado por la presencia del otro.

resultados
Control (Pochonia) : crecimiento normal del hongo pochonia.
Control extracto A-Lavanda: crecimiento normal de el extracto Lavanda.
5 pruebas extracto de Lavanda combinado con el hongo Pochonia.
R1: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R2: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R3: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R4: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R5 : crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro

Control extracto B- Apazote: crecimiento normal del extracto, sin embargo este
presenta un color rojizo; Al realizarse una prueba en el microscopio se logra
identificar contaminación por el hongo Penicillium y por levaduras.
5 pruebas extracto de Apazote combinado con el hongo Pochonia.
R1: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R2: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R3: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R4: crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro
R5 : crecimiento normal de ambos sin afectarse uno al otro

Conclusiones:
Se concluye que el extracto botánico de apazote y el hongo Pochonia
chlamydosporia en combinación pueden trabajar sin ningún problema, ninguno de
ve afectado por la presencia del otro.

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